临床免疫学与检验重要知识点汇总
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医学免疫学重点知识归纳摘要:一、医学免疫学基本概念1.免疫系统的组成2.免疫应答的分类二、固有免疫1.概念和特点2.固有免疫细胞3.固有免疫的作用三、适应性免疫1.概念和特点2.适应性免疫细胞3.适应性免疫的作用四、免疫应答的调节1.免疫抑制2.免疫促进五、免疫学应用1.疫苗2.免疫治疗3.免疫检测正文:医学免疫学是一门研究人体免疫系统功能和机制的学科。
它涉及到人体对抗病原体入侵的防御机制,以及免疫应答的调节等方面。
本文将对医学免疫学的重点知识进行归纳。
一、医学免疫学基本概念免疫系统是人体防御病原体入侵的重要系统,由免疫器官、免疫细胞和免疫分子组成。
免疫应答分为固有免疫和适应性免疫,其中固有免疫是生物在长期进化中逐渐形成的,是机体抵御病原体入侵的第一道防线;适应性免疫是针对特定病原体的免疫应答,具有特异性和记忆性。
二、固有免疫固有免疫是生物在长期进化中逐渐形成的,具有非特异性和先天性特点。
它主要由吞噬细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞等固有免疫细胞组成,能够识别并清除病原体。
三、适应性免疫适应性免疫具有特异性和记忆性,主要由t细胞和b细胞组成。
t细胞分为辅助性t细胞和细胞毒性t细胞,能够识别并杀死感染细胞;b细胞能够产生抗体,结合病原体使其失去活性。
四、免疫应答的调节免疫应答的调节主要包括免疫抑制和免疫促进。
免疫抑制是指通过调节免疫细胞和分子的活性,降低免疫应答的强度;免疫促进是指通过调节免疫细胞和分子的活性,增强免疫应答的强度。
五、免疫学应用免疫学在医学领域有很多应用,如疫苗、免疫治疗和免疫检测等。
疫苗是通过引入病原体的抗原,诱导机体产生免疫应答,从而达到预防感染的目的;免疫治疗是通过调节免疫应答,治疗某些疾病,如癌症和自身免疫性疾病;免疫检测是通过检测免疫细胞和分子的活性,诊断某些疾病,如感染和免疫性疾病。
总之,医学免疫学是研究人体免疫系统功能和机制的学科,涉及到免疫应答、免疫调节和免疫学应用等方面。
概论+抗原抗体反应1 免疫学基本概念及其生物学功能;免疫:机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能免疫三大功能:免疫防御、免疫自稳、免疫监视中枢免疫器官(骨髓和胸腺)外周免疫器官(淋巴结、脾脏、扁桃体)免疫细胞:淋巴细胞(T,B,NK)、单核巨噬细胞、其他免疫应答细胞(中性粒、嗜酸性、嗜碱性和肥大细胞)免疫分子:免疫球蛋白(IgM,IgG,IgA,IgE,IgD),补体,细胞因子,细胞黏附分子,人类白细胞分化抗原免疫应答:机体免疫系统接受抗原刺激发生的一系列反应,并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。
过程:抗原的识别、处理、信息传递(识别阶段),免疫细胞的激活、增殖、分化(活化阶段)以及产生一系列的免疫效应因子(效应阶段)。
临床免疫学检验:研究免疫学检测理论、技术、应用,免疫疾病发病机制、免疫诊断、及防治的一门医学领域的应用学科。
免疫学检测技术的基础是抗原抗体反应,免疫学技术有凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应、中和反应和标记免疫反应五种类型。
免疫检验:1)利用免疫检测原理和技术检测免疫活性细胞、抗原、抗体、补体、细胞因子、细胞黏附分子等免疫相关物质;2)体液中的微量物质如激素、酶、血浆微量蛋白、血液药物浓度、微量元素。
临床免疫学:利用免疫学理论和技术研究疾病的免疫病理机制、诊断和鉴别诊断、疗效评价、预后判断和预防的多个分支学科的总称。
免疫性疾病:各种原因引起的机体免疫应答异常所致的疾病,包括超敏反应性疾病、自身免疫病、免疫缺陷病和免疫增生病。
感染免疫学:研究病原微生物与宿主相互关系从而控制感染的学科,传统免疫学核心。
肿瘤免疫学:研究肿瘤免疫原性、机体抗肿瘤的免疫效应及机体的免疫功能与肿瘤发生、发展的相互关系以及肿瘤免疫诊断与防治的学科。
移植免疫学:研究移植物与宿主相互关系从而选择移植物和延长移植物存活的学科。
2 血清学反应的概念;抗体主要存在于血清中,体外的抗原抗体反应称为血清学反应。
抗原抗体反应:抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应,特异性取决于抗原表位和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性,并通过静电引力、范德华引力、氢键结合力和疏水作用力等非共价键结合在一起。
第一章概论1. 免疫学(Immunology)是研究免疫系统的结构与功能,并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究,探讨有效的免疫措施,实现以防病、治病为目的的一门现代医学学科。
免疫学技术对推动免疫学的发展及基础与临床免疫学的结合起了重要作用。
学习免疫学的基本概念,了解临床免疫学的理论基础,掌握免疫技术的检测原理是学习和研究临床免疫学与免疫技术的重要保障。
第一节免疫学简介1. 免疫(immunity)是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能。
免疫系统与机体的其他系统相互配合,相互制约,共同维持机体在生命过程中的生理平衡。
一、免疫学概念与免疫应答1. 宿主体内的免疫系统能识别并清除从外环境中侵入的病原生物及其产生的毒素、内环境中因基因突变产生的肿瘤细胞、自身衰老残损的组织细胞或自身变性抗原,实现免疫防御、免疫自稳、免疫监视。
免疫防御——指机体排斥外源性异物的能力。
免疫自稳——指机体识别和清除自身衰变残损的组织细胞的能力,以维持正常内环境稳定。
免疫监视——指机体杀伤和清除异常突变细胞的能力,以监视和抑制恶性肿瘤在体内生长。
2. 免疫应答反应(immune response):是指机体免疫系统接受抗原刺激发生一系列反应,并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。
免疫应答的过程主要分为:识别阶段(recognition phase)——抗原识别处理传递信息活化阶段(activation phase)——免疫细胞活化增殖产生效应细胞、分子效应阶段(response phase)——执行效应功能3. 免疫应答效应大多为生理性,是机体对外来抗原或自身变性抗原的清除效应。
免疫应答反应过强时,可致机体组织或器官发生病理损伤,出现临床疾病。
二、免疫组织与器官1. 免疫系统(immune system)由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。
淋巴组织及免疫细胞分布于机体全身,执行免疫防卫功能,维持机体内环境正常的生理功能及动态平衡。
免疫学考试重点归纳(全面)1抗原抗体反应:是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。
抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力,其中疏水作用力最强,它是在水溶液中两个疏水基团相互接触,由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。
2亲和性(affinity):是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位(AD)之间的结合强度,取决于两者空间结构的互补程度。
3亲合力(avidity):是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度,它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。
4抗原抗体反应的特点:特异性、可逆性、比例性、阶段性。
5带现象(zone phenomenon):一种抗原-抗体反应的现象。
在凝集反应或沉淀反应中,由于抗体过剩或抗原过剩,抗原与抗体结合但不能形成大的复合物,从而不出现肉眼可见的反应现象。
抗体过量称为前带,抗原过量称为后带。
6免疫原(immunogen):是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
7免疫佐剂(immuno adjustvant):简称佐剂,是指某些预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
8半抗原(hapten):又称不完全抗原,是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性),而单独不能诱导抗体产生(无免疫原性)的物质。
当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。
9载体(carrier):结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。
10载体效应:初次免疫与再次免疫时,只有使半抗原结合在同一载体上,才能使机体产生对半抗原的免疫应答,该现象称为~。
11单克隆抗体(McAB):将单个B细胞分离出来,加以增殖形成一个克隆群落,该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体,即~。
12多克隆抗体(PcAb):天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位,以该抗原物质刺激机体免疫系统,体内多个B细胞克隆被激活,产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白,即~13基因工程抗体(GEAb):是利用DNA重组及蛋白工程技术,从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配,经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。
医学免疫学重点知识归纳摘要:一、医学免疫学基本概念1.免疫系统的组成2.免疫应答的类型二、免疫细胞的分类与功能1.吞噬细胞2.T 细胞3.B 细胞4.NK 细胞三、免疫应答的过程1.抗原识别2.免疫细胞激活3.免疫效应四、免疫失调与疾病1.免疫缺陷病2.自身免疫病3.过敏反应4.移植排斥反应五、免疫学在临床应用中的重要性1.疫苗研究2.免疫治疗3.免疫诊断正文:医学免疫学是一门研究人体免疫系统结构和功能的学科,它对我们理解疾病的发生、发展及治疗具有重要意义。
本文将对医学免疫学的重点知识进行归纳。
一、医学免疫学基本概念免疫系统是人体抵御外来病原体入侵的重要防线,由多种免疫细胞、组织和分子组成。
免疫应答是免疫系统识别并清除外来抗原的过程,分为天然免疫(非特异性免疫)和适应性免疫(特异性免疫)。
二、免疫细胞的分类与功能免疫细胞是免疫系统的主要成分,包括吞噬细胞、T 细胞、B 细胞和NK 细胞等。
它们各自承担着不同的免疫功能,共同维护机体的免疫平衡。
1.吞噬细胞:通过吞噬和消化病原体来清除抗原。
2.T 细胞:分为辅助性T 细胞和细胞毒性T 细胞,分别参与免疫应答的调控和细胞杀伤。
3.B 细胞:产生抗体,结合病原体抗原,中和毒素,促进病原体清除。
4.NK 细胞:自然杀伤细胞,对病毒感染细胞和肿瘤细胞具有杀伤作用。
三、免疫应答的过程免疫应答是免疫系统对外来抗原的识别和清除过程,包括抗原识别、免疫细胞激活和免疫效应三个阶段。
1.抗原识别:抗原递呈细胞(如吞噬细胞、树突状细胞等)捕获并处理抗原,然后将抗原信息递呈给T 细胞和B 细胞。
2.免疫细胞激活:T 细胞和B 细胞识别抗原后,被激活并增殖分化为效应细胞。
3.免疫效应:效应细胞发挥免疫作用,清除病原体,维持机体免疫平衡。
四、免疫失调与疾病免疫失调可能导致多种疾病,如免疫缺陷病、自身免疫病、过敏反应和移植排斥反应等。
1.免疫缺陷病:免疫系统功能不足,易发生感染。
一、名词解释1.ANA(抗核抗体):是一组将自身各种细胞核成分作为靶细胞的自身抗体总称。
2.BAS(生物素–亲合素系统):基于生物素和亲合素既能偶联抗原(或抗体)分子,又能偶联酶、荧光素等示踪物质,可桥联抗原抗体系统和示踪物质指示系统。
3.包被:将抗体或抗原结合在固体载相上的过程。
4.CH50试验:绵羊红细胞与溶血素结合形成的免疫复合物激活血清中的补体,引起红细胞溶血,以50%溶血为判断终点来测定血清总补体活性。
5.CD分子(簇分化抗原):有核细胞在不同发育阶段其在细胞膜表面均可表达不同的分化抗原,形成不同的细胞类群。
6.沉淀反应:是指可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现可见的沉淀现象。
7.多克隆抗体:在含有多种抗原表位的抗原刺激下,体内多个B细胞克隆被激活并产生针对多种不同表位的抗体,其混合物为多克隆抗体。
8.单克隆抗体:单个B细胞参与融合形成的单个杂交瘤细胞经分离克隆化,产生针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体,具有性质纯、效价高、特异性强、少或无血清交叉反应等优点。
9.等价带:当抗体过量时,IC(免疫复合物)的形成随着抗原递增至抗原、抗体比例最适处达最高峰。
前带:高峰区域左侧,抗体浓度过高,沉淀反应不明显后带:高峰区域右侧,抗原浓度过高,沉淀反应不明显10.封闭:加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质部分地非特异性吸附于固相载体表面,加入1%~5%牛血清白蛋白或5%~20%小牛血清再包被一次,消除此干扰的过程。
11.HLA:是引起同种异体移植排斥反应最强的抗原,与HVGR或GVHR有关。
12.化学发光剂:在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物。
13.胶体金:是金盐被还原成金原子后形成的金颗粒悬液。
14.间接凝集反应:可溶性抗原/抗体先吸附于颗粒性载体表面,与相应抗体/抗原作用,在适宜的电解质存在条件下出现特异性凝集现象。
15.抗原抗体结合的可逆性:抗原与相应抗体结合形成复合物后,在一定条件下又可解离为游离的抗原与抗体的特性。
免疫学简介一、免疫学概念与免疫应答免疫应答过程:抗原的识别、处理、信息传递、免疫细胞的激活、增值、分化以与产生一系列的免疫效应分子免疫应答分为识别阶段、活化阶段、效应阶段1、识别阶段:是巨噬细胞等抗原呈递细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T副主席报与相关淋巴细胞的阶段2、活化阶段:是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后,在一系列免疫分子的参与下,发生活化、增值、分化的阶段。
B细胞接受抗原信息分化为浆细胞,T细胞接受抗原刺激和协同刺激双信号后分化为效应细胞3、效应阶段:是浆细胞分泌特异性抗体,执行体液免疫功能。
T细胞中的Th细胞分泌细胞因子等效应分子,T杀伤细胞执行细胞毒效应功能。
另外有少量T、B细胞在增值分化后,不直接执行效应功能,而成为记忆细胞免疫应答效应多为生理性,是机体对外来抗原或自身变性抗原的清楚效应二、免疫组织与器官免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成免疫器官按功能不同,分为中枢免疫器官和外周免疫器官。
中枢免疫器官是免疫细胞产生、分化和成熟的场所,由骨髓和胸腺组成;外周免疫器官是免疫应答的场所,有淋巴结、脾与扁桃体等组成。
单核细胞核淋巴细胞经血液循环与淋巴循环进出于外周淋巴组织与淋巴器官,形成机体免疫系统的免疫网络。
(一)中枢免疫器官1、骨髓2、胸腺:是一级淋巴上皮组织,是T细胞发育的重要中枢器官,胸腺由胸腺基质细胞(TSC)和胸腺细胞组成。
(二)外周免疫器官与组织1、淋巴结:分为皮质区与髓质区。
皮质区主要的细胞是B淋巴细胞又称为非胸腺依赖区。
淋巴结的中心是髓质区,由淋巴索和淋巴窦组成,淋巴索为之谜聚集的淋巴细胞,包括B 细胞、浆细胞、T细胞与巨噬细胞淋巴结主要功能:是共淋巴细胞栖息和增值的场所;是适宜于淋巴细胞增值分化发挥免疫应答的基地;是淋巴液运行中监视清除病原体异物的过滤监控站2、脾:是富含血管的最大外周淋巴器官。
3、黏膜伴随的淋巴组织:有B细胞、T细胞、浆细胞与巨噬细胞,受局部侵入的病原体激活执行固有和适应性的免疫应答,使B淋巴细胞活化分化为浆细胞,产多种Ig类别的看那个题,其中最主要的是IgA与分泌型IgA,执行体液免疫与局部特异免疫作用(三)淋巴细胞再循环与归巢三、免疫细胞(一)淋巴细胞:是免疫系统的主要细胞,包括T细胞、B细胞核NK细胞1、T细胞外周血中T细胞约占淋巴细胞的70%-75%。
填空1.免疫防御功能异常可导致(感染、免疫缺陷)疾病。
2.抗原抗体反应的特点有(特异性、比例性、可逆性、阶段性)3•抗原抗体反应的温度一般以(15〜40 C)为宜,最适温度为(37 C)4•影响抗原抗体反应的环境因素主要有(电解质、pH、温度)5•某些特殊的抗原抗体反应对温度有一些特殊的要求,如冷凝集素在(4C)左右与红细胞结合最好,(20 C)以上反而解离。
6•抗原抗体的结合分子间的引力包括(静电引力、范德华引力、氢键引力和疏水作用力),其中作用最强的是(疏水作用力)1•间接凝集反应的类型包括(正向间接凝集、反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应和协同凝集反应)四种类型。
2•参与凝集反应中的抗原称为(凝集原),抗体称为(凝集素),常用的直接凝集试验有(玻片法、试管法、玻片法)3•在间接凝集反应中正向凝集反应是用(抗原)致敏载体以检测标本中相应的(抗体),而反向间接凝集反应是用(抗体)致敏载体以检测标本中相应(抗原)4•间接抗球蛋白试验可用已知抗原型红细胞检测血清中的(不完全抗体),可用于输血前的(交叉配血)试验。
1.免疫沉淀反应是(可溶性抗原)与(相应抗体)的特异性结合2.棋盘格法(抗原)和(抗体)同时稀释,可一次完成(抗原)和(抗体)的滴定3.单向琼脂扩散是待测抗原从含有定量(抗体)的(凝胶)内自由向周围扩散,抗原抗体特异性结合,在两者比例合适的部位,形成(沉淀环)。
4.Maneini 曲线适用于(大分子抗原)的测定,在一定范围内,沉淀环随时间延长而扩大,抗原浓度与(扩散环直径的平方)呈线性关系,常用(普通)坐标纸作图。
5.Fahey 曲线适用于(小分子抗原)的测定,在一定范围内,沉淀环随时间延长而扩大,沉淀环直径与(抗原浓度的对数)呈线性关系,常用(半对数)坐标纸作图。
6.双向琼脂扩散试验可对抗原或抗体的存在、含量和相对分子量进行分析,沉淀线靠近抗原孔指示(抗体含量较高);靠近抗体孔则指示(抗原含量较高);不出现沉淀线则表明(无对应的抗原和抗体)。
一:名词解释1免疫学(immunology):是研究免疫系统的结构与功能,并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究,探讨有效的免疫措施,实现以防病,治病为目的的一门现代医学科学。
2免疫球蛋白(immunoglobulin):是B细胞经抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的一种蛋白质,主要存在于血清等液体中,约占血浆蛋白总量的20%,IgG能与相应抗原特异性结合,执行体液免疫功能。
3补体(complement):是存在于人和脊椎动物血清与组织液中一组经活代后有酶活性的蛋白质,包括30余种可溶性蛋白和膜结合蛋白,故称为补体系统。
4细胞因子(cytokine):是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的总称。
大多数细胞因子是低分子量的蛋白或糖蛋白。
5临床免疫学(clinical immunology):是将免疫学基础理论,临床疾病与免疫学技术相结合,用于研究疾病的免疫病理机制,诊断与鉴别诊断,评价治疗效果和判断预后的多个分支学科的总称。
6亲和性(affinity):是指抗体分子上的一个抗原结合点与一个相应抗原表位之间的结合强度,抗原抗体的亲和性取决于两者空间构型的互补的程度。
7亲和力(avidity):是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度,亲和力与亲和性,抗体的结合价,抗原的有效抗原表位数目有关。
8免疫原(immunogen):是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
9半抗原(hapten):是指仅有抗原性而无免疫原性的物质。
10免疫佐剂(immunoadjuvant):预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型,简称佐剂。
11凝集反应(agglutination reaction):是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原的颗粒性载机与相应抗体特异性结合后,在适当电解质存在下,出现肉眼可见的凝集现象。
免疫应答主要分为哪几个阶段?1)识别阶段 2)活化和增值阶段 3)免疫效应中枢免疫器官和外周免疫器官有哪些器官组成?各有什么功能?1)中枢免疫器官:免疫细胞发生、分化、成熟的场所,如骨髓,胸腺2)外周免疫器官:免疫细胞产生应答的场所。
如脾脏,淋巴结,黏膜,扁桃体等。
T细胞、B细胞和NK细胞的主要功能分别是什么?1)T细胞:介导细胞免疫,辅助体液免疫。
2)B细胞:产生体液免疫3)NK细胞:介导天然免疫,发挥细胞毒作用。
根据作用方式及其特点的不同,机体存在两类免疫简述各自的概念和特征?1)先天性免疫或固有性免疫,是个体出生是就具有的天然免疫,可通过遗传获得,是机体在长期进化过程中逐渐建立起来的主要针对入侵病原体的天然防御功能。
其主要特征是反应迅速,针对外来异物的范围较广,不针对某个特定异物抗原,也称非特异性免疫。
2)适应性免疫,是个体出生后,接触到生活环境中的多种异物抗原,并在不断刺激中逐渐建立起来的后天免疫,也称获得性免疫。
其主要特征是针对某个特定的异物抗原而产生免疫应答,开始的应答过程比较缓慢,一旦建立清除该抗原的效率很高,特异性很强,也称特异性免疫。
简述抗原抗体反应的原理。
答:抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性,这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的,它们之间的结合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的结合简述抗原抗体反应的类型。
答:抗原抗体反应分为五种类型:①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应;②可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应;③抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应;④细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应;⑤免疫标记的抗原抗体反应等。
什么是带现象?答:在抗原抗体反应等价带前后,由于抗体或抗原过量(形成前带或后带),上清液中可测出游离的抗体或抗原,形成的沉淀物少,不出现可见反应,这种现象在做血清学试验时称为带现象。
影响抗原抗体反应的环境条件有哪些?在实验中如何控制这些条件因素?答:环境条件包括:电解质,酸碱度和温度。
稳定条件:①电解质:常用O.85%氯化钠或各种缓冲液作抗原及抗体的稀释液及反应液;②酸碱度:pH过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质,抗原抗体反应一般在pH为6~8时进行;③温度:一般以15,40℃为宜,最佳反应温度为37℃。
简述单克隆抗体制备技术的主要步骤。
单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进行制备的,其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内接种或体外增量培养、单克隆抗体的纯化与鉴定。
试述免疫血清应如何进行纯化。
免疫血清的纯化主要是指提纯免疫血清中的IgG并去除无关的杂抗体。
提纯IgG类抗体的方法有:硫酸胺盐析法粗提、离子交换层析法和亲和层析法,采用亲和层析法提取IgG时,可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白A交联sephamse 4B制成层析柱。
另外,还可通过吸附法获得单价特异性抗血清。
方法是将不含特异性抗原的杂抗原与戊二醛等双功能试剂混合制成固相吸附剂,以吸附免疫血清中的杂抗体,或将杂抗原交联于sephamse 4B上,通过亲和层析去除杂抗体。
叙述杂交瘤技术的基本原理。
杂交瘤技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
这种杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性,即既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖,经过克隆化后成为单个细胞克隆,分泌的抗体即为单克隆抗体。
简述间接血凝试验的基本原理。
间接血凝试验是将可溶性抗原(或抗体)吸附于人的0型红细胞或绵羊、家兔的红细胞制成抗原致敏的红细胞,与相应抗体(或抗原)作用,在有电解质存在的条件下,经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞凝集现象,又称被动血凝试验简述抗人球蛋白试验的原理(又称Coombs试验)、类型及其在临床上的应用。
Coombs试验又称抗人球蛋白试验,其原理是不完全抗体多半是7S的IgG类抗体,能与相应的抗原牢固结合,但在一般条件下不出现可见反应,利用抗球蛋白抗体作为第二抗体,连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体,可使红细胞凝集。
Coombs试验有二种类型:(1)直接Coombs试验:用于检测红细胞结合的不完全抗体。
(2)间接Coombs试验:用于检测血清中游离的不完全抗体。
抗球蛋白试验主要应用于那些方面?①输血:对于“危险”受体(指曾经输血、肌肉注射过血液制品或母子间血型不合的妊娠而可能产生免疫性血型抗体的人)的配血试验必须包括各种不完全抗体的检查,以抗球蛋白法最为可靠。
②血型抗原抗体的检查:主要检查Rh—者,其体内是否有抗-D抗体,应用抗球蛋白试验对外表为D 阴性的供体血液作常规检查。
最可靠和灵敏的方法是将待检D 阴性的红细胞与高效价的不完全抗-D 血清混合,然后加抗球蛋白血清检查细胞上有无致敏抗体。
③对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断:母体产生的最常见的免疫性抗体为Rh 抗体和ABO 抗体,一般为7S 的IgG,可通过胎盘屏障,作用于胎儿红细胞,引起新生儿溶血性疾病,可借抗球蛋白试验检出而采取预防性措施。
④对溶血性贫血的研究:获得性溶血性贫血患者大多数可借助该方法证实有自身红细胞的抗体存在。
⑤对细菌或立克次体的不完全抗体的检查。
Coombs 试验还可采用专一性特异性的抗球蛋白的血清,如抗IgG 血清、抗IgM、抗IgA以及抗补体血清等,分析结合于红细胞上的不完全抗体免疫球蛋白的亚类。
什么是协同凝集试验?主要用于何种检测?协同凝集试验与间接凝集反应的原理相类似,但所用的载体为金黄色葡萄球菌。
这种细菌的细胞壁中含有A蛋白(SPA),SPA 能与特异性抗体IgG 的Fc段结合(IgG3除外)。
抗体的F(abˊ)2 段暴露在葡萄球菌的表面,仍保持与相应抗原特异性结合的特性。
当这种葡萄球菌与IgG抗体连接时,就成为抗体致敏的载体颗粒,若与相应抗原接触,即出现反向间接凝集反应。
可用于细菌、病毒、毒素及各种可溶性抗原的检测。
何谓间接凝集反应?将可溶性抗原(或抗体)先吸附或偶联于与免疫无关大小适当的颗粒表面,使之成为致敏载体颗粒,然后与相应抗体(或抗原)作用,在适宜电解质存在条件下,出现特异性的凝集现象,称为间接凝集反应间接凝集反应如何进行分类?各试验的原理是什么根据致敏载体用的是抗原或抗体分为正向间接凝集试验和反向间接凝集试验;根据载体种类,分为间接血凝试验和胶乳间接凝集试验;根据反应方式分为间接凝集试验、间接抑制凝集试验和协同凝集试验。
间接凝集试验是用抗原致敏载体检测标本中的相应抗体。
将可溶性抗原与载体颗粒结合,再与标本中的抗体反应,通过抗体桥联,形成肉眼可见的凝集颗粒或凝集块,为阳性反应。
反向间接凝集试验选用已知特异性抗体致敏载体检测标本中的相应抗原。
用特异性抗体致敏颗粒,与样品中的待检抗原反应,通过抗原桥联,形成肉眼可见的凝集为阳性。
临床上用于检测HbsAg、AFP 等。
间接凝集抑制试验诊断试剂为已知抗原致敏的颗粒载体及相应的抗体,用于检测标本中与致敏抗原相同的抗原。
将标本与抗体试剂相反应,然后加入致敏抗原,若出现凝集现象,说明标本中不存在相应抗原;如未出现凝集现象,则说明待检标本中含有相应抗原,凝集反应被抑制。
同理,用抗体致敏载体颗粒及相应抗原作为诊断试剂,检测标本中的抗体,称为反向间接凝集试验。
协同凝集试验与间接凝集反应的原理相似,但所用载体为金黄色葡萄球菌,该菌细胞壁上的SPA 能与特异性抗体的IgG 的Fc 段结合(IgG3除外),抗体的F(abˊ)2 段暴露在葡萄球菌的表面,仍能与相应抗原特异性结合。
当这种葡萄球菌与IgG 抗体连接时,就成为抗体致敏的载体颗粒,若与相应抗原接触,即出现反向间接凝集反应。
间接血凝试验是以红细胞作为载体的间接凝集试验,用已知的抗原或抗体致敏红细胞,然后与样品中的抗体或抗原在适宜条件下反应,出现红细胞凝集者为阳性。
根据红细胞凝集的程度判断阳性反应的强弱。
胶乳凝集试验是以聚苯乙烯胶乳微粒作为载体的间接凝集试验。
HAT培养基筛选杂交瘤细胞的机制是什么?答:1.淋巴细胞:不能生长,5到7天死亡;DNA的主要合成途径被A阻断2.骨髓瘤细胞:不能生长,5到7天死亡;HGPRT缺乏,DNA合成的旁路途经受阻3.骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成杂交瘤细胞,可长期生长繁殖。
利用淋巴细胞的HGRT将H合成为嘌呤碱并最终与T一起合成DNA从淋巴细胞获得产生某种抗体的遗传信息,从骨髓瘤细胞获得不断繁殖的能力简述免疫系统的三个生理功能。
答:免疫系统的三个生理功能为免疫防御、免疫自稳、免疫监视免疫防御:是机体排斥外来抗原性异物的一种免疫保护功能。
该功能正常时,机体可抵御病原微生物及其毒性产物的感染和损害,即抗感染免疫;异常情况下,反应过高会引起超敏反应,反应过低或缺失可发生免疫缺陷。
免疫自稳:是机体免疫系统维持内环境稳定的一种生理功能。
该功能正常时,机体可及时清除体内损伤、衰老、变性的细胞和免疫复合物等异物,而对自身成分保持免疫耐受;该功能失调时,可发生生理功能紊乱或自身免疫性疾病。
免疫监视:是机体免疫系统及时识别、清除体内突变、畸变细胞和病毒感染细胞的一种生理功能。
该功能失调时,有可能导致肿瘤发生,或因病毒不能清除而出现持续感染。
决定抗原抗体最佳配比的方法有几种?(1)抗原稀释法:将可溶性抗原作一系列倍比稀释,然后向各管中加入一定浓度的适量抗血清,37℃反应后,产生的沉淀量随抗原量变化而不同,以沉淀物最多的管为最适比例管。
(2)抗体稀释法:是将恒定量抗原与不同倍比稀释的抗体反应,出现沉淀物最多的管为抗体最适比例管。
(3)棋盘格法:亦称方阵法。
抗原抗体同时稀释,可一次完成抗原和抗体的滴定,并找出抗原、抗体的最适比。
是前二法的结合简述单向免疫扩散试验的基本原理和技术要点。
(1)原理:待测抗原从局部含有定量抗体的凝胶内自由向周围扩散,抗原抗体特异性结合,在两者比例合适的部位,形成白色沉淀环,沉淀环的大小与抗原的浓度呈正相关。
(2)技术要点:将抗体和热融化琼脂(约50%)混合,倾注成平板。
待凝固后在琼脂板上打孔,孔中加入已稀释的抗原液,和不同浓度的抗原标准品,置37~12温箱,24~48h后观察孔周围沉淀环。
量取沉淀环直径,通过抗原标准品,计算待测抗原的浓度。
在双向免疫扩散试验中,如何判定结果?双向免疫扩散中,出现沉淀线,表明存在相应的抗原、抗体,不出现沉淀线则表明缺乏抗原或抗体。
沉淀线的形成是根据抗原抗体两者比例所致,沉淀线靠近抗原孔,提示抗体含量高;靠近抗体孔,提示抗原含量较多免疫电泳技术的优点是什么?免疫电泳有哪些用途?1)优点:免疫电泳技术是将免疫扩散和电泳相结合的一种免疫学分析技术,既有抗原抗体反应的高度特异性,又有电泳分离技术的快速、灵敏和高分辨力,广泛应用于牛物医学领域。