微生物实操考核表

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食品微生物实际操作考核
考试人员:考试时间:考试分数:
考核内容:水中细菌总数和大肠杆Leabharlann 的检测项目考核目标
满分数
得分
问题点
准备
浏览整个实验目的、原理和操作步骤
2
实验所需试剂的配制
准确配制培养基
3
正确使用灭菌锅
5
取样
水样的采取(自来水)
水龙头用火焰烧3分钟灭菌,使水流5分钟后,在火焰旁打开灭菌三角瓶瓶塞,以接取的水样进行分析
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(2)将这2个梯度的匀液注入到无菌平板中,每个1毫升。同时吸取1毫升生理盐水作空白对照。
5
(3)及时将15-20毫升并恒温至46摄氏度的VRBA注入平皿中,,小心旋转,充分混匀。待琼脂冷凝后再注入3-4毫升。翻转平板,置于36℃±1℃培养18-24h
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(4)根据标准中的要求选择典型菌落,记录数量。
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(3)另取一灭菌培养皿,倾入20毫升琼脂不加1mL生理盐水,作空白对照。培养基凝固后倒置于36℃±1培养箱中培养48h±2h。
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(4)肉眼观察,必要时用显微镜或菌落计数器观察,记录稀释倍数和相应的菌落数量
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平板计数法测定水中的大肠菌群(自来水)
(1)调节上面配制好的1:10匀液PH值,控制在6.5-7.5。用无菌习惯吸取1毫升,注入到9毫升稀释液中,混合均匀。
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水中细菌总数的测定
(1)用灭菌吸管吸取25毫升水样,注入到含225毫升稀释液的无菌三角瓶中配成1:10的匀液。用灭菌吸管吸取1毫升的1:10水样,注入到含9毫升稀释液的无菌试管中,反复混匀。吸取这两个梯度的匀液1毫升,注入到灭菌培养皿中,每个水样做2个平行。
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(2)分别注入20毫升冷却至45摄氏度的平板计数琼脂,放置在水平桌面上旋转摇动,使水样与培养基充分混匀
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(5)证实实验:挑选10个不同类型的典型菌落和可疑菌落,少于10个全部挑取。分别接种于BGLB肉汤管中,36±1℃培养24-48h,观察产气情况。凡有产气,判定为阳性。
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(6)按标准中的方法计算出大肠菌群数。
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