山药多糖提取实验方案(最新)

中药山药中多糖成分提取、分离、含量测定及对胃肠功能的影响姓名：汪岩学号：S2010210 专业：中药学山药为薯蓣科薯蓣属植物薯蓣Dioscorea opposita Thunb.的干燥根茎。

山药生用功偏补肾生精，益肺肾之阴，麸炒则长于益脾和胃，益肾固精[1]。

临床上麸炒山药主要做为滋阴或补阳的臣药，功偏补益[2]。

补益药的药理研究主要包括免疫学研究[3]，山药多糖具免疫调节作用[4]，对对胃肠的功能具有一定的影响。

本实验研究以大黄造脾虚模型小鼠，研究山药多糖成分对胃排空率及肠推进率的影响，同时以胸腺指数和脾脏指数作为衡量模型动物体内免疫水平的基本指标，考察山药麸炒前后多糖成分补脾健胃作用及相关免疫指标的变化，为进一步阐明山药补脾健胃作用的可能机制。

1 仪器、材料与山药多糖的提取1.1仪器与试药分析天平；蒸发仪；离心机；紫外分光光度计。

大黄（注明购买地点、批号）；阿托品（注明厂家、生产批号）；生理盐水（注明生产厂家、批号）；酚红（厂家、批号）；淀粉酶（厂家、批号）；墨汁；NaOH；其它试剂为分析纯。

1.2动物有生产许可证和使用许可证的小鼠80只，其中雌雄各半，体重比较均衡。

1.3山药多糖的提取取山药药材500g，加水冷浸12h，水煎煮1.5h，两次，合并水煎液，加入2%新鲜配制的淀粉酶溶液于60℃保温5min，目的是出去淀粉。

再进行抽滤，滤液浓缩至体积为500ml，以95%乙醇醇沉至含醇量为80%，静置过夜，抽滤，滤渣依次经无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，50℃真空干燥既得山药多糖（粗多糖）。

1.4大黄水煎液的制备取大黄饮片50℃热风干燥，然后称取500g，加入8倍量水冷浸12h后，水煎煮1.5h，两次，合并滤液，最后将滤液浓缩至浓度为1g生药材/ml，储存备用。

2精制山药多糖的分离将山药粗粉50 g ，置索氏提取器中，经石油醚( 60～90℃) 回流提取，弃提取液，药渣挥干石油醚，再用80％乙醇回流提取，以除尽单糖，低聚糖及醇溶性杂质，药渣挥干溶剂后，加500 ml水于90℃，提取，合并提取液。

山药多糖的作用及其提取方法李昂.烟台大学生命科学学院，山东烟台264005摘要：本文综述了山药多糖各种生物活性作用，并对近几年山药多糖的提取方法作了综述，指出了不同提取方法最佳提取工艺条件关键词：山药多糖；作用；提取；最优条件The Effect of Yam Polysaccharide and Method of itsExtractionLi Ang（B iological Engineering，College of Life Science,Yantai University，Yantai 264005）Abstract: This paper was reviewed the biological activity of polysaccharides, and the extraction method in recent years, Chinese yam polysaccharide were summarized, pointed out the optimum extraction conditions of different extraction methodsKey words: yam polysaccharide; function; extraction; optimal condition前言山药是薯蓣科多年生宿根植物山药(Dioscores opposite Thunb．)的块根，主产于河南、广东、广西等省，以河南焦作市(古怀庆府)所产最佳，又称“怀山药”。

《本草纲目》记载其能“益肾气，健脾胃，止泻痢，化痰涎，润皮毛”。

现代医学研究表明，山药具有增强免疫、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、降血糖等多种生物活性，其主要功效成分是山药多糖[1]。

因此山药多糖成为近年来近年来的研究热点。

山药多糖的组成和结构比较复杂，不同的研究者提取分离出了不同的山药多糖，其中有均多糖，有杂多糖，也有糖蛋白，相对分子质量从数干到数百万不等，其多糖含量和糖基组成也各不相同。

第40卷第7期2017年7月新疆医科大学学报Journal of Xinjiang Medical UniversityV〇1.40 No.7July.2017有机山药中多糖及其他成分的含量测定王莹1，蒋洁2,郝宇薇2,刘婧怡2,兰卫2,安冬青2(新疆医科大学1附属中医医院，乌鲁木齐830002; 2中医学院，乌鲁木齐830011)摘要：3的测定有机山药中多糖、脂肪、浸出物含量及折干率。

方法以硫酸_蒽酮为显色剂，采用分光光度法测定有机山药中多糖的含量；采用索氏抽提法，测定有机山药中脂肪的含量；采用重量法测定机山药中浸出物含量及折干率。

结果多糖在203.8〜662.4 pg/m L浓度范围内线性良好（r =0.9993)，精密度、稳定性、重现性的R SD均<5.00%，加样回收率为100.7%，有机山药中多糖含量为28.32%，脂肪含量为1.30%，折干率为12.80%，水浸出物为23.62%，醇浸出物为9.67%。

结洽多糖测定方法简单易行，稳定可靠；有机山药的脂肪和浸出物含量符合国家药典规定，为建立有机山药的质量标准提供依据。

关键词：有机山药；多糖；浸出物；测定中图分类号：R914 文献标识码：A文章编号=1009-5551(2017)07-0957-03doi：10.3 96 9/j.issn.1009-5 5 51.2017.07.025Determination of polysaccharide and other components in organic yamWANG Ying1，JIANG Jie2，HAO Yuwei2，LIU Jingyi2，LAN Wei2，AN Dongqing2i1 Subsidiary Chinese M edicin e Hosp ital o f X in j ia n g M ed ica l University , Urumqi830002, C h in a；2 X in j ia n g M ed ica l University Institute o f TCM Urumqi830011, China) Abstract：Objective To determinate polysaccharide, fat, extract content, drying rate in organic yam. Methods Anthrone sulfuric acid was used as chromogenic agent and the spectrophotometric was used to determi­nate the content of polysaccharide in organic yam；and soxhlet extraction method was used to determinate the content of fat in organic yam extract; gravimetric method was used to determinate the extract content and drying rate of machine in yam. Results Polysaccharide has good linearity in 203.8^662.4 g/mL concentra­tion range (r =0.999 3), precision, stability and reproducibility of the RSD was less than 5.00%, the re­covery rate was 100.7 % , organic yam polysaccharide content was 28.32 % , fat content was 1.30 % , the dr­ying rate was 12.80%, the water extract was 23.62%. The alcohol extract was 9.67%. Conclusion The method is simple, stable and reliable, and the content of fat and extract of organic Chinese yam accords with the requirements of the national pharmacopoeia.Keywords：organic yam；polysaccharide；extract；determination山药为薯葡科（Df〇5corm L.)植物薯葡(_D z'〇5corm士）的干燥根■，又称薯葡、山薯 蓣、怀山药、白山药，含有黄酮、多糖、薯蓣皂苷等成 分。

4.1提取条件对多糖率的影响
超声波功率对多糖含量的影响
由图1可知，使用超声波进行辅助提取与未使用相比，多糖含量有显著的提高；随着超声波功率的增加，多糖含量呈上升趋势。

超声波功率在150~200 W范围内，多糖含量较为稳定，当超声波功率达到250 W(超声波仪器最大允许工作功率)时，多糖含量有显著提高
由图2可知，在3O～5O℃的温度范围内，随着水提温度的升高，山药多糖含量逐渐增大。

在50～70℃温度范围内，随着水提温度的升高，山药多糖含量下降，这是因为山药中含有大量的淀粉，即其储能物质，而非通常所称的活性多糖。

温度过高，一方面使得淀粉在溶液中溶解度增加，另一方面使得淀粉糊化，影响后续的操作，给之后的分离等工艺带来困难。

由图3可知，在2O～60 min内，随着提取时间的延长，山药中多糖含量随之升高，60 min 末接近最大值，可见反应时间越长，提取越充分。

在8O～140 min，山药多糖含量趋于平缓。

因此，考虑实验指标的可观察性，选择水提时间30，60，90 min作为正交实验的三个水平。

由图4可知，开始时随着料液比的增加，山药多糖含量增长缓慢，料液比为1：1O时含量达到最高。

当料液比大于16，含量开始降低。

因此，选择1：10，1：12，1：16作为正交试验的三个水平。

山药多糖的提取分离及活性初步研究的开题报告题目：山药多糖的提取分离及活性初步研究1. 研究背景山药是一种常见的蔬菜，富含多种营养成分。

其中山药多糖是一种重要的生物活性成分，具有较强的免疫调节、抗肿瘤、抗氧化等生物活性，因此备受关注。

本研究旨在提取分离山药多糖，并对其生物活性进行初步研究，为山药多糖的开发利用提供科学依据。

2. 研究内容（1）提取山药多糖的最佳工艺条件的研究：采用不同浓度、不同比例的溶剂，对山药多糖的提取工艺进行优化，得到最佳工艺条件。

（2）山药多糖的分离纯化：采用氨基硅胶柱层析、凝胶过滤层析、超滤等方法进行山药多糖的分离纯化。

（3）山药多糖的物化性质研究：包括分子量、糖含量等的测定。

（4）山药多糖的生物活性研究：主要包括免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等方面的活性测试，探究山药多糖的生物学功能。

3. 研究意义山药多糖作为一种生物活性成分，具有广泛的开发利用价值。

本研究可以进一步探究山药多糖的生物学功能，为其在保健食品、药品等领域的应用提供科学依据。

4. 研究方法（1）植物材料的购买和加工：从市场上购买山药，并进行加工处理。

（2）山药多糖的提取：采用不同的提取条件，包括溶剂体系、提取时间、提取温度等条件的优化，提取山药多糖。

（3）山药多糖的分离纯化：采用氨基硅胶柱层析、凝胶过滤层析、超滤等方法进行山药多糖的分离纯化。

（4）山药多糖的物化性质研究：包括分子量、糖含量等的测定。

（5）山药多糖的生物活性研究：主要包括免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等方面的活性测试。

5. 预期结果本研究预期能够提取纯化山药多糖，并进行初步的物化和生物活性研究，进一步探究山药多糖的功能，为其在保健食品、药品等领域的应用提供科学依据。

怀山药多糖的结构鉴定及活性评价怀山药多糖的结构鉴定及活性评价摘要：怀山药（Dioscorea opposita Thunb）是一种中药材，具有广泛的药用价值。

其中的多糖是其主要有效成分之一，具有多种生物活性。

本研究旨在对怀山药多糖进行结构鉴定，并评价其活性。

一、引言怀山药是一种广泛分布于中国南方和东南亚地区的薯蓣科植物。

其根茎含有丰富的多糖，是一种重要的中药材。

怀山药多糖具有多种生物活性，包括抗炎、抗氧化、免疫调节等。

因此，对怀山药多糖进行结构鉴定和活性评价具有重要的科学价值和应用前景。

二、材料与方法1. 实验材料：采集新鲜怀山药根茎，制备怀山药多糖提取物。

2. 结构鉴定：采用红外光谱（IR）、核磁共振（NMR）等技术对怀山药多糖的化学结构进行鉴定。

3. 活性评价：通过体外活性实验评价怀山药多糖的抗氧化、抗炎、免疫调节等活性。

三、结果与讨论1. 结构鉴定结果：通过红外光谱和核磁共振等技术，得到怀山药多糖的化学结构。

结果表明怀山药多糖是一种具有复杂多糖链结构的高分子物质，包含苷链和葡萄糖等单糖成分。

2. 活性评价结果：体外活性实验结果表明，怀山药多糖具有较强的抗氧化活性，可清除自由基，减轻细胞氧化损伤。

此外，怀山药多糖还具有一定的抗炎作用，可抑制炎症反应，减轻炎症病变。

同时，怀山药多糖对免疫系统具有一定的调节作用，可增强机体免疫功能，提高机体抵抗力。

四、结论本研究对怀山药多糖进行了结构鉴定和活性评价。

结果表明怀山药多糖具有复杂多糖链结构，并具有较强的抗氧化、抗炎和免疫调节活性。

这些发现为怀山药多糖的进一步研究与开发提供了重要的参考依据。

进一步研究怀山药多糖的机理和药效，有助于挖掘怀山药多糖的临床应用价值，并为新药研究和开发提供理论依据。

综上所述，本研究通过对怀山药多糖的结构鉴定和活性评价，发现其具有复杂多糖链结构并表现出抗氧化、抗炎和免疫调节等活性。

这些结果为怀山药多糖的进一步研究和开发提供了重要的参考依据。

Vol.7 No.1Feb. 2021生物化工Biological Chemical Engineering第 7 卷 第 1 期2021 年 2 月山药多糖的功效与提取纯化及含量测定李沂格（石河子大学，新疆石河子 832003）摘 要：山药作为日常生活中一种常见的食材，口感细腻，营养丰富，具有增强人体免疫力、改善睡眠、补脾益肺等功效。

现代医学研究表明，山药具有多种生物活性，并认为山药中的主要功效成分是山药多糖。

本文对山药多糖的功效及其提取、纯化、含量测定方法研究予以综述。

关键词：山药多糖；功效；提取；纯化；含量测定中图分类号：R927.2 文献标识码：AEfficacy, Extraction, Purification and Content Determination of Yam PolysaccharideLI Yige(Shihezi University, Xinjiang Shihezi 832003)Abstract: Chinese yam as a common food in our daily life, because of its delicate taste, rich nutrition, enhance human immunity, improve sleep, strengthen the spleen and stimulate the lung and other effects and popular. Modernmedical research shows that Chinese yam has a variety of biological activities, and it is considered that the main functional components of Chinese yam polysaccharide. In this paper, the efficacy, extraction, purification and content determination of polysaccharide from Chinese yam were described.Keywords: polysaccharide from Chinese yam ; extraction; purification ;content determination山药是薯蓣科薯蓣属植物，主产地为河南、广东、广西等地，以河南省焦作市所产最佳，又称怀山药，是当地“四大怀药”之一。

金华职业技术学院金件切！业扌丄术学航JINHUACOLLEGE OF PROFESSION AND TECHNOLOGY毕业教学环节成果（2011 届）题目山药多糖提取制备工艺地研究________________学院__________ 制药与材料工程学院_________专业_____________ 生物制药技术____________班级学号______________ 201031100380131 _________姓名指导教师2011年5月28日金华职业技术学院毕业教学成果目录摘要-2 -b5E2RGbCAP弓丨言-3 -plEanqFDPw1仪器与试药-4 -DXDiTa9E3d1.1 仪器-4 -RTCrpUDGiT1.2试剂-4 -5PCzVD7HxA2.2样品溶液地制备-5 -jLBHrnAILg2.3标准曲线地制备-5 -XHAQX74J0X2.4山药多糖提取工艺过程-6 -LDAYtRyKfE2.5山药水溶性多糖提取工艺地确定-7 -Zzz6ZB2Ltk3结果与讨论-8 -dvzfvkwMI13.1山药多糖提取工艺条件地确定-8 -rqyn14ZNXI3.1.1料液比对山药多糖提取得率地影响-8 -EmxvxOtOco3.1.2提取温度对山药多糖提取得率地影响-8 -SixE2yXPq53.1.3提取时间对山药多糖提取得率地影响-9 -6ewMyirQFL3.1.4提取次数对山药多糖提取得率地影响-10 -kavU42VRUs3.2山药多糖提取工艺地优化-11-y6v3ALoS893.2.1正交设计地因素和水平-11-M2ub6vSTnP3.2.2试验设计及考察指标-11 -OYujCfmUCw3.3醇沉工艺地优化-13 -eUts8ZQVRd3.4最优工艺实验验证-14 -sQsAEJkW5T4 分析与结论-14 -GMsIasNXk A谢辞-16 -TIrRGchYzg参考文献-17 -7EqZcWLZNX山药多糖提取制备工艺地研究金华职业技术学院生物制药技术摘要：目地：对山药多糖水提醇沉工艺进行研究，得出山药多糖地最佳提取工艺•方法：以山药总多糖为指标，采用分光光度法，单因素考察及正交设计试验法，对料液比、提取温度、提取时间、提取次数进行考察；并对醇沉浓度、醇沉时间和醇沉次数进行考察.结果：水提正交试验结果表明，料液比1:15，温度100°C，时间4h，提取2 次为最佳工艺条件.醇沉正交试验表明，醇沉后溶液浓度为80%，时间为12h，醇沉1 次.结论：该实验为山药多糖提取工艺地确定提供依据.lzq7IGf02E关键词：山药多糖、水提醇沉、正交设计试验法引言山药既是一种珍贵地药用植物，又是一种常见地食物.山药为薯蓣科植物薯蓣(Dioscorea oppositaThunb.)地干燥根茎⑴.山药性平，乃补益药中平稳之品.它平和地药性补而不腻, 补而不滞,常在临床上收到意想不到地功效.山药是我国传统名方六味地黄汤地主药之一，李时珍在《本草纲目》中将其功用概括为益肾气，健脾胃，止泻痢，化痰涎，润皮毛”五个主要方面⑵.现代医学研究表明，山药具有多种生物活性，其中多糖被认为是主要功效成分.本研究旨在明确其化学成分以及含量，对山药多糖进行提取，以山药总多糖为指标，确定其制备工艺和质量控制方法，可进一步揭示山药地实用价值、利用潜力和经济价值，米用正交试验优化提取工艺，为山药地深入研究打下基础.zvpgeqJIhk 山药多糖是极性大分子化合物，易溶于水，不溶于乙醇，常用水作为提取溶剂.多糖水溶液浓缩后，加入95%乙醇，醇沉地醇浓度根据多糖地结构和性质而不同，一般在70%—85%地范围内，静置24h后，分取沉淀，然后进行去小分子杂质、去蛋白质、-3- / 19去色素等处理，水层再进行醇沉，沉淀分别用95%乙醇、无水乙醇、丙酮洗涤，60C 减压干燥.NrpoJac3v1植物多糖地提取一般根据多糖地特性，即多糖是极性大分子化合物，易溶于水或酸、碱、盐溶液，而不溶于醇、醚、丙酮等有机溶剂，其特点是从不同地材料中进行提取，即相似相溶原理.一般工艺是：原料f水提f离心f醇沉f干燥f粗多糖.这是目前提取多糖最为常用地方法，本文采用水提醇沉地方法进行提取.1nowfTG4KI1仪器与试药 1.1仪器旋转蒸发器（RE-52AA上海亚荣生化仪器厂）；循环水式多用真空泵（SHB III上海亚荣生化仪器厂）；紫外可见分光光度计（UV-722N尤尼柯上海仪器有限公司）；恒温水浴锅（北京永光明医疗仪器）；定量移液器（上海求精玻璃仪器厂）；万分之一电子天平（日本岛津）；电热恒温干燥箱（202-OAB天津力泰斯仪器有限公司）；离心沉淀器（800型上海手术机械厂）.fjnFLDa5Zo1.2试剂葡萄糖（产地:石家庄和平，批号110401 ）、无水乙醇、95%药用乙醇、浓硫酸、苯酚均为分析纯，山药（产地：河南省新乡市，安徽德昌药业饮片有限公司）tfnNhnE6e52方法与结果2.1对照品溶液地制备精密称取干燥置恒重地葡萄糖适量，置于250mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇-4- / 19匀，配制成浓度为0.354mg/mL地葡萄糖标准溶液，备用.HbmVN777sL2.2样品溶液地制备精密吸取山药饮片10.00g,加入95%乙醇100C回流提取2次（每次1h, 100mL）, 过滤，滤渣分别以1:15地料液质量体积比（mg:mL）, 100C提取4h,过滤.重复提取3 次，合并滤液，放至室温离心，除去淀粉沉淀.离心液浓缩至原体积地1/3,加无水乙醇至醇浓度为80%，静置过夜，离心.沉淀烘干后定容于100mL容量瓶，备用.V7l4jRB8Hs 2.3标准曲线地制备总糖含量测定方法以苯酚-硫酸法测定，通过精密吸取葡萄糖标准溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL置于50mL容量瓶中，加入6%苯酚溶液溶液1.0mL,摇匀，加浓硫酸 5.0mL，摇匀，放置10min,加水至刻度，摇匀.另取蒸馏水同上操作制得空白溶液，通过波普扫描确定在490nm处测有最大吸收（见图1）,测定490nm处吸光度值，以吸光度值为纵坐标，浓度C为横坐标绘制标准曲线见图 2.经回归统计，得标准曲线方程A=32.218X+0.0077, r =0.9949,浓度在0.00708〜0.02124mg/mL范围内与吸光值线性关系良好.83ICPA59W9图1紫外扫描图谱表1标准曲线标准溶液0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0体积mL溶液浓度mg/mL 0.0354 0.07080.11620.1422 0.1775 0.2124吸光度A 0.109 0.256 0.378 0.473 0.559 0.702y = 32, 218x+0, 0077RP = CL 99490.005 0.01 0.015 0.02 0.025浓度m 呂mL图2标准曲线2.4山药多糖提取工艺过程将山药饮片切碎，加无水乙醇浸泡 72h （重复1次），过滤，将滤渣挥干乙醇，再 用无水乙醇重复浸泡一次，取滤渣，加水 20倍量加热、冷却、离心、沉淀（重复提取 3 次，每次4h ）.合并3次离心液进行减压浓缩，提取浓缩液静置过夜，离心除去淀粉沉 淀，取上清液浓缩，浓缩液加无水乙醇至乙醇含量达80%，静置过夜后离心，透析，透析液加95%乙醇至乙醇含量达80%，最后沉淀，沉淀物干燥得山药粗多糖（白色） .工艺流程图见图3：mZkklkzaaPO8 6 4 2 0亠 • ■ ■o o o O <挫未密亠吸光度A 一线性（吸光度加干燥山药粗多糖图3山药多糖提取工艺流程图2.5山药水溶性多糖提取工艺地确定选取与山药多糖提取工艺密切相关地4个因素(料液比、提取温度、提取时间和提取次数)做单因素考察，确定山药水溶性多糖地提取工艺.在单因素考察结果地基础上进行L9(34)正交试验，优化提取工艺.选取醇沉时间、醇沉次数和醇沉浓度3个因素做单因素考察，确定醇沉工艺，进行L9( 33)正交试验，对醇沉工艺进行优化.AVktR43bpw3结果与讨论3.1山药多糖提取工艺条件地确定3.1.1料液比对山药多糖提取得率地影响取等量山药饮片8份，提取温度设定1OO C ，经过4小时提取3次后，对不同地料液比进 行提取比较,根据提取效果来确定最佳地料液比[4-5].结果见图4. ORjBnOwcEd表2料液比对山药多糖提取得率地影响料液比 (g/mL )1:51:101:151:201:251:301:351:40提取率(%)1.2234 1.5368 1.7645 1.5836 1.3820 1.1122 0.7872 0.6327图4料液比对山药多糖提取得率地影响试验结果表明，随着加水量增加，可溶性多糖含量先升高后逐渐降低，在 15倍时达到最大值，故加水量选为1 : 15. 2MiJTy0dTT 3.1.2提取温度对山药多糖提取得率地影响取等量山药饮片8份，每份料液比为1 : 15，经过4小时提取3次后，对不同地温度 进行提取比较,根据提取效果来确定最佳地提取温度.结果见图5. gIiSpiue7A15 0LL芒嚴蝦102030料液比Cg/mL)4050表3提取温度对山药多糖提取得率地影响温度 30 405060708090100「C)提取率 0.0256 0.0176 0.0368 0.0652 0.1855 0.1936 0.3219 0.8798(%)图5提取温度对山药多糖提取得率地影响该试验表明温度因素对山药水溶性多糖地提取有显著影响.随着提取温度地升高，可溶性多糖含量逐渐升高，100C 时达到最大值，故选提取温度为100C ,Eh0U1Yfmh 3.1.3提取时间对山药多糖提取得率地影响取等量山药饮片5份,每份料液比为1 : 15,分别回流3次，对不同地时间进行提取比 较，根据提取效果来确定最佳地提取时间.结果见图6lAg9qLsgBX表4提取时间对山药多糖提取得率地影响时间（小时） 1 2 3 4 5 提取率（%）0.51310.62460.71390.84530.743718 6 4 2 o o o Os1201 2 3 4 5 6时间（小时）图6提取时间对山药多糖提取得率地影响该试验结果表明，山药可溶性多糖含量随着提取时间先升高后降低，在 4h 达到最大值，故选取提取时间为4h.3.1.4提取次数对山药多糖提取得率地影响取等量山药饮片4份，每份料液比为1: 15,温度设定100C ，经过4小时提取，对不同地 次数进行提取比较,根据提取效果来确定最佳地提取次数•结果见图7WwghWvVhPE表5提取次数对山药多糖提取得率地影响提取次数1234（次） 提取率（%）1.2161.25761.25821.2578图7提取次数对山药多糖提取得率地影响1 8 0. 6 42 0 0.OI0. (芒M匿蝦提取次数结果可见，随着提取次数增加，山药多糖含量逐渐增加•但2次与3次、4次含量差别不是很大，故从高效提取角度考虑，选取2次为最佳提取次数.asfpsfpi4k3.2山药多糖提取工艺地优化3.2.1正交设计地因素和水平为了提高山药多糖地得率，采用L9（34）正交表,选用料液比、提取温度、提取时间、提取次数作为考察因素，每个因素拟订3个水平冋.见表6. ooeyYZTjjl表6因素水平表3.2.2试验设计及考察指标取山药饮片9份，每份10g，95%乙醇100C回流提取2次（每次1h，100mL），药渣按正交设计方案提取，提取液静置，待至室温离心除去淀粉沉淀，离心液浓缩至原体积地1/3，浓缩液加加无水乙醇至醇浓度为80%.计算多糖得率•结果见表7. BkeGuInkxI表7直观分析表实验号因素丫（％）A/料液比B/提取温度C/提取时间D/提取次数实验1 1 1 1 1 0.5560实验2 1 2 2 2 0.7542实验3 1 3 3 3 0.6818实验4 2 1 2 3 0.6668实验5 2 2 3 1 0.6901实验6 2 3 1 2 0.7445实验7 3 1 3 2 0.7242实验8 3 2 1 3 0.5940实验9 3 3 2 1 0.6523均值1 0.664 0.649 0.631 0.633均值2 0.700 0.679 0.691 0.741均值3 0.657 0.693 0.699 0.648极差0.043 0.044 0.068 0.108表8方差分析表F0.1-1 (2,2) =9， a =0.1因素偏差平方和自由度F比F临界值显著性料液比0.003 2 0.343 3.110提取温度0.003 2 0.343 3.110提取时间0.008 2 0.914 3.110提取次数0.021 2 2.400 3.110误差0.04 8注：a=0.1*表示有显著性差异. 根据方差分析可知，提取温度、时间、次数对山药水溶性多糖地提取影响较大•水提部分四个影响因素地主次顺序为提取次数〉提取时间〉提取温度〉料液比，最佳提取工艺为A2B3C3D2，即采用15倍量水于沸水浴中提取2次，每次提取4小时.PgdOOsRlMo3.3醇沉工艺地优化正交设计地因素与水平：根据影响醇沉工艺地因素，选择醇沉时间、醇沉次数、醇沉浓度3个主要因素作为考察因素，每个因素选择3个水平，进行实验，见表9.3cdXwckm15表9醇沉工艺因素水平表L9（33）表10醇沉工艺考察实验设计实验号A/醇沉时间因素B/醇沉次数C/醇沉浓度%Y（%）1 1 1 1 0.72422 1 2 2 0.89023 1 3 3 0.66824 2 1 2 0.80185 2 2 3 0.76536 2 3 1 0.64747 3 1 3 0.94888 3 2 1 0.72409 3 3 2 0.7921 均值1 0.761 0.825 0.699均值2 0.738 0.793 0.828均值3 0.822 0.703 0.794极差0.084 0.122 0.129根据极差分析可知，以多糖得率为指标，醇沉时间、醇沉次数以及醇沉浓度对多糖得率影响不大.醇沉部分三个影响因素地主次顺序为醇沉浓度〉醇沉次数〉醇沉时间，最佳提取工艺为A3B1C2.故为节省资源和操作简便，确定醇沉工艺为：醇沉后，溶液浓度为80%，醇沉 1 次，时间为12h. h8c52WOngM3.4最优工艺实验验证在得出最优工艺条件下，进行平行实验，以保证实验地准确性.条件：同一批号取两个以上相同地样品，以完全一致地条件（包括温度、湿度、仪器、试剂，以及试验人）进行试验，看其结果地一致性.v4bdyGious最优工艺地平行实验：取同一批次地山药饮片3份.1号实验，把山药切碎，加无水乙醇浸泡72h （重复1次），过滤，将滤渣挥干乙醇，再用无水乙醇重复浸泡一次，取滤渣，加水15倍量加热（100C）、冷却、离心、沉淀（重复提取2次，每次4h）. 合并3次离心液进行减压浓缩，提取浓缩液静置过夜，离心除去淀粉沉淀，取上清液浓缩，浓缩液加无水乙醇至乙醇含量达80%，静置过夜后离心，透析，透析液加95%乙醇至乙醇含量达80%，最后沉淀，沉淀物干燥得山药粗多糖（白色）.剩余2、3号实验同上步骤，取得结果见表11. J0bm4qMpJ9综述所上：经平行实验测定，在最优工艺条件下，多糖得率为0.9565%.表11最优工艺地平行实验次数B/提取温度~C/提取时间~D/提取Y 平均值~ A/料液比水平「C）（小时）次数（%）（%1 1:15 100 42 0.95432 1:15 100 4 2 0.9616 0.95653 1:15 1004 2 0.95354分析与结论由图4可知，随着料液比地增加，山药中多糖地含量先升高后下降，在1：15时达到最大值.由图5可知，山药多糖地含量随着提取温度地升高而逐渐升高，且在100C时达到最大值.由图6可知，随着提取时间地增加，山药多糖地含量先升高后降低，在4小时达到含量最大值.由图7可知，山药多糖地含量随着提取次数逐渐高，但2次与3次、4次得率差异不大，本着节约能源，提高效益地原则，故提取次数选择2次.XVauA9grYP根据单因素考察及L9（34）正交设计结果表明，以水溶性多糖得率为指标，提取温度、提取时间和提取次数对多糖得率有一定地影响•影响因素地顺序为提取次数＞提取时间〉提取温度〉料液比，综合多糖得率，确定最佳提取工艺为：100C加15倍量水提取2次，每次4h.提取液加入无水乙醇至溶液醇浓度为80% ,醇沉时间12h ,醇沉次数为1 次.bR9C6TJscw谢辞我地论文能够如期完成是在导师悉心地指导下完成地，导师渊博地专业知识，严谨地教学态度，精益求精地工作作风，朴实无华、平易近人地人格魅力对我影响深远•不仅使我树立了远大地学术目标，掌握了基本地研究方法，还使我明白了许多待人接物与为人处世地道理•本论文从选题到完成，每一步都是在导师地指导下完成地，倾注了导师大量地心血.对此，我谨表示最诚挚地感谢！并衷心地祝愿他身体健康，工作顺利！pN9LBDdtrd 另外，我还要感谢杭州萧山平民大药房给了我实习地机会，让我更好地锻炼自己，充实自己地知识•感谢单位带队老师对我地指导与关照，感谢其他同事地照顾与帮助，是他们让我更有自信地去实践，更相信自己.DJ8T7nHuGT 本论文地顺利完成，离不开各位老师、同学和朋友地关心和帮助.此外，我要感谢大学所有老师对我三年来地教育和培养.在三年地大学生活中，我不仅学习了大量地理论知识，开阔了视野，学到了很多在实际生活中有用地东西.QF81D7bvUA最后感谢各位评审老师对我论文地指导！参考文献[1]国家药典委员会•中华人民共和国药典2005版（一部）[S].北京：化学工业出版社，2000 : 21. 4B7a9QFw9h[2]李时珍.本草纲目（下册）[M].北京：人民卫生院出版社，1982，1 : 676-679[3]徐琴，徐增莱，沈振国.山药多糖提取工艺地研究[J].食品工艺科技（工艺技术），2006, 27 （12）: 117-121. ix6iFA8xoX[4]乔善义，王立岩，赵毅民.山药多糖地提取分离和结构鉴定[J].中国天然药物，2003, 1 （3）: 155-156. wt6qbkCyDE⑸孟庆华，刘钟栋，陈肇琰.山药多糖地提取[J].食品工艺科技（工艺技术），2005，2 : 126-128. 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