红细胞比容测定实验报告
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血细胞比容测定
【目的】
掌握血细胞比容的温氏测定法。
【原理】
将定量的抗凝血液灌注于温氏管中,经过一定的速度和时间离心沉淀后,观察压紧红细胞层占全血体积的比值。
【实验器材或试剂】
1 器材:温氏比积管、毛细吸管、离心机。
2 试剂:按EDTA-K223.5mg/每试管(或肝素钠0.2mg/每试管)标准,将抗凝剂分装于小试管中干燥。
【操作步骤】
1、抽取静脉血2.0ml,立即注入装有抗凝剂的抗凝管中并混匀。
2、用细长毛细滴管吸取混匀的抗凝血,插入温氏比积管底部,然后将血液缓慢注入至10cm 刻度处,避免产生气泡。
3、将加好血液的比积管置于水平离心机,以3000r/min的速度离心30min,读取压实红细胞层柱高的毫米数,然后再以同样速度离心10min至红细胞层高度不再下降为止。
【结果计算】
血细胞比容=红细胞层柱高的毫米数×0.01
【注意事项】
1、所用器材必须清洁干燥,以防溶血,如遇溶血现象应加以注明。
2、不能使用影响红细胞体积的抗凝剂。
3、离心速度和时间要规范化,否则血细胞比容的误差很大。
【临床意义】
1、参考范围:男性:0.40~0.50
女性:0.37~0.48
2、增高或降低
A、血细胞比容增高:见于各种原因所致的血液浓缩或红细胞绝对性增多。
临床上测定脱水病人的血细胞比容,作为计算补液量的参考。
B、血细胞比容减低:见于各类贫血。
[实验目的]
学习和掌握用温氏分血管测定红细胞比容的方法。
[实验原理]
将定量的抗凝血灌注于特制的、具有刻度的比容管内,定时、定速离心后,有形成分和血浆分离,上层淡黄色液体是血浆,中间一薄层白膜是白细胞和血小板(或栓细胞),下层不透明的暗红色部分为红细胞,彼此压紧而不改变细胞的正常形态。
根据红细胞柱及全血高度,可计算出红细胞在全血中的容积比值,即为红细胞比容(压积)。
[主要仪器与器械]
温氏分血管,普通离心机,长针头,干棉球等。
[实验方法与步骤]
1.取血
2.离心
3000r·min-1,30min。
3.读数
注意事项
☐选择抗凝剂必须考虑到不能使红细胞变形、溶解。
本实验采用柠檬酸钠抗凝。
☐血液与抗凝剂混合、注血时应避免动作剧烈引起红细胞破裂。
☐温氏分血管内壁必须清洁干燥。
血液进入分血管内的刻度读数要精确,血柱中不得有气泡。
思考题
☐在哪些情况下,红细胞的比容明显增加?
☐测定红细胞比容时,常出现的误差来源是什么?☐测定红细胞比容的实际意义是什么?。
血液生理实验实验一血液的组成和红细胞比容的测定实验一:血液的组成和红细胞比容的测定一、实验目的:1.了解血液的组成和各组成部分的功能。
2.掌握红细胞比容的测定方法及其临床意义。
二、实验原理:血液是由血浆和血细胞组成的混合物,其中血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
红细胞在血液中占有较大比例,其主要功能是运输氧气和二氧化碳。
红细胞比容是指红细胞在血液中所占的容积百分比,是反映血液中红细胞数量及血液浓度的指标之一。
三、实验步骤:1.准备实验材料:5ml移液管、10ml离心管、离心机、电子天平、称量纸、记号笔、标签纸、移液器、生理盐水、抗凝剂。
2.取5ml全血样本,用移液管准确加入10ml生理盐水中,摇匀制成混合液。
3.用电子天平称量混合液的总重量,并记录。
4.将混合液转移至离心管中,加入抗凝剂,标记好标签,放入离心机中,以3000r/min的速度离心5分钟。
5.离心结束后,将离心管取出,用移液器将上层血浆移出,称量剩余的血细胞及血浆重量,并记录。
6.根据公式计算红细胞比容:红细胞比容=血细胞重量/(血细胞重量+血浆重量)×100%。
四、实验结果:1.混合液的总重量为()g。
2.离心后的血细胞及血浆重量为()g。
3.根据公式计算得到红细胞比容为()%。
五、实验总结:通过本实验,我们了解了血液的组成和各组成部分的功能,掌握了红细胞比容的测定方法及其临床意义。
通过观察和测量全血样本中的红细胞比容,可以反映血液中红细胞的相对数量及血液的浓度,对于了解患者的血液循环状态、指导临床治疗具有一定的参考价值。
此外,实验过程中需要注意操作的规范性和准确性,以保证实验结果的可靠性。
例如,在称量血细胞及血浆重量时,需确保样品已经完全转移至称量纸上,避免误差的产生。
同时,在计算红细胞比容时,还需注意单位的换算和公式的正确使用。
六、注意事项:1.实验前需对实验材料进行充分的准备和检查,确保实验所需的试剂、仪器等均符合要求。
血液的组成和红细胞比容的测定[实验目的]:1、了解血液的组成,区别血浆、血清、血细胞及纤维蛋白。
2、测定红细胞比容。
[实验对象]:家兔[实验用品]:兔手术器械、动脉插管、试管、小烧杯、离心机、抗凝剂(肝素钠等)。
[方法与步骤]:1.兔颈动脉采血,徐徐注入试管A、B、C、D (肝素处理),F(未经肝素处理),封口膜封闭试管口,3000r/min离心30min。
取出,读取前4支试管血细胞柱刻度及全血刻度;再次离心5min,若血细胞柱刻度不变,取前4支试管血细胞压积的平均值,即为此家兔的血细胞压积值。
血细胞压积=血细胞柱刻度/全血刻度2.观察A、B、C、D、F试管中血液,分析其不同。
[实验结果]:1. A、B、C、D试管上层为血浆,下层为红细胞,中间一白色薄层为白细胞和血小板;而试管F中,上层为血清。
2.家兔血细胞比容测定:编号血细胞柱长度(cm) 全血柱长度(cm) 红细胞比容(%)ABCD此家兔红细胞比容为[分析讨论]:血液、血浆、血细胞比容血清、血浆[结论]:1、2[思考题]:1.测定红细胞比容的实际意义是什么?血液凝固及其影响因素[实验目的]:1、了解血液凝固的基本过程及加速或延缓血液凝固的因素。
2、学会兔颈部手术的基本操作。
[实验对象]:家兔[实验器材]:哺乳动物手术器械、兔手术台、动脉插管、动脉夹、气管插管、注射器、小试管8支、小烧杯2个、竹签、恒温水浴槽、冰块、棉花。
[药品]:25%乌拉坦溶液、石蜡油、肝素、草酸钾、肺组织浸液。
[实验步骤]:1.麻醉与固定仰卧位固定在兔台上,用1%普鲁卡因溶液局部麻醉。
2.手术颈动脉插管3. 观察项目(1) 观察加速或延缓血液凝固的因素,比较内源性凝血和外源性凝血将8支试管准备好(1,对照管;2,放棉花少许;3,蜡油润滑内表面;4,置于37℃水浴槽中;5,置于冰水浴槽中;6,加肝素8单位;7,加草酸钾1~2mg;8,加肺浸液1ml),打开动脉夹,每管加入血液2ml,即刻开始计时(6,7,8号试管加入血液后轻轻摇匀,使血液与试剂充分混合),每隔15s,将试管倾斜一次,至血液不再流动为止。
开放性实验血细胞比容测定(温氏法)(多媒体)【要求】了解血细胞比容测定的原理及方法,掌握血细胞比容参考值及其临床意义。
【原理】抗凝全血经离心沉淀后,可测出下沉的血细胞在全血中所占体积的百分比,即血细胞比容。
【试剂】EDTA-K2或双草酸盐抗凝剂。
1.5ml注射器、试管。
2.毛细滴管长约12cm,口径不大于2mm。
3.温氏(Wintrobe)管上以1mm为间隔,刻有0~100mm的刻度(图1-5)。
【操作】1.试管内加入抗凝剂,每管内加EDTA-K2或双草酸盐溶液0.5ml,烤干备用。
2.静脉采血2ml,立即注入抗凝管中,混匀。
3.用细长的毛细滴管取摇匀的抗凝血,从温氏管底部徐徐注入血液,随血液平面上升而渐渐向上抽提毛细滴管,直到血液至“100”刻度处,切勿产生气泡。
4.将注入血液的温氏管置水平离心机中,以相对离心力2264g(即有效半径22.5cm),即300rpm速度离心30min,读取红细胞层高度,然后再离心10min至红细胞不再下降为止,离心后血液分为5层,从上至下依次是:血浆层;白色乳糜层(主要为血小板);灰红色层(主要为白细胞和有核细胞);暗红色层(主要为被血细胞代谢还原的还原血红蛋白);鲜红色层(为含习红细胞)。
5.读取以暗红色红细胞层为准的红细胞柱高的毫米数,乘以0.01报告(或以百分比报告)。
【注意事项】1.所有器材必须清洁干燥,以防溶血。
2.抗凝剂与血液要充分混合,防止部分血液发生凝固,出现小凝块。
3.离心力大小直接影响结果,本试验一定要在达2264g的条件下进行离心。
4.采血后应尽快试验,最好不超过3h。
【参考值】男性 0.42~0.49(42%~49%)女性 0.37~0.48(37%~48%)【临床意义】1.血细胞比容减少见于各种贫血。
2.血细胞比容增多见于,①呼种原因所致的血液浓缩,如大量呕吐、腹泻、失水、大面积烧伤等;②真性红细胞增多症有时血细胞比容可高达0.80左右;③继发性红细胞增多症,如新生儿、高原居民及慢性心肺疾患。
实验诊断学实验报告红细胞计数试验实验目的:通过红细胞计数实验1、掌握红细胞计数方原理、方法及注意事项。
2、掌握血细胞计数板的结构试验器材:血细胞计数板、显微镜、盖玻片、试管、血红蛋白吸管、生理盐水实验原理:一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后,充入血细胞计数池中显微镜下计数一定容积内的细胞,再换算成每升标本的细胞数报告。
操作步骤: 1、取红细胞稀释液2.0ml毫升,放入一小试管内。
2、用血红蛋白吸管吸血至l0ul处。
3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内,上清液嗽洗吸管2-3次,立即摇匀。
4、将计数池与盖玻片用软布料擦净,将盖玻片覆盖于计数池上。
5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液,充入计数池中。
6、待2—3分钟,让红细胞完全下沉后,将计数板平放在显微镜台上,用低倍镜观察,如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。
红细胞计数的区域:中心大方格中的5个中方格(正中一个和四角各一个)。
计数原则:数上不数下,数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线(双线)上的红细胞,只计上侧与左侧线上的细胞,而压在下侧与右侧线上者不计入。
计算:红细胞数/l=5个中方格内红细胞数×5×10×201×106 或红细胞数/l=5个中方格内红细胞数÷100×1012 式中×5 5个中方格换算成1个大方格×10 1个大方格容积为0.1ul,换算成1.0 ul。
×201 血液的稀释倍数×106 由u1换算成l数据处理: rbc: ×l0/l12参考值男:(4~5.5)×10/l 12 女:(3.5~5)×10/l12 新生儿:(6~7)×10/l 12 答案不唯一,言之有理即可注意事项: 1、吸管、试管要注意清洁、干燥以防溶血,操作迅速避免血液凝固,如有血凝块应重新采血。
2充液前,红细胞复液要充分摇匀,红细胞悬液注入计数池内要求分布均匀,不可有气泡,亦不可有多余液体外溢。
实验报告实验名称血液学实验实验目的1、掌握实验用兔颈动脉采血的方法2、了解红细胞比容及其测定方法3、血液凝固的基本过程及影响血凝的一些因素实验原理1、红细胞比容测定原理将抗凝血放在特制有刻度的玻璃管(温氏分血管)中,经过离心沉淀,使血细胞与血浆分离。
红细胞下沉,彼此压紧而又不改变每个血细胞的正常形态。
根据玻璃管刻度的读数,可以计算出红细胞在全血中所占的容积百分比——即红细胞比容。
2、血液凝固原理血液凝固可分为三个主要步骤。
第Ⅰ阶段是凝血因子FX 激活成FXa 并形成凝血酶原复合物(凝血酶原激活物)第Ⅱ阶段是凝血酶原(Prothrombin ,F Ⅱ)激活成为凝血酶(thrombin ,F Ⅱa )第Ⅲ阶段是纤维蛋白原(FI )转变成纤维蛋白(filbrin ,FIa )。
在这三个主要步骤中都需要Ca 离子的参与。
实验材料及设备材料:大兔一只,兔手术保定台, 设备:烧杯(500ml ,50ml ),常用手术器械(手术刀、毛剪、手术剪、止血钳),线动脉套管,动脉夹 温氏分血管,长颈滴管,5毫升试管,离心机,天平,5ml 注射器试管,试管架,吸管,2%戊巴比妥钠,3.8%柠檬酸钠,肝素,1%氯化钙,5%草酸钾,液体石蜡,带有开叉橡皮管的玻棒等。
试验方法及步骤(一)手术操作1、2%戊巴比妥钠按1ml/kg 的剂量从耳缘静脉注入实验用兔2、麻醉后仰卧固定于手术台上(同时准备实验用试管等)3、剪去颈部术野的被毛,切开皮肤,找出两侧颈动脉4、将颈动脉剥离2厘米左右,然后在颈动脉下面穿两条线。
将一侧颈动脉在远心端用线结扎,再于近心端用动脉夹夹住。
结扎处与动脉夹之间最好不少于1.5厘米5、用眼科剪刀在这段动脉上靠近结扎处1/4的地方,斜向近心方向剪一小口,将动脉套管插入,用线扎好,以免滑脱,待用(需采集血样时打开动脉夹即可)专业: 动物科学 姓名: 张思佳学号: 3090100252 日期: 2011/ 5/5 地点: 生物实验楼装订线(二)比容的测定1、用配有长注射针的注射器吸取含肝素的抗凝血,然后将注射针插入温氏分血管的底部,缓缓地将滴管内的血液注入分血管内(不得有气泡),使血液正确地装到刻度10处。
实验6.1红细胞比容的测定[实验目的]学习和掌握测定红细胞比容的方法。
[实验原理]将定量的抗凝血灌注于特制的毛细玻璃管中,定时、定速离心后,有形成分和血浆分离,上层呈淡黄色的液体是血浆,中间很薄一层为灰白色,即白细胞和血小板(或栓细胞),下层为暗红色的红细胞,彼此压紧而不改变细胞的正常形态。
根据红细胞柱及全血高度,可计算出红细胞在全血中的容积比值,即为红细胞比容(压积)(图6.1-1)。
[实验对象] 动物种类不限[实验药品]草酸盐抗凝剂(0.8 g草酸钾·H2O + 1.2 g草酸銨·H2O + 甲醛1 ml + 蒸馏水至100 ml)或10 g·L-1肝素,橡皮泥或半融化状态石蜡,75%酒精。
[仪器与器械]毛细玻璃管(内径1.8 mm,长75 mm)或温氏分血管,酒精灯,水平式高速毛细管离心机(或普通离心机),天平,注射器,长针头,干棉球,刻度尺(精确到mm)。
[实验方法与步骤] 1.微量毛细管比容法(1)以抗凝剂湿润毛细管内壁后吹出,让壁内自然风干或于60 ℃~80℃干燥箱内干燥后待用。
(2)取血:常规消毒,穿刺指(或尾)尖,让血自动流出,用棉球擦去第一滴血,待第二滴血流出后,将毛细管的一端水平接触血滴,利用虹吸现象使血液进入毛细管的2/3(约50 mm)处。
(3)离心:用酒精灯溶封或橡皮泥、石蜡封堵其未吸血端,然后封端向外放入专用的水平式毛细管离心机,以12000 r·min-1的速度离心5 min。
届时用刻度尺分别量出红细胞柱和全血柱高度(单位 mm)。
计算其比值,即得出红细胞比容。
2.温氏分血管比容法(1)取大试管和温氏分血管各一支,用抗凝剂处理后烘干备用。
(2)取血:可采取静脉取血或心脏取血,将血液沿大试管壁缓慢放入管内,用涂有凡仕林的大拇指堵住试管口,缓慢颠倒试管2~3次,让血液与抗凝剂充分混匀,并不能使血细胞破碎,制成抗凝血。
用带有长注针头的注射器,取抗凝血2 ml 将其插入分血管的底部,缓慢放入,边放边抽出注射针头,使血液精确到10 cm刻度处。
第1篇实验目的:1. 了解红细胞的基本结构及其生理功能。
2. 探究红细胞在氧气运输中的作用。
3. 学习显微镜的使用方法。
实验时间:2023年10月25日实验地点:生物实验室实验器材:1. 显微镜2. 红细胞样本3. 载玻片4. 滴管5. 玻片盖6. 红细胞计数板7. 计时器8. 记录本实验步骤:1. 准备工作:- 将显微镜调整至合适的亮度。
- 将红细胞样本滴在载玻片上。
- 使用滴管轻轻覆盖玻片盖,避免气泡产生。
2. 观察红细胞形态:- 使用低倍镜观察红细胞的整体形态。
- 转换至高倍镜,观察红细胞的详细结构,包括细胞膜、细胞核、血红蛋白等。
3. 红细胞计数:- 将红细胞计数板放置在显微镜下。
- 使用低倍镜找到红细胞计数区域。
- 转换至高倍镜,数出一定区域内的红细胞数量。
- 计算红细胞总数。
4. 氧气运输实验:- 将一定量的氧气溶解在水中。
- 将红细胞样本放入氧气溶解的水中。
- 观察红细胞内血红蛋白的颜色变化。
- 记录实验结果。
5. 实验结束:- 清理实验器材。
- 将实验数据整理成报告。
实验结果:1. 红细胞形态:- 红细胞呈双凹圆盘状,细胞膜清晰可见。
- 细胞核较小,位于细胞中央。
- 血红蛋白呈红色,充满整个红细胞。
2. 红细胞计数:- 在计数区域内,共观察到100个红细胞。
- 红细胞总数为:100个/区域× 25区域 = 2500个。
3. 氧气运输实验:- 将红细胞放入氧气溶解的水中后,血红蛋白颜色逐渐变为鲜红色。
- 实验结果表明,红细胞在氧气运输过程中起到重要作用。
实验结论:1. 红细胞呈双凹圆盘状,细胞膜、细胞核、血红蛋白等结构清晰可见。
2. 红细胞在氧气运输过程中起到重要作用,血红蛋白能够结合氧气,运输至全身各个部位。
实验讨论:1. 红细胞为何呈双凹圆盘状?这种形态有何优势?2. 红细胞计数有何意义?3. 红细胞在氧气运输过程中有何生理作用?实验反思:1. 本实验操作过程中,应注意避免气泡产生,以免影响观察结果。
红细胞比容测定实验报告
实验目的:
1.了解红细胞比容的概念和意义;
2.掌握红细胞比容测定的方法和技巧;
3.分析不同因素对红细胞比容的影响。
实验原理:
1.取一定量的血液样本,加入抗凝剂进行抗凝处理;
2.用离心机进行离心,使血液离心沉积,红细胞沉积到底部形成红细胞柱;
3.读取红细胞柱的体积,即为红细胞比容。
实验仪器和试剂:
1.离心机;
2.采血器;
3.抗凝剂(例如EDTA);
4.离心管;
5.读数尺。
实验步骤:
1.用采血器采集一定量的患者血液样本;
2.加入适量的抗凝剂进行抗凝处理;
3.将抗凝后的血液样本转移到离心管中;
4.将离心管放入离心机中,进行高速离心;
5.离心结束后,取出离心管,观察离心后血液的形态变化;
6.用读数尺读取红细胞柱的高度,即为红细胞比容。
实验结果和数据处理:
通过实验测得的红细胞比容数值可以用来判断机体的贫血程度。
正常
人的红细胞比容数值一般在37%~54%之间,如果低于37%,则表明机体存
在贫血。
实验探究:
在实验中,还可以通过改变不同因素来观察对红细胞比容的影响。
例如,可以观察不同抗凝剂对红细胞比容的影响,不同离心速度对红细胞比
容的影响等。
通过这些观察和比较,可以得出一些关于红细胞比容的规律。
实验总结:
红细胞比容测定是一种简单而常用的实验方法,可以用来评估机体的
贫血程度。
通过实验,我们不仅了解了红细胞比容的概念和意义,还掌握
了测定红细胞比容的方法和技巧。
同时,通过观察和比较不同因素对红细
胞比容的影响,我们也对红细胞比容这一指标有了更深入的了解。