下载文档原格式
物体表面与工人手细菌总数检测方法ICSQ/SL 西安申兰生物医学工程有限公司企业标准Q/SL 06-0012011 ,物体表面与工人手细菌总数的检测规程2011-08-15发布 2011-09-01实施发布西安申兰生物医学工程有限公司Q/SL 06-001,2011目次前言 ..................................................................... ............. II 1 范围 ..................................................................... ............ 1 2 规范性引用文件 ..................................................................... .. 1 3 职责 ..................................................................... ............ 1 4 抽样 ..................................................................... ............ 1 5 采样方法 ..................................................................... ........ 1 6 检验方法 ..................................................................... ........ 1 7 结果计算 ..................................................................... ........ 1 8 记录(见表A.1 表A.2) (1)IQ/SL 06-001,2011前言本标准是根据Q/SL 9000-2011《质量手册》中的要求而制定。
医院物品、物体表面及医务人员手消毒效果监测分析医院物品、物体表面及医务人员手消毒效果监测对降低医院感染的影响。
方法每月消毒效果监测1次。
操作及判断标准按《消毒技术规范》、《医院消毒卫生标准》进行。
结果医院物品消毒质量合格率从86.52%增至94.79%，物体表面消毒质量合格率从83.91%增至93.02%，不合格科室监测点经整改后重新监测，合格率达到100%。
医务人员手消毒质量合格率从83.91%增至93.02%，不合格的医务人员经整改后重新监测，合格率达到97.85-99.19%。
医院感染发病率从5.6%降至3.6%。
结论医院物品、物体表面及医务人员手消毒效果定期监测对预防和控制医院感染具有重要作用。
医院感染不但影响医疗效果，而且是导致一些医疗事故的重要因素。
因而与医院的生存和发展密切相关。
消毒灭菌监测工作是一个现代化医院管理的重要内容，也是控制医院感染的基础工作。
本文以廊坊市人民医院2007-2009年灭菌物品、物体表面及医务人员手的消毒灭菌监测结果进行分析、探讨。
1 材料与方法1．1 材料方盘、酒精灯、打灯机、显微镜、冰箱、试管架、无菌生理盐水试管、无菌棉试子、剪刀、镊子、一次性注射器、规格板、9cm普通营养琼脂平板、紫外线指示卡等。
1．2 对象手术室、脑外科、骨科、胸泌科、普外科、内干科、妇产科、心内科、神内科、内分泌科、五官科、内二科、儿科、小手术室、疼痛科、皮肤科、传染科、注射科、外科门诊（换药室）、肾内科、急诊科、供应室、泌尿外科、血液科、手显微镜外科、介入、激光室、眼科门诊、口腔科门诊等。
物品包括消毒液、透析液、无菌医疗物品、压力蒸气灭菌器生物指示剂等。
物体表面包括治疗台、治疗车、胃镜、肠镜、镊子、活检钳等物体表面。
手是指医务人员手。
1．3 方法及评价标准分别在各科室设置灭菌物品和物体表面监测点并抽查医务人员手。
医务人员手采用随机抽查。
监测每月进行1次。
具体操作及评价标准按《消毒技术规范》[1]、《医院消毒卫生标准》[2]进行。
医院环境微生物监测SOP
文件编号：
持有部门：医院感染管理科医务部护理部微生物室全院各科室
修订时间：年月
执行日期：年月日
具体内容：
一、监测项目
医院环境微生物监测项目包括：空气、物体表面及医务人员手的微生物监测。
二、监测部门
手术室、产房、导管室、ICU、新生儿病房、导管手术室、口腔科、等易出现医院感染爆发的科室。
三、监测指征
1. 采用空气净化的部门每季度一次进行环境微生物监测，每个净化级别至少监测一个房间；
2. 未采用空气净化的部门每半年一次进行环境微生物监测；
3. 手术部门（手术室、产房、导管室）每季度进行一次手卫生监测；
4. 发生医院感染暴发时，当流行病学数据分析证实与环境有关，则须进行环境微生物检测；
5. 为了评估感染控制措施的效果，可进行短期的环境微生物监测；
6. 当需要对危险环境进行评估，以发现污染物或需证实环境污染物已降低时，可进行环境微生物检测；
7. 进行任何环境微生物检测时，其检测结果需有标准可供参照；
8. 检测结果不符合标准时，应查找原因并采取措施，直至检测结果达标，并留有完整记录。
四、监测方法
空气、物体表面及手卫生的采样时间、采样方法和结果判定参照GB15982及GB50333-2002。
曲阜市中医医院医院空气、物表与医务人员手卫生学监测根据卫生部下发的《医院空气净化管理规范》、《医疗机构消毒技术规范》（2012年8月1日实施）及《医务人员手卫生规范》要求，特制定我院环境卫生学监测方法与结果判断标准，请遵照执行。
一、空气净化效果的监测1. 监测科室医院应对感染高风险部门如手术室、产房、层流洁净病房、重症监护病房、母婴同室、供应室等的空气净化与消毒质量进行监测。
2. 监测频率（1）感染高风险部门每季度进行监测；（2）洁净手术室及其他洁净场所、新建与改建验收时、换高效过滤器后应进行监测；（3）遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时监测，并进行相应致病微生物检测。
3. 采样时间（1）采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；（2）非洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；（3）怀疑与医院感染暴发有关时采样。
4. 监测方法(1)洁净手术室及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法，参照GB50333要求进行监测。
浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。
监测时将采样器置于室内中央0.8m〜1.5m 高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30mi n。
房间面积〉10m2者，每增加10m2增设一个采样点；(2)未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法：室内面积w30 m2设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积〉30 m2设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。
将普通营养琼脂平皿(①90mm放置各采样点，采样高度为距地面0.8m〜1.5m;采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检；(3)平皿暴露时间：①层流洁净手术室或场所暴露30min；②非洁净手术室、产房、导管室、新生儿室、重症监护病房、器官移植病房、血液病病区、烧伤病房等感染高风险部门暴露15min；③儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心(室) 、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊暴露5min。
物体表面与工人手细菌总数检测方法ICSQ/SL 西安申兰生物医学工程有限公司企业标准Q/SL 06-0012011 , 物体表面与工人手细菌总数的检测规程2011-08-15 发布2011-09-01 实施发布西安申兰生物医学工程有限公司Q/SL 06-001,2011目次、八前言.......... II 1 范围........ 1 2 规范性引用文件.. 1 3 职责........ 1 4 抽样........ 1 5 采样方法... 1 6 检验方法... 1 7 结果计......... 1 8 记录（见表A.1 表A.2） (1)IQ/SL 06-001,2011、八前言本标准是根据Q/SL 9000-2011 《质量手册》中的要求而制定。
本标准由质量部提出。
本标准批准人: 张冠中。
本标准由质量部归口。
本标准起草部门: 质量部。
本标准主要起草人: 孟阳。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为:本标准代替Q/SL 07-03,2006 。
IIQ/SL 06-001,2011物体表面与工人手细菌总数的检测规程1 范围适用于与产品接触的所有物体表面及工人手的细菌总数的检测。
2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB 15980-1995 一次性使用医疗用品卫生标准GB 15981-1995 消毒与灭菌效果的评价方法及标准GB 2828 逐批检查计数抽样程序及抽样表（适用于连续批的检查）Q/SL 9761,2011 监视和测量装置控制程序Q/SL 08-001,2011 实验室管理制度职责3 质量部负责对本检验规程实施。
4 抽样按GB 2828《逐批检查计数抽样程序及抽样表（适用于连续批的检查）》。
医院空气、物表与医务人员手卫生学监测根据卫生部下发的《医院空气净化管理规范》、《医疗机构消毒技术规范》（2012年8月1日实施）及《医务人员手卫生规范》要求，特制定我院环境卫生学监测方法与结果判断标准，请遵照执行。
一、空气净化效果的监测1.监测科室医院应对感染高风险部门如手术室、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴同室、血液透析中心(室)、烧伤病房的空气净化与消毒质量进行监测。
2.监测频率（1）感染高风险部门每季度进行监测；（2）洁净手术室及其他洁净场所、新建与改建验收时、换高效过滤器后应进行监测；（3）遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时监测，并进行相应致病微生物检测。
3.采样时间（1）采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；（2）非洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；（3）怀疑与医院感染暴发有关时采样。
4.监测方法（1）洁净手术室及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法，参照GB50333要求进行监测。
浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。
监测时将采样器置于室内中央0.8m～1.5m高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30min。
房间面积＞10 m2者，每增加10 m2增设一个采样点；（2）未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法：室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30 m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。
将普通营养琼脂平皿（Φ90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0.8m～1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检；（3）平皿暴露时间：①层流洁净手术室或场所暴露30min；②非洁净手术室、产房、导管室、新生儿室、重症监护病房、器官移植病房、血液病病区、烧伤病房等感染高风险部门暴露15min；③儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊暴露5min。
各类环境空气物体表面医护人员手卫生标准全集文档(可以直接使用，可编辑实用优质文档，欢迎下载）各类环境空气、物体表面、医护人员手卫生标准细菌菌落总数允许检出值见表1.表1各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌苗落总数卫生标准2致病性微生物不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其他致病性微生物。
在可疑污染情况下进行相应指标的检测。
母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿及儿科病房的物体表面和医护人员手上，不得检出沙门氏菌。
医疗用品卫生标准1进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌 2接触粘膜的医疗用品：细菌菌落总数应≤20cfu ／g 或lOOcm2：致病性微生物不得检出。
.3接触皮肤的医疗用品：细菌菌落总数应≤200cfu ／g 或lOOcm2；致病性微生物不得检出，4.使用中消毒剂：细菌菌落总数应≤100cfu ／mL ；致病性微生物不得检出。
5无菌器械保存液必须无菌。
6污物处理卫生标准：污染物品无论是回收再使用的物品，或是废弃的物品，必须进行无害化处理，不得检出致病性微生物。
在可疑污染情况下，进行相应指标的检测。
【采样方法】1、取生理盐水5ml 于试管中，高压。
2、取样后，振摇80次。
3、取0.5ml 于培养皿中，将配好的营养琼脂倾注于培养皿中，待冷却后放培养箱过夜。
【计算方法】空气：菌落数×157（或260〈培养皿9cm 或7cm 〉） 物表：100菌落数×10＝10菌落数（100：面积〈用5cm ×5cm 规格板取4次〉；10：稀释倍数） 手指：60菌落数×10＝6菌落数（60：10个手指头总面积；10：稀释倍数）0.4个/30min·90皿(10个/m3)1.5个/30min·90皿(50个/m3)4个/30min·90皿(150个/m3)注：1细菌浓度是直接所测的结果，不是沉降法和浮游法互相换算的结果。
物体表面与手部细菌污染的监测
1.目的
为了规范物体表面与手部细菌污染的监测。
2.适用范围
适用于本厂物体表面与手部细菌污染的监测。
3.定义:
物体表面包括：墙面/地面/工作台面/机器表面等，物体表面污染与空气污染不同，为不均匀性污染。
4.操作步骤
4.1样品采集
物体表面：将经灭菌的内径为5cm×5cm的灭菌规格板放在被检物体表面，用一浸有灭菌生理盐水的棉签在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。
工人手部：被检人五指并拢，用一浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面，从指尖到指端来回涂擦10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。
4.2细菌菌落总数检测
将已采集的样品在6h内送实验室，每支采样管充分混匀后取1mL 样液，放入灭菌平皿内，倾注营养琼脂培养基，每个样品平行接种两块平皿，置35℃±2℃培养48 h，计数平板上细菌菌落数。
4.3 计算方法
y2= A
×10 S2
y3= A
×10 S3
式中：y2――工作台表面细菌菌落总数，cfu/cm2; A――平板上平均细菌菌落数；
S2――平板面积，cm2;
y3－－工人手表面细菌菌落总数，cfu/只手。
医院环境卫生学监测制度每月感染管理科进行环境卫生学监测，包括对空气、物体表面和医护人员手的监测，对手术室、重症监护室、产房、母婴室、新生儿病房、新生儿重症监护病房、血透室、供应室、导管室、治疗室、换药室等重点部门进行环境卫生学监测。
一、医院消毒卫生标准的采样及检查方法采样及检查必须遵循的原则是采样后尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过2h，若样品保存于1—4℃条件时，送检时间不得超过24h。
（一）空气采样及检查方法1.采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。
2.采样高度与地面垂直高度80 cm。
3.布点方法室内面积≤30 ㎡，设一条对角线上取3点，即中心一点，两端各距墙1m 处各取一点；室内面积＞30 ㎡，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙1m。
4.采样方法将9cm 直径普通营养琼脂平板放在采样点，采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖后及时送检。
（二）物体表面采样及采样方法1.采样时间：选择消毒处理后4h 内进行采样。
2.采样面积：被采样面积＜100cm2，取全部表面；被采样面积≥100 cm2，取100 cm2。
3.采样方法用 5cm×5cm 的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放入装10ml 采样液的试管中送检。
门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。
（三）医护人员手采样及检查方法1.采样时间：采取手卫生后，在接触病人、从事医疗活动前进行采样。
2.采样面积及方法被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次(一只手涂擦面积 30 cm2)，并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml 采样液的试管内送检。
采样面积按平方厘米(cm2)计算。
物品和物体表面消毒效果监测
1、采样方法
(1）采样时间：消毒处理后医疗操作前。
(2）采样面积：被采表面小于100cm²，时，取全部表面；被采表面大于等于100cm²时，取100cm²。
(3）采样方法：将5cm×5cm 灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液（中和剂＋洗脱液）的棉试子一只，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉试子，剪去手接触部位，将棉试子放入装有10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液（中和剂＋洗脱液）的试管内，在试管上标明科室、检品所在房间和物品或物体表面的名称及采样面积，立即送至检验科细菌室。
若采样面积大于等于100cm²，应连续采样四个点（即采样100cm²）。
2、检验方法
(1）细菌总数检测〔cfu /cm²〕：
将试管内的棉试子用力振打80次，无菌操作吸取1.0ml 接种于灭菌平皿内，加入溶化冷至45一48℃的营养琼脂15一18ml，边倒入边摇匀，待凝固后放入37℃培养箱培养 48h ，计数菌落数 cfu / cm²。
计算：cfu/cm²=平板上菌落数×稀释倍数／采样面积 (cm²) ，不规则物品或物体表面报告单位为 cfu／件。
(2）致病菌检测
①检测原则：致病菌的检测依据污染情况进行相应指标的检测。
②金黄
色葡萄球菌检测
取采样液 1.0ml ，接种于 5ml SCDLP 液体培养基中→36℃±1℃增菌 24h →取1白金耳环上述增菌液，在血平板上作划线分离→36℃±℃培养24h→观察菌落特征→鉴定→报告。
③乙型溶血性链球菌检测
取样品1.0ml，接种于1％葡萄糖肉汤→37℃增菌24h→取1白金耳环增菌液在血平板上作划线分离→36℃±1℃培养24h→观察菌落→鉴定→报告。
④沙门氏菌属、志贺氏菌属、非发酵菌群等致病菌的检测参照相关检测方法。
(3）报告：报告细菌总数（cfu/ cm²）和是否检出致病菌及致病菌菌种（金黄色葡萄球菌、β一溶血性链球菌、沙门氏菌属、志贺氏菌属、非发酵菌群等）。
3、注意事项
(1）严格遵守无菌技术操作规程。
(2）门把手等不规则的物体表面用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉试子直接涂擦采样。
手和皮肤粘膜消毒效果监测
1、采样方法
(1）采样时间：在消毒后立即采样。
(2）手的采样：被检人五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液（中和剂＋洗脱液）的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦 2次（一只手涂擦面积约30cm²），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液（中和剂十洗脱液）试管内，在试管外壁标明科别、姓名，立即送检。
(3）皮肤粘膜采样：用5cm×5cm 的标准灭菌规格板，放在被检皮肤处，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液（中和剂＋洗脱液）的棉拭子 1 支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液（中和剂＋洗脱液）的试管内，在试管外壁标明科别、姓名、采样部位、采样面积，立即送检。
(4）不规则的粘膜皮肤处可用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液（中和剂＋洗脱液）棉拭子直接涂擦5次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入 10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液（中和剂＋洗脱液）的试管内，在试管外壁标明科别、姓名、采样部位，立即送检。
2、检测方法
(1）细菌总数检测
将采样管在混匀器上振荡 20s或用力振打80次，用无菌吸管吸取 1.0ml 待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，内加入已溶化的45℃～48℃的营养琼脂15ml—18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置 36 ℃士 1 ℃温箱培养 48h ，计数菌落数。
计算：细菌总数（cfu/ cm²) ＝平板上菌落数×稀释倍数／采样面积
不规则粘膜皮肤报告单位为细菌总数（cfu／件）
(2）致病菌检测
按照物品和物体表面消毒效果监测中的致病菌检测方法操作。
(3）报告
报告细菌总数〔cfu /cm²〕和是否检出致病菌〔金黄色葡萄球菌、β一溶血性链球菌、沙门氏菌属、志贺氏菌属等〕。
若检出致病菌，需报告菌种。
3、注意事项
(1）严格遵守无菌技术操作规程。
(2）两只手采样面积约 60cm 。
使用中的消毒剂和灭菌剂细菌污染监测
1、采样方法
把被检样品充分混匀，用无菌吸管吸取消毒液 1 . 0ml ，加入到9.0ml 含相应中和剂的无菌生理盐水采样管中混匀，在试管上标明科别、样品所在室、样品名科（含浓度）、用途，立即送检。
报告细菌总数（cfu / ml ）和是否检出致病菌〔金黄色葡萄球菌、β一溶血性链球菌、沙门氏菌属、志贺氏菌属等〕。
若检出致病菌，需报告菌种。
2、检测方法
(1）细菌总数检测
①涂抹法：把待检样品充分混匀，用无菌吸管吸取上述溶液0.2ml ，滴于干燥普通琼脂平板，每份样品同时做2个平行样，一平板置 20 ℃培养 7d ，观察霉菌生长情况，另一个平板置 35 ℃温箱培养 72h 记数菌落数。
②倾注法：把待检样品充分混匀，用无菌吸管吸取消毒液 1.0ml ，加入到
9.0ml含相应中和剂的无菌生理盐水采样管中混匀，分别取0.5ml放入2只灭菌平皿内，加入己熔化的45℃—48oC的营养琼脂 15ml—18ml ，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，一平板置20℃培养7d ，观察霉菌生长情况；另一个平板置36℃±1℃培养 72h ，计数菌落数。
计算:倾注法消毒灭菌剂染菌量（cfu /ml）=每个平板上的菌落数×20 涂沫法消毒灭菌剂染菌量（cfu /ml）=每个平板上的菌落数×50
(2）致病菌检测
按照物品和物体表面消毒效果监测中的致病菌检测方法操作。
(3)报告
报告细菌总数（ cfu /m1）和是否检出致病菌（金黄色葡萄球菌、β—溶血性链球菌、沙门氏菌属、志贺氏菌属等〕。
若检出致病菌，需报告菌种。
3、注意事项
严格遵守无菌技术操作规程。
