荧光STR直接复合扩增试剂缓冲体系的研制_赵兴春
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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910168477.3(22)申请日 2019.03.06(71)申请人 广东华美众源生物科技有限公司地址 528000 广东省佛山市禅城区季华二路北侧佛山国家火炬创新创业园申请人 广州市刑事科学技术研究所(72)发明人 刘超 杜蔚安 郑文彦 刘宏 周咏松 徐曲毅 王邦超 刘长晖 (74)专利代理机构 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205代理人 王国标(51)Int.Cl.C12Q 1/6888(2018.01)(54)发明名称一种检测人类Y染色体快速突变STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒及应用(57)摘要本发明提供了一种检测27个人类Y染色体快速突变STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒,可在单个反应中多重扩增Y染色体上27个高突变率的STR基因座。
本发明通过设计独特的基因座排布和特异性引物,将27个Y染色体快速突变STR基因座分为四组并分别标记不同的荧光染料。
本发明的复合扩增系统包含的全部为突变率高、多态性高的Y染色体STR基因座,男性个体识别能力高,在家系细分和案件排查中可作为常规Y染色体STR试剂盒的有效补充。
所述荧光标记复合扩增系统引物特异性好、检材适应性强,方法操作简便,检测耗时短、效率高。
权利要求书2页 说明书6页序列表7页 附图2页CN 109929936 A 2019.06.25C N 109929936A1.一种检测人类Y染色体快速突变STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒,其特征在于:所述试剂盒含有用于特异性扩增27个Y染色体快速突变STR基因座的19组引物对,27个基因座为DYF387S1a/b、DYF399S1a/b/c、DYF403S1a1/a2/a3/b、DYF404S1a/b、DYS449、DYS508、DYS516、DYS518、DYS526a/b、DYS534、DYS547、DYS565、DYS570、DYS573、DYS576、DYS612、DYS626、DYS627和DYS640。
荧光标记miniSTR复合扩增体系的建立及法医学应用研究的开题报告开题报告一般包括以下几个部分:1. 题目:荧光标记miniSTR复合扩增体系的建立及法医学应用研究。
2. 研究背景和意义:该研究旨在建立一种可靠的复合扩增体系,用于在微量样本中进行DNA检验,并将其应用于法医学领域。
目前,DNA鉴定已成为科学研究和犯罪侦查的基本技术之一。
但由于样品获取量有限,往往难以使用传统的STR分型方法进行分析。
miniSTR是目前用于微量样本分析的一种有效方法,但存在多个引物需要设计和组合,复杂度较高。
因此,本研究旨在建立一种简单、快速且高效的miniSTR复合扩增体系,以提高微量样本的DNA分析的可靠性。
3. 研究内容和方法:本研究将采用文献研究和实验方法,从以下方面开展研究:(1)筛选适合miniSTR复合扩增的荧光标记引物及扩增体系;(2)优化引物和扩增体系的复合扩增条件,确定最优方案;(3)比较该复合扩增体系与传统的STR分型方法的检测灵敏度和可靠性;(4)将该复合扩增体系应用于法医学领域,对微量样本进行DNA检验。
4. 预期成果和意义:通过本研究,预期能够建立一种适合于复合扩增的miniSTR标记体系,提高微量样本的DNA鉴定技术水平,为法医学领域提供更可靠和有效的技术支持。
同时,该研究也有助于在实际应用中提高DNA分析的准确性和鉴定样品的可靠性。
5. 研究进度和计划:本研究计划于2022年7月开始,历时2年完成。
具体任务分配如下:(1)2022年7月-2023年6月:确定荧光标记引物及扩增体系;(2)2023年7月-2024年6月:优化复合扩增条件;(3)2024年7月-2025年6月:比较复合扩增体系与传统方法的可靠性;(4)2025年7月-2026年6月:将该方法应用于法医学领域。
6. 研究组成员:本研究由XXX教授带领,研究组成员包括XXX、XXX等人。
7. 预计经费和资源:本研究预计经费XXX万元,其中包括实验用品费用、设备费用、人员费用等。
Forensic application of mini STR multiplex
amplification system
作者: 刘峰[1] 叶健[2] 姜成涛[2] 赵兴春[2] 胡萌[1] 李湘秦[1] 戴文申[1]
作者机构: [1]中国人民公安大学研究生部,北京100038 [2]公安部物证鉴定中心,北京100038
出版物刊名: 刑事技术
页码: 11-14页
主题词: 降解DNA STR 短片段STR
摘要:目的解决严重降解(低于300bp)DNA检验问题,提高降解DNA的检出率。
方法重新设计引物,减小扩增产物片段长度,用荧光标记短片段STR复合扩增体系进行DNA检验,扩增结果与用Identifiler试剂盒扩增出的结果进行比较。
结果用荧光标记短片段STR复合扩增系统对实际案件中的高度降解DNA检材进行检验,可以获得满意分型。
结论该系统可用于严重降解DNA检材的检验工作。
4种免疫磁珠分离模拟混合斑效果比较张尔力;姜伯玮;赵兴春【摘要】目的建立免疫磁珠捕获精子的方法,比较4种不同抗体制备的免疫磁珠捕获模拟检材中精子的效果,探索其分离混合斑的可行性以及优缺点.方法分别用4种抗体制备免疫磁珠,对不同比例混合细胞悬液(上皮细胞与精子)中的精子和放置不同时间的纯精斑进行提取,将磁珠吸附到的细胞进行DNA-STR分型,对比4种磁珠的差异.结果4种磁珠都能特异性地将精子分离出来,分型结果与男性供者已知分型一致.经X2检验,当上皮细胞与精子的比例大于100:1或小于10:1时,P>0.05,捕获结果没有明显差异;当其比例在10:1时,P<0.05,抗PH20抗体磁珠的灵敏度高于其余三种抗体.捕获放置1天和15天精斑的成功率结果差别P>0.05,没有明显差异.捕获放置30天的精斑结果差别P<0.05,抗JLP抗体磁珠有明显优势,而抗ADAM2抗体磁珠效果最差.结论4种不同抗体制备的免疫磁珠在捕获精子的灵敏度上有差异,可以根据需要选择抗体制备免疫磁珠,有望实现对不同混合斑的分离.【期刊名称】《湖南警察学院学报》【年(卷),期】2018(030)002【总页数】5页(P124-128)【关键词】法医物证学;STR;免疫磁珠;混合斑;精子表面抗原【作者】张尔力;姜伯玮;赵兴春【作者单位】湖南警察学院,湖南长沙410138;公安部第一研究所,北京 100038;公安部物证鉴定中心,北京 100038【正文语种】中文【中图分类】D631.2法医在处理性犯罪案件精阴混合斑检材的过程中,为得到精子的分型,通常有两类方法:一类是在提取到DNA并得到混合STR图谱后,用统计学方法比对分析出可能的分型[1];另一类是在裂解细胞提取出DNA之前将不同细胞分离开,再提取目标细胞的DNA进行分型比对。
后者目前常用的有差异裂解、激光捕获显微切割等方法[2]。
而这些方法存在一些问题,一是计算过程繁琐,二是若差异裂解处理不彻底,则会残留。
专利名称:一种直接扩增试剂及其应用专利类型:发明专利
发明人:赵兴春,叶健,姜伯玮,季安全申请号:CN201210063825.9
申请日:20120312
公开号:CN103305499A
公开日:
20130918
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明公开了一种PCR扩增的试剂及其应用。
本发明提供的直接扩增试剂,为如下1)或2):1)所示的直接扩增试剂包括非离子型表面活性剂和醇类化合物;2)所示的直接扩增试剂包括非离子型表面活性剂;本发明的实验证明,本发明提供的直接扩增试剂,能够越过DNA提取与纯化步骤直接对FTA血卡、血液等常见生物样本进行PCR扩增或STR荧光复合扩增,获得理想结果。
申请人:公安部物证鉴定中心
地址:100038 北京市西城区木樨地南里17号
国籍:CN
代理机构:北京纪凯知识产权代理有限公司
代理人:关畅
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荧光STR复合扩增试剂盒的评估过程探索
赵兴春;叶健;姜成涛;季安全
【期刊名称】《刑事技术》
【年(卷),期】2008(000)004
【摘要】STR复合扩增检验技术是目前法医DNA检验技术中最重要也是最常用的技术种类之一,随着荧光检测技术和毛细管电泳技术的发展,特别是DNA数据库建设中丰要采用STR复合扩增技术进行基因分型,大大拓展了STR复合扩增检验应用范围。
与此同时,STR复合扩增检验试剂成为影响检验质量的重要因素,关系到样本检验分型结果,而分型数据是为法庭提供证据的直接依据,
【总页数】3页(P54-56)
【作者】赵兴春;叶健;姜成涛;季安全
【作者单位】公安部物证鉴定中心,北京,100038;公安部物证鉴定中心,北
京,100038;公安部物证鉴定中心,北京,100038;公安部物证鉴定中心,北京,100038【正文语种】中文
【中图分类】DF795.2
【相关文献】
1.24个Y-STR基因座荧光标记复合扩增体系的建立
2.15个常染色体和10个Y-STR基因座复合扩增试剂盒的研发
3.23个STR基因座荧光复合扩增体系的法医学应用评估
4.19个X-STR荧光复合扩增体系的法医学应用评估
5.5个STR基因座遗传多态性研究及复合扩增试剂盒的构建及应用
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法医DNA标准物质STR位点等位基因分型定值研究赵兴春;孙敬;印佳;王燕;姜伯玮;高运华;叶健【摘要】为探讨法医DNA标准物质STR位点等位基因分型的定值和溯源,利用有机法提取法医DNA标准物质备选所用细胞基因组DNA,以其为模板进行STR复合扩增,制备获得等位基因分型片段并测序分析,成功获得法医DNA标准物质备选所用细胞STR位点等位基因分型的定值.对STR位点等位基因分型进行定值研究可以作为法医DNA标准物质溯源研究的有效途径之一.%In order to develop the certified value and traceability for the alleles on STR loci of forensic DNA reference materials, the genomic DNA of the cells was extracted and amplified for preparing the forensic DNA reference materials. Then the allelic DNA was prepared, sequenced and valuated. Finally the value for the alleles on STR loci of the cells was certified. The certified value for the alleles on STR loci can work as an effective approach for the traceability of forensic DNA reference materials.【期刊名称】《中国测试》【年(卷),期】2012(038)004【总页数】3页(P55-57)【关键词】法医DNA;标准物质;STR位点;等位基因;定值【作者】赵兴春;孙敬;印佳;王燕;姜伯玮;高运华;叶健【作者单位】公安部物证鉴定中心,北京100038;公安部物证鉴定中心,北京100038;中国人民公安大学,北京100038;中国人民公安大学,北京100038;中科院应用物理研究所,上海201800;中国计量科学研究院,北京100013;公安部物证鉴定中心,北京100038【正文语种】中文【中图分类】Q783.1;Q755;TB99;TM930.120 引言短串联重复序列(short tandem repeat,STR)又称为微卫星序列,是人类基因组DNA中分布较为广泛的一类遗传标记,其核心序列一般由2~6个碱基组成,核心序列的重复单位数目不同构成同一基因座中不同的等位基因。