骨髓细胞学检查PPT课件

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四、常用细胞化学染色及 临床意义
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【原理】 粒细胞及分化较好的单核细 胞胞浆内的POX能分解H2O2，产生 新生态氧使无色的色原（如联苯胺） 氧化显色，定位于胞浆内。计数100 个原始细胞，报告阳性细胞百分率 或用－，＋，＋＋，＋＋＋，＋＋ ＋＋5个等级进行积分值计算
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过氧化物酶
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6.巨核细胞系统 magakarocytes
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【临床意义】同POX染色反应
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（三）中性粒细胞碱性磷酸酶染色 （NAP）
【原理】碱性磷酸酶主要存在于成熟中性粒
细胞（分叶核及杆状核）内，在碱性条件下 能水解基质液中的α-磷酸萘酚，产生α-萘酚， 其与重氮盐偶联，形成不溶性棕黑色偶氮染 料沉淀。阳性反应为胞质中出现灰色到棕褐 色颗粒，计数100个成熟中性粒细胞，报告阳 性细胞百分率或用－，1＋，2＋，3＋，4＋ 进行积分值计算。
骨髓细胞学检查
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主要内容
概述 骨髓检查适应症禁忌症 血细胞生成发展规律形态特点 细胞化学染色 正常骨髓象 常见血液病骨髓象
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一、概 述
骨髓是人出生后的主要造血组织。 骨髓组织由网状组织、基质、血管系统和神
经等构成的造血微环境，以及充满其间的发 育过程中的血细胞所组成。 骨髓形态学主要检查骨髓中各系列血细胞数 量的增减及其比例的改变，形态的异常，可 以了解骨髓的造血功能和病理改变。
极度活跃 >100/HP
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三、血细胞的生成，发育规律 及正常形态学特征
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（一）血细胞的生成
所有的血细胞均起源于共同的造血干细胞
①具有高度自我更新的能力，以保持干细胞池数量的 恒定，维持机体终身的稳定造血；
②具有多向分化的能力，即可向各系列祖细胞分化， 然后经过增殖、发育和成熟，成为各系细胞。
【临床意义】主要用于急粒和急单的鉴别
急单：—强阳性，被NaF抑制
急粒：－原粒阴性或弱阳性，不被NaF抑制
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醋酸萘酚酯酶和氟化钠抑制试验
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五、正常骨髓象
有核细胞增生活跃 粒系细胞占40-60％，原粒<2％，早幼粒<5%, 中幼粒、
晚幼粒<15%, 嗜酸<5%,嗜碱<1%, 细胞形态染色基本正 常 幼红细胞占20％左右，原红<1%, 早幼红<5%, 中幼红、 晚幼红各占10％，成熟红细胞大小形态染色大致正常 M:E 2～4：1 淋巴占20％ 巨核7～35个，多为产板巨 可见少量单核细胞、浆细胞、网状细胞、内皮细胞、 组织细胞等
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血友病
局部皮肤感染 出血倾向者 病情危重者
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标本采集
部位：髂后上棘、髂前上棘、胸骨
量：0.2ml（涂片）
3-5ml （免疫分型、培养等）
穿刺成功标志：
抽取骨髓一瞬间，病人有特殊的疼痛感
抽取的骨髓液内含有骨髓小粒。
显微镜下可见骨髓特有的细胞如巨核细胞、浆细 胞、组织细胞等
杆状核>分叶核
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骨髓穿刺
bone marrow puncture
骨髓抽吸
Bone marrow aspiration 骨髓涂片
Bone marrow smear
骨髓活检
Bone marrow biopsy
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血液病的诊断,分期和疗效的评估 了解恶性肿瘤有无骨髓侵犯 感染性疾病或发热待查,病原生物学培养 临床疑难病例
造血干细胞：包括全能干细胞（TSC）及由其分 化的骨髓系干细胞和淋巴系干细胞。
受造血微环境、造血细胞生长因子和白细胞介素以及 神经和体液因子的调控，其中造血微环境最重要。
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造血干细胞的分化. 及增殖示意图 15
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㈢、血细胞的正常形态学特征
1、红细胞系统 erythrocytes
原红（normoblast） 早幼红（basophilic normoblast） 中幼红（polychromatic normoblast） 晚幼红（orthochromatic normoblast）
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协助红血病，红白血病的诊断以及与其它 类型良性贫血的鉴别：
红血病，红白血病幼红细胞PAS强阳性
巨幼贫，再障等呈阴性反应
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【原理】 α-醋酸萘酚酯酶又称非特异性酯酶
（NSE），能将基质内的醋酸萘酚水解，与重 氮染料偶联，形成不溶性的灰黑色或棕黑色沉 淀。但在单核细胞内此酶的活性可被氟化钠抑 制。故这两个试验常同时进行。
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骨髓涂片的显微镜检查
低倍镜
观察取才、涂片、染色情况
观察骨髓增生程度
计数巨核细胞
观察有无异常细胞
油镜
选择染色良好、分布均匀的部位，
计数200个有核细胞，分类
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骨髓标本的分类部位
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骨髓增生程度分级(高倍镜） 增生减低 5~20/HP
极度减低 1~5/HP
增生活跃明显活跃 20~50/H5P0~100/HP
【参考值】阳性率10～40％ 积分40～80。
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碱性磷酸酶
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碱性磷酸酶染色（NAP）临床意义
NAP增高:
细菌感染，类白血病反应， 慢粒急变，急淋， 淋巴瘤，再障，骨纤等
NAP减低：
慢粒，急非淋，PNH及恶 组等
NAP用于鉴别：
慢粒与类白血病反应；
PNH与再障；
急淋与急非淋；
细菌感染与病毒感染（感染症状相似）
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2、粒细胞系统 granulocytes
原粒（myeloblast） 早幼粒（ pro myelocyte） 中幼粒（myelocyte）：中性、嗜酸、嗜碱 晚幼粒（metamyelocyte） 杆状核粒（stab granulocyte,band
granulocyte） 分叶核（Segmenteel granulocyte）
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过氧化物酶染色 (POX)临床意义
主要用于急性白细胞类型的鉴别
急性粒细胞白血病：
强阳性（颗粒较粗大，呈局灶分布）
急性单核细胞白血病：
弱阳性（颗粒细小、稀少、 散在分布）源自文库
急性淋巴细胞白血病：
阴性，ALL骨髓中残留的原粒细胞POX可为（+）， 但比例小于3%
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【原理】是一种脂溶性染料，可溶于细胞 质内的含脂物质，是之呈棕黑色或深黑 色颗粒。