各种组织特殊染色法—纤维素染色法

纤维素染色液(Gram 甲紫法)简介：病理的内源性沉着物是色素沉着物的一部分，组织细胞经过一定的病理变化，形成不同形状特点的沉着物质，这种聚合形成的特殊蛋白，经染色后能够显示纤维素蛋白。

纤维素是存在于血液内的纤维蛋白分子聚合形成的特殊蛋白质，又称为纤维蛋白，这种蛋白以弯曲细丝纤维素的形式存在于组织内，大多数呈网状结构，有时会呈粗大的纤维素网，陈旧的可凝集呈无定型的块状。

Leagene 纤维素染色液(Gram 甲紫法)主要由Gram 伊红染色液、甲紫染色液、Gram 碘液组成，是一种简便、廉价的纤维素染色液，染色后纤维素呈蓝色。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、 常规石蜡切片，常规脱蜡至水。

2、 入Gram 伊红染色液，染色，稍水洗。

3、 入甲紫染色液，染色，稍水洗。

4、 入Gram 碘液，染色。

5、 倾去Gram ，用吸水纸吸干。

6、 取苯胺和二甲苯等量混合作为分化液，分化。

7、 更换新的二甲苯清洗组织。

中性树胶封固。

染色结果：纤维素 蓝色 背景红色注意事项：1、 Gram 伊红染色液染色后，经过水洗时务必使组织上有足够的红色。

2、 苯胺和二甲苯等量混合分化时，注意轻轻摇动，以使组织脱色均匀。

编号 名称DG0078 3×50mlStorage试剂(A): Gram 伊红染色液 50ml RT 避光 试剂(B): 甲紫染色液 50ml RT 避光 试剂(C): Gram 碘液 50mlRT 避光 使用说明书1份3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：3个月有效。

相关：编号名称DC0032 Masson三色染色液DF0111 中性福尔马林固定液(10%)DH0006 苏木素伊红(HE)染色液IH0305 柠檬酸钠抗原修复液(50×)NR0001 DEPC处理水(0.1%)PW0040 Western blot一抗稀释液TC1243 甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP单试剂比色法)。

纤维素纤维染料的染色原理及特点1.直接染料：直接染料具有磺酸基(-SOH)或羧基(-COOH)等水溶性基团分子结构排列成直3线型，芳环结构处于同一平面，因此直接染料对纤维素纤维具有较大的亲和力，在中性介质中直接染色，只要把染料溶解于水，便可进行染色。

染料在溶液中被纤维吸附到表面，然后不断向纤维的无定形区扩散，与纤维大分子形成氢键和范德华力的结合。

其派生的染料有直接耐晒染料和直接铜盐染料。

2.活性染料：活性染料是在化学结构上带反应性基团的水溶性染料，在染色过程中，染料与纤维发生反应，最终生成共价键(酯键和醚键)，活性染料具有水溶性和直接性，其原理和直接染料类似，只是又多了一项反应性。

活性染料按其活性基结构不同又分X型、K型、KN型等。

3.硫化染料：硫化染料不是单一结构的化合物，多数为混合物，化学结构难以确定，大致是由硫键(—S—)结合的环状结构，不溶于水，不能直接染色，需先由硫化钠还原溶解成染料的隐色体(溶于水，对纤维有亲和力)，被纤维吸收，经氧化处理，染着在纤维上的染料不再溶解，具有较好的水洗牢度，其派生染料有液体硫化染料、水溶性硫化染料。

从染料的结构、染色原理中，我们可以了解染料的特点，我们将其进行比较。

a.湿处理牢度染料的湿处理牢度包括水洗、水浸等牢度。

通常，我们只比较水洗牢度就可以了。

水洗牢度与染料和纤维结合键的强弱有关。

直接染料与纤维之间靠氢键和范德华力结合，强力较弱，故直接染料水洗牢度差。

直接耐晒染料和直接铜盐染料的水洗牢度仍然比不上活性染料和硫化染料。

活性染料与纤维之间靠共价键结合，强力较大，故水洗牢度好。

硫化染料上染纤维氧化后不再溶解，其水洗牢度也较好。

b.日晒牢度日晒牢度与染料的分子结构(活性染料指母体结构)有关。

直接染料(包括直接耐晒染料)固色后日晒牢度偏低，直接铜盐染料经过硫酸铜处理后日晒牢度提高。

活性染料、硫化染料中即使是同一类染料也因分子结构的不同，日晒牢度就有差别。

总的说来，部分直接染料、活性染料、硫化染料在日晒牢度方面基本上能满足粗纺产品的要求。

字号：大中小第一节结缔组织和肌纤维染色Van Gieson苦味酸酸性复红法(VG法)用途：VG法用于区分胶原纤维和肌纤维。

原理：酸性复红和苦味酸对这两种纤维都具有较强的亲合力，结果胶原纤维被酸性复红染成红色，肌肉被苦味酸染成黄色。

此方法是一种优良的传统方法。

固定：10%福尔马林切片：4-6微米试剂：Weigert铁苏木精液：A液：苏木精1g，无水酒精100 ml。

一般配制后需要数周或数月自然氧化，成熟后使用。

B液：29%三氯化铁水溶液4 ml，蒸馏水95 ml，盐酸1 ml。

两液分别配制，临用时A、B液等量混合，过滤后使用。

24h后失去染色能力。

Van Gieson液：1%酸性复红水溶液10 ml苦味酸饱和水溶液90 ml临用时1:9混合过虑后使用。

Van Gieson苦味酸酸性复红法(VG法)步骤：1．石蜡切片脱蜡至水。

2．Weigert苏木精液5-10 min。

3．充分水洗。

4．Van Gieson液1-5 min。

5．95%酒精迅速分化数秒。

6．无水酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。

结果：胶原纤维呈红色、肌肉、神经胶质、胞浆、红血球呈黄色、细胞核呈黑色或棕蓝色。

体会与说明：由于酸性复红退色较快，染色结果不能长期保存，一般只能保存3～6个月。

二Masson三色法试剂：Regaud 氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml。

将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。

Masson丽春红酸性复红液：丽春红0.7g，酸性复红0.3g，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml。

0.2%冰醋酸水溶液：冰醋酸0.2 ml，蒸馏水100 ml。

1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100 ml。

苯胺蓝水溶液：苯胺蓝2g，蒸馏水98 ml，冰醋酸2 ml。

1%光绿水溶液：光绿1g，蒸馏水100 ml。

Masson三色法步骤1．石蜡切片脱蜡至水。

2．铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。

编号名称DP0406Storage 植物纤维素染色液(氯碘化锌法)50ml RT 避光使用说明书1份植物纤维素染色液(氯碘化锌法)简介：通常与半纤维素、果胶和木质素结合在一起，其结合方式和程度对植物源食品的质地影响很大。

而植物在成熟和后熟时质地的变化则有果胶物质发生变化引起的。

人体消化道内不存在纤维素酶，纤维素是一种重要的膳食纤维。

Leagene植物纤维素染色液(氯碘化锌法)利用氯碘化锌反应，染色后纤维素呈蓝色，木质素、角质及软木脂呈橙黄色，主要用于新鲜组织切片以及经乙醇、FAA固定液固定、冰冻干燥的组织切片等样本的染色。

该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

组成：自备材料：1、 固定液：乙醇、FAA固定液、冰冻干燥组织切片2、 载玻片3、系列乙醇操作步骤(仅供参考)：1、 切片置于载玻片上。

2、 立即用入植物纤维素染色液(氯碘化锌法)浸染。

染色结果：含大量纤维素或半纤维素的细胞壁蓝色含大量木质素、角质、软木脂的细胞壁橙黄色编号名称DC0032Masson三色染色液DA0065台盼蓝染色液(0.4%)DM0007瑞氏-姬姆萨复合染色液PW0053Western抗体洗脱液(碱性)TC0699植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法)TC0733乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)注意事项：1、 切片脱蜡应尽量干净。

组织固定常采用乙醇、FAA固定液。

2、 避免使用铬酸固定剂，铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。

3、 冰冻切片和细胞染色，最好根据具体情况摸索实验条件。

有效期： 12个月有效。

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病理学技术——特殊染色最全总结特殊染色是病理学中常用的一种技术手段，用于染色并可视化细胞、组织或病理标本中特定的结构、细胞成分或病理损伤，从而帮助诊断人员更准确地判断疾病类型和病理变化程度。

特殊染色的种类繁多，下面将对一些常见的特殊染色进行全面总结。

一、银染色法银染色法是通过化学反应使待染物质与银盐结合，生成黑色或褐色沉淀，并在显微镜下观察变化。

常见的银染色方法有：Reticulin（網狀纖維）染色、Gomori银染色、Grocott-Methenamine银染色。

二、PAS染色PAS染色（Periodic Acid-Schiff染色）是一种常见的特殊染色技术，用于检测糖原以及其他多糖类物质。

通常使用的PAS染色是将待染物标本与过氧化铬酸溶液（Periodic Acid）处理后再使用Schiff试剂进行染色的方法。

PAS染色为酸性物质染成红色，大多为胞浆染色。

常见的应用包括鉴别肝细胞变性、神经纤维、肾小管等结构。

三、 Masson三色染色法Masson三色染色法是一种多彩染色方法，通过染色剂的组合可染出细胞核、胶原纤维和细胞质等不同组织成分。

Masson三色染色方法包括酸性区域以绿色染色显示胶原纤维，细胞核以黑色或暗蓝色染色显示，胞质以红色染色显示。

该染色法在组织纤维化、炎症反应等病变的检测中应用广泛。

四、Mallory三色染色法Mallory三色染色法和Masson三色染色法类似，可以用于显示胶原纤维、细胞核和胞质等组织成分。

其区别在于Mallory三色染色法标本在染色前需用盐酸处理，使染色剂更易于沉积在纤维上，能更清晰地显示组织纤维结构。

五、Giemsa染色Giemsa染色通常用于血液和骨髓涂片的染色，并可以显示细胞核、染色质和胞质等成分。

Giemsa染色法有多种方法，如Giemsa-Eosin染色法、Giemsa-Wright染色法等，可根据需要选用。

六、von Kossa染色法von Kossa染色法用于检测组织中的钙盐沉积，如血管壁的钙化、尿路结石等。

纤维素染色液(改良MSB 法)简介：病理的内源性沉着物是色素沉着物的一部分，组织细胞经过一定的病理变化，形成不同形状特点的沉着物质，这种聚合形成的特殊蛋白，经染色后能够显示纤维素蛋白。

纤维素染色改良MSB 法是指采用马休黄-丽春红-甲基蓝为核心的染色方法，Leagene 纤维素染色液(改良MSB 法)在上述基础上进行改良，采用马休黄-酸性红-苯胺蓝为核心的染色，主要由天青石蓝染色液、Mayer 苏木素染色液、马休黄染色液、苯胺蓝染色液等组成组成，是一种简便、廉价的纤维素染色液，染色后纤维素呈红色或蓝色。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、 常规石蜡切片，常规脱蜡至水。

2、 入海波溶液处理，稍水洗。

3、 入天青石蓝染色液染色。

4、 入Mayer 苏木素染色液染色。

5、 酸性分化液分化数秒，流水冲洗。

6、 95%的乙醇稍洗。

7、 入马休黄染色液染色，蒸馏水稍洗。

8、 入酸性红染色液染色，蒸馏水稍洗。

9、 磷钨酸溶液处理切片，直至胶原蛋白红色消失，蒸馏水稍洗。

10、入苯胺蓝染色液，染色或更长时间。

编号 名称DG0075 9×50mlStorage 试剂(A): 海波溶液 50ml RT 试剂(B): 天青石蓝染色液 50ml 4℃ 避光 试剂(C): Mayer 苏木素染色液 50ml 4℃ 避光 试剂(D): 酸性分化液 50ml RT 试剂(E): 马休黄染色液 50ml RT 避光 试剂(F): 酸性红染色液 50ml RT 避光 试剂(G): 磷钨酸溶液 50ml RT 避光 试剂(I): 弱酸溶液 50mlRT使用说明书1份11、弱酸溶液稍洗。

12、95%的乙醇快速脱水。

无水乙醇脱水。

13、二甲苯透明3次，每次1~2min，中性树胶封固。

染色结果：纤维素红色(新鲜纤维素可呈黄色，陈旧性纤维素可呈蓝色)细胞核蓝色-灰色红细胞黄色胶原纤维蓝色注意事项：1、磷钨酸处理切片一般需要5～10min，至少大于5min才能出现选择性。

微晶纤维素微晶纤维素是一种纯化的、部分解聚的纤维素，白色、无臭、无味，有多孔微粒组成的结晶粉末。

微晶纤维素广泛应用于制药、化妆品、食品等行业，不同的微粒大小和含水量有不同的特征和应用范围。

制药工业：常用用作吸附剂、助悬剂、稀释剂、崩解剂。

微晶纤维素广泛应用于药物制剂，主要在口服片剂和胶囊中用作稀释剂和粘合剂，不仅可用于湿法制粒也可用于干法直接压片。

还有一定的润滑和崩解作用，在片剂制备中非常有用。

食品工业：在食品工业上可作重要的功能性食品基料—膳食纤维素，是一种理想的保健食品添加剂。

（1）保持乳化和泡沫的稳定性（2）保持高温的稳定性（3）提高液体的稳定性（4）营养补充剂和增稠剂（5）其他用途：化妆品：作为拼料，用于多种化妆品、皮肤治疗与护理用品，及清洁洗涤剂的制造。

制法：微晶纤维素可用稀无机酸溶液将α-纤维素控制水解制得，α-纤维素可从含纤维素植物的纤维浆制得。

水解后的纤维素经过滤、提纯、水浆喷雾干燥形成干的。

粒径分布广泛的多孔颗粒。

安全性：本品广泛用在口服制剂和食品中，是相对无毒和无刺激性的物质。

口服不吸收，几乎无潜在毒性。

大量使用可引起轻度腹泻，作为药物制剂辅料无困难。

滥用含纤维素的制剂，如吸入或注射给药，都会导致纤维素肉芽肿。

稳定性：本品为有吸湿性，稳定的物质。

大批量贮存应在阴凉干燥的密闭容器内。

微晶纤维素是一种纯净的纤维素解聚产物。

由天然纤维素制备，是无臭无味的结晶粉末。

产品在医药工业上可用作药物赋形剂和药片崩解剂；在食品工业上可作重要的功能性食品基料—膳食纤维素，是一种理想的保健食品添加剂；在涂料工业上利用它的触变性和增稠性可作为水基涂料的增稠剂和乳化剂；在化妆品上它集填料、增稠和乳化作用于一身，对油性物质有很好的乳化能力；在湿法制造人造革生产中作为增粘和填料使用，使人造革表面平滑、厚度均匀。

由此可见，微晶纤维素的用途十分广泛，国内对该产品的需求将不断增加。

超细食用纤维素，即微晶纤维素，简称MCC，是天然纤维素在酸性介质中水解使分子量降低到一定的范围成为尺寸约10μm左右的颗粒状粉末产品。

叶片纤维素染色引言：纤维素是植物细胞壁中最主要的成分之一，它在植物的生长和发育过程中起着重要的作用。

为了研究纤维素的分布和组成，科学家们发展了多种染色技术，其中叶片纤维素染色是一种常用且有效的方法。

本文将介绍叶片纤维素染色的原理、方法和应用。

一、原理叶片纤维素染色的原理是利用特定的染料与纤维素发生化学反应，使纤维素显色。

常用的染料有伊红、甲苯红、苏木精等。

这些染料能与纤维素形成氢键或离子键，从而使纤维素呈现出不同的颜色。

二、方法1. 前处理：将待染色的叶片进行固定处理，常用的固定剂有醋酸乙酯和福尔马林。

固定剂的选择要根据实验需要和样品特点进行确定。

2. 染色液制备：根据实验需要选择合适的染料和染色液配方。

一般情况下，将染料溶解于适量的缓冲液中，加入适量的酒精和水，制成染色液。

3. 染色：将固定的叶片放入染色液中，浸泡一定时间，使染料充分渗透进入叶片组织中。

染色时间的长短可以根据实验需要进行调整。

4. 清洗：染色完成后，用缓冲液或蒸馏水洗净叶片，以去除多余的染料。

洗涤时间和次数要根据染色程度进行适当调整。

5. 保存：将染色好的叶片放入适当的保存液中，以避免颜色失真或退色。

三、应用1. 纤维素分布研究：通过叶片纤维素染色，可以观察和分析纤维素在叶片组织中的分布情况。

不同类型和部位的叶片纤维素含量和分布情况可能存在差异，通过染色可以直观地展示这些差异。

2. 纤维素含量测定：叶片纤维素染色可以结合显微镜观察和图像分析技术，对纤维素含量进行定量测定。

这对于研究纤维素合成和代谢的过程非常重要。

3. 病理研究：染色技术可以帮助研究者观察和分析叶片组织中纤维素的变化，从而揭示植物在病理过程中纤维素的作用和调控机制。

4. 新材料研发：叶片纤维素染色可以为新材料的研发提供重要的参考。

通过对纤维素的染色观察，可以了解纤维素的形态和分布，为新材料的设计和制备提供指导。

结论：叶片纤维素染色是一种常用的研究方法，它可以通过染色技术直观地观察和分析叶片组织中纤维素的分布和组成。