重组人肿瘤坏死因子-α对Lewis肺癌移植小鼠体内肿瘤细胞抑制的作用重点

农业生物技术学报Journal of Agricultural Biotechnology 2004,12(6):644~647*基金项目：国家教委博士点基金项目（No.1998071232)资助。

林亚秋:女,1976年生,硕士研究生。

**通讯作者。

Author for correspondence.E-mail:<******************>.收稿日期：2003-12-31接受日期:2004-03-16·研究论文·肿瘤坏死因子-α诱导大鼠脂肪细胞凋亡*林亚秋李瑞文孙超陈国柱杨永青孟德连杨公社**（西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室,杨凌712100）摘要：采用光学显微镜、DNA 琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术3种技术，检测了不同浓度肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠脂肪细胞凋亡的影响。

结果表明，①TNF-α诱导脂肪细胞凋亡的形态学变化与浓度呈线性相关，在5~20ng/mL 范围内，浓度越大，凋亡特征越明显。

②5ng/mLTNF-α处理有明显的形态学变化，但电泳结果未见梯状条带，说明细胞凋亡的形态学变化早于细胞凋亡的生化特征性改变。

③TNF-α诱导脂肪细胞凋亡在5~20ng/mL 浓度范围内存在剂量-效应关系，5，10，15和20ng/mL TNF-α处理组与对照组相比差异极显著（<0.01），10ng/mL 与15和20ng/mL 处理组之间差异不显著（>0.05），以10ng/mL 为最佳诱导浓度。

关键词：肿瘤坏死因子-α；脂肪细胞；凋亡Rat Adipocyte Apoptosis Induced by Tumor Necrosis Factor-αLIN Ya-Qiu LI Rui-Wen SUN Chao CHEN Guo-ZhuYANG Yong-Qing MENG De-Lian YANG Gong-She**(Laboratory of Animal Fat Deposition and Musle Development,Northwest Sci-tech Universityof Agriculture and Forestry ，Yangling 712100，China)The effects of tumor necrosis factor-α(TNF-α)at different concentration levels on rat adipocyte apoptosis were detect-ed by optical microscopy,agarose gel electrophoresis and flow cytometry methods.The morphologic changes of rat adipocyte apopto-sis induced by TNF-αwere correlated linearly with the concentrations of TNF-αwithin a range from 5to 20ng/mL,and the higher concentration of TNF-αcould induce more obvious apoptosis.The morphologic changes of rat adipocytes treated by 5ng/mL TNF-αwere clearly shown,but their DNA ladders didn't appear by the DNA electrophoresis analysis,indicating that the morphologic changes occurred earlier than the biochemical changes.TNF-αinduced the rat adipocyte apoptosis in a dose-dependent manner within a concentration range from 5ng/mL to 20ng/pared with the control,the apoptotic effect induced respectively by 5,10,15and 20ng/mL TNF-αwas significantly difference (<0.01),but the effect among 10,15and 20ng/mL TNF-αtreatments was not dif-ference (>0.05).Thus the optimum concentration of TNF-αinducing apoptosis was determined at the level of 10ng/mL.tumor necrosis factor-α；adipocyte ；apoptosisCarwell 等[1]1975年发现了肿瘤坏死因子(tumornecrosis factor,TNF)，以后把由单核巨噬细胞和淋巴细胞产生的细胞毒因子，分别命名为TNF-α和TNF-β。

肿瘤坏死因子基因转导的肿瘤疫苗对小鼠机体免疫的影响覃新干;陆云飞;林进令;邱庆明;曾健【期刊名称】《广西医科大学学报》【年(卷),期】2003(020)001【摘要】目的:用肿瘤坏死因子基因转导的人肝癌细胞作为肿瘤疫苗,研究其对小鼠机体免疫活性的影响.方法:小鼠分5组,采用经60Co照射的含人肿瘤坏死因子基因的人肝癌细胞(BEL-7404-TNF-60Co)、未经60Co照射的含人肿瘤坏死因子基因的人肝癌细胞(BEL-7404-TNF)、经60Co照射的人肝癌细胞(BEL-7404-60Co)、未经60Co照射的人肝癌细胞(BEL-7404)和生理盐水分别接种小鼠,用MTT法检测各组小鼠脾脏NK细胞活性,用SABC免疫组化法检测T淋巴细胞亚群.结果:肿瘤疫苗接种小鼠后, BEL-7404-TNF-60Co组小鼠脾脏NK细胞活性及T淋巴细胞亚群CD+4、CD+8增高,与BEL-7404组、BEL-7404-60Co组、生理盐水组相比差异有显著意义(P<0.05、P<0.01).BEL-7404-TNF-60Co组和BEL-7404-TNF组相比,NK细胞活性、T淋巴细胞亚群CD+4、CD+8均无显著差异(P＞0.05).结论:肿瘤坏死因子基因转导的肿瘤疫苗具有提高小鼠机体免疫力的作用.【总页数】4页(P58-61)【作者】覃新干;陆云飞;林进令;邱庆明;曾健【作者单位】广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,南宁,530021【正文语种】中文【中图分类】R73-36+2【相关文献】1.肿瘤坏死因子α基因转导的肿瘤浸润淋巴细胞体外生物学活性及不同转输方式的比较 [J], 关俊宏;于宏伟;潘尉然;杨涌杰;王成林;任长山;陈红;隋承光2.^(60)Co照射对肿瘤坏死因子基因转导的人肝癌细胞的增殖及TNF-α分泌的影响 [J], 陆云飞;覃新干3.^(60)Co照射对肿瘤坏死因子基因转导的人肝癌细胞增殖的影响 [J], 陆云飞;覃新干4.肿瘤坏死因子α基因转导的人肝癌细胞疫苗对小鼠肝癌移植瘤的影响 [J], 陆云飞;覃新干;曾健;林进令;廖清华5.肿瘤坏死因子α基因转导人脑胶质瘤浸润淋巴细胞的抗肿瘤活性研究 [J], 吴幼章;王文宏;陈华群;李洪福;倪黎;汪承亚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

重组人血管内皮抑制素对小鼠Lewis肺癌肿瘤抑制作用李忠义;刘江秋;徐璐;刘万兴;夏结来;汪军远【期刊名称】《中国肿瘤生物治疗杂志》【年(卷),期】2003(10)4【摘要】目的:研究重组人血管内皮抑制素(rhu-Endostatin)对小鼠Lewis肺癌肿瘤生长的抑制作用,寻找其量效关系及其作用机制。

方法:每只小鼠剃毛背部皮下接种Lewis肺癌细胞,待肿瘤长至100mm^3左右时,随机分为低、中、高3个剂量组,每次分别注射rhu-Endostatin5mg/(kg·d),15mg/(kg·d)或30mg/(kg·d),每天1次,连续21d。

同时设置生理盐水对照组和注射用环磷酰胺[100mg/(kg·d)]治疗对照组。

于第22天断颈处死小鼠,称皮下肿瘤的重量,并取脑、肺、肝、脾和肾切片做病理学检查。

结果:血管内皮抑制素治疗组的曲线下面积明显小于肿瘤对照组(P<0.01)。

病理切片检查显示,治疗组肿瘤有大面积的坏死,瘤周毛细血管消失。

结论:rhu-Endostatin可明显抑制小鼠Lewis肺癌肿瘤的生长(高剂量组可达58.8％)、转移和新生毛细血管的形成。

【总页数】3页(P274-276)【关键词】Lewis;肺癌;血管内皮抑制素;肿瘤转移【作者】李忠义;刘江秋;徐璐;刘万兴;夏结来;汪军远【作者单位】沈阳军区军事医学研究所;辽宁肿瘤生物基因治疗中心;鞍山曙光医院;第四军医大学统计学教研室【正文语种】中文【中图分类】R734.2【相关文献】1.重组人血管内皮抑素联合放疗对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及VEGF表达的影响[J], 王慧敏;戈伟;曹德东;郑永法;介芳芳;何渡;胡科;张金忠2.重组人血管内皮抑制素联合放射治疗对lewis肺癌小鼠的作用 [J], 何渡;戈伟;李长虎;赵振宇;徐细明;杨芳3.重组人血管内皮抑制素联合顺铂对Lewis肺癌小鼠肿瘤微环境的影响 [J], 汤建华;张鹤鸣;庞茜茜;任峻青;张志华4.重组人血管内皮抑制素联合培美曲塞对非小细胞肺癌患者血清肿瘤标志物及血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子的影响 [J], 管伟;陈健;何俊明;楼国梁;项信青;付印;胡江苇5.瘤内局部注射重组人血管内皮抑制素对小鼠Lewis肺癌抑瘤作用的研究 [J], 王丽芳;谷振芳;王宝成;崔巍;毕经旺因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

小鼠肿瘤组织中tnfa含量摘要：本研究旨在探讨小鼠肿瘤组织中TNF-α（肿瘤坏死因子-α）的含量，并分析其与肿瘤发生发展的关系。

通过使用ELISA（酶联免疫吸附试验）方法，我们检测了小鼠肿瘤组织中TNF-α的含量。

实验结果显示，小鼠肿瘤组织中TNF-α含量显著高于正常组织。

这一结果提示，TNF-α可能在小鼠肿瘤发生发展中发挥重要作用。

一、引言肿瘤坏死因子-α（TNF-α）是一种具有广泛生物活性的细胞因子，参与免疫应答、炎症反应等多种生理过程。

近年来研究表明，TNF-α在肿瘤发生发展中也发挥重要作用。

然而，关于小鼠肿瘤组织中TNF-α含量的研究尚不多见。

因此，本研究旨在通过实验方法检测小鼠肿瘤组织中TNF-α的含量，并探讨其与肿瘤发生发展的关系。

二、材料与方法1.实验动物与肿瘤模型2.选取健康成年小鼠作为实验对象，建立小鼠肿瘤模型。

将实验小鼠随机分为两组：对照组（未接种肿瘤细胞）和实验组（接种肿瘤细胞）。

3.样本采集与处理4.采集实验小鼠肿瘤组织及对应正常组织样本，处理后保存待测。

5.TNF-α含量检测6.采用ELISA方法检测小鼠肿瘤组织中TNF-α的含量。

按照试剂盒说明书操作，测量各样本的吸光度值，计算TNF-α浓度。

7.数据分析8.使用统计软件对实验数据进行处理和分析，比较两组间TNF-α含量的差异，分析其与肿瘤发生发展的相关性。

三、结果实验数据显示，实验组小鼠肿瘤组织中TNF-α含量明显高于对照组正常组织（P<0.05）。

具体数据如表1所示：表1：小鼠肿瘤组织与正常组织中TNF-α含量比较为实验组平均TNF-α含量；Y1为对照组平均TNF-α含量。

图1：小鼠肿瘤组织与正常组织中TNF-α含量柱状图【请在此处插入柱状图】四、讨论本研究结果表明，小鼠肿瘤组织中TNF-α含量显著高于正常组织，提示TNF-α可能参与了肿瘤的发生发展过程。

这与其他相关研究的结果一致，表明TNF-α在肿瘤发展中的重要作用。

肿瘤坏死因子-α对人肺癌A549细胞的放疗增敏作用夏晖;于长海;张宜明;俞建琦;李捷;张文;李英杰【摘要】目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在人肺癌A549细胞放射治疗中的增敏作用.方法单独γ射线辐照细胞或联合应用TNF-α处理细胞,通过MTT法检测人肺癌A549细胞存活生长曲线,采用流式细胞术分别检测细胞凋亡和细胞周期的变化,并利用Western blot法分析细胞中Caspase-3蛋白表达的变化.结果与单独γ射线作用相比,TNF-α和γ射线联合应用能明显抑制人肺癌A549细胞的生长,同时诱导和促进A549细胞的凋亡发生,调整细胞周期的变化,这一过程与细胞中Caspase-3蛋白表达的增加相关.结论 TNF-α可以增加入肺癌A549细胞的放疗敏感性,提高γ射线对人肺癌A549细胞的放射治疗效果.%Objective To assess the effects of tumor necrosis factor-α (TNF-α) in enhancing the radiosensitivity of lung cancer cells in vitro.Methods A549 cells were exposed to y-ray with or without TNF-α treatment.MTT assay was used to evaluate the cell viability,and flow cytometry was performed to assess the cell apoptosis.Western blotting was used to observe the expression of caspase-3 protein in the exposed cells.Results Compared with the exposed cells without TNF-α treatment,the cells treated with TNF-α showed significantly suppressed cell proliferation,increased the cellapoptosis,altered cell cycle,and increased caspase-3 protein expression after y-ray exposure.Conclusion TNF-α can enhance the radiosensitivity of A549 cells to increase the efficiency of radiotherapy with y-ray irradiation.【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2012(032)004【总页数】4页(P565-568)【关键词】肿瘤坏死因子-α;肺癌;放疗增敏【作者】夏晖;于长海;张宜明;俞建琦;李捷;张文;李英杰【作者单位】中国人民解放军总医院第一附属医院胸心外科,北京100048;中国人民解放军总医院第一附属医院胸心外科,北京100048;中国人民解放军总医院第一附属医院胸心外科,北京100048;中国人民解放军总医院第一附属医院胸心外科,北京100048;中国人民解放军总医院第一附属医院胸心外科,北京100048;中国人民解放军总医院第一附属医院胸心外科,北京100048;中国人民解放军总医院第一附属医院胸心外科,北京100048【正文语种】中文【中图分类】R34;R734.2放射治疗是肺癌治疗的重要手段之一，然而，不同于对放疗敏感的小细胞肺癌（SCLC），非小细胞肺癌（NSCLC）对放疗不敏感，因此，放疗增敏越来越成为大家关注的热点，国内外的研究人员正在努力寻找和尝试各种放疗增敏的方法[1]。

重组人肿瘤坏死因子对鼻咽癌细胞生长抑制的研究焦伟【期刊名称】《广西医科大学学报》【年(卷),期】1999(16)5【摘要】目的:研究重组人肿瘤坏死因子(rhTNF-α)对鼻咽癌细胞株CNE3生长的抑制作用.方法:应用MTT比色法,选择CNE3细胞生长指数期,检测rhTNF、rhIL-2(重组白介素-2)单用或合用在不同剂量、不同时间的抑制作用.结果: rhTNF-α与CNE3 细胞培养24h,抑制率仅有9.38%.当作用时间延长到72h,抑制率达到30.7%.用量由40 u/2×105细胞增加到5000u/2×105时,对CNE3细胞的生长抑制率也由3.35%增长到33.8%.结论:rhTNF-α对鼻咽癌细胞的生长的抑制作用有时相和剂量的依赖关系.rhTNF与rhIL-2合用对CNE3细胞生长的抑制有叠加作用.【总页数】3页(P563-565)【作者】焦伟【作者单位】广西壮族自治区人民医院,南宁,530021【正文语种】中文【中图分类】R730.5【相关文献】1.重组溶瘤腺病毒rAd-CMV-E1A的构建及其对人鼻咽癌细胞放射增敏的研究 [J], 汪茜;朱苹;吴丽芳;陈建武;洪金省;应学明;赵建华2.奥沙利铂对人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞生长抑制和凋亡作用的研究 [J], 袁渊;楚建军;肖大江;朱国臣3.重组人肿瘤坏死因子-α联合肿瘤坏死因子受体1基因转染杀伤舌癌细胞的实验研究 [J], 刘大庆;司徒镇强;曹云新;许彦鸣;于翠娟;王成济;杨安钢4.重组人肿瘤坏死因子对白血病细胞生长抑制的研究 [J], 左大鹏5.精油对人鼻咽癌细胞生长抑制的研究 [J], 孙伟;肖家祁;王淳凯;徐志敏;瞿伟菁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

小鼠肿瘤组织中tnfa含量-回复小鼠肿瘤组织中的TNF-α含量是指小鼠体内的肿瘤块组织中是否存在或者表达着一种名为肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α）的蛋白质。

TNF-α是一种重要的炎症介质，参与了许多炎症反应和免疫调节过程。

研究小鼠肿瘤组织中的TNF-α含量可以帮助我们了解其在肿瘤生长和免疫反应中的作用机制。

第一步：什么是肿瘤坏死因子-α（TNF-α）肿瘤坏死因子-α是一种由免疫细胞（如白细胞和巨噬细胞）合成并释放的蛋白质，可以分泌到体内循环系统中或局部组织中。

TNF-α对细胞具有多种作用，例如促进免疫细胞的活化、诱导炎症反应、调节细胞生长和凋亡等。

在炎症反应中，TNF-α可以招募免疫细胞到达炎症部位，促进炎症反应的发生和发展。

除了免疫调节作用外，TNF-α还被发现在肿瘤发生、生长和转移过程中发挥了重要作用。

第二步：研究小鼠肿瘤组织中TNF-α含量的意义研究小鼠肿瘤组织中的TNF-α含量可以帮助我们了解其在肿瘤生长和免疫反应中的作用机制。

首先，肿瘤细胞可以释放TNF-α来引起炎症反应，进而招募免疫细胞到达肿瘤组织中，形成细胞浸润。

这些免疫细胞可以通过吞噬肿瘤细胞或者释放细胞毒素的方式来抑制肿瘤的生长。

因此，肿瘤组织中TNF-α的含量可能与肿瘤的体积、生长速度以及预后等有关。

其次，肿瘤组织中的TNF-α还可以直接作用于肿瘤细胞，影响其增殖、凋亡和迁移等生物学过程。

一些研究发现，TNF-α可以通过激活其受体信号通路，诱导肿瘤细胞凋亡，从而抑制肿瘤的生长。

然而，TNF-α过度的表达也可能导致肿瘤细胞产生更多的炎症因子，形成更多的血管和免疫逃逸机制，促进肿瘤的生长和转移。

第三步：如何研究小鼠肿瘤组织中TNF-α含量研究小鼠肿瘤组织中TNF-α含量一般可以通过以下实验方法来进行：1.酶联免疫吸附实验（ELISA）：ELISA是一种常用的实验方法，可以定量测定细胞培养上清液或动物体内液体中的目标蛋白质。

养肺控瘤方对Lewis晚期肺癌小鼠的抑瘤作用及对白介素—2和肿瘤坏死因子—α表达的影响作者：沈水杰徐玲俊来源：《世界中医药》2018年第02期摘要目的：观察养肺控瘤方对Lewis晚期肺癌小鼠模型的抑瘤作用及对血清白介素-2（IL-2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。

方法：选取30只C57BL/6雄性小鼠，采用胸腔注射Lewis肺癌细胞悬液制作Lewis晚期肺癌小鼠。

造模后随机分为6组：空白对照组、顺铂组、等效剂量中药组、高剂量中药组、顺铂+等效剂量中药组、顺铂+高剂量中药组，每组5只。

计算各组抑瘤率，并采用酶联免疫吸附试验检测血清中IL-2、TNF-α的表达。

结果：顺铂组、等效剂量中药组、高剂量中药组、顺铂+等效剂量中药组、顺铂+高剂量中药组的抑瘤率分别为57.52%，30.88%，51.15%，67.73%，82.75%。

与空白对照组比较，各观察组血清IL-2、TNF-α水平均得到显著下降（P关键词养肺控瘤方；Lewis晚期肺癌；小鼠；抑瘤作用；白介素-2；肿瘤坏死因子-αAbstract Objective：To observe the tumor-inhibitory effect of Yangfei Kongliu Fang and its effect on the expression of serum IL-2 and TNF-α in mouse models with advanced Lewis lung carcinoma. Methods：By using Lewis lung carcinoma cell suspensions via intrapleural injection， 30 male C57BL/6 mice were prepared into mouse models with advanced Lewis lung carcinoma. After model establishment， the mice were randomly divided into 6 groups： normal saline group （group C/control group）， cisplatin group （DDP group）， group treated with an equivalent dose of Chinese medicinals （group L）， group treated with a high dose of Chinese medicinals （group H）， group treated with cisplatin+equivalent dose of Chinese medicinals （group L+DDP）， and group treated with cisplatin+high dose of Chinese medicinals （group H+DDP）. Each group contained 5 mice and underwent corresponding intervention. Then， the tumor inhibition rate in each group was calculated， and the ELISA method was used to measure the expression of serum IL-2 and TNF-α. Results：The tumor inhibition rates in the DDP group， group L， group H， group L+DDP and group H+DDP were 57.52%， 30.88%， 51.15%， 67.73% and 82.75%， respectively. Compared with the control group， each treatment group achieved significant decreases in the levels of serum IL-2 and TNF-α （PKey Words Yangfei Kongliu Fang， Mouse with advanced Lewis lung carcinoma， Tumor-inhibitory effect， IL-2， TNF-α中图分类号：R289.5文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2018.02.043原发性支气管癌起源于支气管黏膜或腺体，简称肺癌，是临床最为常见的恶性肿瘤，近年来其发病率、死亡率呈逐渐上升趋势[1]，肺癌在城市肿瘤死亡顺序中已经由原来的第4位上升至第1位。

小鼠胚胎成纤维细胞成熟化过程中肿瘤坏死因子α的作用杨文玖;邹云雯;王志杰【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2010(014)011【摘要】背景:近年的研究表明,肿瘤坏死因子α对不同组织成纤维细胞的作用具有组织特异性及浓度依赖性.目的:观察肿瘤坏死因子α及其信号传导途径中特异性激酶抑制剂对小鼠胚胎成纤维细胞成熟化所起的作用.方法:体外培养小鼠胚胎成纤维细胞,将细胞分为3组:第1组用含体积分数2%血清的DMEM高糖培养基培养作为空白对照组;第2组用含100 μg/L肿瘤坏死因子α的培养基培养;第3组先加入质量浓度为50 μg/L的Anti-TNFRSF1B作用1 h后,倒出培养基再加入含有肿瘤坏死因子α的培养基继续培养.采用RT-PCR法测定各组Ⅰ型胶原蛋白和基质金属蛋白酶3 mRNA表达、Western Blot法测定各组Ⅰ型胶原蛋白和基质金属蛋白酶3蛋白表达.结果与结论:小鼠胚胎成纤维细胞在一定质量浓度肿瘤坏死因子α作用下,其信号传导途径特异性激酶发生磷酸化或蛋白被激活,信号通路被激活,促进基质金属蛋白酶3的活化,明显降低Ⅰ型胶原的表达.加入其信号传导途径的抑制剂Anti-TNFRSF1B后,肿瘤坏死因子α的效应得到了一定的抑制,但并未完全消除,这更进一步证明肿瘤坏死因子α对小鼠胚胎成纤维细胞活化的作用.【总页数】4页(P2072-2075)【作者】杨文玖;邹云雯;王志杰【作者单位】青岛大学医学院附属医院脊柱外科,山东省青岛市,266003;青岛大学医学院附属医院脊柱外科,山东省青岛市,266003;青岛大学医学院附属医院脊柱外科,山东省青岛市,266003【正文语种】中文【中图分类】R318【相关文献】1.肿瘤坏死因子-α在缓激肽开放血肿瘤屏障过程中的作用 [J], 秦丽娟;薛一雪;谷艳婷;王东春;张志勇;张田;孙娜2.球形Ni(OH)2生长过程中的Ostwald熟化作用 [J], 彭美勋;沈湘黔;危亚辉3.肿瘤坏死因子α在抗鼠衣原体生殖道感染过程中的作用 [J], 陈曦; 刘璐瑶; 张旭; 陆春雪; 陈利; 全淑芬; 陈丽丽4.肿瘤坏死因子-α对NIH3T3细胞成熟化作用的影响 [J], 杨文玖;邹云雯;王志杰;褚言琛5.白细胞介素-1β、白细胞介素-6与肿瘤坏死因子-α在非酒精性脂肪性肝病发展过程中的作用 [J], 赵鹏;金海;朱加兴(综述);庹必光(审校)因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。