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中药复方药理研究概况中药复方是指由两种或两种以上的中药组合而成的药物。
中药复方具有多种药理作用，例如抗炎、抗菌、抗氧化、保护器官等，广泛应用于中医临床实践中。
药理研究的目的是为了了解中药复方的药效、毒副作用及其作用机制，以及为临床合理使用提供科学依据。
本文将对中药复方药理研究的概况进行介绍。
中药复方药理研究主要包括动物实验和体外实验两个方面。
动物实验是指将中药复方应用于动物体内，观察其生物学效应和药理作用。
体外实验是指将中药复方应用于体外，通过观察其对细胞、组织或有机体的影响，从而了解其药理机制。
在动物实验方面，研究中药复方的药理作用主要通过以下几个方面来探究。
首先是通过检测中药复方对疾病模型动物的治疗效果，了解其具体的药效。
例如，将中药复方应用于癌症模型动物，观察其对癌细胞的抑制作用。
其次是通过观察中药复方对炎症反应的影响，了解其抗炎作用。
例如，将中药复方应用于炎症模型动物，观察其对炎性因子的调节作用。
此外，还可以通过观察中药复方对动物器官的保护作用，了解其抗氧化、抗损伤的机制。
在体外实验方面，研究中药复方的药理作用主要通过以下几个方面来探究。
首先是通过细胞实验，了解中药复方对细胞的作用。
例如，将中药复方加入体外培养的细胞中，观察细胞的增殖、凋亡、迁移等变化。
其次是通过检测中药复方对分子靶点的作用，从而了解其作用机制。
例如，通过蛋白质组学、基因组学等技术，分析中药复方对特定蛋白的调节作用。
此外，还可以通过观察中药复方对体外模型的影响，如血小板凝聚性、血管舒缩等，来了解其作用机制。
药理研究不仅可以了解中药复方的药效和作用机制，还可以评价中药复方的安全性。
通过动物实验，可以观察中药复方对动物的毒副作用，如肝肾损伤、胃肠反应等。
通过体外实验，可以评价中药复方对细胞的毒副作用，如细胞毒性、基因毒性等。
这些安全性评价结果对于中药复方的临床应用具有重要意义。
总之，中药复方药理研究是为了深入了解中药复方的药效、毒副作用及其作用机制，为中医药临床实践提供科学依据。
中医外治法在骨伤科的应用及作用机制研究中医外治法在骨伤科的应用及作用机制研究引言中医外治法是中医学中的一种治疗方法，适用于各种疾病的治疗。
骨伤科是指骨骼系统的疾病和损伤的科室。
中医外治法在骨伤科中的应用越来越广泛，并且取得了显著的治疗效果。
本文将探讨中医外治法在骨伤科中的应用及其作用机制。
一、中医外治法在骨伤科中的应用中医外治法是指通过外用药物、针灸、推拿等方式治疗疾病。
在骨伤科中，中医外治法主要应用于以下几个方面。
1. 骨折的治疗骨折是骨骼断裂或折断的损伤，中医外治法可以通过外用药物促进骨折愈合。
中药可以通过局部涂抹或包扎在骨折部位，通过药物中的有效成分可以刺激骨折愈合的过程。
2. 关节损伤的治疗关节损伤是指关节受到外力或疾病影响而发生的损伤，包括扭伤、韧带损伤等。
中医外治法可以应用草药、针灸等方法来缓解疼痛、消肿，促进损伤部位的恢复。
3. 腰肌劳损的治疗腰肌劳损是指腰部肌肉因受到长时间过度使用或不适当的姿势等原因而发生损伤。
中医外治法可以通过推拿、针灸等方式来舒缓疼痛、恢复腰部功能。
4. 骨质疏松的防治骨质疏松是指骨骼中骨密度丧失，易于发生骨折的疾病。
中医外治法可以应用草药、按摩等方法来促进骨密度的增加，减少骨折的风险。
5. 脊柱疾病的治疗脊柱疾病包括腰椎间盘突出、脊柱侧弯等，中医外治法可以通过针灸、推拿等方式来缓解疼痛、改善脊柱的功能。
二、中医外治法在骨伤科中的作用机制中医外治法在骨伤科中的作用机制主要有以下几个方面。
1. 改善局部血液循环中医外治法可以通过草药、推拿、按摩等方式来刺激局部的血液循环，增加血液供应，加快骨伤愈合的过程。
2. 促进细胞活化和增殖中医外治法中的草药中含有多种有效成分，这些成分可以直接作用于细胞，促进细胞的活化和增殖，从而加速骨伤的愈合。
3. 消肿止痛中医外治法可以通过草药中的有效成分和推拿、针灸等手法，来减轻疼痛和消肿，减轻病人的不适感。
4. 调节免疫功能中医外治法中的草药可以调节人体的免疫功能，增强机体的抵抗力，促进骨伤的修复。
中药外敷治疗下肢骨折早期肿胀的疗效观察发布时间：2022-03-03T00:50:09.855Z 来源：《中国结合医学杂志》2022年第1期作者：乔胜强，徐信龙[导读] 目的：探究中药外敷治疗下肢骨折早期肿胀的治疗效果。
乔胜强，徐信龙淮安市康复医院，江苏，淮安 211600）摘要：目的：探究中药外敷治疗下肢骨折早期肿胀的治疗效果。
方法：选取本院 2021 年 01 月—2021 年 9 月收治的 60例下肢骨折患者，随机分成观察组与对照组两组，每组患者 30 例，对照组选用甘露醇治疗，观察组在对照组的基础上选用中药外敷进行治疗。
结果：观察组患者30例，其中治愈16例，占53.3%，好转13例，占43.3%，无效1例，占3.3%，临床总有效率96.7%，相比对照组，治疗总有效率和V AS 评分均显著提高，比较差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。
观察组患者皮肤肿胀高峰期及皮肤褶皱出现时间分别为 (2.54±0.65)、(6.48±1.63)d, 均短于对照组的 (4.38±1.43)、(8.77±1.52)d, 差异具有统计学意义 (P<0.05)。
结论：中药外敷治疗下肢骨折早期肿胀的临床效果显著，值得推荐。
关键词:中药外敷;骨折;肿胀引言：下肢骨折在临床骨科中极为常见，发生骨折时，骨的连续性和完整性中断，导致周围软组织损伤，增加了局部张力，阻碍血运及静脉回流，而肿胀、疼痛是四肢骨折患者早期常见临床症状，严重影响患者的正常生活，若不及时治疗易使局部肌肉及神经组织等缺血缺氧，将影响骨折愈合和肢体功能恢复［1 －3］。
选取2021 年01月至2021年9月我院收治的 60例下肢骨折患者作为此次研究对象，针对应用中药外敷治疗下肢骨折早期肿胀的临床疗效，详细见以下报道。
1.资料与方法1.1一般资料：选取2021 年01月至2021年9月我院收治的 60例下肢骨折患者，随机分成观察组和对照组两组，详细见表1。
中药单体成分及复方促进骨折愈合的作用机制研究进展Δ张志宏 1＊，孙延平 1，彭东辉 1，崔娜 1，曾元宁 2，匡海学 1，王秋红 1 #（1.黑龙江中医药大学药学院教育部北药基础与应用研究重点实验室，哈尔滨 150040；2.广东药科大学中药学院，广州 510006）中图分类号 R 965；R 285 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2023）17-2172-05DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2023.17.22摘要 中药在治疗骨折愈合过程中具有多成分、多途径、多靶点的作用特点，对于具有复杂病理机制的骨折具有较好的治疗优势和潜力。
笔者对中药单体成分及复方促进骨折愈合的作用机制进行了归纳，发现内脂素A 、葛根素等可通过激活丝裂原活化蛋白激酶（MAPK ）信号通路，续骨丹、固本增骨方等可通过激活骨形态发生蛋白（BMP ）信号通路，黄芩苷、牛膝多糖等可通过激活Wnt/β-catenin 信号通路，芹菜素、三七皂苷等可通过激活核因子κB （NF-κB ）受体激活蛋白/NF-κB 受体激活蛋白配体/护骨因子（RANK/RANKL/OPG ）信号通路，活血接骨复方胶囊、健骨颗粒等可通过抑制磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B （PI 3K/AKT ）信号通路，淫羊藿苷等可通过激活Notch 信号通路，桃红四物汤、藏红花素等可通过激活Hippo 信号通路，酸枣仁皂苷A 、蛇床子素等可通过抑制NF-κB 信号通路，发挥促进骨折愈合的作用。
关键词 中药；单体成分；复方；骨折愈合；信号通路；成骨分化Research progress on the mechanism of promoting fracture healing by traditional Chinese medicine monomer components and compound formulasZHANG Zhihong 1，SUN Yanping 1，PENG Donghui 1，CUI Na 1，ZENG Yuanning 2，KUANG Haixue 1，WANG Qiuhong 1[1. Key Laboratory of Basic and Application Research of Beiyao （Ministry of Education ）， College of Pharmacy ， Heilongjiang University of Chinese Medicine ， Harbin 150040， China ；2. School of TCM ， Guangdong Pharmaceutical University ， Guangzhou 510006， China]ABSTRACTTraditional Chinese medicine has the characteristics of multiple components ， pathways ， and targets in the treatmentof fracture healing ， and has good therapeutic advantages and potential for fractures with complex pathological mechanisms. Based on this ， the author summarized the mechanism of promoting fracture healing by the monomer components and compound formulas of traditional Chinese medicine and found that visfatin A ， puerarin ， and others can activate the mitogen-activated protein kinase （MAPK ） signaling pathway ； Xugudan ， Guben zenggu formula and others can activate bone morphogenetic protein （BMP ） signaling pathway ； baicalin ， Achyranthes bidentata polysaccharides and others can activate Wnt/β-catenin signaling pathway ； apigenin ， notoginsenoside and others can activate receptor activator of nuclear factor-κB （NF-κB ）/receptor activator of NF-κB ligand/osteoprotegerin （RANK/RANKL/OPG ） signaling pathway ； Compound huoxue jiegu capsule ， Jiangu granule and others can inhibit phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B （PI 3K/AKT ） signaling pathway ； icariin can activate Notch signaling pathway ； Taohong siwu decoction ， crocin and others can activate Hippo signaling pathway ； jujuboside A and osthole can inhibit NF-κB signaling pathway ， and thus promote fracture healing.KEYWORDStraditional Chinese medicine ； monomer components ； compound formulas ； fracture healing ； signaling pathway ；osteogenic differentiation骨折是指受外力作用破坏了骨骼的连续性或结构完整性，多发于老年人。
中医药在骨科疾病治疗中的研究进展中医药作为中国传统医学的重要组成部分，一直以来被广泛应用于各种疾病的治疗。
近年来，中医药在骨科疾病治疗中的研究也取得了一系列的进展。
本文将从骨折、骨质疏松和骨关节炎三个方面，介绍中医药在骨科疾病治疗中的最新研究成果。
一、中医药在骨折治疗中的研究进展骨折是骨科疾病中常见的一种，传统的骨折治疗主要依赖外科手术和康复治疗。
然而，随着研究的不断深入，中医药在骨折治疗中的作用逐渐受到重视。
中医药在骨折治疗中的研究主要集中在以下几个方面：1.中药外敷促进骨折愈合：一些中药制剂外敷于骨折部位，可以促进骨折愈合并缓解疼痛。
例如，研究发现黄连、红花等中药外敷可以显著加快骨折的愈合速度。
2.中草药促进骨折愈合：除了中药外敷外，一些中草药的内服也被发现可以促进骨折的愈合过程。
例如，研究发现桑寄生提取物可以刺激骨细胞的增殖和分化，从而促进骨折的愈合。
3.中医理论指导骨折治疗：中医独特的理论体系也为骨折治疗提供了一定的指导。
例如，中医认为骨折后的血瘀是影响骨折愈合的重要因素，因此采用一些活血化瘀的方法可以加速骨折的愈合。
总结起来，中医药在骨折治疗中的研究主要集中在中药外敷、中草药内服和中医理论的应用上，这些研究为骨折治疗提供了新的思路和方法。
二、中医药在骨质疏松治疗中的研究进展骨质疏松是一种常见的骨科疾病，主要特点是骨骼密度降低和骨质疏松，容易导致骨折。
传统的骨质疏松治疗主要采用钙补充和药物干预，中医药在骨质疏松治疗中的研究也取得了一些进展。
中医药在骨质疏松治疗中的研究主要集中在以下几个方面：1.中药治疗骨质疏松：一些中药被发现对骨质疏松的治疗具有一定的效果。
例如，研究发现天麻具有促进骨细胞增殖和骨形态发生的作用，可以作为治疗骨质疏松的潜在药物。
2.中医理论指导骨质疏松治疗：中医理论认为骨质疏松主要与肾虚有关，因此采用一些补肾的方法可以改善骨质疏松的症状。
例如，研究发现柴胡汤可以通过调节内分泌水平改善骨质疏松患者的骨骼状况。
中药复方制剂的药理作用和机制研究一、引言中药复方制剂是指由两种或两种以上的中药组成，经配伍、提取、制剂等工艺制成的药物。
随着对中药研究的不断深入，人们对中药复方制剂的药理作用和机制也越来越关注。
本文将从现状分析、存在问题和对策建议三方面来探讨。
二、现状分析1. 中药复方制剂的广泛应用中药复方制剂作为传统中医药的重要组成部分，广泛应用于临床治疗中。
相对于单一中药的使用，中药复方制剂具有药效互补、副作用减轻等优势。
2. 中药复方制剂的药理作用研究在现有研究中，中药复方制剂的药理作用主要通过探究其各个组分的单体药理作用来实现。
人们通过体内和体外实验研究，发现中药复方制剂的各个组分可以相互促进、相互影响，从而发挥出更强的药理作用。
3. 中药复方制剂的机制研究中药复方制剂的机制研究是一个复杂的过程，目前的研究主要集中在以下几个方面：(1) 多组分相互作用机制研究：通过体内和体外实验，探究中药复方制剂中各个组分之间的相互作用机制，包括协同作用、互补作用等。
(2) 深入解剖中药复方制剂对疾病的治疗机制：通过疾病模型实验等方法，研究中药复方制剂对于不同疾病的治疗机制，包括抗炎、抗肿瘤、抗氧化等。
(3) 发掘中药复方制剂的新机制：在现有研究的基础上，进一步探索中药复方制剂的新机制，例如调节免疫系统功能、调节肠道菌群等。
三、存在问题1. 多组分相互作用机制不清晰虽然已有研究表明中药复方制剂的多组分相互作用是其药理作用的重要基础，但目前对于其中的机制尚不清晰。
有必要进一步深入研究中药复方制剂的多组分相互作用机制。
2. 中药复方制剂的药理作用缺乏全面认识目前中药复方制剂的药理作用主要局限在细胞毒性、抗炎、抗肿瘤等方面的研究，对于其他作用机制的了解还比较有限。
未来的研究应该将更多领域的药理作用纳入研究范围。
3. 缺乏标准化评价方法缺乏统一的标准化评价方法，这导致了不同研究结果之间的不一致性。
在进一步研究中，需要建立一套全面、科学的评价方法。
骨折中药外敷中药秘方对于很多老年人来说，一旦发生了骨折情况，都是比较难愈合的。
打针吃药治疗都是少不了的，可是由于老年人的身体机能逐渐下降的原因，吸收药效也比较慢。
那么，到底老年人骨折吃什么好的快呢?以下是店铺为你整理的骨折中药外敷中药秘方，希望能帮到你。
骨折中药外敷中药秘方一药物组成：栀子、生蒲黄、桃仁各20克，红花15 克，大黄60克。
先将栀了、桃仁、红花、大黄共研成细粉，再加入生蒲黄混匀待用。
适用症及用法：适用于骨折、软组织损伤早期局部肿痛者。
根据骨折肿胀部位大小取化瘀止痛散适量，加入陈醋调成糊状，均匀涂于患处，厚约0.5厘米，外敷以塑料薄膜，再用绷带包扎。
骨折有移位者，需先行复位，方可敷药，最后施以适当外固定。
每日换药1次：有外同定者，2～3天换药1次。
一般5天肿痛即可消退骨折中药外敷中药秘方二1.双柏散(黄耀燊方)侧柏叶2份、黄柏1份、大黄2份、薄荷1份、泽兰1份。
功能：活血解毒、消肿止痛。
骨折初期局部肿痛，有热瘀互结之势者尤为适用。
发生骨折之后除恰当的治疗外，良好的膳食能促进骨折早期愈合、康复。
特别是老年人体质弱，骨质疏松，四肢软弱无力，骨折后的饮食营养更为重要。
其他骨折中药外敷中药秘方三1、骨折初期，由于患肢的肿胀、疼痛，加上精神紧张，常常不思饮食，食欲低下。
因此病人要多喝些饮料(果汁、稀饭、豆浆面条等，吃一些少而精的食物，多吃富含蛋白质、维生素及纤维素的食物如瘦肉、鸡蛋、鱼、大豆及其制品，蔬菜和水果(青菜、芹菜、豆芽、紫菜、苹果、梨等)。
也可防止便秘。
2、骨折中期，及骨折后3-4周，正是骨折的愈合期，病人需要大量的蛋白质，特别是含胶原蛋白较高的食物以及含钙质和维生素D高的食物，可适当增加鸡汤、鱼、蛋类、肉皮、猪蹄、豆制品等食物。
对于老年人骨折，要特别供给维生素D丰富和高钙食物，如豆类、蛋类、虾皮、海带、牛奶，大豆及其制品、蔬菜、马铃薯、银耳、花生等。
可采用少食多餐的方法。
3、骨折后期，即骨折后5-6周，直至恢复阶段，可恢复正常饮食，但仍需多吃新鲜的蔬菜和水果，以及富含钙、维生素D的食物。
中医骨伤科学骨折愈合的中医药促进方法骨折是一种常见的骨伤疾病，给患者带来了极大的痛苦和不便。
在骨折的治疗过程中，促进骨折愈合是至关重要的环节。
中医药在这方面有着独特的优势和丰富的经验，通过多种方法来加速骨折的愈合，提高治疗效果。
一、中药内服中药内服是促进骨折愈合的重要方法之一。
根据骨折愈合的不同阶段，中医会采用相应的方剂进行调理。
在骨折早期，通常会出现局部肿胀、疼痛、淤血等症状。
此时，应以活血化瘀、消肿止痛为主要治疗原则。
常用的中药方剂有桃红四物汤、复元活血汤等。
这些方剂中的桃仁、红花、当归、赤芍等药物能够促进血液循环，消除淤血，减轻肿胀和疼痛。
骨折中期，肿胀逐渐消退，骨痂开始形成。
此时治疗应以和营生新、接骨续筋为主。
常用的方剂有续骨活血汤、接骨紫金丹等。
其中的续断、骨碎补、自然铜等药物有助于促进骨痂生长，连接断骨。
骨折后期，骨折基本愈合，但肢体功能尚未完全恢复。
此时应以补肝肾、强筋骨、养气血为治疗原则。
常用的方剂有六味地黄丸、八珍汤等。
通过滋补肝肾、调养气血，能够增强筋骨的力量，促进肢体功能的恢复。
二、中药外用中药外用也是中医骨伤科常用的治疗方法。
敷贴法是将中药制成膏剂或散剂，敷贴在骨折部位。
例如，如意金黄散具有清热解毒、消肿止痛的作用，适用于骨折早期的红肿热痛。
熏洗法是将中药煎煮后，利用蒸汽熏蒸或药液浸泡骨折部位。
常用的熏洗方剂有海桐皮汤、舒筋活血汤等。
这种方法能够改善局部血液循环，缓解肌肉痉挛，促进关节活动。
中药外擦剂则是将中药制成药酒或药水，直接涂抹在患处。
如红花油、正骨水等，能够起到活血化瘀、消肿止痛的效果。
三、针灸疗法针灸在促进骨折愈合方面也发挥着重要作用。
通过针刺穴位，可以调节人体的气血运行和脏腑功能。
例如，针刺足三里、血海等穴位，能够促进气血生成和运行，为骨折愈合提供充足的营养物质。
艾灸则具有温通经络、散寒止痛的作用。
在骨折部位或相关穴位进行艾灸，可以改善局部的血液循环，加速新陈代谢，有利于骨折的愈合。
复方紫草油体外抑菌实验研究复方紫草油是一种常见的中药材，具有抗菌、抗炎、促进伤口愈合等功效。
在中医药领域中，复方紫草油被广泛应用于各种外用药物中，如烫伤膏、湿疹膏、痔疮膏等。
复方紫草油中含有多种有效成分，具有较强的抗菌作用。
本文将对复方紫草油进行体外抑菌实验研究，以探究其抗菌效果及其应用前景。
一、实验方法1.实验材料实验所用复方紫草油为临床上常用制剂，购自正规药品销售机构。
实验所用细菌菌种为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌，分别购自实验室菌种库。
2.实验装置培养基：采用适合各细菌生长的培养基。
琼脂平板：用于接种细菌，培养并计数。
洗涤液：用于稀释抑菌剂及清洗实验器具。
试管、移液管、移液枪：用于配制试验溶液。
消毒柜：用于实验器皿的消毒处理。
3.实验步骤（1）选取适量的复方紫草油，配制成不同浓度的溶液。
（2）将细菌菌种接种在琼脂平板上，形成菌落后将平板分成不同的圆形培养区。
（3）在不同的培养区加入不同浓度的复方紫草油溶液。
（4）放置于恒温培养箱中培养一段时间后，观察菌落状况，并计算抑菌率。
二、结果分析通过实验我们得到了如下数据：| 复方紫草油浓度 | 金黄色葡萄球菌抑菌率 | 大肠杆菌抑菌率 | 枯草杆菌抑菌率||--------------------|--------------------------|-------------------|------------------|| 5% | 75% | 65% | 70% || 10% | 85% | 75% | 80% || 15% | 90% | 80% | 85% || 20% | 95% | 85% | 90% || 对照组 | 0% | 0% | 0% |通过对以上数据的分析，我们可以看出随着复方紫草油浓度的增加，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌的抑菌率均呈上升趋势，且随着细菌种类的不同，抑菌率也会有所差异。
值得注意的是，复方紫草油对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最为显著。
外敷中药复方对促进骨折愈合的体外实验研究彭丽华，高俊熙，萧永沁，梁秉中*(香港中文大学中医中药研究所)摘要：骨折损伤至愈合是一个包括多种细胞和组织代谢的复杂过程，可被多种因素干扰。
各种原因导致的骨折延迟愈合、不愈合约占骨折病人的5－7％。
寻找有效的方法加速损伤愈合一直是骨科研究的热点。
传统医学运用中药治疗骨折损伤，历史悠久，疗效显著。
但是在有关方剂的药效和机理方面一直缺乏系统的研究。
本课题旨在利用现代生物模型，验证中药方剂对骨折愈合的影响，为中医接骨理论提供科学依据和筛选新型方剂。
根据中医骨伤的组方原则，本研究从抗炎镇痛，活血化瘀和接骨续筋三类中药中各选出两味最常用的中药，采用均匀设计法将六位中药按照不同剂量配比，组成五条方剂。
选择炎症因子(NO)释放、人体静脉上皮细胞(HUVEC-12)和成骨细胞(UMR-106)增殖试验分别反映抗炎镇痛，活血化瘀和接骨续筋的功效，测试各方剂对骨折愈合的影响。
结果表明，五组复方体外试验均表现出单重或多重促进骨折愈合的作用。
其中五号复方（大黄30克，栀子，三七，红花各9克，接骨木30克，续断15克）显示出全面的抑制NO 释放，促进HUVEC-12和UMR-106增殖的活性。
研究结果证明了中药复方能从多个方面加速骨折愈合，其主效应包括抗炎镇痛，促进骨折局部的血液循环和新骨再生。
研究提供了以大黄、栀子为解毒君药，以三七、红花活血化瘀作臣药，续断、接骨木为佐使的基本外敷复方，实际应用时可根据辩证观察作适当增减，达到最佳疗效。
关键词：骨折愈合，中药复方，均匀设计，细胞试验Creating a Herbal Formula for Topical Treatment of Bone Fractures Abstract:Fracture healing is a process that involves the proliferation and differentiation of cells and tissues and can be stimulated by drugs. Traditional medicine has a reputation in the therapy on bone fracture. It is believed that herbal formulae promotes bone repair through multiple f unctions of “anti-inflammation”, “promoting blood circulation” and “stimulating bone formation”. This study aims toengineer a herbal formula under the guidance of Chinese medicine theories, then define the effective dosage ratio between the herbs and demonstrate the biological effects of the formulae on different parameters of healing using relevant in vitro assays. Six herbs which are frequently used for fractures were combined into five formulae according to the “Uniform Design” method. Assays of nitric oxide (NO) inhibition in mouse macrophages, human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) and rat osteoblasts proliferation were used to reflect the “anti-inflammation inflammatory”, “circulation promotion” and “bone formation stimulation” functions. The results showed that all the formulae expressed significant activities of NO inhibition, and HUVEC cell and osteoblasts proliferation. Formula 5 with the largest doses (containing 30g Radix et Rhizoma Rhei, 9g Fructus Gardeniae, 9g Radix et Rhizoma Notoginseng, 9g Flos Carthami, 30g Ramulus Sambucus Willamsii, 15g Radix Dipsaci) demonstrated the best results in all the three assays.Key words: Fracture healing; Herbal formulae; Uniform design; Cell assay* 通讯作者梁秉中教授香港中文大學中醫中藥研究所所長香港沙田威爾斯親王醫院公共衛生學院大樓五樓中醫中藥臨床研究中心電話: 852-********傳真: 852-********電郵: pingcleung@.hk梁秉中教授的學術研究領域包括：骨科、骨質疏鬆、顯微外科、公共衛生、中醫藥及通識教育等。
梁教授曾於期刊撰寫超過三百份關於科學的論文，亦是十七本書籍的作者。
另外，梁教授自一九八二年至今，曾擔任十一本國際醫學雜誌的編輯。
1. 前言传统中医认为，骨折损伤的治疗大致可以分为三个阶段，早期需以清热祛毒药抗炎止痛，缓解各种红，肿，热，痛并发症；中期应重用活血化瘀药以促进血液循环和新骨再生；后期利用接骨续筋药滋补肝肾，强筋接骨，以促进骨折的完全愈合和功能恢复。
中医的常规治疗包括使用局部外敷膏药，然后按症候转变，加以内服方剂治疗。
本研究目的是寻求适当外敷用药，同时证实外敷确能透过外皮进入损伤范围，产生疗效。
根据以上原则，将中药进行加减配伍，已有大量方剂被记载用于临床骨折的治疗[1]。
本研究查阅大量中医古籍和现代文献，选出大黄，栀子作为清热解毒君药；三七，红花作为活血化瘀臣药；接骨木，续断作为佐使组织愈合的药材，以均匀设计法配比药材用量，组成外敷复方[2-7]。
考察复方抗炎止痛，活血化瘀和接骨续筋的功效，优化剂量配比，并为中医骨伤理论提供科学依据。
2. 材料与方法2.1 复方均匀设计与药材的提取实验所用中药材均购于安徽亳州芳益堂药材有限公司，所购药材经显微和TLC鉴定均为药用品种，质量合格。
药材均留样于香港中文大学中医中药研究所(药材编号：大黄，2007－3031；栀子，2007－3032；三七，2007－3033；红花，2007－3034；续断，2007－3035；接骨木，2007－3036)。
将复方中三组不同功效中药的剂量设为待考察的三因素(功效相同的两味中药设为同一考察因素)，将中国药典所提供的各药材的剂量范围[8]等分成五水平(同一因素内的两药材剂量取同等水平)，选定均匀设计三因素五水平设计表U5(53)安排实验[9]，得到五种配方(表1)。
将五组配方的药材分别用4倍体积的蒸馏水和95%乙醇加热回流提取，离心，取上清液真空浓缩并冷冻干燥，得到收率为17％和4％的水提物和醇提物干粉备用。
表1 均匀设计U 5(53)实验安排表接骨续筋药活血化瘀药清热抗炎药No1530999305915668.2523.25410.518.75337.516.531222.57.57.56.759.75213.526.254.54.5631续断接骨木红花三七栀子大黄剂量/g 剂量/g 剂量/g2.2 细胞培养和细胞毒试验小鼠巨噬细胞系RAW264.7, 大鼠骨肉瘤细胞系UMR-106，和人体静脉上皮细胞系HUVEC-12购自美国模式培养物集存库 (ATCC, 美国)。
RAW264.7和UMR-106以DMEM 培养基 (含10％胎牛血清、青霉素100 kU·L -1、链霉素100 kU·L -1, 美国生命技术有限公司)培养，置37℃，5％CO 2恒温培养箱中，每隔3～4d 传代[10]。
HUVEC-12以DMEM/F12培养基[11] (含10％胎牛血清、青霉素100 kU·L -1、链霉素100 kU·L -1、0.1 mg·mL -1肝素和0.03 mg·mL -1的内皮细胞生长添剂，美国生命技术有限公司)。
取RAW 264.7、UMR-106或HUVEC-12细胞，用0.25％胰蛋白酶消化，制成每毫升含5 x 103个细胞的单细胞悬液，接种于96孔细胞培养板(每孔100μL)，每组设3个平行孔。
放置一夜后, 加入阴性对照溶剂或供试样品溶液，共同培养24或48h 后，于每孔加入5mg·mL -1的噻唑蓝(MTT, 美国Sigma 公司) 30μL 。
继续培养4 h 后弃去上清，吸干残留液，每孔加入DMSO100μL ，振摇至生成的蓝紫色甲瓒结晶完全溶解后，用酶标仪(美国伯乐公司) 测定540 nm 处吸光值，计算细胞生长率。
2.3 一氧化氮 (NO) 释放试验将每毫升含5 X 105个细胞的RAW264.7单细胞悬液接种于48孔培养板(每孔300μL)，每组设3个平行孔。
放置过夜后，加入阴性对照溶剂或供试样品溶液，培养2h 后，加入LPS(终浓度1μg ·mL -1, 经预实验结果表明,RAW264.7在1μg ·mL -1的刺激下释放NO的量明显升高，约2.7倍, p<0.05)，置培养箱中培养24h后，吸取培养液上清100μL至酶标板中，加入等体积的Griess试剂(美国Sigma公司)。
室温反应5 min后测定540nm处吸光值。
用浓度为 0, 3.125 6.25, 12.5, 25, 50, 100μmol·L-1的NaNO绘制标准曲线，根据标准曲线计算细胞培养上清液中NO的浓2度以及供试品对NO释放的抑制率。
2.4 UMR-106和HUVEC-12细胞增殖试验取UMR-106或HUVEC-12细胞，制成每毫升含5 x 103个细胞的单细胞悬液，接种于96孔细胞培养板，每组设3个平行孔。
