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苗利军，刘晓光，刘孟军．4种液相色谱柱对枣果中三萜类物质的分离效果［J ］．江苏农业科学，2013，41（1）：254－256．4种液相色谱柱对枣果中三萜类物质的分离效果苗利军1，刘晓光2，刘孟军2（1．中国环境管理干部学院，河北秦皇岛066004；2．河北农业大学中国枣研究中心，河北保定071001）摘要：比较了4类色谱柱分离枣果中熊果酸、齐墩果酸的效果。
结果表明，BDS 型色谱柱分离枣果中熊果酸、齐墩果酸的效果优于ODS 型色谱柱，C 18型液相色谱柱分离枣果中熊果酸、齐墩果酸的效果优于CN 型液相色谱柱。
4种色谱柱中，分离效果最好的是反相柱填料为Hydersir BDS C 18（250mm ˑ4．6mm ，5μm ）的色谱柱；最佳分离条件为：柱温18ħ，压强2MPa ，流速0．6mL /min ，流动相甲醇与水的体积比为93ʒ7，磷酸含量300mg /kg ，进样量5μL 。
该条件下，金丝小枣样品中齐墩果酸和熊果酸可得到良好分离。
关键词：色谱柱；三萜酸：枣中图分类号：O65文献标志码：A文章编号：1002－1302（2013）01－0254－02收稿日期：2012－05－10基金项目：国家科技支撑计划（编号：2012BAD35B7－08、2011BA48B01－1）；河北省秦皇岛市科技支撑计划（编号：201101A201）。
作者简介：苗利军（1977—），男，河北邯郸人，硕士，讲师，从事食品质量与安全研究。
E －mail ：422865201@qq．com 。
通信作者：刘孟军，教授，从事干果种质资源与分子辅助育种研究。
E －mail ：lmj1234567@yahoo．com．cn 。
枣（Ziziphusjujuba Mill．）为鼠李科枣属植物的果实，是《中国药典》2010年版一部收载品种［1］，为补中益气、养血安神、缓和药性的常用中药。
枣是我国特产果树，我国枣树栽培总面积约150万hm 2，枣果总产量超过400万t ，约占世界枣果总产量的99%［2］。
柱色谱注意事项
柱色谱是一种常用的色谱方法，在操作过程中有以下几点需要注意：
- 色谱柱的选择：通常选择与目标化合物具有相同极性或化学特性的色谱柱固定相涂覆液，以得到良好的峰形。
但极性较高的色谱柱通常耐热温度较低，耐久性也较低，因此建议先用耐热温度较高的无极性色谱柱进行分析，再用极性较高的色谱柱分析。
- 载气纯度：为了防止色谱柱氧化导致分离性能下降，务必使用99.999%以上的高纯载气。
- 温度控制：仪器开机升温前，先注入足够的
载气，将色谱柱中的氧气排出，然后再提高色谱柱温度。
特别是极性色谱柱，容易被氧化，因此请将色谱柱内的空气完全置换为载气后，再进行升温。
关机时，先把色谱柱的温度降到40度以下，最后再关闭载气。
- 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动：温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况。
在使用柱色谱时，需根据实际情况灵活调整，以获得最佳的分离效果。
阳离子交换色谱柱TSKgel SP-NPR（0.3 mm I.D.）使用说明书东曹株式会社安全注意事项［注意标签］■远离火源使用易燃溶剂时，请务必小心。
否则可能会导致火灾、爆炸或中毒。
■使用环境必须通风良好如果通风不良，易燃或有毒溶剂可能会导致火灾、爆炸或中毒。
■请勿喷洒溶剂溶剂发生喷洒或泄漏可能会导致火灾、触电、中毒、受伤以及腐蚀。
清除漏出的溶剂时，请佩戴合适的护具。
■请佩戴护目镜和防护手套有机溶剂和酸属于有害物质，切勿直接接触皮肤。
■请小心处理包装处理不当可能会导致产品破裂或溶剂飞溅。
■请勿将本产品用于其他目的本产品仅可用于分离和提纯，请勿用于其他用途。
■请确认化合物的安全性请确认分离和提纯后的化合物和溶剂安全可靠。
■正确废弃请根据当地法律法规正确废弃。
注■请妥善保管本说明书，以便日后参阅。
注意事项：出厂溶剂出厂溶剂：10 mmol/L醋酸铵（pH 4.2）。
注意事项：填料填料：聚甲基丙烯酸树脂。
目录1. 简介 (1)2. 使用前 (1)3. 色谱柱规格 (1)4. 安装和操作 (1)4-1 操作 (1)4-2 安装 (2)4-3 使用条件 (2)4-4 拆卸 (2)4-5 保存 (2)4-6 清洗色谱柱 (2)5. 理论塔板数和不对称因子的计算方法 (3)5-1 理论塔板数的计算方法 (3)5-2 不对称因子的计算方法 (4)6. 质量标准和质量保证 (4)6-1 检测报告的检测条件 (4)6-2 质量标准 (5)6-3 质量保证 (5)本说明书详细记载了有关如何正确保存和使用该类色谱柱的重要信息，以便充分发挥产品的性能。
使用色谱柱之前，请务必仔细阅读本使用说明书。
2. 使用前使用前，请检查色谱柱的包装和外观，确认是否有损坏。
如果发现损坏，请根据本说明书最后记载的地址，联系当地东曹销售代表或相关代理店。
确认包装中含有以下文件：使用说明书1份检测报告（Inspection Data）1份3. 色谱柱规格TSKgel SP-NPR色谱柱的规格如下所示。
实验十柱色谱一．实验目的：1. 学习柱色谱的原理及方法。
二．实验重点和难点：1.学习柱色谱的原理及方法。
实验类型：基础性实验学时：4学时三．实验装置和药品：主要实验仪器：色谱柱(或25mL碱式滴定管) 25mL锥形瓶普通漏斗玻璃棉或脱脂棉量筒试管电子天平烧杯主要化学试剂：石油醚（600C—900C）丙酮中性氧化铝(100--200目) 500g菠菜色素95%乙醇四．实验装置图：五．实验原理：图 1 柱色谱装置柱色谱法是色谱方法之一。
色谱法是分离、纯化和鉴定有机化合物的重要方法之一。
(一)色谱法的基本原理：是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能(即分配) 的不同，或其它亲和作用的性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分开。
(二)色谱法的分类：1.根据组分在固定相中的作用原理不同，可分为吸附善谱、分配色谱、离子交换色谱、排阻色谱等。
2.根据操作条件的不同，可分为柱色谱、纸色谱、薄层色谱、气相色谱及高效液相色谱等类型。
(三)柱色谱原理：柱色谱是化合物在液相和固相之间的分配，属于固--液吸附层析。
图1就是一般柱色谱装置。
柱内装有”活性”固体(固定相) 如氧化铝或硅胶等。
液体样品从柱顶加入流经吸附柱时，即被吸附在柱的上端，然后从柱顶加入洗脱溶剂冲洗。
由于固定相对各组分吸附能力不同，以不同速度沿柱下移，形成若干色带。
再用溶剂洗脱，吸附能力最弱的组分随溶剂首先流出，分别收集各组分，再逐个鉴定。
1.吸附剂：常用的吸附剂有：氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙和活性炭等。
吸附剂一般要经过纯化和活性处理。
选择吸附剂的首要条件是与被吸附物及展开剂均无化学作用。
吸附能力与颗粒大小有关。
颗粒太粗，流速快分离效果不好。
颗粒小，表面积大，吸附能力就高，但流速慢，因此应根据实际分离需要而定。
色谱用的氧化铝可分酸性、中性和碱性三种。
2.溶质的结构与吸附能力的关系：化合物的吸附能力与分子极性有关。
美国药典(USP)规定的色谱柱编号L1和L8是美国药典(USP)规定的色谱柱编号，其实就是ODS柱和NH2柱。
下面是USP规定的编号所对应的色谱柱类型。
L1：十八烷基键合多孔硅胶或无机氧化物微粒固定相，简称ODS柱L2：30～50m m表面多孔薄壳型键合十八烷基固定相，简称C18柱L3：多孔硅胶微粒，即一般的硅胶柱L4：30～50m m表面多孔薄壳型硅胶柱L5：30～50m m表面多孔薄壳型氧化铝柱L6：30～50m m实心微球表面包覆磺化碳氟聚合物，强阳离子交换柱L7：全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相，简称C8柱L8：全多孔硅胶微粒键合非交联NH2固定相，简称NH2柱L9：强酸性阳离子交换基团键合全多孔不规则形硅胶固定相，即SCX柱L10：多孔硅胶微球键合氰基固定相（CN），简称CN柱L11：键合苯基多孔硅胶微球固定相，简称苯基柱L12：无孔微球键合季胺功能团的强阴离子交换柱L13：三乙基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相（C1），简称C1柱L14：10m m硅胶化学键合强碱性季铵盐阴离子交换固定相，简称SAX柱L15：已基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相，简称C6柱L16：二甲基硅烷化学键合全多孔硅胶微粒固定相 C2柱L17：氢型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,强阳离子交换柱L18：3～10m m全多孔硅胶化学键合胺基（NH2）和氰基（CN）柱L19：钙型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物，强阳离子交换柱L20：二羟基丙烷基化学键合多孔硅胶微球固定相（Diol），简称二醇基柱L21：刚性苯乙烯－二乙烯基苯共聚物微球填料柱L22：带有磺酸基团的多孔苯乙烯阳离子交换柱L23：带有季胺基团的聚甲基丙烯酸甲酯或聚丙烯酸酯多孔离子交换柱L24：表面含有大量羟基的半刚性聚乙烯醇亲水凝胶柱L25：聚甲基丙烯酸酯树脂交联羟基醚（表面含有残余羧基功能团）树脂。
能分离分子量100～5000MW范围的水溶性中性、阳离子型及阴离子型聚合物（用聚氧乙烯测定）的固定相L26：丁基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相，即C4柱L27：30～50m m的全多孔硅胶微粒L28：多功能载体，100Å的高纯硅胶加以氨基键合以及C8反相键合的官能团L29:氧化铝,反相键合,含碳量低,氧化铝基聚丁二稀小球,5m m，孔径80ÅL30:全多孔硅胶键合乙基硅烷固定相L31:季胺基改性孔径2000Å的交联苯乙烯和二乙烯基苯(55%)强阴离子交换树脂L32: L-脯氨酸铜配合物共价键合于不规则形硅胶微粒的配位体的交换手性色谱填料L33:能够分离分子量4000～40000MW范围蛋白质分子的球形硅胶固定相, pH稳定性好L34：铅型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物强阳离子交换树脂，9m m球形L35：锆稳定的硅胶微球键合二醇基亲水分子单层固定相，孔径150ÅL36:5m m胺丙基硅胶键合L-苯基氨基乙酸－3,5二硝基苯甲酰L37：适合分离分子量2000～40000MW的聚甲基丙烯酸酯凝胶L38：水溶性甲基丙烯酸酯基质SEC色谱柱L39：亲水全多孔聚羟基甲基丙烯酸酯色谱柱L40：Tris 3,5－二甲基苯基氨基甲酸酯纤维素涂覆多孔硅胶微球L41：球形硅胶表面固定α1酸糖蛋白固定相L42: C8和C18硅烷化学键合多孔硅胶固定相L43:硅胶微球键合五氟代苯基固定相L44:多功能固定相,60 Å高纯硅胶基质键合磺酸阳离子交换功能团和C8反相功能团L45: β-环糊精键合多孔硅胶微球L46:季胺基改性苯乙烯-二乙烯基苯聚合物微球L1 Octadecyl silane chemically bonded to porous silica or ceramic.L1 十八烷基键合硅烷化学键合于多孔硅胶或陶瓷微粒，3-10u。
2,4-二羟基苯乙酮柱色谱是一种分离和纯化有机化合物的技术。
其原理是利用不同物质在固定相和流动相之间的分配比的不同，从而达到分离物质的目的。
柱色谱的分离过程如下：
1.装柱：将固定相研碎，并过筛。
然后将固定相放在带有玻璃塞
的玻璃瓶中，加水使其湿润，用力摇晃，使颗粒均匀地分布在瓶底。
然后加入适量的溶剂，将需要分离的有机物加入到固定相中，用棉花塞住瓶口，摇动瓶子，使有机物均匀地分布在固定相中。
2.洗脱：将流动相加入到柱子中，然后打开活塞，使流动相流出。
随着流动相的流出，固定相中的有机物会按照不同的极性或溶解度被逐渐洗脱下来。
3.收集：收集洗脱下来的有机物。
可以根据需要将有机物收集在
不同的容器中。
4.检测：对收集到的有机物进行检测，例如通过比色法、荧光法
或薄层色谱法等方法进行定性和定量分析。
第1篇一、实验目的1. 理解柱色谱分离的基本原理和方法。
2. 掌握柱色谱实验的操作技能，包括样品的制备、色谱柱的填充、洗脱剂的选择和样品的收集。
3. 学习如何分析色谱分离的结果，并能够根据分离效果评估实验条件。
二、实验原理柱色谱是一种利用混合物中各组分在固定相和流动相之间分配系数的不同来实现分离的技术。
实验中，将含有目标组分的混合物通过填充有吸附剂的色谱柱，由于不同组分在固定相和流动相中的分配系数不同，它们在色谱柱中的移动速度也会不同，从而实现分离。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：- 柱色谱柱（玻璃或塑料）- 漏斗- 烧杯- 滴定管- 铁架台- 秒表2. 试剂：- 吸附剂（如硅胶、氧化铝等）- 混合样品（含目标组分）- 洗脱剂（根据目标组分的极性选择）- 标准样品（用于对照和定量分析）四、实验步骤1. 准备色谱柱：将吸附剂倒入漏斗中，用滴定管缓慢倒入色谱柱中，使其填充紧密。
2. 样品制备：准确称取一定量的混合样品，用适量的溶剂溶解。
3. 样品上样：将样品溶液缓慢滴加到色谱柱顶部，注意控制流速。
4. 洗脱：将洗脱剂滴加到色谱柱顶部，控制流速，收集流出液。
5. 收集分离组分：观察色谱柱中的分离情况，记录各组分对应的收集时间。
6. 样品分析：将收集到的各组分进行进一步的分析，如薄层色谱、红外光谱等。
五、实验结果与分析1. 分离效果：观察色谱柱中的分离情况，记录各组分对应的收集时间，分析分离效果。
2. 定量分析：根据收集到的各组分量，计算其含量，并与标准样品进行对照。
3. 优化实验条件：根据分离效果，分析实验条件对分离效果的影响，如吸附剂类型、洗脱剂类型、流速等，并对实验条件进行优化。
六、问题与讨论1. 实验中遇到的问题：- 色谱柱填充不均匀，导致分离效果不佳。
- 洗脱剂选择不当，导致分离效果不佳。
- 流速控制不当，导致分离效果不佳。
2. 解决方法：- 优化色谱柱填充方法，确保填充均匀。
- 根据目标组分的极性选择合适的洗脱剂。
