检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的原理
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检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验报告姓名:班级:【实验目的】1、尝试检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,探讨细胞中主要化合物的种类。
2、掌握实验的操作技能。
3、认识到脂肪、糖类、蛋白质和淀粉是生物组织的重要成分。
【实验原理】某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。
脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色也可以被苏丹Ⅳ染液染成红色。
糖类中的还原性糖(如葡萄糖、果糖)可以与斐林试剂发生作用,产生砖红色沉淀。
蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
淀粉遇碘变蓝色。
因此,可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应,检测生物组织中糖类、脂肪或蛋白质的存在。
【材料器具】1.实验材料:苹果或梨匀浆,马铃薯匀浆,花生种子,花生种子匀浆,豆浆。
2.仪器:解剖刀,试管(最好用刻度试管),试管架,试管夹,滴管,大小烧杯,量筒,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜。
3.试剂:斐林试剂(甲夜:质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液,乙夜:质量溶液)苏丹III或苏丹Ⅳ染液,双缩脲试剂(A夜:质浓度为0.05g/ml的CuSO4溶液),量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液,B夜:质量浓度为0.01g/ml的CuSO4体积分数为50%的酒精溶液,蒸馏水,碘液。
【实验注意问题】1、一定要听从老师的安排,不让动的坚决不动。
2、保持安静,坚决不能大声喧哗。
3、注意实验安全4、注意爱护实验器材,谁损坏谁负责。
【实验过程】【实验结论】实验结果和分析:【课后巩固】1、以花生子叶为材料进行脂肪的检测时,制作临时装片的正确步骤是()①盖盖玻片②切子叶③苏丹Ⅲ染液染色④滴加蒸馏水⑤酒精洗去浮色A.④②①③⑤B.②④①③⑤C.④②③①⑤D.②③⑤④①2、下列各组中的前项为需检测的物质,中项为使用的试剂,后项为产生的颜色,正确的是()A.葡萄糖、斐林试剂、砖红色B.脂肪、苏丹Ⅲ染液、红色C.蛋白质、双缩脲试剂、蓝色D.脂肪、苏丹Ⅳ染液、橘黄色3、医院确认糖尿病的常用方法及结果是( )A. 加入斐林试剂,出现砖红色B.加入碘—碘化钾溶液,出现蓝色C. 加入苏丹Ⅲ溶液,出现橘黄色D.加入碘—碘化钾溶液,出现淡黄色4、在可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验材料的选择叙述错误的是( )A.马铃薯块茎中含有较多的糖且近于白色,可用于进行可溶性还原糖的鉴定B.花生种子富含脂肪且子叶肥厚,是用于脂肪鉴定的好材料C.大豆种子蛋白质含量高,是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料D.鸡蛋清含蛋白质多,是进行蛋白质鉴定的动物材料5、在鉴定可溶性还原糖的实验中,加入斐林试剂时必须( )A.先加入斐林试剂甲液,后加入乙液B.先加入斐林试剂乙液,后加入甲液C.将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再使用D.以上A、B、C三项操作方法都正确。
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一、实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二、实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
思考2.试以葡萄糖为例写出相应方程式:思考3.蛋白质检测的反应机制是什么?三.实验材料思考4.做可溶性还原性糖鉴定实验应选择什么样的实验材料?为什么?思考5.做脂肪的鉴定实验应选择什么样的实验材料?思考6.做蛋白质的鉴定实验应选择什么样的实验材料?四、实验试剂斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液)、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液)、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水。
思考7.斐林试剂与双缩脲试剂相同吗?为什么?思考8.上述的酒精溶液起作用?五、方法步骤:1、还原糖检测和观察的操作方法:制备组织样液(去皮、切块、研磨、过滤)→取1支试管,向试管内注入2mL组织样液→向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡→试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色。
思考9.为什么苹果或梨组织液必须临时制备?思考10.实验中应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂,为什么?思考11.实验中能否将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测?为什么?思考12.还原糖溶液检测过程中出现的颜色变化过程是怎样的?2、脂肪检测和观察的操作方法:方法一:向待测组织液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液,观察样液被染色的情况;方法二:取材→切片→制片→观察思考13.为什么切片要尽可能薄些?思考14.制片过程中为什么要洗去浮色?思考15.制片过程中为什么要用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精?思考16.制片过程中为什么在盖上盖玻片前要滴加蒸馏水?3、蛋白质检测和观察的操作方法:制备组织样液(浸泡、去皮研磨、过滤)→加样液约2ml于试管中→加入双缩脲试剂A,摇匀→再加入双缩脲试剂B液3~4滴,摇匀→观察颜色变化。
实验二 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一P 18)一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
1.可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O 沉淀。
如:葡萄糖+ Cu ( OH ) 2葡萄糖酸 + Cu 2O ↓(砖红色)+ H 2O ,即Cu ( OH ) 2被还原成 2O ,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸 (该反应式了解) 注意反应条件,水浴加热。
2.非还原糖:淀粉遇碘变蓝色。
另外蔗糖也不是还原糖,所以不能用甘蔗、甜菜什么的来做还原糖的实验。
因为它们富含的糖是蔗糖。
3.脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。
4.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH 溶液中能与双缩脲试剂中的Cu 2+作用,产生紫色络合物。
) 三.实验材料1.做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。
(因目中实在要用菜叶子了,记得有一个步骤叫做“脱色”)2.做脂肪的鉴定实验。
应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。
3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。
我们用的蛋清液。
四、实验试剂1.斐林试剂(检测还原糖)甲液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH 溶液: 乙液:质量浓度为0.05g/ mL CuSO 4溶液 2.苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液(检测脂肪) 3.双缩脲试剂(检测蛋白质)A 液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH 溶液B 液:质量浓度为0.01g/ mL CuSO 4溶液4.其他试剂:体积分数为50%的酒精溶液(检测脂肪实验中用来洗去浮色);碘液(检测淀粉液);蒸馏水(制作标本时使用)五、方法步骤。
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质自主梳理检测原理是利用某些化学试剂与生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。
1.还原糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。
2.淀粉遇碘变蓝。
3.脂肪被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色,或被苏丹Ⅳ染液染成红色。
4.蛋白质与双缩脲试剂作用产生紫色反应。
要点归纳1.实验原理及目的要求根据某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应,尝试用化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质。
2.实验流程归纳(1)选材→制备组织样液→显色反应。
(2)脂肪的检测还可利用显微镜观察法,实验流程为:取材→切片→制片→观察。
3.实验材料的选择(1)可溶性还原糖的鉴定实验中,最理想的实验材料是还原糖含量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅,易于观察。
可选用苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。
(2)脂肪的鉴定实验中,实验材料最好选富含脂肪的生物组织,若利用显微镜观察,则最好选择花生种子。
如果是新鲜花生种子,可不必浸泡,浸泡后效果反而不好;如果是干种子,需浸泡3~4h最适宜切片(浸泡时间短,不容易切片;浸泡时间过长,组织太软,切下的薄片不易成形)。
(3)蛋白质的鉴定实验,最好选用富含蛋白质的生物组织。
植物材料常用大豆,且浸泡1~2d,适于研磨,动物材料常用鸡卵清蛋白。
4.实验操作中的注意事项(1)在鉴定可溶性还原糖的实验中,加热试管中的溶液时,应该用试管夹夹住试管上部,放入盛50~65℃温水的大烧杯中加热。
注意试管底部不要接触烧杯底部;斐林试剂不稳定易变性,应现用现配。
(2)还原糖、蛋白质的鉴定实验中,在加相应试剂鉴定之前,要留出一部分组织样液,以便与鉴定后的样液颜色作对比,增强实验的说服力。
(3)在蛋白质的鉴定实验中,如果用蛋清稀释液作为实验材料,一定要稀释到一定程度,否则,与双缩脲试剂发生反应后会粘在试管的内壁上,使反应不彻底,试管也不易洗刷干净。
感悟拓展(1)浓度不同。
斐林试剂中CuSO4溶液浓度为0.05g/mL,双缩脲试剂中CuSO4溶液浓度为0.01g/mL。
考点三 (实验)检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(5年6考)检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.检测原理(1)糖类的检测(2)脂肪的检测:脂肪+⎩⎨⎧苏丹Ⅲ染液―→橘黄色苏丹Ⅳ染液―→红色 (3)蛋白质的检测:蛋白质+双缩脲试剂―→紫色2.实验步骤3.实验成功关键点(1)三个实验中都不宜选取有颜色的材料,否则会干扰实验结果的颜色变化。
(2)由于苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液易溶于酒精,故可用体积分数为50%的酒精洗去浮色。
(3)蛋白质鉴定中,若用大豆作材料,必须提前浸泡;若用蛋清作材料,必须稀释,防止其黏在试管上不易刷洗。
(4)物质鉴定实验一般可预留部分样液作对照实验,若需进一步设立对照实验,对照组应加入成分已知的物质,如验证唾液淀粉酶是蛋白质,对照组可加入稀释的鸡蛋清溶液。
1.下图是检测还原糖的实验(1)如下图示的处理,2 min后试管内将呈现何种颜色?试加以分析说明。
(2)向某试管内无色液体中加入斐林试剂,经加热若出现砖红色沉淀,则表明试管内含有葡萄糖,对吗?提示(1)应为蓝色(斐林试剂的颜色,因未经水浴加热,只有将试管置于50~65 ℃温水中,经水浴加热后,方可呈现“砖红色沉淀”)。
(2)不对。
只能证明含有“还原糖”,不能具体证明是哪种还原糖。
2.下图为某种物质鉴定方案,请推测:(1)图示的实验方案用于鉴定何类物质,其中“某试剂”是什么?A液、B液分别指什么?(2)若溶液中有被检测物质则右侧试管“摇匀后”变成何种颜色?提示(1)蛋白质及多肽化合物;双缩脲试剂;A为0.1 g/mL NaOH溶液;B为0.01 g/mL CuSO4溶液。
(2)紫色。
糖类、脂肪与蛋白质的检测1.(2016·海南卷,15)下列实验中,加入试剂后不能产生特定颜色的是()A.取成熟香蕉匀浆,用斐林试剂检测还原糖B.黑暗中生长24 h的天竺葵叶片,用碘液检测淀粉C.玉米根尖经甲基绿染色后,在显微镜下观察细胞核D.花生子叶经苏丹Ⅲ染色后,在显微镜下观察脂肪颗粒解析成熟香蕉中含有较多葡萄糖,用斐林试剂检测会出现砖红色沉淀;黑暗中生长24 h的天竺葵叶片,淀粉被消耗,加入碘液不会产生蓝色;玉米根尖经甲基绿染色后,在显微镜下观察细胞核呈绿色;花生子叶经苏丹Ⅲ染色后,在显微镜下观察脂肪颗粒呈橘黄色。
新人教生物必修一(学案+练习)(探究·实践)检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.检测原理某些化学试剂能使生物组织中的相关化合物产生特定的颜色反应。
(1)还原糖的检测:还原糖+斐林试剂――→水浴加热砖红色沉淀。
(2)脂肪的检测:脂肪+苏丹Ⅲ染液―→橘黄色。
(3)蛋白质的检测:蛋白质+双缩脲试剂―→紫色。
2.实验步骤(1)还原糖的检测。
(2)脂肪的检测。
(3)蛋白质的检测。
1.还原糖和蛋白质的检测都需要加热处理。
( × ) 2.斐林试剂和双缩脲试剂都需要现用现配。
( × )3.在脂肪检测的过程中,使用体积分数为50%的酒精的作用是洗去浮色。
( √ )4.在检测还原糖时,应先加入斐林试剂的甲液,再加入斐林试剂的乙液。
( × )5.用于检测还原糖的斐林试剂的甲液和乙液,可直接用于蛋白质的检测。
( × )1.关注实验中的四个注意点3.把握三类有机物检测在操作步骤上的“三个唯一”1.(2021·北京东城二模)现有甲、乙两种溶液,相关内容如表所示,据此分析不能得出的推论是( )B .①是斐林试剂,使用时需水浴加热C .乙液可能是一种酶溶液D .②是紫色,③是核苷酸D 解析:斐林试剂用于检测还原糖,还原糖包括葡萄糖、麦芽糖和乳糖等,其中麦芽糖由两个葡萄糖缩合而成,A 正确;斐林试剂用于检测还原糖,在水浴加热的条件下出现砖红色沉淀,B 正确;大多数酶的本质是蛋白质,双缩脲试剂可与蛋白质发生紫色反应,因此乙液可能是一种酶溶液,②是紫色,③是氨基酸,C正确,D错误。
2.(2022·湖北联考)下列有关实验的叙述,正确的是()A.淀粉、葡萄糖、麦芽糖分别与斐林试剂混合并水浴加热后都会出现砖红色沉淀B.花生子叶用苏丹Ⅲ染液染色后用显微镜观察,可看到红色颗粒C.黄豆组织样液中加入0.01g/mL的CuSO4溶液摇匀,再加入0.1g/mL 的NaOH溶液后会出现紫色D.蔗糖是非还原糖,但是它的水解产物在一定条件下可以与斐林试剂反应生成砖红色沉淀D解析:淀粉不是还原糖,与斐林试剂混合并水浴加热后不会出现砖红色沉淀,A错误;花生子叶用苏丹Ⅲ染液染色后用显微镜观察,可看到橘黄色颗粒,B错误;黄豆组织样液中含有蛋白质,可与双缩脲试剂反应呈紫色,但加入双缩脲试剂时,应先加入0.1g/mL的NaOH溶液,再加入0.01g/mL的CuSO4溶液,C错误;蔗糖是非还原糖,其水解产物为葡萄糖和果糖,葡萄糖和果糖都是还原糖,可以与斐林试剂在水浴加热条件下产生砖红色沉淀,D正确。