熊果酸提取分离方法进展

摘要：以苦丁茶为研究对象，采用大孔吸附树脂对苦丁茶中熊果酸的粗提取物进行分离纯化。

对4种不同型号的大孔吸附树脂进行静态实验考察，筛选出最佳树脂，并以该树脂对苦丁茶中的熊果酸进行动态吸附及洗脱性能的研究，优化大孔树脂分离熊果酸的工艺参数。

实验筛选出了以HZ-816型树脂为上样树脂，该树脂纯化熊果酸的优化工艺条件为：吸附流速4BV∕h,上样浓度1.40mg∕m1.,上样体积225m1.,树脂吸附量可达18.697mg/g；以90%乙醇为洗脱剂，洗脱流速4BV∕h,洗脱剂用量10BV,解吸率可达58.57%,再减压浓缩解吸液得干膏，纯度为48.26%o关键词：苦丁茶；熊果酸；大孔树脂；分离纯化；吸附；解吸0引言苦丁茶，别称茶丁、富丁茶。

苦丁茶中含有多种活性成分，如维生素、氨基酸、挥发油、黄酮类化合物、微量元素以及多酚类物质等。

其味苦、性凉，具有生津止渴、清热消暑、抑癌防癌、活化血脉等多种生物学效应。

熊果酸(UA),又名乌苏酸，属于五环三菇类化合物。

在自然界中分布较广，如在女贞、熊果、枇杷和毛泡桐等天然植物中均有一定含量存在。

熊果酸纯品为白色或类白色针状晶体或结晶粉末。

熊果酸本身具有多种很强的开发价值，比如具备抑制肿瘤、抗炎镇静、保护肝脏损伤、抗糖尿病、抑制细菌活性、抗病毒传播等药理作用。

目前，广泛应用于熊果酸分离纯化的方法有：硅胶柱色谱吸附及分步洗脱法和有机溶剂萃取法。

然而，上述方法均存在工艺流程复杂、收率低，且使用的有机溶剂有毒有害等问题。

大孔树脂分离技术，具有工作效率高、吸附容量大、可再生等诸多优点，且采用乙醇作为溶剂进行梯度洗脱，所得产物绿色环保，安全性高，已逐步在中药制药工艺中得到应用。

1 材料与方法1.1实验材料与试剂实验材料与试剂如表1所示。

«1实验材料后试名称，奴格•生产厂家。

苦丁茶药材50“袋•，产自海南五指山，黑果酸标唐品标准品（98%>P上海同田生物技术有限公司。

•—AR（分析凭）“国药具团化学试用有限公司。

实验仪器与材料


实验器材：超声波仪 ，紫外光谱仪，红外光 谱仪，高效液相色谱仪。 原料与试剂：地榆粉 500g，，薄层层析硅胶 G ，95%乙醇，1%氢氧化钠水溶液 ，石油醚 ， 甲醇 ，活性炭 ，环乙烷 ，氯仿 ，乙酸乙酯 ， 对二甲氨基苯甲醛 ，浓硫酸 。
参考文献



韩小龙，《从枇杷叶中提取、分离熊果酸的工艺研 究》2005 – 西北大学 于明明， 周富强， 刘军海，《熊果酸提取工艺的研 究进展》，氨基酸和生物资源，AMINO ACIDS AND BIOTIC RESOURCES，2009年31期 谷芳芳，《山楂叶中熊果酸提取分离与测定研究》， 中南大学 文小静， 张永利; 《熊果酸的提取工艺研究》，实 用药物与临床, SHIYONG PHARMACY AND CLINICAL REMEDIES , 2006年9期
纯度测定：薄层色谱法

分别取样品用乙醇溶解后制成1 g/L 的溶液，用毛细管分别点样适 量于同一硅胶G薄层板上，以环己 烷一氯仿一乙酸乙酯一甲醇(20：5： 8：0．5)为展开剂，展开(展距 9．0 cm)，取出、晾干喷以 10% 硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑 点显色清晰，置日光灯下检视。观 察样品色谱中，是否为单一斑点且 无其他斑点则证明样品为纯的熊果 酸.， 吴杰， 骆妃静，《山楂中熊果酸的提取与 分离》，西北药学杂志，NORTHWEST PHARMACEUTICAL JOURNAL ，2009年24期相关文 献 张如新， 羊卫平， 樊勤，《超声波法提取山茱萸中 熊果酸的工艺研究》，湖南师范大学自然科学学报， JOURNAL OF NATURAL SCIENCE OF HUNAN NORMAL UNIVERSITY，2008年31期 李丽， 陈剑锋， 林国荣， 黄娟， 陈浩， 郭养浩， 《枇杷叶中熊果酸的分离纯化》，福州大学生物工 程学院,福建,福州 郑艳，苏丹，《女贞子中熊果酸的提取工艺研究》， 陕西科技大学学报（自然科学版）

熊果酸含量测定方法研究进展（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【关键词】熊果酸；含量测定方法熊果酸（ursolie acid，UA）又名乌索酸、乌苏酸，属于三萜类化合物，广泛存在于熊果、白花蛇舌草、女贞子、乌梅等天然植物和草药中，具有抗炎、护肝、降血脂等多种生物学活性［1～4］。

目前许多中药材及其制剂常选用熊果酸的含量作为其质量控制指标。

本文对熊果酸含量测定方法的研究进展综述如下。

1 分光光度法李国章等［5］建立了湘产3种苦丁茶中熊果酸含量测定的分光光度法，具体操作是取苦丁茶经索氏提取器提取后，加入5%香草醛－冰醋酸、高氯酸显色，在波长548 nm处测定吸光度，结果熊果酸在4～20 μg·ml-1浓度范围内线性关系良好，加样回收率为98.96%。

罗启剑等［6］采用同样方法测定了连钱草中熊果酸含量，结果熊果酸在0～18 μg·ml-1浓度范围内线性关系良好，加样回收率为100.64%。

2 薄层扫描法白洁等［7］采用双波长薄层扫描法测定了夏枯草中熊果酸的含量，具体操作为取夏枯草药材粗粉经95％乙醇超声提取两次，滤液用70℃水浴蒸干，残渣用石油醚浸泡两次，挥干溶剂，用95％乙醇溶解后测定。

采用硅胶G板，以环己烷－氯仿－醋酸乙酯（20∶5∶8）为展开剂，用10％硫酸乙醇溶液显色，选用λS=540 nm，λR=700 nm进行双波长反射式锯齿扫描，结果熊果酸在0.314～1.570 μg范围内线性关系良好，加样回收率为99.3％。

张军等［8］建立了狼疮静颗粒中熊果酸的薄层扫描法测定方法，具体操作为取狼疮静颗粒用乙醚萃取3次，合并乙醚萃取液水浴蒸干乙醚，残留物加无水乙醇－氯仿（3∶2）混合液溶解后测定，以环己烷－氯仿－醋酸乙酯－甲酸（20∶5∶8）为展开剂，用10％的硫酸乙醇液显色，以λS=520 nm，λR=700 nm进行双波长薄层扫描，结果熊果酸在0.498～3.084 μg范围内线性关系良好，加样回收率为97.91％。

从苹果皮中提取和分离熊果酸研究摘要：以苹果（Malus pumila Mill.）皮为原料，以NaOH 的乙醇水溶液为溶剂进行超声辅助提取，并采用响应面的方法对提取条件进行优化，提取液体经浓缩，加盐酸调节pH 3.0，过滤，用10%的乙醇水溶液洗涤滤饼、滤饼经干燥、石油醚脱脂、乙醇结晶和重结晶后，可得到高纯度的熊果酸晶体。

该工艺所用设备和原料易得，方法简单，易于实现工业化生产，通过该方法可使苹果皮变废为宝，减少环境污染。

关键词：苹果（Malus pumila Mill.）皮；熊果酸；提取；分离中图分类号：S661.1 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2018）11-0079-04DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2018.11.019Abstract：Apple（Malus pumila Mill.）peel was extracted with ultrasound assistance using ethanol aqueous solution containing NaOH as extracting solvent，the extraction conditions were optimized by response surface method. The extract was concentrated，and its pH was justified to 3.0 with hydrochloric acid. The mixture was filtrated and filter cake was washed with 10% ethanol aqueous solution. The filter cake wasdried，and then degreased by petroleum ether. The residue was crystallized and recrystallized in ethanol to obtain ursolic acid crystal. This method was very simple and easy to scale up，which can make apple peel valuable and can reduce environmental pollution.Key words：Apple（Malus pumila Mill.）peel；ursolic acid；extraction；separation苹果（Malus pumila Mill.）的生产和消费近年来持续增长，已成为全球产量第二的水果。