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全自动染色机在病理HE 染色中的使用心得随着医学技术的不断发展和医疗设备的不断更新，目前很多医院的病理科或相关实验室正在使用全自动染色机来替代繁琐的手工HE染色。
全自动染色机HE染色与手工染色相比，染色结果色彩鲜艳，洁净透明，细胞质与细胞核结构清晰，有利于制片质量标准化[1]。
我科于2018年开始使用Leica Autostainer XL全自动染色机，在使用的这几年中，刚开始染色对比差、染色质量不稳定，到后来染色鲜亮、对比度好、染色质量稳定。
全自动染色机运行稳定，故障率低，大大提高了染色效率，同时又节省了人力。
要使一台全自动染色机能够出色的染出高质量的病理切片并且能够稳定地运行，我们不仅要懂得如何去调试程序和排除故障，而且要注重日常的使用和保养。
现将我科近几年在使用Leica Autostainer XL全自动染色机过程中的一些经验和心得分享给大家，希望能给想要购入或正在使用全自动染色机的同仁们提供一些参考，内容如下：1.全自动染色机最好安放在通风厨里，这样可以减少染色过程中散发出的有害气体对人体的损害，染色机需要接水源和排水管，还配电源插座，有需要的可以预留出封片机的安放位置。
2.全自动染色机具体的程序因设备品牌不同、使用的染色试剂不同等因素，所以程序的设置方法不同，大家可根据自身实际情况设置和调试出适合自己的染色程序。
下面我们主要讨论下关于程序设置的一些注意事项：1）.在进行全自动染色机的程序设置时，苏木精、盐酸乙醇、伊红等需要水洗的染液应尽量靠近水缸，脱水透明的染缸要靠近染色机的输出口，尽量避免滴落的试剂污染其它染液缸[2]。
在染色程序运行过程中，尤其是程序设置初期，观察染片架的运行轨迹，尽量避免出现试剂互相污染的现象。
染片架从脱蜡水化到苏木精再到分化液最后到伊红之前的80%乙醇，中间过程中需注意避免带水的染片架越过其他试剂缸。
带水的染片架避免越过其他试剂。
2）.为了保持染片架的平稳移动，机械臂移动染片架的速度较缓慢，染片架上下移动也较缓慢，当染片架数多时机器会有延时，所以对于需要规定时间浸染的步骤需将精确时间设置为“是”，如苏木精、盐酸乙醇、伊红等。
· 医学诊疗技术 ·2172020年 第26期针对脱钙不全、钙化灶等对常规病理制片存在的不利影响，医院提出在材料采集之后，用蜡块脱钙法将钙质完全脱去，在按照常规步骤操作，解决制片问题，提升切片质量，现将结果报道如下。
1 材料及方法1.1材料从医院病理科2019.01~2019.12收集的蜡块中，抽取脱钙不全，含有钙化灶、砂粒体的蜡块200例作为研究对象。
按照1~200顺序对其进行随机编码，单号纳入对照组，双号纳入研究组。
对照组100例，不做任何处理直接进行常规切片；研究组100例，经蜡块脱钙法处理后，常规切片。
1.2方法（1）仪器设备：Varistain ™ Gemini ES 全自动染色封片机（美国），珊顿全密封组织脱水机（美国Thermo Electron Corporation 公司），TKY-BMB 生物组织石蜡包埋机（杭州艾普仪器设备有限公司），德国美康HM355S 全自动轮转式石蜡切片机（上海涵飞医疗器械有限公司提供），常规病理技术制片所需基础仪器与试剂（病理科实验室提供）。
（2）操作方法：①配置脱钙液，即“30mL 盐酸+30mL 甲醛+20mL 甲酸+20mL 蒸馏水”混合均匀。
②对照组100例蜡块不做处理，观察组100例蜡块应用脱钙法处理后切片。
处理方法为：将余蜡清除，使蜡块组织最大切面暴露出来，并让其与所配置脱钙液有效接触60min 后，利用清水洗净蜡块表面脱钙液。
全密封组织脱水机脱水后，利用德国美康HM355S 全自动轮转式石蜡切片机对两组蜡块进行常规切片。
③严格按照Varistain ™ Gemini ES 全自动染色封片机、TKY-BMB 生物组织石蜡包埋机说明书操作，完成HE 染色、封固等工作。
④利用光学显微镜观察制片情况。
1.3观察指标与判定（1）切片组织结构：当蜡块组织面钙化部分完全突出并能够切出完整切片时，表示蜡块已经钙化完全[1]。
蜡块切片后，切片外观完好无损，厚度均匀切面平整，无空洞、裂缝等问题，视为组织结构完整。
染色封片一体机的技术评估报告技术评估报告：染色封片一体机一、概述染色封片一体机是一种用于临床病理诊断中染色和封片的设备。
其通过自动化的方式，将组织切片染色和封片的过程集成在一个机器中，提高了工作效率，减少了操作环节中的人为误差。
本技术评估报告旨在对染色封片一体机的技术进行评估，以确定其在临床病理诊断中的可行性和优势。
二、技术评估内容1. 技术原理：染色封片一体机是通过自动化的方式，将细胞或组织切片经过染色和封片过程，最终得到可供病理医师观察和诊断的染色玻片。
评估中需要对其染色和封片的原理和机制进行详细了解。
2. 设备性能：评估染色封片一体机的性能参数，包括工作速度、切片和封片的准确性、染色效果等。
评估中可通过对比实验和质量控制测试，验证其性能是否符合要求。
3. 操作界面和人机交互：评估染色封片一体机的操作界面是否简洁易用，人机交互是否友好。
此外还需要评估设备的操作流程是否合理，是否有辅助功能提供操作指引。
4. 自动化程度：评估染色封片一体机的自动化程度，包括自动切片、自动染色和自动封片等。
评估中可以通过对比实验和用户反馈，评估其自动化程度的效果和可靠性。
5. 数据管理系统：评估染色封片一体机的数据管理系统，包括对切片和染色数据的储存、查询和管理等功能。
评估中需要考察数据的安全性、查询速度和数据导出功能等。
三、评估方法1. 文献调研：通过查阅相关的科研文献和专利，了解染色封片一体机的技术原理和发展趋势。
2. 实地考察：参观染色封片一体机的生产厂家或临床使用单位，了解其设备性能和使用情况。
3. 对比实验：选取染色封片一体机和传统染色封片方法进行对比实验，比较其在染色效果和工作效率上的差异。
四、预期结果通过技术评估，预计得出以下结论：1. 染色封片一体机在工作效率上优于传统染色封片方法。
2. 染色封片一体机的自动化程度较高，能够减少操作环节中的人为误差。
3. 染色封片一体机的染色效果良好，能够提供高质量的染色玻片供病理医师诊断使用。
国产全自动染色封片机在病理制片中的应用近些年来，全自动染色封片机以其操作量大，稳定性好，效率高等优点被越来越多的病理实验室接受并使用，并逐渐替代手工操作[1]。
但是由于进口机器价格昂贵，维护成本高，使得一些小医院望而却步，然而随着国家对自主产业的大力支持，国产机器也只是稍微略逊一筹。
本文就国产全自动染色封片机在日常制片过程中的使用心得总结如下：1.材料与方法1.1 仪器设备国产派斯杰RS36型全自动染色封片、FP30型封片机和染色架若干。
1.2 试剂改良Harris苏木素[2]，0.5%醇溶性伊红，二甲苯，无水乙醇，95%乙醇，75%乙醇，0.3%盐酸乙醇，1%氨水，石碳酸二甲苯混合液，中性树胶。
1.3 方法常规石蜡切片烤片后，放入自动染色机中，具体染色步骤见表一。
染色完成后染色架自动移动到下载抽屉处。
当三个下载站点全部满后，蜂鸣器鸣叫，提醒用户取出，之后手动放入封片机中进行封片。
2.结果染色鲜艳，均匀，胞质、胞核着色良好对比度清晰；无气泡、无溢胶现象。
3.讨论自机器使用一年多来，通过摸索和实践主要体会如下：3.1 染色机3.1.1应用注意⑴试剂缸排列：需水洗残留试剂的，可将其试剂缸沿水洗缸排列，避免机械臂在提取染色剂过程中将残余试剂滴入其他试剂缸污染别的试剂；⑵分化液：由于机械手臂起落时需耗时间，不像手工操作快速水洗，因此需要将原本1%的浓度降到0.3%，这样才能达到好的分化效果；⑶伊红染色：低浓度的乙醇对醇溶性伊红有分化作用，因此要缩短染伊红后在75%乙醇中的停留时间，一般10s，其中机械臂中间耗时大概7～8s；⑷脱水：为防止切片脱水不干净，应在乙醇与二甲苯之间放置1：3的石碳酸二甲苯液，这样避免南方梅雨季节空气潮湿造成切片脱水不净；⑸试剂更换：苏木素及伊红染片均在2000张左右，其他二甲苯、酒精、分化液及返蓝液，由于是开放式染色，液体挥发的比较多，基本上在300张左右就需要更换；⑹维护：程序结束后关机，盖好盖子减少挥发，定期清理水槽管道。
两种全自动HE染色机在常规病理中的应用对比梁晓辉;赵秀兰;刘增辉;孙保存【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2018(034)011【总页数】3页(P1279-1281)【关键词】病理技术;HE染色;全自动染色机【作者】梁晓辉;赵秀兰;刘增辉;孙保存【作者单位】天津医科大学病理学教研室,天津 300070;天津医科大学总医院病理科,天津 300052;天津医科大学病理学教研室,天津 300070;天津医科大学总医院病理科,天津 300052;天津医科大学病理学教研室,天津 300070;天津医科大学总医院病理科,天津 300052;天津医科大学病理学教研室,天津 300070;天津医科大学总医院病理科,天津 300052;天津医科大学肿瘤医院病理科,天津 300060【正文语种】中文【中图分类】R361+.2随着分子病理时代、精准医疗时代的接踵而来，HE染色技术也进入了全自动机器染色的新时代。
HE全自动染色技术大大提高了染色质量，保证了HE染色的均一性、稳定性，提高了工作效率，减少了误诊率，节省了人力[1]。
目前，国内外常见的有多种全自动HE染色机。
天津医科大学总医院病理科先后引进了Leica Autostainer XL全自动染色机和Roche VENTANA HE 600全自动染色封片机，这两种染色机分别采用的是浸染和滴染的染色方式，本文对这两种染色机在常规病理HE染色中的应用体会介绍如下，为建设标准化病理技术平台提供参考。
1 材料与方法1.1 标本选取2017年6～12月天津医科大学总医院病理科存档的120例石蜡标本，其中淋巴结、胃肠、肺、子宫、甲状腺、乳腺组织各20例，所选标本均为外检诊断剩余的组织样本，已明确诊断为正常或者肿瘤组织，标本符合临床试验相关要求，均经10%中性福尔马林固定。
每例组织蜡块常规4 μm厚切片10张。
1.2 仪器与试剂仪器使用Roche VENTANA HE 600全自动染色封片机、Leica Autostainer XL全自动染色机、Leica CV5030自动封片机。
全自动染色机及封片机在病理制片中的应用
范玲丽
【期刊名称】《临床合理用药杂志》
【年(卷),期】2016(0)13
【摘要】随着现代病理技术的快速发展和病理设备的不断更新,全自动染色机及封片机以其卓越的性能和良好的处理效果已被各大医院广泛应用,取代了人工染色及人工封片,我科近年来引进德国Leica全自动染色机及封片机,既减轻劳动强度,又提高制片质量,减少失误。
经过几年使用略有心得,现介绍如下。
1资料与方法1.1仪器和设备德国Leica全自动染色机ST5020和自动封片机CV5030及附带设备。
【总页数】2页(P152-153)
【作者】范玲丽
【作者单位】首都医科大学附属北京妇产医院病理科
【正文语种】中文
【中图分类】R361.2
【相关文献】
1.全自动染色机在制备涂胶载玻片中的改良应用
2.Leica全自动染色封片一体化工作站在病理常规制片中的应用体会
3.不同封片参数在全自动封片机中应用的封片效果比较
4.新型Leica全自动染色机和封片机的应用体会
5.全自动封片机在常规制片中的应用体会
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全自动免疫组化染色平台在临床病理检查中的应用覃思繁;韦常宏;罗元;林思彤;黄俊淇;陶展飞【摘要】目的：探讨全自动免疫组化染色仪在临床病理检查中的应用价值。
方法用统一的二抗，同一种一抗对临床常用于检测乳腺癌的ER、PR、HER-2、Ki-67、p53等5种免疫组化抗体，分别采用全自动免疫组化仪（实验组）和手工操作法（对照组）进行免疫组化染色，对比两组检测的结果。
结果实验组和对照组ER、PR、HER-2、Ki-67、p53等5种免疫组化抗体在边缘效应、特异性、着色情况、背景等均有差异。
全自动免疫组化染色仪染色结果均匀，阳性定位准确，背景较清晰，无边缘效应，检测结果理想，优于手工操作法。
结论全自动免疫组化染色仪工作比较稳定，染色效果优良，标准化程度高，能减少手工操作的误差，易于质量控制，可为临床诊断和治疗提供更加准确和科学的实验依据。
【期刊名称】《中国癌症防治杂志》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】4页(P294-297)【关键词】全自动免疫组化染色仪;免疫组化;手工操作法;标准化;质量控制;应用【作者】覃思繁;韦常宏;罗元;林思彤;黄俊淇;陶展飞【作者单位】530021 南宁广西医科大学附属肿瘤医院病理科;530021 南宁广西医科大学附属肿瘤医院病理科;530021 南宁广西医科大学附属肿瘤医院病理科;530021 南宁广西医科大学附属肿瘤医院病理科;530021 南宁广西医科大学附属肿瘤医院病理科;530021 南宁广西医科大学附属肿瘤医院病理科【正文语种】中文【中图分类】R730.2在我国，乳腺癌发病率居女性恶性肿瘤的首位［1］，随着乳腺癌综合诊治水平的提高，对临床病理诊断的质量要求亦越来越高，乳腺癌常用的检测指标ER、PR、HER-2、Ki-67、p53对指导乳腺癌的治疗至关重要［2］。
优良的免疫组化检测结果是正确病理诊断的前提和基础，因而受到普遍重视。
由于免疫组化是一种较强的技术性操作，每一步实验操作都有可能影响最后的检测结果［3］。
达科为全自动染封一体机在常规病理染色中的应用摘要：常规病理染色是病理技术中最常用方法，尽管现代病理技术蓬勃发展，但该技术仍是诊断的基础。
传统的手工方法，因步骤繁琐，容易出现质量不稳定的情况，在经济条件允许的情况下，用自动化的仪器取代手工操作是必然的趋势。
我科2020年引进达科为染封一体机，进行常规HE染色及封片工作，使用一年来染色封片效果良好。
现将使用情况进行分析，并将保养体会进行总结。
关键词达科为染封一体机使用评价质量控制常规病理染色是病理技术中最常用的方法，尽管现代病理技术蓬勃发展，但该技术仍是诊断的基础。
传统的手工方法，因步骤繁琐，容易出现质量不稳定的情况，在经济条件允许的情况下，用自动化的仪器取代手工操作是必然的趋势。
我科2020年引进达科为染封一体机，进行常规HE染色及封片工作，使用一年来染色、封片效果良好。
我科的常规染色方法从纯手工染色过度到自动化的机器染色，先后引进了赛默飞全自动染色机和达科为染封一体机，在自动化仪器使用方面积累了一定的经验，现将手工法与2种自动化仪器的使用情况进行分析，并将保养体会总结如下：一、材料与方法1.1仪器设备赛默飞全自动染色机（Gemini AS），达科为全自动智能染封一体机（DP360染色机/CS500封片机，显微镜（OLYMPUS BX41）1.2试剂苏木素、伊红、3%盐酸乙醇、返蓝液、80%乙醇、95%乙醇、无水乙醇、二甲苯1.3 常规HE手工染色及机器染色流程组织经固定、脱水、透明、包埋后切片，然后分别进行手工染色、赛默飞及达科为机器染色，染色程序如表1表2表3。
染色完成后，赛默飞全自动染色机染色完成的片子需进行手工封片，达科为全自动智能染封一体机染色完成的片子会自动完成封片。
表1 手工染色程序步骤试剂时间沥液时间1二甲苯5min5 2二甲苯5min5 3二甲苯5min5 4二甲苯5min5 5二甲苯5min10 6无水乙醇5min5 795%乙醇5min5880%乙醇5min59水洗2min51苏木精8min10 01水洗2min5 113%盐酸乙醇2s10 21水洗1min5 31返蓝液30s10 41水洗1min5 5伊红20s10 161780%乙醇25s51895%乙醇30s519无水乙醇1min52无水乙醇1min521二甲苯1min522二甲苯1min5表2 赛默飞全自动染色机染色程序步骤试剂时间沥液时间抖缸次数1二甲苯5min332二甲苯5min333二甲苯5min334二甲苯5min335二甲苯5min336无水乙醇1min33795%乙醇1min50880%乙醇1min309水洗3min301 0苏木精8min1031 1水洗2min301 23%盐酸乙醇2s001 3水洗1min301 4返蓝液30S301 5水洗1min301 6伊红20s1031 780%乙醇25s331 895%乙醇30s331 9无水乙醇1min332 0无水乙醇1min532 1二甲苯1min002 2二甲苯1min00表3 达科为全自动智能染封一体机染色程序步骤试剂时间沥液时间抖缸次数1二甲苯5min332二甲苯5min333二甲苯5min1534无水乙醇1min335无水乙醇1min33695%乙醇1min50780%乙醇1min308水洗3min309苏木精8min1031 0水洗2min301 13%盐酸乙醇2s001 2水洗1min301 3返蓝液30s331 4水洗1min301 580%乙醇30s331 6伊红20s1031 780%乙醇25s331 895%乙醇30s331 9无水乙醇1min332 0无水乙醇1min532 1烤箱1min60℃2 2中转站点0001.4 方法对比对同一组织（乳腺标本）蜡块取连续切片30张，捞片获得切片30张，10张切片为一批次分别用手工、赛默飞、达科为三种方法进行染色封片，记录使用时间并评价方法学的一致性（重复性），及染色封片效果。
