嗜麦芽寡养单胞菌DHHJ降解羽毛产物的分析研究

临床分离嗜麦芽寡养单胞菌L1、L2酶基因克隆、测序及定位【关键词】β摘要：目的了解临床分离嗜麦芽寡养单胞菌产L1、L2 β内酰胺酶情况、酶基因定位及核苷酸序列进化和同源关系。

方法PCR法扩增两种β内酰胺酶基因，通过克隆、测序、序列比对确定其亚型、基因进化、同源关系和基因所在位置。

结果细菌染色体DNA和质粒DNA 扩增L1、L2酶基因阳性，其序列具有明显异质性，两种酶基因位于12kb大小的质粒上。

结论嗜麦芽寡养单胞菌绝大多数产生两种β内酰胺酶，酶基因变异和进化加速的驱动力部分可能与β内酰胺类抗生素的长期使用有关。

关键词：β内酰胺酶；异质性；质粒Cloning, sequencing and location of genes encoding L1 and L2 βlactamasesABSTRACT Objectives To investigate the production of L1 and L2 βlactamases, location and evolution or homology of nucleotide sequences of their encoding genes in clinical isolates of Stenotrophomonas maltophilia.Methods Two βlactamasesencoding genes were amplified by PCR. The subtypes, evolution or homology and location of genes were determined by gene cloning, sequencing and sequences contrasting. Results L1 and L2 genes in chromosomes and plasmids were amplified, the genesequences were apparently heterogeneous and the genes were located on 12kb plasmid. Conclusion Majority of Stenotrophomonas maltophilia isolates produced two βlactamases. Gene variation and evolution acceleration partly contributed to longtime uses of βlactams.KEY WORDS βlactamases; Molecular heterogeneity; Plasmids嗜麦芽寡养单胞菌(又称嗜麦芽窄食单胞菌)为机会致病菌，广泛分布于自然界，医院环境和医务人员皮肤分离率较高。

# 论著#嗜麦芽寡养单胞菌感染分布及耐药性研究余素飞1 , 杨雪飞1 , 李婷婷2( 1. 浙江省台州医院, 浙江临海317000; 2. 临海市第一人民医院, 浙江临海317000)摘要: 目的了解我院嗜麦芽寡养单胞菌的临床分布, 分析细菌的耐药谱, 提高其诊治水平。

方法对经VIT EK 系统鉴定出162 株嗜麦芽寡养单胞菌, 进行自动化、纸片扩散法药敏试验, 统计分析其感染分布及耐药性变化。

结果在所有临床分离的嗜麦芽寡养单胞菌标本中, 以痰液为主( 90. 1%) , 其次为创口分泌物和咽拭子; 该菌对大多数抗菌药物耐药, 复方新诺明、环丙沙星的耐药率较低, 分别为20. 4%和22. 2%。

结论嗜麦芽寡养单胞菌是重症监护病房( ICU) 常见的医院感染致病菌, 痰标本的分离率最高; 合理使用抗菌药物、减少侵袭性操作、加强耐药性监测, 有利于预防及控制医院嗜麦芽寡养单胞菌感染。

关键词: 嗜麦芽寡养单胞菌; 药敏试验; 耐药性中图分类号: R379. 9 文献标识码: A 文章编号: 1005- 4529( 2006) 05- 0587- 03Distribution and Drug-resistance of Stenotrophomonas mal tophil iaYU Su-fei, YAN G Xue-fei, LI Ting-ting( Zhej iang T ai z hou H osp i tal , L inhai , Zhej iang 317000, China) Abstract: OBJECTIVE T o get know ledge o f the distr ibution and dr ug- resistance o f Stenotr op homonas maltop hiliain o ur hospital and impro ve the level of diag no sis and tr eatment. METHODS The automatic dr ug sensitiv e t est andthe pa per spreads medicine sensitive test w ere car ried on to 162 str ains of S. maltop hilia w ith t he index of t heVITEK system. RESULTS In all clinical samples, S. maltop hilia isolated from phlegm was the mo st ( 90%) , then w as f rom secretio n and swab. The majo rit y of 162 strains wer e mult idrug resistant. But to the trimetho pr imsulfamethoxazo le and cipr oflo xacin, the dr ug resistance was low ( 20. 4% and 22. 2%, r espectively ) . CONCLUSIONS S. maltop hilia is the pr ev alent patho gen of nosocomial infection in ICU . And most o f it ar e isolated fr omphlegm . So use antibio tics cor rectly, r educe invasiv e ex aminations o r treatments and strengt hen drug- resistant monitoring, are helpful to pr event and contro l S . mal top hilia nosocomial infectio n.Key words: S. maltop hili a; drug sensitivity test; drug- resistance嗜麦芽寡养单胞菌是一种非发酵革兰阴性杆菌, 广泛分布于自然界, 机体防御功能低下时成为条件致病菌, 可引起肺炎、脑膜炎、败血症、心内膜炎和皮肤软组织感染。

第49卷第6期2021年6月Vol49No6Jun2021西北农林科技大学学报(自然科学版)Journal of Northwest A&F University(Nat.Sci.Ed.)网络出版时间2020-122515#7DOI：10.13207/ki.jnwafu.202106.016网络出版地址：https:///kcms/detai//61.1390.S.20201224.1319.013.html羽毛降解菌DHW-06的分离鉴定及产酶特性研究董萌萌，郝鹏泽，王佳柳，陈欢，颜华，贾良辉（西北农林科技大学生命科学学院，陕西杨凌712100）［摘要］【目的+从土壤中分离筛选羽毛降解菌株，检测其产酶条件，研究其所产酶的酶学性质，以丰富角蛋白降解的菌株资源）【方法】从土壤样品中，以牛奶培养基和羽毛培养基筛选羽毛降解菌株，失重法测定羽毛降解率，并对筛选菌株进行形态观察、生理生化检测及16SrRNA序列鉴定。

筛选菌株于37d,180r/min条件下，在以羽毛为唯一碳氮源的培养基中发酵，采用福林酚法测定其角蛋白酶活力，对培养时间（3,6,9,12,15,18,21和24h）、接种量（体积分数1.5%,3.0%和6.0%"、发酵温度（22,27,32,37和42°C）及培养基初始pH（6.0,6.5,7.0,7.5和80）进行优化，并研究温度（30,40,50,60,70和80°C）、pH（6.0,7.0,80,9.0和10.0）、金属离子（K+,Mg2+,Ca2+,Fe3+, Zn+,Mn2+,C『+和Ni2+）、化学试剂（二硫基苏糖醇（DTT）、乙二胺四乙酸（EDTA）、苯甲基磺酰氟（PMSF）、十二烷基硫酸钠（SDS）、%-藐基乙醇、异丙醇和二甲基亚矶（DMSO））和不同底物（酪蛋白、角蛋白、牛血清蛋白、牛血红蛋白、天青角蛋白和羽毛粉）对角蛋白酶活力的影响。