(完整版)临床免疫学检验知识点.doc

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临床免疫学检验

1、免疫:是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能

2、免疫防御(对外);免疫自稳(防自身免疫病);免疫监视(防肿瘤)。

3、中枢免疫器官:骨髓、胸腺;外周免疫器官:淋巴结、脾脏(最大)、黏膜相关淋巴组织

4、 B 细胞:通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原,介导体液免疫;B细胞受体=BCR=mIg

表面标志:膜免疫球蛋白(SmIg)、 Fc 受体、补体受体、EB 病毒受体和小鼠红细胞受体。

成熟 B 细胞: CD19、CD20、 CD21、 CD22 (成熟 B 细胞的 mIg 主要为 mIgM和 mIgD)同时检测 CD5分子,可分为 B1 细胞和 B2 细胞。

B 细胞功能检测方法:溶血空斑形成试验(体液免疫功能)。

5、T 细胞:介导细胞免疫。共同表面标志是 CD3(多链糖蛋白);辅助 T 细胞的标志是 CD4;杀伤 T 细胞的标志是 CD8; T 细胞受体 =TCR。

T 细胞和 NK细胞的共同表面标志是CD2(绵羊红细胞受体);

CD3+ CD4+CD8- =辅助性T细胞(Th)

CD3+ CD4-CD8+ =细胞毒性T 细胞( Tc 或 CTL)( T 细胞介导的细胞毒试验)

CD4+ CD25+ =调节性T细胞(Tr或Treg)

T 细胞功能检测:植物血凝素( PHA)刀豆素( CONA)刺激 T 细胞增殖。增殖试验有:形态

法、核素法。

T 细胞亚群的分离:亲和板结合分离法,磁性微球分离法,荧光激活细胞分离仪分离法

*E 花环试验是通过检测SRBC受体而对T 细胞进行计数的一种试验;

6、 NK细胞:具有细胞介导的细胞毒作用。直接杀伤靶细胞(肿瘤细胞和病毒感染的细胞)

表面标志: CD16( ADCC)、 CD56。

测定人 NK细胞活性的靶细胞多用K562 细胞株,而测定小鼠胞株。NK细胞活性则常采

YAC-1 细

7、吞噬细胞包括:单核 - 吞噬细胞系统(MPS,表面标志外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞)和中性粒细胞。CD14,包括骨髓内的前单核细胞、(表达 MHCⅡ类分子)

8、人成熟树突状细胞(DC)(专职抗原呈递功能):表面标志为CD1a、CD11c和CD83。

9、免疫球蛋白可分为分泌型( sIg ,主要存在于体液中,具有抗体功能)及膜型( mIg,作为抗原受体表达于 B 细胞表面,称为膜表面免疫球蛋白)

10、免疫球蛋白按含量多少排序:IgG>IgA>IgM>IgD>IgE五类(按重链恒定区抗原性(CH)排序)

免疫球蛋白含量测定:单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。

11、免疫球蛋白的同种型抗原决定簇位于恒定区(CH、CL)

12、抗体由浆细胞产生。抗体分子上VH和 VL(高变区)是抗原结合部位。

13、 IgG:血清中含量最高的免疫球蛋白( IgG1 最高),血液和细胞外液中的主要抗体。也

是再次免疫应答的主要抗体,是唯一能通过胎盘的抗体,大多数抗菌抗体、抗病毒抗体是

IgG,某些自身抗体及超敏Ⅱ型抗体是IgG ,免疫学检测中第二抗体也以IgG 为主。

14、 IgA :分血清型(单体存在)及分泌型;分泌型IgA (sIgA )为二聚体,性能稳定,主

要存在于胃肠道、支气管分泌液、初乳、唾液、泪液中,局部浓度高,是参与黏膜局部免疫

的主要抗体。

15、 IgM:为五聚体,主要存在于血液中,是Ig 中分子量最大的(又称巨球蛋白)。个体发

育最早合成和分泌的抗体。抗原刺激后体液免疫应答中最先产生的抗体,感染过程中血清

IgM 水平升高,说明近期感染。新生儿脐血中若 IgM 增高,提示有宫内感染。

16、 IgE :为单体结构,正常人血清中含量最低。 IgE 为亲细胞抗体,介导Ⅰ型超敏反应。

特异性过敏反应和寄生虫早期感染患者血清中可升高。

17、补体:具有酶样活性的球蛋白(肝细胞、巨噬细胞产生);激活途径主要有三种:经典

途径(以结合抗原后的IgG 或 IgM 类抗体为主要激活剂(双链 DNA), C1~C9 全部参与)、替代途径(病原微生物细胞壁成分(脂多糖)直接激活补体 C3,然后完成C5~ C9 的激活过程)、MBL途径(由急性炎症期产生的甘露糖结合凝集

素( MBL)与病原体结合后启动激活)。

18、补体系统中C3含量最多, C2 含量最少。

19、灭活:加热56℃ 30 分钟,补体丧失活性

20、补体清除免疫复合物的方式:吞噬调理;免疫粘附;免疫复合物抑制。

21、完全抗原 =反应原性 +免疫原性。半抗原 =反应原性(无免疫原性)

22、抗原抗体结合力(分子间引力):静电吸引、范德华力、氢键、疏水作用力(最强)

23、抗原抗体反应的四大特点:特异性、可逆性、比例性、阶段性;受反应条件(如温度、pH、电解质、抗原抗体比例等)的影响。

24、抗体过量——前带;抗原过量——后带(钩状效应)

25、抗原抗体反应可分为两个阶段:第一阶段为抗原与抗体发生特异性结合的阶段,此阶段

反应快,仅需几秒至几分钟,但不出现可见反应;第二阶段为可见反应阶段,此阶段反应慢,往往需要数分钟至数小时。

26、颗粒性抗原出现凝集反应。可溶性抗原出现沉淀反应。单价抗原与相应抗体结合不出现沉

淀现象。

27、木瓜酶水解 IgG 为 2Fab+Fc;胃蛋白酶水解 IgG 为 F(ab)2+nFc 。

28、最常用于免疫动物的佐剂是弗氏佐剂,弗氏佐剂分为弗氏完全佐剂(弗氏不完全佐剂加

卡介苗)和弗氏不完全佐剂两种。

29、 R(兔子)型抗血清是用家兔及其他动物免疫产生的抗体,抗原抗体反应比例合适范围较宽,适于作诊断试剂。

H(马)型抗血清是用马等大动物免疫获得的抗体,抗原抗体反应比例合适范围较窄,一般用作免疫治疗。

30、抗血清常见保存条件: 2-8 ℃保存;冷冻保存(最常用);真空干燥保存(5-10 年)。