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山东科学ＳＨＡＮＤＯＮＧＳＣＩＥＮＣＥ第３６卷第２期２０２３年４月出版Ｖｏｌ.３６Ｎｏ.２Ａｐｒ.２０２３收稿日期:２０２２￣０５￣３１作者简介:吴丹(１９９０ )女ꎬ硕士ꎬ实验师ꎬ研究方向为中药药物分析ꎮＥ￣ｍａｉｌ:１１２４８６８９９９＠ｑｑ.ｃｏｍ∗通信作者ꎬ刘龙(１９８７ )ꎬ男ꎬ制药工程师ꎬ研究方向为新药研发ꎮE￣mail:151****9730＠１６３.ｃｏｍ超高效液相色谱－四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱法同时检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷㊁甘草酸铵的含量吴丹１ꎬ黄碧云１ꎬ王静２ꎬ刘龙２∗(１.广州医科大学药学院ꎬ广东广州５１１４３６ꎻ２.泰州医药高新技术产业园区公共服务平台中心ꎬ江苏泰州２２５３００)摘要:建立了一种超高效液相色谱－四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱同时检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷和甘草酸铵含量的方法ꎮ采用超高效液相色谱－四级杆/静电场轨道阱质谱ꎬＨｙｐｅｒｓｉｌＧｏｌｄＣ１８型色谱柱ꎬ乙腈￣０.１％甲酸水梯度洗脱ꎬ流速０.４ｍＬ/ｍｉｎꎬ柱温４０ħꎬ进样量１μＬꎻ采用电喷雾离子源ꎬ正离子模式下ꎬ在质荷比１００~１５００范围内全扫描ꎬ通过提取待测成分的精确质量数进行定量ꎮ结果表明ꎬ毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷㊁甘草酸铵线性范围分别为０.０８９１~１.４２５０μｇ/ｍＬ㊁０.０９８４~１２.６０００μｇ/ｍＬ㊁７.４２５０~２９.７０００μｇ/ｍＬ(ｒȡ０.９９９３)ꎬ检测限分别为５.５７㊁４.１０㊁５.８０ｎｇ/ｍＬꎬ定量限分别为２２.２６㊁１２.３０㊁２３.２０ｎｇ/ｍＬꎬ精密度㊁重复性及样品稳定性(２４ｈ)良好ꎬ加样回收率９１％~１０５％(δＲＳＤɤ５.０％ꎬｎ＝６)ꎮ本方法简便快捷㊁特异性强㊁灵敏度高ꎬ可同时检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷㊁甘草酸铵的含量ꎮ关键词:超高效液相色谱－四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱ꎻ补中益气丸ꎻ毛蕊异黄酮葡萄糖苷ꎻ橙皮苷ꎻ甘草酸铵中图分类号:Ｒ２８４.１㊀㊀㊀文献标志码:Ａ㊀㊀㊀文章编号:１００２￣４０２６(２０２３)０２￣００１６￣０７开放科学(资源服务)标志码(ＯＳＩＤ):Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃａｌｙｃｏｓｉｎ７￣Ｏ￣ｇｌｕｃｏｓｉｄｅꎬｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎꎬａｎｄａｍｍｏｎｉｕｍｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎａｔｅｉｎＢｕｚｈｏｎｇｙｉｑｉＰｉｌｌｓｖｉａＵＰＬＣ￣Ｑ/ＯｒｂｉｔｒａｐＨＲＭＳＷＵＤａｎ１ꎬＨＵＡＮＧＢｉｙｕｎ１ꎬＷＡＮＧＪｉｎｇ２ꎬＬＩＵＬｏｎｇ２∗(１.ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＧｕａｎｇｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＧｕａｎｇｚｈｏｕ５１１４３６ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＴａｉｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＨｉ￣ＴｅｃｈＺｏｎｅＰｕｂｌｉｃＳｅｒｖｉｃｅｓＰｌａｔｆｏｒｍꎬＴａｉｚｈｏｕ２２５３００ꎬＣｈｉｎａ)ＡｂｓｔｒａｃｔʒＩｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙꎬｗｅｈａｖｅｄｅｖｅｌｏｐｅｄａｎｏｖｅｌｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃａｌｙｃｏｓｉｎ７￣Ｏ￣ｇｌｕｃｏｓｉｄｅꎬｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎꎬａｎｄａｍｍｏｎｉｕｍｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎａｔｅｉｎＢｕｚｈｏｎｇｙｉｑｉＰｉｌｌｓｂａｓｅｄｏｎＵＰＬＣ￣Ｑ/ＯｒｂｉｔｒａｐＨＲＭＳｕｓｉｎｇＨｙｐｅｒｓｉｌＧｏｌｄＣ１８ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｃｏｌｕｍｎ.Ｔｈｅｇｒａｄｉｅｎｔｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｃｏｍｐｒｉｓｅｄａｃｅｔｏｎｉｌｅａｓｗｅｌｌａｓｗａｔｅｒｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ０.１％ｆｏｒｍｉｃａｃｉｄ.Ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅꎬｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅꎬａｎｄｉｎｊｅｃｔｉｏｎｖｏｌｕｍｅｗｅｒｅ０.４ｍＬ/ｍｉｎꎬ４０ħꎬａｎｄ１μＬꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.Ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒｗａｓｏｐｅｒａｔｅｄｕｓｉｎｇａｎｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙｉｏｎｉｚａｔｉｏｎｓｏｕｒｃｅｉｎｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｉｏｎｍｏｄｅｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎ.Ｔｈｅｓｃａｎｒａｎｇｅｗａｓ１００~１５００ｍ/ｚ.Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｂｙｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｔｈｅａｃｃｕｒａｔｅｍａｓｓｏｆｔｈｅｔａｒｇｅｔｃｏｍｐｏｕｎｄｓ.Ｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｓｏｆｃａｌｙｃｏｓｉｎ７￣Ｏ￣ｇｌｕｃｏｓｉｄｅꎬｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎꎬａｍｍｏｎｉｕｍｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎａｔｅｗｅｒｅ０.０８９１~１.４２５０μｇ/ｍＬꎬ０.０９８４~１２.６０００μｇ/ｍＬꎬａｎｄ７.４２５０~２９.７０００μｇ/ｍＬ(ｒȡ０.９９９３)ꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅꎬｔｈｅｌｉｍｉｔｓｏｆｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗｅｒｅ５.５７ｎｇ/ｍＬꎬ４.１０ｎｇ/ｍＬꎬａｎｄ５.８０ｎｇ/ｍＬꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎬｗｈｉｌｅｔｈｅｌｉｍｉｔｓｏｆｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎｗｅｒｅ２２.２６ｎｇ/ｍＬꎬ１２.３０ｎｇ/ｍＬꎬａｎｄ２３.２０ｎｇ/ｍＬꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｇｏｏｄｐｒｅｃｉｓｉｏｎꎬｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙꎬａｎｄｓａｍｐｌｅｓｔａｂｉｌｉｔｙ.Ｓｐｉｋｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｗｅｒｅ９１％~１０５％(δＲＳＤɤ５.０％ꎬｎ＝６).Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅꎬａｃｃｕｒａｔｅꎬａｎｄｈｉｇｈｌｙｓｅｎｓｉｔｉｖｅꎬｗｈｉｃｈｉｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃａｌｙｃｏｓｉｎ７￣Ｏ￣ｇｌｕｃｏｓｉｄｅꎬｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎꎬａｎｄａｍｍｏｎｉｕｍｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎａｔｅｉｎＢｕｚｈｏｎｇｙｉｑｉＰｉｌｌｓ.ＫｅｙｗｏｒｄｓʒＵＰＬＣ￣Ｑ/ＯｒｂｉｔｒａｐＨＲＭＳꎻＢｕｚｈｏｎｇｙｉｑｉＰｉｌｌｓꎻｃａｌｙｃｏｓｉｎ７￣Ｏ￣ｇｌｕｃｏｓｉｄｅꎻｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎꎻａｍｍｏｎｉｕｍｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎａｔｅ㊀㊀补中益气丸由黄芪(蜜灸)㊁党参㊁甘草(蜜灸)㊁白术(炒)㊁当归㊁升麻㊁柴胡㊁陈皮㊁生姜㊁大枣等１０味中药组成ꎬ具有补中益气ꎬ升陷利湿的功效[１￣２]ꎮ毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷㊁甘草酸铵分别为黄芪㊁陈皮㊁甘草的主要有效成分ꎮ补中益气丸收载于«中国药典»２０２０版一部[３]成方制剂和单味制剂ꎬ其质量标准有鉴别㊁检查和含量测定项ꎬ其中含量检测项仅对黄芪甲苷进行定量测定ꎬ对其他有效成分未做要求ꎮ目前ꎬ文献报道的补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷㊁甘草酸铵的含量检测多采用高效液相色谱(ＨＰＬＣ)法㊁液相色谱￣串联质谱(ＵＰＬＣ￣ＭＳ/ＭＳ)法等[４￣７]ꎬ以上分析方法可实现成分的含量检测ꎬ但方法有一定的局限性ꎮＨＰＬＣ法分析时间较长ꎬ方法特异性较差ꎬ灵敏度较低ꎻＵＰＬＣ￣ＭＳ/ＭＳ法虽能部分克服ＨＰＬＣ法的不足ꎬ但其实验过程需优化待测成分离子对及碰撞能等ꎬ方法开发过程繁琐复杂ꎮ超高效液相－四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(ＵＰＬＣ￣Ｑ/ＯｒｂｉｔｒａｐＨＲＭＳ)法与ＵＰＬＣ￣ＭＳ/ＭＳ法相比具有较高质量分辨率及高质量精度ꎬ可提高定性及定量分析准确度[８￣９]ꎬ其灵敏度高ꎬ特异性强ꎻ且轨道阱高分辨质谱在全扫描模式下ꎬ除能提供准确的定性信息外ꎬ还可以通过提取化合物特征离子进行定量分析ꎬ方法简便快捷ꎬ目前已广泛应用于食品安全㊁药品安全㊁中药成分分析㊁代谢组学㊁蛋白质组学等领域[１０￣１６]ꎮ本研究采用ＵＰＬＣ￣Ｑ/ＯｒｂｉｔｒａｐＨＲＭＳ法同时检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷和甘草酸铵的含量ꎬ缩短了分析时间ꎬ提高了分析方法的灵敏度及特异性ꎬ为补中益气丸质量标准的制定提供了技术参考ꎮ１㊀仪器与材料１.１㊀仪器ＵＰＬＣ￣Ｑ/ＯｒｂｉｔｒａｐＨＲＭＳ仪ꎬ液相系统为Ｄｉｏｎｅｘ３０００型高压液相色谱系统ꎬ并配备ＱＥｘａｃｔｉｖｅＦｏｃｕｓ加热型电喷雾离子源ꎬＸｃａｌｉｂｕｒ质谱工作站(美国ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ公司)ꎻＭＥ１５５ＤＵ十万分之一电子分析天平(瑞士ＭｅｔｔｌｅｒＴｏｌｅｄｏ公司)ꎻＴＬＥ３０００万分之一电子分析天平(瑞士ＭｅｔｔｌｅｒＴｏｌｅｄｏ公司)ꎻＲｅｓｅａｒｃｈ移液器(德国Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ公司)ꎻＫＱ￣３００Ｅ超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)ꎻＣＴ１５ＲＴ超速冷冻离心机(天美科学仪器有限公司)ꎻＧｅｎＰｕｒｅ超纯水器(美国ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ公司)ꎮ１.２㊀试剂与药品毛蕊异黄酮葡萄糖苷(批号ＲＦＳ￣Ｍ０２００１９０２０１９ꎬ成都瑞芬思生物科技有限公司)㊁橙皮苷(批号１５０７０２１１ꎬ成都曼斯特生物科技有限公司)㊁甘草酸铵(１１０７３１￣２００６１４ꎬ中国食品药品检定研究院)ꎬ对照品纯度均大于９８％ꎻ甲醇(色谱纯ꎬＭｅｒｃｋ公司)ꎻ乙腈(色谱纯ꎬＭｅｒｃｋ公司)ꎻ甲酸(色谱级ꎬＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ公司)ꎻ实验用水为超纯水ꎬ由ＧｅｎＰｕｒｅＰｒｏ型超纯水处理系统(ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ公司)制备ꎻ补中益气丸１(２０２２０１１９４ꎬ九芝堂股份有限公司)㊁补中益气丸２(２１１００４ꎬ仲景苑西制药股份有限公司)㊁补中益气丸３(２０２２０１２３ꎬ江西药都樟树制药有限公司)ꎮ２㊀实验方法２.１㊀溶液制备２.１.１㊀对照品溶液的制备分别称取毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷㊁甘草酸铵对照品２ｍｇꎬ精密称定ꎬ用甲醇溶解并定容ꎬ制得质量浓度约０.２ｍｇ/ｍＬ各对照品单标储备液ꎮ分别精密量取各对照品单标储备液适量至同一量瓶中ꎬ用甲醇稀释制得混合对照品储备液ꎬ混合对照品储备液中各成分的质量浓度分别为毛蕊异黄酮葡萄糖苷７.１３μｇ/ｍＬ㊁橙皮苷６３.００μｇ/ｍＬ和甘草酸铵１４８.５０μｇ/ｍＬꎮ取混合对照品储备液适量ꎬ用甲醇稀释相应的倍数即得不同质量浓度的对照品溶液ꎮ２.１.２㊀样品溶液的制备取药品约５０粒ꎬ研细ꎬ过筛ꎬ取细粉０.５０００ｇꎬ精密称定ꎬ置离心管中ꎬ加入８０％甲醇１０ｍＬꎬ加盖ꎬ称定质量ꎮ置超声波清洗器中ꎬ超声提取６０ｍｉｎ(温度３５ħꎬ功率７００Ｗꎬ频率４０ｋＨｚ)ꎬ提取完成后冷却至室温ꎬ称定质量ꎬ用８０％甲醇补足所失质量ꎮ超声所得液体离心处理５ｍｉｎ(转速１０００ｒ/ｍｉｎ)ꎬ取离心后上清液１００μＬ置于进样瓶中ꎬ加入８０％甲醇９００μＬꎬ混匀即制得样品溶液ꎮ２.２㊀色谱及质谱条件２.２.１㊀色谱条件Ｄｉｏｎｅｘ３０００型高压液相色谱系统ꎻ色谱柱ＨｙｐｅｒｓｉｌＧｏｌｄＣ１８(１００ｍｍˑ２.１ｍｍꎬ１.９μｍ)ꎻ柱温４０ħꎻ流动相０.１％甲酸－水(体积比)与乙腈ꎻ流速０.４ｍＬ/ｍｉｎꎻ梯度洗脱:０~３ｍｉｎꎬ１０％乙腈ꎻ３~１０ｍｉｎꎬ１０％乙腈ң８０％乙腈ꎻ１０~１３ｍｉｎꎬ８０％乙腈ꎻ进样量１μＬꎮ２.２.２㊀质谱条件ＱＥｘａｃｔｉｖｅＦｏｃｕｓ静电场轨道阱高分辨质谱仪ꎻ离子源为加热型电喷雾离子源ꎻ正离子全扫描模式ꎬ扫描范围１００~１５００ｍ/ｚꎬ分辨率７００００ꎻ鞘气流速４.８２Ｌ/ｍｉｎꎬ辅助气流速９.５８Ｌ/ｍｉｎꎬ吹扫气流速０Ｌ/ｍｉｎꎻ喷雾电压３.５ｋＶꎬ喷雾电流５５.０μＡꎻ毛细管温度３２０ħꎬＳ￣ｌｅｎｓ电压５５.０Ｖꎬ辅助气加热温度３１０ħꎮ其他质谱参数见表１ꎬ待测化合物的质谱图见图１ꎮ表１㊀待测成分的质谱参数橙皮苷Ｃ２８Ｈ３４Ｏ１５６.３４６１１.１９７０[Ｍ＋Ｈ＋]６１１.１９６８０.３ˑ１０－６甘草酸铵Ｃ４２Ｈ６５ＮＯ１６８.０８８２３.４１１１[Ｍ－ＮＨ３＋Ｈ＋]８２３.４１０６０.６ˑ１０－６图１㊀待测成分质谱图Ｆｉｇ.１㊀Ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｕｍｏｆｔａｒｇｅｔｃｏｍｐｏｕｎｄｓ图１(续)３㊀实验结果３.１㊀特异性考察分别精密吸取空白溶液㊁对照品溶液及样品溶液(批号２０２２０１１９４)１μＬꎬ按２.２项下色谱及质谱条件进样分析ꎬ采集空白溶液㊁对照品溶液及样品溶液离子流图ꎬ并提取各待测成分相应的特征离子峰得提取离子流图ꎬ见图２ꎮ由图可得各待测成分之间分离效果良好ꎬ空白溶液对各待测成分的检出无影响ꎬ方法特异性良好ꎮ图２㊀对照品溶液及样品溶液提取离子流图Ｆｉｇ.２㊀ＥＩＣｏｆｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｏｌｕｔｉｏｎꎬａｎｄｓａｍｐｌｅｓｏｌｕｔｉｏｎ３.２㊀检测限及定量限考察取２.１.１项下混合标准品储备液ꎬ用甲醇逐级稀释ꎬ制得不同质量浓度的对照品溶液ꎮ精密吸取不同质量浓度的对照品溶液１μＬꎬ按２.２项下色谱及质谱条件进样分析ꎬ采集各溶液离子流图ꎬ提取各待测成分相应的特征离子峰ꎬ记录相应的峰面积及信噪比Ｓ/Ｎꎮ选取Ｓ/Ｎ大于３时ꎬ各待测成分的质量浓度作为检测限ꎻ选取Ｓ/Ｎ大于１０时ꎬ各待测成分的质量浓度作为定量限ꎮ结果表明:各待测成分的检测限分别为毛蕊异黄酮葡萄糖苷５.５７ｎｇ/ｍＬꎬ橙皮苷４.１０ｎｇ/ｍＬꎬ甘草酸铵５.８０ｎｇ/ｍＬꎻ各待测成分的定量限分别为毛蕊异黄酮葡萄糖苷２２.２６ｎｇ/ｍＬꎬ橙皮苷１２.３０ｎｇ/ｍＬꎬ甘草酸铵２３.２０ｎｇ/ｍＬꎮ３.３㊀线性关系考察取２.１.１项下混合对照品储备液ꎬ用甲醇稀释ꎬ制得不同质量浓度的对照品溶液ꎮ分别精密吸取不同质量浓度的对照品溶液１μＬꎬ按２.２项下色谱及质谱条件进样分析ꎬ采集各溶液离子流图ꎬ提取各待测成分相应的特征离子峰ꎬ记录相应的峰面积ꎮ对各待测成分的峰面积(Ｙ)及质量浓度(Ｘ)进行线性关系考察ꎬ在各待测成分线性范围内ꎬ计算线性回归方程及相关系数ꎬ绘制线性曲线ꎬ结果见表２ꎮ结果表明各待测成分在相应的线性范围内ꎬ其峰面积与质量浓度相关系数ｒȡ０.９９９３ꎬ线性关系良好ꎮ表２㊀各待测成分的回归方程㊁相关系数㊁线性范围毛蕊异黄酮葡萄糖苷Ｙ＝５.８３ˑ１０橙皮苷Ｙ＝１.８１ˑ１０７Ｘ＋２.５７ˑ１０６０.９９９３０.０９~１２.６０甘草酸铵Ｙ＝３.４６ˑ１０６Ｘ＋２.４６ˑ１０７０.９９９４７.４３~２９.７０３.４㊀精密度考察取２.１.１项下同一对照品溶液ꎬ按２.２项下色谱及质谱条件进样分析ꎬ连续进样６次ꎮ采集各溶液离子流图ꎬ提取各待测成分相应的特征离子峰ꎬ记录相应的峰面积ꎬ计算各待测成分峰面积的日内相对标准偏差(δＲＳＤ)ꎮ取同一对照品溶液ꎬ按２.２项下色谱及质谱条件进样分析ꎬ每天进样测试１次ꎬ连续测试６ｄꎬ记录相应化合物的峰面积ꎬ计算各待测成分峰面积的日间δＲＳＤꎮ毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷㊁甘草酸铵峰面积日内δＲＳＤ分别为２.４１％㊁１.５２％㊁１.４５％ꎬ日间δＲＳＤ分别为３.１５％㊁２.０３％㊁１.３６％ꎬ该方法精密度良好ꎮ３.５㊀重复性考察取同一批次(批号２０２２０１１９４)样品ꎬ按２.１.２项下方法制备样品溶液ꎬ平行配制６份ꎬ分别精密吸取６份样品溶液１μＬꎬ按２.２项下色谱及质谱条件进样分析ꎬ采集各溶液离子流图ꎬ提取各待测成分相应的特征离子峰ꎬ记录相应的峰面积ꎬ代入相应的线性回归方程ꎬ计算６份样品溶液中各待测成分的含量ꎬ计算含量的δＲＳＤꎮ毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷㊁甘草酸铵含量的δＲＳＤ分别为２.２２％㊁３.８２％㊁４.００％ꎬ表明该方法重复性良好ꎮ３.６㊀稳定性考察取同一样品(批号２０２２０１１９４)溶液(按２.１.２项下方法制备)ꎬ室温条件下放置ꎬ按２.２项下色谱及质谱条件于０㊁２㊁４㊁６㊁８㊁１２㊁２４ｈ进样分析ꎬ采集各溶液离子流图ꎬ提取各待测成分相应的特征离子峰ꎬ记录相应的峰面积ꎬ计算峰面积的δＲＳＤꎮ毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷㊁甘草酸铵峰面积δＲＳＤ值分别为２.６１％㊁１.９９％㊁１.７６％ꎬ样品溶液室温下２４ｈ内稳定性良好ꎮ３.７㊀加样回收率考察取已知含量的同一批次(批号２０２２０１１９４)样品约０.５ｇꎬ精密称定ꎬ分别按相应量约８０％㊁１００％㊁１２０％准确加入毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷㊁甘草酸铵对照品ꎬ每组平行３份ꎬ按２.１.２项下方法制备样品溶液ꎬ取样品溶液按２.２项下色谱及质谱条件进样分析ꎬ采集各溶液离子流图ꎬ提取各待测成分相应的特征离子峰ꎬ记录峰面积ꎬ代入相应的线性回归方程ꎬ计算各待测成分含量㊁加样回收率㊁平均加样回收率及加样回收率δＲＳＤꎬ部分结果见表３(全表见ＯＳＩＤ科学数据与内容附表１)ꎮ结果表明各待测成分平均加样回收率在９４％~９９％之间ꎬ回收率δＲＳＤ均小于５％ꎬ该方法准确性良好ꎮ表３㊀各待测成分的加样回收率毛蕊异黄酮葡萄糖苷０.５０１４０.８７４１.３７５.２８９１.６１９６.３２４.６１０.５１０４１.６０４９.２８７.５１９６.３８０.５０４７８.４８６２.０１２８.１０９１.１９橙皮苷０.５０１７８.０２７８.５１６５.０２１０５.４３９４.９５４.７３０.５１０７９.４２９３.８１６２.２３９３.６６０.５０４１４８６.９４１１９２.０２８０１.１０１０４.５６甘草酸铵０.５０１１４７８.０９１４９０.０２７４１.３２９２.３６９５.５６４.９１０.５１０１５０４.６４１７８５.０３３５８.０３１０２.０８３.８㊀样品测定本文选取３个不同厂家的补中益气丸进行检测ꎮ按２.１.２项下方法制备样品溶液ꎬ每批次样品平行制备３份样品溶液ꎬ取各样品溶液按２.２项下色谱及质谱条件进样分析ꎬ采集各溶液离子流图ꎬ提取各待测成分相应的特征离子峰ꎬ记录峰面积ꎬ代入相应的线性回归方程ꎬ计算各待测成分含量ꎮ结果表明ꎬ毛蕊异黄酮葡萄苷的含量分别为８１.５７㊁５１.２０㊁４４.３５μｇ/ｇꎬ橙皮苷的含量分别为１５５.７２㊁１０５０.９６㊁１５２.３２μｇ/ｇꎬ甘草酸铵的含量分别为２９５０.２７㊁２９９１.６２㊁２９５３.１１μｇ/ｇꎬ见表４ꎮ表４㊀各待测成分含量结果(ｎ＝３)Ｔａｂｌｅ４㊀Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔａｒｇｅｔｃｏｍｐｏｕｎｄｓ(ｎ＝３)单位:μｇ/ｇ２１１００４５１.２０１０５０.９６２９９１.６２仲景宛西制药股份有限公司２０２２０１２３４４.３５１５２.３２２９５３.１１江西药都樟树制药有限公司４㊀讨论４.１㊀提取方法的优化在样品溶液制备过程中ꎬ本研究对样品提取方法(超声提取㊁加热回流提取)进行考察ꎬ结果表明两种提取方法提取效率相差不大ꎬ为简化实验操作ꎬ故选择超声提取ꎻ同时还对样品提取溶剂(５０％甲醇㊁８０％甲醇㊁纯甲醇㊁水)进行考察ꎬ结果表明８０％甲醇作为提取溶剂ꎬ可获得最多的提取物ꎮ４.２㊀色谱条件的优化本文采用０.１％甲酸水作为流动相ꎬ可避免色谱峰拖尾现象ꎬ同时可提高待测成分的电离效率ꎬ提高方法灵敏度ꎮ同时为提高待测成分的分离效果ꎬ缩短分析时间ꎬ本研究对不同的流动相组合(甲醇￣０.１％甲酸水ꎬ乙腈￣０.１％甲酸水)及梯度洗脱程序进行考察ꎬ最后确定采用乙腈￣０.１％水作为流动相ꎬ梯度洗脱ꎬ各待测成分分离效果好ꎬ分析时间较短ꎬ方法特异性强ꎮ４.３㊀定量离子的选择本研究所使用高分辨质谱仪具有高分辨率及高精确质量数ꎬ其在全扫描模式下ꎬ不仅可提供准确的定性信息ꎬ还可选取化合物特征离子进行定量分析ꎬ简化了质谱参数的优化过程ꎬ方法更简便快捷ꎮ研究分别采用正离子㊁负离子两种模式对待测成分进行分析ꎬ发现各待测成分在两种模式下均有响应ꎬ但正离子模式下响应明显强于负离子模式ꎬ同时分别选取各化合物响应强的特征离子作为定量离子进行定量分析ꎬ各化合物定量离子数与理论质量数进行比较ꎬ偏差均在１.０ˑ１０－６之内ꎬ数据见表１ꎮ５㊀结论本研究建立了ＵＰＬＣ￣Ｑ/ＯｒｂｉｔｒａｐＨＲＭＳ检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷㊁甘草酸铵含量的方法ꎬ结果表明ꎬ不同厂家之间毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷含量差异较大ꎬ甘草酸铵含量差别小ꎬ可能与原药材(产地㊁种植㊁采摘等)及制剂生产工艺有关ꎮ本文所建立的分析方法简便快捷㊁分析时间短㊁方法特异性强㊁准确度灵敏度高ꎬ可同时检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁橙皮苷㊁甘草酸铵的含量ꎬ为其质量标准的制定提供了技术参考ꎮ参考文献:[１]洪滔ꎬ罗小泉ꎬ李守明ꎬ等.补中益气丸的主治功效及毒性评价[Ｊ].时珍国医国药ꎬ２０２１ꎬ３２(１０):２３７７￣２３８０. [２]张永昕ꎬ李莎恩ꎬ俞发ꎬ等.补中益气丸中相关药味的薄层鉴别补充研究[Ｊ].中国药业ꎬ２０１８ꎬ２７(２２):１７￣２０. [３]国家药典委员会.中华人民共和国药典一部２０２０年版[Ｍ].北京:中国医药科技出版社ꎬ２０２０:１０６３.[４]薛薇ꎬ毛菊华ꎬ王志芳.ＨＰＬＣ法同时测定补中益气丸中３种活性成分的含量[Ｊ].中国药房ꎬ２０１４ꎬ２５(１６):１５２４￣１５２６. [５]董乙文ꎬ李天雪ꎬ褚朝森ꎬ等.ＵＰＬＣ￣ＭＳ/ＭＳ法同时定量测定补中益气丸中的１５种化合物[Ｊ].药物分析杂志ꎬ２０１７ꎬ３７(７):１２２８￣１２３３.ＤＯＩ:１０.１６１５５/ｊ.０２５４￣１７９３.２０１７.０７.１０.[６]张永昕ꎬ李莎恩ꎬ蔡琴琴ꎬ等.一测多评法同时测定补中益气丸中６种成分的含量[Ｊ].中国药业ꎬ２０２１ꎬ３０(２３):７１￣７５. [７]陈晓虎.ＨＰＬＣ￣ＥＬＳＤ测定补中益气颗粒中黄芪甲苷含量[Ｊ].中国现代中药ꎬ２０１４ꎬ１６(３):２２９￣２３１.ＤＯＩ:１０.１３３１３/ｊ.ｉｓｓｎ.１６７３￣４８９０.２０１４.０３.０１４.[８]刘芸ꎬ丁涛ꎬ费晓庆ꎬ等.高效液相色谱－四级杆/静电场轨道阱高分辨率质谱检测蜂蜜中的４￣甲基咪唑和２￣甲基咪唑[Ｊ].食品安全质量测试学报ꎬ２０１４ꎬ５(１０):２９７９￣２９８６.ＤＯＩ:１０.１９８１２/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｆｓｐ１１￣５９５６/ｔｓ.２０１４.１０.００３. [９]ＳＣＨＥＬＴＥＭＡＲＡꎬＨＡＵＳＣＨＩＬＤＪＰꎬＬＡＮＧＥＯꎬｅｔａｌ.ＴｈｅＱＥｘａｃｔｉｖｅＨＦꎬａＢｅｎｃｈｔｏｐｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒｗｉｔｈａｐｒｅ￣ｆｉｌｔｅｒꎬｈｉｇｈ￣ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｑｕａｄｒｕｐｏｌｅａｎｄａｎｕｌｔｒａ￣ｈｉｇｈ￣ｆｉｅｌｄＯｒｂｉｔｒａｐａｎａｌｙｚｅｒ[Ｊ].ＭｏｌＣｅｌｌＰｒｏｔｅｏｍｉｃｓꎬ２０１４ꎬ１３(１２):３６９８￣３７０８. [１０]王小兵ꎬ李启艳ꎬ冉金凤ꎬ等.超高效液相色谱－四极杆/飞行时间高分辨质谱法用于保健食品中６种非法添加降脂类药物的快速筛查与定量分析[Ｊ].食品安全质量检测学报ꎬ２０１９ꎬ１０(５):１２１４￣１２１９.[１１]李宇翔ꎬ李燕平ꎬ华永有.ＵＰＬＣ￣四极杆－静电场/轨道阱高分辨质谱法测定畜禽肉类食品中双酚Ａ和双酚Ｓ[Ｊ].海峡药学ꎬ２０１９ꎬ３１(７):５３￣５７.[１２]ＷＡＮＧＳＰꎬＬＩＵＬꎬＷＡＮＧＬＬꎬｅｔａｌ.ＳｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｉｘｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎｒａｔｐｌａｓｍａａｆｔｅｒｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆＪｉｔａｉＴａｂｌｅｔｂｙｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ￣ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ￣ｔａｎｄｅｍｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ:Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｔｏａｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｔｕｄｙ[Ｊ].ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＢꎬ２０１３ꎬ９１２:７５￣８４.ＤＯＩ:１０.１０１６/ｊ.ｊｃｈｒｏｍｂ.２０１２.１１.０１９.[１３]胡雁萍ꎬ赵迪ꎬ李焕茹ꎬ等.ＵＰＬＣ￣Ｑ￣ＥｘａｃｔｉｖｅＯｒｂｉｔｒａｐ高分辨质谱定量分析不同产地㊁炮制前后女贞子中９种成分的含量[Ｊ].天然产物研究与开发ꎬ２０２１ꎬ３３(８):１３０８￣１３１９.ＤＯＩ:１０.１６３３３/ｊ.１００１￣６８８０.２０２１.８.００６.[１４]钮正睿ꎬ王聪ꎬ丁宏ꎬ等.超高效液相色谱－四极杆/飞行时间高分辨质谱测定保健食品及其原料中洛伐他汀及类似物的含量[Ｊ].食品安全质量检测学报ꎬ２０１７ꎬ８(７):２５６３￣２５７０.[１５]吴丹ꎬ刘斌ꎬ邹瑜.ＵＰＬＣ￣Ｑ￣Ｅｘａｃｔｉｖｅ四极杆－静电场轨道阱高分辨率质谱法同时测定参芪健胃颗粒中８个成分的含量[Ｊ].中国药房ꎬ２０２０ꎬ３１(５):６００￣６０６.ＤＯＩ:１０.６０３９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００１￣０４０８.２０２０.０５.１９.[１６]刘亚涛ꎬ刘芳ꎬ贺晓立ꎬ等.超高效液相色谱－四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱测定五味子和醋五味子中８种木脂素成分含量[Ｊ].中国医院药学杂志ꎬ２０２０ꎬ４０(１３):１４２１￣１４２７.ＤＯＩ:１０.１３２８６/ｊ.１００１￣５２１３.２０２０.１３.０４.。
超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱联用仪技术参数一、应用范围本设备主要用于食品安全，药物代谢，毒物分析，代谢组学，脂质组学等小分子化合物的快速同步定性、定量分析。
1.工作条件1. 1.1电源电压：230V±10%,50∕60Hz,16Λ1.1.2环境温度：15-27βC（最优：18~21C）1.1.3相对湿度：20-80%二、技术要求1.超高效液相色谱仪1.1二元超高效梯度泵（带真空在线脱气机）1. 1.1流量范围:0~8m1.∕min,步进0.001m1./min▲1.1.2最大压力：≥103.4Mpa1.1.3流量准确度:＜0.1%1.1.4流量精密度：＜0.05%1.1.5梯度混合精确度：＜0.15%1.1.1.6梯度混合类型：二元高压混合1.2.7泵清洗系统：主动式单独流路清洗柱塞1.3.动进样器：1.4.1进样体积：0.01-IOO P1.1.4.2进样体积准确度：0.5%1.4.3交叉污染：0.004%1.5.温箱1.6.1温控范围：5~80°C1.3.2温度准确度：±0.5C1.3.3温度精度±0.1C1.3.4容量：最多12支色谱柱2.质谱部分技术性能2.1.离子源2.1.2离子源：独立的可加热电喷雾离子源（ESI源），全内置式气路电路接口设计，安装离子源时即可实现气路电路连接，自动识别，实现零误操作；▲2.1.2可加热ES1.源，加热温度最高可达550C,不分流的情况下采用纯水作为溶剂，流速为1.u1.-2000μ1.∕min;2.1.3探针采用60度最优喷雾设计，可在任意位置固定并实现前后直线型、左右圆弧型调节，高低连续可调；2.1.4内置大面积多边形同轴主动排废气设计，消除废气涡流，降低化学噪音，不锈钢排废管路，实现离子源腔体高温自洁净；2.1.5具有雾化气、辅助雾化气、可调式吹扫气（0-151.∕min可调），进一步提高雾化效率和稳定性；2.1.6可拆卸的吹扫挡锥，非对称锥面设计，在富灵敏度的情况下确保长期耐用性；2.1.7内置六通阀，实现流动相自由切换2.2离子传输系统▲2.2.1离子传输系统必须配有离子传输管设计，保护分子涡轮泵，减少真空负担；2.2.2大口径非对称高通量离子传输管，确保更多离子进入质谱系统，提高灵敏度；2.2.3离子传输管双独立加热，最高温度可达400℃,进一步提高脱溶剂效率和确保离子传输系统抗污染能力；2.2.4具有真空隔断阀设计，在移去、清洗离子传输部件时，不需破坏真空即可实现快速更换，待机时不需要消耗氮气；2.3四极杆质量分析器2.3.1碰撞气为高纯高惰性氧气或氮气，确保母离子碎裂效率；2.3.2四极杆分辨率：QI和Q3在全质量范围，分辨率可到0.2amu的高选择性，在只需在方法设定设定界面简单选择即可，无需特殊手动调谐。
1、超高效液相色谱-四极杆超高分辨质谱联用仪1.设备用途食品安全检测和未知添加物的定性定量检测2. 工作条件2.1.电源:230V±10%,AC(交流),50/60Hz2.2.环境温度:18-25℃;2.3. 相对湿度:40-60%2.4. 仪器可连续正常运行。
2.5.工作条件及安全性要求符合中国及国际有关标准或规定。
3. 质谱部分技术参数*3.1 配备独立的可加热电喷雾离子源ESI,大气压化学电离源APCI,要求离子源具有真空锁定装置,ESI 与APCI 切换快速方便。
3.1.1 可加热电喷雾离子源ESI 流速:1-2000ul/min3.1.2 独立的大气压化学电离源APCI 流速50-2000ul/min*3.2 质量分析器:采用四极杆与静电场轨道阱串联组合质谱。
若采用四极杆-飞行时间组合质谱,需采用各厂家最高端型号(提供官方网站证明)。
3.2.1 质量范围:50-6000 m/z。
3.2.2 四极杆:要求金属钼双曲面四极杆,其选择性达到小于0.4Da。
*3.2.3 分辨率:要求所提供设备的分辨率不小于140,000(在m/z200),可扩展到200,000。
若达不到140000FWHM(在m/z200)需加配离子淌度和纳升液相色谱各一套(需提供技术彩页证明)3.2.4 分辨率与灵敏度:在提高仪器分辨率时,设备的灵敏度保持不降低;也即100fg 利血平标准品进样,ESI+模式下,分辨率分别为35000 和70000 时,其它仪器参数一致的前提下,其609 信号的响应值(峰面积)相差不超过10%。
(该项指标将作为验收指标)。
3.2.5 质量准确度(MS 和MS/MS):内标:小于1 ppm,外标:小于3 ppm*3.2.6 质量轴稳定度:设备一次校正后不再校正且不使用内标情况下,连续48 个小时内重复进样100fg 利血平,609 质量精确度≤3ppm;(此项指标将作为设备验收指标)。
液相色谱-四极杆/飞行时间质谱联用（HPLC-QTOF）一、开机1.打开计算机，LAN Switch电源。
2.打开液相各个模块电源，打开质谱前面的电源开关，等待大约两分钟，当听到第二声溶剂阀切换的声音(表明质谱自检完成)后，仪器可以联机。
3.在计算机桌面上双击MassHunter采集软件图标，进入MassHunter工作站。
4.如果MassHunter工作站在之前曾经打开和关闭过，请确认在再次打开工作站之前，关闭MassHunter所有的进程；双击桌面上的图标，在弹出的窗口点击Shut Down，等待所有的Status都变为Terminated后，点击Close。
然后再打开MassHunter工作站。
注意：在MassHunter采集软件关闭后，再次打开之前，必须执行上面的操作，否则无法进入采集软件。
5. 点击Standby按钮，检查前级真空（典型值应≤2.5Torr）和高真空，等到高真空≤2×10-6Torr后，关闭工作站。
6. 进入仪器诊断软件界面，在菜单上选择Connection > Connect，输入IP地址192.168.254.12，点击OK。
根据不同的情况，选择不同的Condition HV的模式。
0.6 Hour Cycle (Quick Vent) 适用于Q-TOF短暂关机后的Condition，比如更换泵油，短时间停电等。
2 Hour Cycle (Optics Service) 适用于对Q-TOF关机，进行简单维护后的Condition，比如清洗毖绅管等。
8 Hour Cycle (TOF Service) 适用于对Q-TOF关机，进行比较长时间的维修后的Condtion，比如仪器出现故障后Agilent工程师上门维修后再次开机。
13 Hour Cycle (Installation) 适用于Q-TOF安装时第一次开机后的Condtion；当者是比如长假关机后再次开机。
第39卷第12期2020年12月分析测试学报FENXI CESHI XUEBAO(Journal of Instrumental Analysis)Vol.39No.121521-1526d o i: 10.3969/j.issn.1004 -4957. 2020.12. 013超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱同时检测血样中4种卡西酮类新精神活性物质刘静1何洪源1!\倪春芳2**，曹芳琦3,赵海波M，徐琳1(1.中国人民公安大学侦查与刑事科学技术学院，北京100038; 2.上海市公安局物证鉴定中心上海市现场物证重点实验室，上海200083; 3.上海市刑事科学技术研究院上海市现场物证重点实验室，上海200083; 4.太原市公安局迎泽分局，山西太原030045)摘要：建立了同时检测血样中3，4-亚甲二氧基甲卡西酮（Methylone)、3，4-亚甲二氧基乙卡西酮（Ethy-lo e)、4-氯甲卡西酮(4-CMC)、4-氯乙卡西酮(4-CEC)4种卡西酮类新精神活性物质的超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法（^?1£：-(710^3肩3)。
取0.5 1^血液，按体积比5:2:13将血液、水和乙腈混合，润旋振荡1m in，以12000 r/m in离心15m in将蛋白沉淀，取上清液待测。
采用Acquity UPLC® BEH C1色谱柱(2.1m m x l00 mm，1.7 |x m)分离，0.1%甲酸-水(5mmol/L乙酸铵）和乙腈作为流动相进行梯度洗脱，采用多反应监测（MRM)模式，正离子[M+ H]+扫描检测。
结果表明，4种目标药物在5~500 ng/m L质量浓度范围内线性关系良好，检出限为2 ng/m L，定量下限为5ng/m L，回收率为87.3% ~ 111%，日内和日间相对标准偏差分别不大于8.1%和8.6%。
该方法可同时检测血样中4种卡西酮类新精神活性物质，满足实际检验需要。
超高效液相色谱-串联三重-四极杆质谱联用仪技术参数：(一)、质谱仪部分1、*离子源：电喷雾离子源(ESI，流量1~5-2000~3000 μl/min)2、大气压化学电离源(APCI，流量50~200-3000 μl/min，或200-2000 μL/min)3、离子源切换要求方便、快速；清洗、维护要方便。
4、离子源接口：离子源接口适用于100％有机相到100％水相，耐用一定浓度的缓冲液，要求采用气帘气等特殊措施，以保持高灵敏度和抗污染能力, 抗堵塞抗污染的接口技术。
5、**质量分析器：三重四极杆；*质量范围m/z：5--2000~2800 amu或更高范围。
扫描速度: 4000~10000 amu/sec；分辨率：分辨率：0. 4 FWHM；质量稳定性：±0.1amu/24h。
质量准确度: 0.1amu。
6、***串联质谱功能：具有MS/MS和MS/MS/MS功能，一次进样，可同时获得MRM定量图谱及各组分子离子二级/三级全扫描质谱图。
7、***定量分析重现性：5ppb和50ppb胆固醇氧化物连续五次进样RSD〈1%〉或5ppb和50ppb利血平连续五次进样RSD〈1%〉；定量范围：6个数量级8、**MRM检测灵敏度：(低中高三种流速方式不分流200/500/1000ul/min均可实现)ESI源(+) 1pg利血平S/N>500:1(峰峰比)；或更高ESI源(-) 1pg氯霉素S/N>500:1(峰峰比)；或更高APCI源1pg利血平S/N>300:1(峰峰比)；或更高10、**扫描模式: 全扫描(Full Scan)；选择离子扫描(SIM)；子离子扫描( Product IonScan)；母离子扫描(Precursor Ion Scan)；中性丢失扫描(Neutral Loss Scan)；选择反应扫描(SRM)；多反应同时监测扫描(MRM), 具有加速装置保证一次进样可完成多对离子MRM监测(>300对) Q2驻留时间小于2ms(dwell time).11、增强多电荷扫描；时间延迟碎裂；混合扫描(可把以上扫描功能进行组合扫描)(Mixed Scan Mode)；正/负离子快速切换扫描, 正负离子切换时间小于20-50ms。
1、超高效液相色谱-四极杆超高分辨质谱联用仪1.设备用途食品安全检测和未知添加物的定性定量检测2. 工作条件2.1．电源：230V±10%，AC(交流)，50/60Hz2.2．环境温度：18-25℃；2.3. 相对湿度：40-60%2.4. 仪器可连续正常运行。
2.5．工作条件及安全性要求符合中国及国际有关标准或规定。
3. 质谱部分技术参数*3.1 配备独立的可加热电喷雾离子源ESI，大气压化学电离源APCI，要求离子源具有真空锁定装置，ESI 与APCI 切换快速方便。
3.1.1 可加热电喷雾离子源ESI 流速：1-2000ul/min3.1.2 独立的大气压化学电离源APCI 流速50-2000ul/min*3.2 质量分析器：采用四极杆与静电场轨道阱串联组合质谱。
若采用四极杆-飞行时间组合质谱,需采用各厂家最高端型号(提供官方网站证明)。
3.2.1 质量范围：50-6000 m/z。
3.2.2 四极杆：要求金属钼双曲面四极杆，其选择性达到小于0.4Da。
*3.2.3 分辨率：要求所提供设备的分辨率不小于140,000（在m/z200），可扩展到200,000。
若达不到140000FWHM（在m/z200）需加配离子淌度和纳升液相色谱各一套(需提供技术彩页证明)3.2.4 分辨率与灵敏度:在提高仪器分辨率时，设备的灵敏度保持不降低；也即100fg 利血平标准品进样，ESI+模式下，分辨率分别为35000 和70000 时，其它仪器参数一致的前提下，其609 信号的响应值(峰面积)相差不超过10%。
（该项指标将作为验收指标）。
3.2.5 质量准确度（MS 和MS/MS）：内标：小于1 ppm，外标：小于3 ppm*3.2.6 质量轴稳定度：设备一次校正后不再校正且不使用内标情况下，连续48 个小时内重复进样100fg 利血平，609 质量精确度≤3ppm；（此项指标将作为设备验收指标）。
超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法一、概述在当今的科学研究和工业生产中，高分辨质谱技术已经成为一种非常重要的分析方法。
它不仅可以用于大分子的结构鉴定和分析，还可以用于微量成分的检测和定量分析。
超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法作为一种新兴的高分辨质谱分析技术，具有很高的分辨率和灵敏度，受到广泛关注。
在本文中，将介绍该技术的原理、应用及发展前景。
二、原理超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法的原理主要包括超高效液相色谱、四极杆质谱和静电场轨道阱质谱三部分。
1. 超高效液相色谱（UHPLC）是一种高分辨率、高灵敏度的液相色谱技术，它通过使用亚毫米级的柱内粒子和高压泵，能够大大提高分离效率和分析速度。
2. 四极杆质谱是一种广泛应用的成熟质谱分析技术，它通过四个电极产生交变电场，对离子进行筛选和分析。
3. 静电场轨道阱质谱是一种高分辨率、高灵敏度的质谱分析技术，它通过静电场将离子束限制在一个稳定的轨道上，以便进行准确的质量测定。
三、应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法在许多领域都有着重要的应用价值，例如医药、食品安全、环境监测等。
1. 医药领域：该技术可以用于药物代谢动力学研究、天然产物的结构鉴定和药物残留的检测。
2. 食品安全领域：该技术可以用于食品中农药、兽药残留的检测、食品添加剂的分析及食品成分的定量分析。
3. 环境监测：该技术可以用于大气、水体和土壤中微量有机物和无机物的分析与检测。
四、发展前景随着分析技术的不断发展，超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法也在不断完善和提高。
未来，预计该技术将在分析速度、分辨率、灵敏度和样品通量方面都会有显著的提升。
1. 提高分辨率：通过优化仪器结构、信号处理算法等手段，提高分辨率，实现更为精准的分析。
2. 提高灵敏度：改进离子传输和捕获方式，提高仪器的灵敏度，能够对更小浓度的物质进行分析。
3. 提高分析速度：通过改进柱子材料、优化流动相等手段，提高分析速度，实现更为高效的分析。
超高效液相色谱三重四级杆质谱联用仪主要技术性能要求1．技术指标：1.1质谱部分1.1.1质谱仪主机▲1.1.1.1质量数范围(m/z)：覆盖5-2000 m/z。
1.1.1.2最高分辨率：分辨率≤0.5amu。
1.1.1.3扫描速度：≥18000amu/s。
1.1.1.4质量稳定性：±0.1amu (24hr)。
1.1.1.5最小离子驻留时间：1ms。
1.1.1.6三重四极杆扫描模式：全扫描(Full Scan)，选择离子扫描(SIM)，多反应监测扫描(MRM)，子离子扫描，母离子扫描，中性丢失扫描。
1.1.1.7具备同时定性定量功能，具备MRM+PICs或MRM+EPI扫描功能。
1.1.1.8具备离子富集功能。
1.1.1.9真空系统：大抽速无油机械泵(终生无需泵油)和长寿命涡轮分子泵组合高真空系统, 无需额外水冷却系统，自动断电保护功能。
1.1.2离子源▲1.1.2.1需配置ESI和APCI复合离子源，离子源具有真空隔断阀，无须真空系统放空，即可拆洗离子源，可实现气路电路连接，自动识别，不需进行额外操作。
复合源模式：一次进样可以同时获得ESI和APCI的正负离子方式数据等四张谱图，便于方法开发，ESI和APCI间切换时间≤20ms1.1.2.2离子源可加热，确保离子化更为充分, 辅助加热温度最大可达600℃以上,确保最大的离子化效率和抗基质干扰能力。
▲1.1.2.3离子源接口采用锥孔结构和锥孔反吹技术，无毛细管设计,以同时保持高灵敏度和优异的抗污染能力。
1.1.3检测器性能以及灵敏度1.1.3.1动态线性范围：定量超过六个数量级。
▲1.1.3.2正/负离子快速切换扫描，同时测定正、负离子化合物，切换速度：≤18ms。
▲1.1.3.3灵敏度(需提供制造商盖章的原版技术参数作为证明文件)灵敏度ESI+：1pg 利血平，MRM分析测量m/z195（子离子）、m/z609（母离子），柱上进样，信噪比≥300000:1。
附件：技术参数一、超高效液相色谱-四极杆飞行时间高分辨质谱联用仪1.应用范围：系统主要用于有机化合物的定性和定量分析。
可分别通过多目标未知物筛查流程、完全未知物筛查流程等来开展未知物的发现和鉴定工作；还可以开展药物代谢、代谢物鉴定和代谢组学研究等。
2.工作环境条件：2.1 电源：230Vac，±10%，50/60Hz，30A。
2.2 环境温度：15 ~ 26︒C。
2.3 相对湿度：20 ~ 80%。
3.总体要求：3.1 该系统基本组成包括超高效液相色谱部分和具有超高灵敏度、超快扫描速度的落地式高频四极杆-飞行时间串联质谱仪部分。
仪器由计算机控制、配有独立的ESI和APCI离子源。
软件包括仪器调节、数据采集、数据处理、定量分析和报告。
3.2 仪器灵敏度要高，性能稳定，重复性好。
3.3 国际知名质谱公司（10年以上商品化四极杆-飞行时间质谱生产经验）推出的主流产品，产品全部为原装进口，其性能达到或超过以下要求。
4. 质谱性能指标：4.1 离子源：配有电喷雾离子源（ESI）、大气压化学电离源（APCI），离子源切换方便、快速，清洗、维护方便。
4.1.1 插拔式可互换ESI及APCI喷针，可实现ESI源及APCI源的快速更换。
4.1.2 大气压离子源采用锥孔结构，使用气帘气技术，而无毛细管（半径<1mm）设计装置，以同时保持高灵敏度和优异的抗污染能力。
（要求提供接口结构图）4.1.3 电喷雾离子源流速范围：在确保灵敏度不损失的前提下，实现高流速，无需分流，即可达到3ml/min；加快样品的分析速度同时，还可避免分流对样品造成损失。
4.1.4 大气压化学电离源流速范围：在确保灵敏度不损失的前提下，实现高流速，无需分流，即可达到3ml/min；加快样品的分析速度同时，还可避免分流对样品造成损失。
4.1.5 脱溶剂能力：离子源内采用辅助气体加热，气体最高温度可达700℃，确保最佳的离子化效率。
（要求提供硬件结构图和软件界面截图作为证明文件）4.1.6 离子源内废气排放：有主动废气排放装置，防止气体在密闭的离子源腔体中的回流，降低离子源的记忆效应和污染，降低机械泵的负荷延长机械泵泵油使用时间，维护试验环境，保障工作人员健康。
4.1.7 Q0聚焦技术：离子引入部分拥有高压离子聚焦技术，压力至少达7.5mtorr，以确保最佳的离子聚焦效果和离子传输效率，有效消除“记忆效应”和“交叉污染”。
4.1.8 校正方式：外置CDS辅助校正。
4.2 质量分析器：落地式四极杆-飞行时间串联质谱。
4.2.1 质量范围m/z：50-40,000 m/z。
4.2.2 扫描速度（MS/MS）：不少于80张质谱图/秒。
（提供软件设置界面截图）4.2.3 分辨率和采集速率（要求必须满足下列条件之一，需提供谱图证明文件）：4.2.3.1 分辨率：≥40000（FWHM），测试条件：监测离子m/z 906，采集速率：80Hz，即不低于80张谱图/秒；4.2.3.2 分辨率：≥40000（FWHM），测试条件：监测离子m/z 906，采集速率：30Hz，即不低于30张谱图/秒；需再配备离子淌度组件（HDMS）；4.2.3.3分辨率：≥240000（FWHM），测试条件：监测离子m/z 400；且采集速率最高可达20Hz以上，即不低于20张谱图/秒。
4.2.4质量准确度（MS和MS/MS，外标法）：小于1.0 ppm。
4.2.5质量稳定性：48小时小于2.0ppm。
4.2.6 串联质谱功能：一次进样同时获得高分辨MS和MS/MS数据（15分钟内完成不少于50种化合物）。
4.2.7 飞行管：4.2.7.1 加速电压：不低于15kV。
4.2.7.2 飞行路径：采用高速单反射式飞行管设计。
4.2.7.3 控温系统：采用温度惰性合金和真空隔热夹层设计，保证常规实验室环境下的使用。
4.2.8 加速器脉冲频率：不低于30kHz。
4.2.9 定量动态线性范围：5个数量级。
4.2.10 灵敏度（ESI+）：4.2.10.1 MS模式：1pg利血平柱上进样S/N优于750:1（分辨率>30000，扫描速度>25Hz）。
4.2.10.2 MS/MS模式：1pg利血平柱上进样S/N优于1750:1（分辨率>30000，扫描速度>45Hz）。
4.2.10.3 柱上100 amol BSA肽段S/N > 200:1。
4.3 检测系统：40GHz的多通道检测器，保证超高灵敏度。
4.4 真空系统：高性能分子涡轮泵，真空效率高，长寿命。
4.5 气路系统：所有气路、碰撞气等均采用同一种气体，确保质谱仪极高的灵敏度和重现性。
4.6 数据系统硬件：I5-4570S以上CPU，8GB内存，2×2TB硬盘，21”液晶显示器，DVD-RW驱动器。
4.7 数据系统软件：4.7.1 仪器控制软件：可用于控制整个LC/MS/MS系统，包括LC-MS/MS仪器调节、数据采集、数据处理、分析和报告的软件系统。
4.7.2 数据处理：同时处理多组数据，进行数据间比较、处理，背景扣除等基本功能。
4.7.3 分子特征提取软件：从海量数据提取化合物特征信息，能够消除背景噪音干扰，从背景中提取响应很小的组分信息，确保不会漏掉任何可能存在的目标组分信息。
对于共流出物，自动分类各组分的质谱信号，能够提取任何一个组分的所有质谱信号，包括同位素信息。
4.7.4 同位素分析软件：自动计算每个分子式的同位素丰度，并与理论同位素丰度比对，可以模拟化合物的理论同位素质谱图；自动与分子式计算功能关联进行元素组成确认；通过精确质量、同位素丰度比、同位素精确质量比及MS/MS四维信息可靠关联分析，给出最终分子式信息。
4.7.5数据非依赖采集和分析软件：可进行连续可变窗口设置并采集所有化合物的MS和MS/MS谱图，不需要分段多次试验，一次采集完成整个质量范围的二级图谱采集。
4.7.6 定量分析软件：高通量的定量软件，可处理大批量样品，同时分析上百种甚至上千种化合物。
采用工业标准的MQ4算法或Signal Finder TM算法，提供可靠的积分，减少积分误差。
4.7.7 谱库功能：标准MS/MS谱库要求提供的为不同碰撞能量下的化合物MS/MS图谱，谱库搜索具有可靠性强，可在数据定性时无需标准品即可完成准确定性。
谱库化合物种类≥2000种，包括农药、兽药、霉菌毒素类等。
同时可提供Chemspider在线数据库，化合物种类不少于40000个，检测数据不需要导出，和检索数据库实现无缝链接。
（提供原厂软件无缝链接Chemspider在线数据库的截图）4.7.8 高分辨MRM定量分析性能：可进行高分辨质谱数据的准确定量分析功能，实现真正的高分辨质谱同时定性定量的优异性。
4.7.9实时多重质量亏损采集过滤软件：在数据采集过程中可以采用不同的质量亏损窗口同时鉴定出I相和II相代谢物，保证即使在体内复杂基质中能获得高质量的MS/MS质谱图。
保证快速地从多种复杂峰中查找特定母核结构的一类化合物，有效排除本底噪音的干扰，简化数据文件，快速发现被掩盖在强背景噪音下的目标化合物。
（提供软件方法文件和说明）4.7.10 代谢组学软件和分析平台：支持代谢组学分析过程中涉及到质谱色谱峰发现和提取、质谱峰解析、统计学、生物信息学等，一套软件即可实现上述所有功能，且对分析人员要求低，即使非代谢组学专业人员也能轻松完成代谢组学数据分析，准确发现潜在的生物标志物和差异代谢通路。
4.7.10.1 产品是与全球最著名的Scripps研究所合作研发，是目前认可度最高的代谢组学数据处理软件。
4.7.10.2 数据上传速度：0.5 min-1min。
4.7.10.3 数据处理速度：45min-60 min。
4.7.10.4 数据库检索：鉴定化合物直接检索METLIN的数据库。
含有240000种以上的化合物信息，大于12000种化合物的二级信息，超过60000张二级质谱图。
4.7.10.5 本地化代谢组学数据库：可直接使用本地化代谢组学数据库，该数据库是基于标准品建立，无需预先从公用网站下载数据库到本地，且无需联网即可检索。
5. 超高效液相色谱性能指标：5.1 二元高压梯度泵。
5.1.1 流速范围：0.001-5mL/min, 0.001mL/min步进。
5.1.2 最高耐压：18000psi以上。
5.1.3 流速精密度：<0.065%RSD。
5.1.4 梯度组成精度：<0.15% RSD。
5.1.5 梯度组成准确度：±0.5%。
5.1.6 延迟体积：< 120μL。
5.2 真空脱气机：所有通道均可在线脱气，有自动柱塞清洗和进样针清洗功能。
5.3 自动进样器：5.3.1 进样精度：< 0.3% RSD。
5.3.2 进样范围：0.1-50μL，增量为0.1μL。
5.3.3 样品容量：不少于100位2mL样品盘。
5.3.4 样品污染度：< 0.0015%。
5.4 柱温箱5.4.1 控温范围：室温-10℃~100℃。
5.4.2 控温精度：±0.05℃。
5.4.3 控温准确度：±0.5℃。
5.4.4 柱容量：15cm×2。
5.5 二极管阵列检测器5.5.1 测量波长范围：190- 700nm5.5.2波长准确度：±1nm5.5.3噪音水平：±0.2 × 10- 5AU/hour5.5.4漂移：0.5 × 10- 3AU/hour6.技术服务条件：6.1 技术文件：由供货方提供样本，使用及安装、调试、维修手册。
6.2 质量及验收标准：质量符合买方要求并符合厂家规定的各项标准，同时按厂家标准验收程和中国国家计量标准部门的有关规程验收，仪器制造商授权的技术人员现场安装调试、仪器技术指标经验收合格，附验收报告。
6.3 技术服务：安装验收期间，在用户所在地对用户进行仪器的基本操作和日常维护的现场培训，内容包括仪器原理，使用方法和维护方法等，仪器制造商在中国境内应有零备件库，有经验丰富的维修工程师和技术应用支持工程师负责售后支持。
6.4 保修：仪器制造厂提供壹年以上免费保修服务，保修期后，厂商应保证长期供应零备件和正常的售后服务。
6.5 维修响应：8小时故障相应，48小时内到现场。
6.6 国内应用支持能力：质谱生产厂家在国内有强大的应用支持的能力。
投标文件中需提供近3年（2015-2017年）国内客户发表的、具有质谱厂家技术人员署名的SCI收录文献不少于10篇，需提供文献目录，文献首页及文献作者介绍页。
7.详细配置表：二、超高效液相色谱-串联四极杆质谱联用仪1.应用范围：系统主要用于中药活性成份分析、药代动力学分析、化合结构分析、靶向代谢组学研究等工作。
