孕马血清促性腺激素
- 格式:doc
- 大小:83.50 KB
- 文档页数:2
实验五孕马血清促性腺激素的生物学测定一.实验特点实验类型:设计型实验实验类别:专业基础课计划学时:4学时每组人数: 4~5人二.实验目的要求生物学测定法是根据一些动物的靶器官和靶组织对激素反应程度来测定激素含量的方法,是最早应用于激素测定的经典方法,能够直接反应激素的生物活性,也称作激素的生物学效价,其它的测定方法往往以此种方法加以验证。
要求学生通过孕马血清促性腺激素的活性测定,掌握激素的生物学测定方法。
三.实验原理PMSG的生物学测定法是以即将达到性成熟或摘除垂体的小鼠或大鼠,注射含有待测激素样品后,观察其子宫或卵巢增重及卵泡发育等变化。
凡是引起确定的生理变化的最低有效剂量,即相当于一个效价单位(如小鼠单位或大鼠单位)。
母马在妊娠的40天,PMSG开始出现,增长至70天达到顶峰,持续到120天,每升血液中可达7万国际单位以上,然后开始下降,大约在170天时降到几乎测不出的程度。
PMSG 能促进动物卵巢机能,进而引起子宫增生和生长的变化。
以性未成熟的小白鼠子宫增大程度为测定活性的根据,来测定该激素引起小白鼠子宫阳性反应的最低浓度,来进行计算预测定的PMSG样品的活性。
即为能引起未成熟的小白鼠子宫增大一倍PMSG的量称之一个小白鼠单位。
四.实验动物和器材1.同品系20~21日龄,体重10~12g性未成熟的雌性健康小白鼠25只(每一实验教学组)。
2.含PMSG血清样品或稀释的PMSG和灭菌生理盐水。
3.5ml注射器5只,5号小针头5只,试管架1个,1ml、2ml、5ml、10ml吸量管各一支,吸耳球一个,10 ml试管5支,20ml试管二支,剪子,镊子。
五.实验内容步骤1.将25只小白鼠随机分为5组,每组5只,其中4组为实验组,另一组做为对照组。
2.取灭菌后的试管4支,分别加人生理盐水11、2、4、6ml,吸取1ml样品血清或PMSG稀释液加人到第一支试管中,充分混匀。
再取此试管的稀释血清在其他三支试管中各加入2ml,混匀后其血清浓度分别为1/12,1/24,1/36 和1/48。
孕马血清促性腺激素对小鼠受孕的影响
唐旭;周姝;荣晓;廖纪如;李争妍;蒋图良;何开丽;张亚娟;韩琴
【期刊名称】《局解手术学杂志》
【年(卷),期】2010(019)002
【摘要】目的观察孕马血清促性腺激素(PMSG)对于小鼠受孕率的影响.方法通过注射PMSG进行超数排卵处理,建立实验组和自然周期组昆明小鼠妊娠模型,比较两组小鼠的受孕率和获得的平均胚胎数.结果在PMSG妊娠小鼠模型中,小鼠妊娠率为75%,平均受孕17个胚胎;自然周期小鼠妊娠率为40%,平均受孕10个胚胎.结论PMSG能促进小鼠排卵,增强小鼠受孕率.
【总页数】2页(P117-118)
【作者】唐旭;周姝;荣晓;廖纪如;李争妍;蒋图良;何开丽;张亚娟;韩琴
【作者单位】成都医学院预防医学专业;成都医学院预防医学专业;成都医学院预防医学专业;成都医学院预防医学专业;成都医学院预防医学专业;成都医学院预防医学专业;成都医学院预防医学专业;成都医学院预防医学专业;成都医学院公共卫生实验室,四川,成都,610083
【正文语种】中文
【中图分类】R339.2;Q492.6;Q575.12
【相关文献】
1.孕马血清促性腺激素对狗卵母细胞体外核成熟的影响 [J], 王坤;林涛;赵明辉;高威威;尹熙俊
2.孕马血清促性腺激素对幼龄鼠卵巢和子宫发育的影响 [J], 原璐;王博;朴善花;谭建华;安铁洙
3.不同剂量孕马血清促性腺激素(PMSG)对未成年大鼠超数排卵效果与质量的影响[J], 张春燕;刘丽均;狄敏;赵丹凤;赵立虎;陈浩杰;徐平;芮荣
4.孕马血清促性腺激素(PMSG)对母猪繁殖力的影响 [J], 刘学剑
5.孕马血清促性腺激素在羊繁殖中的应用 [J], 白园园; 王净
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
孕马血清标准
孕马血清(PMSG)是一种常用的动物用促性腺激素,用于促进动物排卵和改善繁殖性能。
孕马血清的标准因生产厂家和用途而异,但通常会根据其促性腺激素的含量、纯度、生物活性、安全性等方面进行规定。
一般来说,孕马血清中促性腺激素的含量越高,其促排卵效果越好。
同时,孕马血清的纯度也很重要,高纯度的产品可以减少杂质和其他激素的干扰,提高使用效果。
此外,孕马血清的生物活性也是评价其质量的重要指标,活性越高,促排卵效果越好。
在安全性方面,孕马血清应符合相关法规和标准,如无菌、无热原、无有害微生物等。
此外,孕马血清的使用剂量和注射时间应根据具体情况而定,一般建议在兽医指导下使用。
总之,孕马血清的标准是多方面的,包括促性腺激素含量、纯度、生物活性、安全性等。
选择符合标准的孕马血清产品可以提高动物的繁殖性能和生产效益。
孕马血清促性腺激素定量检测试剂盒的建立与应用章金刚军事医学科学院输血医学研究所血清或血浆成分的检测多采用免疫学方法。
根据检测的目的不同,检测方法很多,其中酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种最为常用也比较成熟的试验技术,既可用于定性,也可用于定量。
在医学和兽医学实践中,大多数的检测试剂盒都是基于ELISA方法。
目前,用于检测抗原(包括孕马血清促性腺激素(PMSG)),多采用双抗体夹心ELISA。
理论上讲,对于孕马血清促性腺激素(PMSG)的定量检测,应该采用双抗体夹心ELISA方法。
要建立PMSG的双抗体夹心ELISA,必须首先获得特异性好、敏感性高、亲和力强的抗体。
所用抗体可以是纯化的多克隆抗体(抗血清),也可以是单克隆抗体(单特异性)。
上述两类抗体各有优缺点,关键是标准化、特异性、敏感性、重复性的问题。
以下从主要研究内容、试验技术方案、基本经费预算、可能存在问题(风险因素)等几个方面简要叙述,供参考。
一、主要研究内容1、抗原制备与鉴定无论是制备多克隆抗体,还是单克隆抗体,抗原即PMSG的纯度都至关重要。
基本要求是PMSG的纯度应为电泳纯级,毫克量以上。
否则,可能影响整个工作的开展。
2、单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备包括小鼠免疫与检测、杂交瘤细胞的融合与筛选、阳性克隆的筛选与扩增、杂交瘤细胞株的建立与鉴定(含染色体鉴定)、抗体的亚类与效价鉴定、抗体的亲和力与特异性鉴定、单抗的制备与纯化、单抗的标记与测定等。
要建立检测试剂盒,必须选出3~5株针对不同抗原决定簇的单克隆抗体,继续有关特异性、敏感性、稳定性等一系列试验。
3、多克隆抗体的制备一般选用家兔。
主要内容包括免疫与检测、血清的采集与鉴定、抗体的纯化与鉴定、抗体的标记与测定等。
多克隆抗体存在的最大缺陷是难于标准化,检测结果不稳定,这也是目前检测试剂盒多采用单克隆抗体的主要原因。
4、检测方法的建立和优化检测方法的建立和优化包括抗体和抗原最适工作浓度的优化、抗体包被浓度的优化、抗原标准含量曲线的建立、样品检测等。
激素对小鼠胚胎体外发育的影响摘要探讨小鼠胚胎体外发育过程中,2种激素(孕马血清促性腺激素PMSG、人绒毛膜促性腺激素HCG)对早期胚胎发育的影响。
取原核期胚胎培养于不同的培养体系中,确定适合胚胎发育的最佳体外培养体系;在胚胎培养液中加入不同浓度的激素,观察激素对体外发育的影响。
试验发现含10%胎牛血清的人输卵管液培养液(HTF)是该试验条件下小鼠早期胚胎发育的最佳培养液;在该培养液中添加不同浓度和不同种类的激素后,各发育阶段胚胎的发育率与未添加激素的对照组相比均有所下降,但未发现浓度依赖性。
由此可认为,高浓度的PMSG和HCG 对体外培养的胚胎发育有抑制作用,可降低胚胎发育到各阶段的比例,尤其是显著降低了囊胚的发生率。
关键词激素;小鼠胚胎;体外发育;影响EffectsofHormoneonDevelopmentofMousePreimplantationEmbryosinVitroYAO YingXU Ying *CHEN Yi-fei(College of Medicine,Jiaxing University,Jiaxing Zhejiang 314001)AbstractThe system for mouse embryo culture,and the effects of two different hormone on mouse preimplantation embryos in vitro were explored.One-cell mouse embryos were cultured in different culture media to determine the optima system,and thendifferentconcentrationhormone were added to the medium to observe the effect ofhormone on mouse embryo development in vitro. HTF +10% FBS medium was the best culture system of mouse preimplantation embryod in viting. After hormone of different concentrations and kinds were added to HTF +10% FBS medium,the development rate of different stages embryos declines compared with control group. High concentration hormone could depress development of mouse preimplantation embryos in vitro,and lessens the developmental proportion of different stage embryos,then significant decreased the occurrence of blastocyst.Key wordshormone;mouse preimplantation embryos;development in vitro;effects早期胚胎体外培养技术在发育生物学、胚胎移植、转基因动物等领域的研究工作中都有很重要的作用[1]。
浙大九天猪场常见激素制品用药指导一、兽用血清促性腺激素(血促性素、孕马血清、PMSG)本品促进母畜发情、排卵、受孕、提高性欲。
主要作用于不发情或发情不明显的母畜,还可用于超数排卵,促进多胎,增加产仔数。
1、治疗母猪不发情:1000-1500单位/头,经产母猪宜加0.1mg/头氯前列烯醇。
2、后备母猪发情同期化处理:800-1000单位/头。
二、兽用注射用绒毛膜促性腺激素(绒促性素,HCG)本品由人体胎盘绒毛膜分泌通过尿液提取的糖蛋白激素。
本品促进母畜卵泡继续发育成熟,诱导排卵,在排卵后,促进功能性黄体的形成,增强超数排卵的效果;控制排卵,治疗排卵迟缓,卵泡成熟度差,卵泡囊肿,促进公畜睾丸间质细胞发育和精子的形成,促进雄激素分泌。
1、诱导发性排卵:1000-2000单位/头,促进卵泡发育成熟并排卵,加快发情表现。
在母猪断奶后当天或次日肌注PMSG400单位+HCG200单位,可使多数母猪于断奶后5-8天发情。
2、控制促进排卵:用PG600、PMSG处理后72小时或配种同时肌注HCG500-1000单位,促进排卵的同期化,明显提高受胎率和产仔数。
3、治疗母猪乏情:肌注2000-3000单位HCG早晚一次,连用2-3天,如配合PMSG1000-1500单位、FSH200-400单位,疗效更佳。
4、治疗公猪繁殖障碍:对于性欲差、精液质量差、隐睾症、阳痿等公猪,肌注1000-5000单位HCG,能促进公猪性欲表现力,提高精子活力,增加精液数量。
三、兽用注射用促黄体素释放素A3(促排3号,LHRH-A3,LRH-A3)本品是人工合成的促黄体素释放激素D-色氨酸类似物。
能促进动物垂体前叶释放促黄体素(LH)和促卵泡素(FSH)。
用于治疗排卵迟缓,多泡发育、卵巢囊肿,提高受胎率和母猪产仔数。
1、提高受胎率和产仔数:配种前12小时至配种同时,肌注20-25ug,可提高每窝产仔数平均1-2头,对生产力水平较低的母猪效果更显著。
孕马血清促性腺激素PMSG的主要作用和功能孕马血清促性腺激素PMSG也称为马绒毛膜促性腺激素。
主要来自妊娠母马子宫内膜杯状细胞。
主要存在于血清中,妊娠后40天左右开始出现,60天达高峰,维持到120天后逐步下降,170天全部消失。
孕马血清促性腺激素PMSG已知在妊娠马属动物(驴、斑马等)都有产生,所以有人称为马属动物绒毛膜促性腺激素(eCG)。
PMSG激素在马以外的物种中有大约4天的生物活性半衰期。
延长的生物活性可以引起卵巢刺激和排卵。
然而,单独使用PMSG通常会导致囊性卵巢疾病,因为不受限制的卵巢刺激和糖分子降低激素的清除率。
由于循环半衰期延长,PMSG比其他垂体激素更有可能被使用。
PMSG仅具有促黄体生成激素样活性,但在其他动物类中,PMSG具有FSH和LH样活性。
孕马血清促性腺激素(PMSG)品种间差异较大。
孕马血清为糖蛋白激素,主要作用和功能有:1、具有与FSH相似的生理功能,促进卵泡发育和黄体形成,可引起母畜超数排卵。
2、对公畜,PMSG促使睾丸的精细管发育和性细胞分化。
在动物繁殖生产和临床上,PMSG常用做FSH的代替品,用于治疗母畜卵巢静止、机能衰退,还可用于超数排卵。
猪的诱导发情常用剂量为750~1000单位;对公畜可治疗性欲不强和生精机能减退。
生产中多与人绒毛膜促性腺激素(hCG)配合使用。
艾美捷代理的孕马血清促性腺激素PMSG是一个复杂的糖蛋白,是从怀孕母马的血清中获得。
这个大小为43-63kDa的蛋白能够补充和替代雄性和雌性体内的促卵泡激素和脑垂体前叶的间隙细胞刺激素。
因此,PMSG –Intervet能刺激雌性卵泡的发育。
孕马血清促性腺激素(PMSG)生物测定方法—小鼠卵巢增重法...孕马血清促性腺激素(PMSG)生物测定方法~小鼠卵巢增重法和子宫增重法的探讨李湛君柯若伦(中国药品生物制品捡定所100050)l95表文探讨了用小鼠卵鞋增重法和.,显子言增重洼测定孕马血清促性隙激素(PYlSG)生物效价的可厅洼影响田袁及最洼窑验条件.实验墙果证明小鼠卵巢和子宫增重法在一定剂量范围内,剂量的对数弓反应存在直线关系,涮主P~ISG嫂升与太鼠印巢增重甚结接近,小鼠珀幕增重击与1j,鼠子宫增重法比转,前者优于者.孕马血清促性腺激素(PMSG)是FSH和LH的混合物.但以FSH为主,其生物测定方法主要依据FSH和LH的活性.PMSG第二次国际标准品效价协作标定中共采用十二种生物测定方法"I}日本药局方(翦十一改正),英国药典(1988)以大鼠卵巢增重法作为法定方法.我所于1980年首次建立PMSG国家标准品时,也采用此法.由于太鼠来源困难价格高,因此考虑用小鼠.小鼠卵巢增重法或子宫增重浩国内外均曾有报导".我们就效价测定中最佳实验条件,如给药次数,摘取小鼠卵巢或子宫时间等进行了探讨,对比陌种方法优劣,井与大鼠卵巢增重法的生物效价测定结果进行比较.一,材料与方法动物:小自鼠:昆明种,雌性,体重10~12g,本所繁殖场.大白鼠:雌性,体重d0~60g,北医实验动物中心.标准品PMSG第二次国家参考标准品(s2),效价llOOlU/amp.样品:PMSG冻千样品,本所制备(T);PMSG冻干制剂,日本商品(r),PMSG冻干原料,外购(T).方法小鼠卵巢增重法:雌幼小白鼠,体重10~12g,均匀分组,每组10~15只,剂量范围选择在最小剂量能产生卵巢增重,最大剂量增重不达极限溶液以生理盐水或05%CMC配制, 剂距l:0.5.每只小鼠颈部皮下一次注射0.2 ml,给药后一定时间用乙醚麻醉处死,摘取卵巢,剥离干净,吸干组织液,用精密天秤(精确至05rag)称重.小鼠子宫增重法:方法同上,但剂距用l:0.6(或l:0.7),最后摘取子宫称重.大鼠卵奠增重法:按文献,实验设计为(2?2)法或(3?3)法.效价测定结果均按中国药典(1985)量反应平行线测定法(2.2或3.3)进行可靠性测验;可靠性测验通过者计算效价和平均可信限率.=,结果与讨论1.剂量与反应关系,直线性测验小鼠卵巢增重法和小鼠子宫增重法,每次实验设4~6个剂量组,以对数剂量与反应关系作图,进行直线性翅!I验并计算精密度指数值(^=S/b)及回归直线的斜率b值.表1及图1,图2为小鼠卵巢法和小鼠子宫法多次实验结果:经直线性测验,PMSG在一定剂量范围内,对数剂量与反应的直线回归项有非常显着意义(P<0.01),二次曲线回归项及偏离回归项均无显着意义(P>D一05),即直线关系成立.比较二种方法的^值,比较,●;:fI■●ll●,..●196巷壁堑盘查表1小鼠卵簟法和小鼠子宫法PMSG对散剂量~反应直线性涓验避过的涓定结果实验方浩小鼠卵巢珐小鼠子宫法.剂量图l小鼠卵巢法对数瓤量~反应曲线纵坐标:器官重(rag)/小鼠重(g)横坐标IU/只接近,说明二种方法有相近的精密度.小鼠子宫法虽其b值大,反应对剂量的灵敏度高,但反应对其它各种影响因子的敏感性亦高,标准差亦大,故值亦不小.小鼠子宫法直线关系成立的剂量范I目较窄,并受季节等客观条件影响,剂量范围变化比小鼠卵巢法大(图2),因此用小鼠子宫增重法时,最好先作预实验,并且剂距不宜太大.2.相同实验条件下,一次路药与多次给药的比较文献"'测定PMSG效价均用大鼠卵巢增重法,但给药方法不同,前者为一次给药,而后者为连续三天三次给药.我们在相同实验条件下,比较了一次给药与三次给药(每天一次连续三天)方法的优劣,并作它们两个回归系巨2小鼠于宫甚对数剂量~反应曲线[实验1(4月份),x实验2(5月份)▲实验8(6月份)纵坐标:器官重(rag)/小鼠重(g)横坐标tv/只数间的显着性铡验.三次给药时,将PMSG溶于0,5CMC溶液中,一次配成,4℃保存.表2结果表明:小鼠卵巢增重法三次给药比一次给药的精密度指数小,b大,并且b~b间差异有显着性意义,即三次给药的方法不仅回归直线的斜率较大,反应对剂量的灵敏度较高,而且精密度也较好,标准差较小,故小鼠卵巢增重法三次给药优于一次给药.小鼠子宫增重法一次给药与三次给药比较,虽b—b间差异无显着性意义,但值小,即精密度较好,故一次给药的小鼠子宫增重法可能较好.表2PMSG--攻耸药与三次给药结果比较~~∞'帅一一乳只一Ⅲ∞∞围如范量.剂数n一实一.■lI^.●●●3.最佳子宫或卵巢摘取时间的选择小鼠卵巢和小鼠子宫增重法分别给3~4组剂量,在给药后不同时间摘取卵巢或子宫称重,比较给药后第二天(24小时),三,四,五,六天的组织增重情况精密度,回归直线的斜率等.表3说明:小鼠卵巢增重法,给药后第四,五天回归直线的斜率b值较大,精密度指数较小.并且多数情况下第四天b值最大,^ 值最小,第五天次之}而第二,三,六天的回-197?归直线常不成立,个别成立者也是b值最小, 值最大,井与第四天b值问差异常有显着性意义.故认为小鼠卵巢增重法反应高峰在第四天,其反应对齐量的灵敏度最高,标准差最小,精密度最好,摘取卵巢的最佳时同为给药后第四天(72小时).小鼠子宫增重法给药后第四,五天回归直线的斜率b值最大,精密度指数^值最小,而第三,六天b值小,值大,因此选择给药后第四天(72小时)摘取子宫为佳表5耋旨pMSG后不商时间摘取卵巢或子宫的比较宴峻方法编号小鼠卵巢法小鼠子宫浩!摘取组织天数第二天l第三天l簿四天I第五天li,0?230.98P<0.0,5O?44lO?62P~0*050,580.530.6;O.P>0.05第三天0.320.52P>O.02第四天J0.3.1:0.27第五天lo.弛.o.50}P<O.05第二天OoO0ld8?33P<O?Oi;第三天0.072.i9P<o.053第四天Io.45o.37j第五天o.31Io.3gP>O.05第六天0.18l0.78P<0.06第三天J0.51.1.36P>O.05第四天I3.O010.184第五天1.210.d2P>o.o.第六天l0.i;1i.2,5P>O.05第三天J1.3010.d6P>O.05【第四暑I2.30【0.29{5第五天2.i;1J0.23P>O.05第六天l1.15l0.25P>O.054小鼠法与大鼠卵巢法效价锢!I定结果比较.以小鼠9口巢法和小鼠子宫法分别溯定三个PMSG样品的生物效价,并与大鼠卵巢增重法的测定结果进行比较.表4说明小鼠卵巢和小鼠子宫增重怯与大鼠卵巢增重法测定的效价一般比较接近,个别实验有相差较多的,与大鼠法的效价比值, 小鼠卵巢法是0.84—1.05,小鼠子宫法是1.18 ^一1.26,虽与大鼠法间的差异均无显着性意l98如义,但结果偏高:从平均可信限率及精密度指数上都可看出.小鼠法的辐密度均不如大鼠卵趟晶买殓方浩TT£药物{}析杂志巢法,但我们考虑可通过严格控制动物质量,增加物数等措施加以改进.表4PMsG样品生物效价测定结果'~…一'1_●___..__________-__..●___-_____',.'-__,__-q-一敬数摇.鼠242.{J凳蔷'(213.4—292.J,臣202.7卵巢甚(136.4—298.4)一鼠285.5F宦法9(I95.2~425.3)x鼠642.5}巢一(624.6~1373.3)一677.9卵矍法.(639.~8I7.3)小鼠774.8予喜法4(611.5~885.2)走鼠858?4._翼法'(770.0~580.9)出鼠1084.8F富珐i<925.2—1216.0注;可靠恤f黔均通过【;j犬鼠卵巢法比值'23.9~5I.2:0.14~0.18i2.6~30.810.I2~0.23小鼠卵巢增重法直线关系成立的剂量范围较宽,并比较稳定.易选择剂量进行教价测定;而小鼠子宫增重法呈直线关系的剂量范围较窄,受客观条件影响变化较大,进行效价测定时剂量不易掌握,影响成功率,并且测定结果波动较大.敦价比值偏高,故认为小鼠卵巢法优于小鼠子宫涪虽然我们所测的样品较少,积累的数据有限,但实验结果初步证明小鼠卵巢法有一定的可行性,在特定条件下,可代替大鼠进行效价测定,但尚需进一步完善并积累数据进行考核.关■词:孕马血清促性腺激素;生物测定}小鼠卵巢增重珐:鼠子宫增重弦1.00I参考文献'[1]DRBangham&PatriclaAIWoodward.●Bu]lW1dH|thOrg,85:76I,1956[2]日年菇局方(第十一改正)[8]TheBritishPharmaeopeIa.1988[4]V0nHTrolldenlet:ZbJPharm,120(10):100S.1981[5]吕垒根等l上海畜牧兽医通讯,3(3)l127,I983(本文于l989年6月11日修改回,●●1O(4).1990?199? PreliminaryStudiesintotheBioassayMethodofSerumGonadotrophin(PMSG)MouseOvarianWeightMethod andMouseUterineWeightMethodLiZhan-junKeRuo—lun(Ⅳnti.M』Institute/.rtheControlo/PharmaceuticalottdBiologicalProductsBei]in9)Thispaperi'tlqul'resintothebioassaymethodsofmollseovarianweightMOWanduterine mou5eweightMUWforestimationofpMSG.Thefeasibility,accuracyofthemethodsand theexperimentalconditionsaFeinvestigated.ResultsofthetestsbythewayofMOW artdMUWdemonstratedthatinacertaindoserangethereislinearrelationshipexisting betWeenthelogarithmofdoseaⅡdthereaction.SomesamplesofPMSGaTeestimated hYthemethodsme12tiOI1edahoveandals0byratovarianweightmethod.TheresultB sho,nosigⅡillcant0lifferencesamoⅡgthemHoweve~,MOWseemstobethemethod. Keywords:PMSG.Bioassay;Mouseovarianweightmethod;MouseuterineweightI【l】1Lld荧光法测定聚肌胞含量的研究张培培(中国药品生物河品检定所l000503本文建立了测定聚肌Jj白含量的新方法~荧光洼.用正交实验选择出缓冲蔽的盐(Nac】)浓度为0.5r,反应温度为室温(20℃),反应时INlO分钟为最佳测定条件,含量在2~l2g/ml范围内呈良好的线性关系.变异系数(n=5)小于 5.本文提供的方法简便,快速和实用,比现有的剥定方法专一性更强,有一定的应坍价值.聚肌胞是由单链聚肌苷酸和聚胞苷酸聚合而成的双链多聚核昔酸.是一种免疫增强荆,具有抗病毒的功能"-.』临床用于单纯性疱疹性角膜炎,痘疹性i21腔炎,带状痘疹等I.聚肌胞含量测定目前国内多采用地依酚法….该法是根据样品中核糖含量来确定聚肌胞含量, 其专属性较差,不能区分样品中单链和双链聚核苷酸,并受蛋白质,杂糖干扰..本文试用荧光法测定聚肌胞含量,该法能专一地与双链聚肌胞结合,为聚肌胞含量的测定建立了快。
北京华越洋生物提供 QQ:1733351176
孕马血清促性腺激素(PMSG )
PMSG 也是一种糖蛋白激素,其特点是含糖量高,约占41~45%,而且唾液酸含量多,因而形成了PMSG 的酸性特点,故在血液中的半衰期可长达40—120小时。
PMSG 分子与垂体促性腺激素一样,也是由α和β亚单位组成,而β亚单位是表现其活性的主要部分。
其分子量为53000。
由于分子不够稳定,高温、酸、碱条件都易引起失效,同时对它的分离提纯工作也较其他糖蛋白激素困难,但是目前通过研究其肽链的编码DNA ,已经推出其α、β两亚基的氨基酸顺序。
1.PMSG 具有类似FSH 和LH 的双重活性,但以FSH 的作用为主,因此有着明显的促卵泡发育的作用,同时有一定的促排卵和黄体形成的功能。
2.对雄性动物具有促使精细管发育和性细胞分化的功能。
关于PMSG 对妊娠母马本身的确切功能和生物学特性.至今还了解不够,尚待深入研究论证。
(四)孕马血清促性腺激素的应用
PMSG 是一种经济实用的促性腺激素。
在生产上常用以代替较昂贵的FSH 而广泛应用于动物的诱发发情、超数排卵或增加排卵率(如提高双羔率);对卵巢发育不全或雄性生精能力衰退等也都可收到一定疗效。
其应用方法和常用剂量列于表2—4。
应该提出的是,在实践中进行诱发发情或超数排卵处理时,发现动物个体对PMSG 的反应性差异很大,有的个体甚至没有反应。
其原因比较复杂,是否与个体生理状态不同,或者不同个体产生不同程度的免疫性反应所致,尚有待进一步探讨。
关于PMSG 与PG 或hCG 等其他激素合用,在胚胎移植中作超排处理的方法、剂量详见有关章节。
(五)孕马全血、孕马血清制备或提取孕马血清促性腺激素的方法
编码 品名 规格 单位 北京华越洋生物WX01-1000 孕马血清促性腺激
素(PMSG )
1000IU 瓶 北京华越洋生物WX01-5000
孕马血清促性腺激素
(PMSG ) 5000IU 瓶
北京华越洋生物提供QQ:1733351176
1.孕马全血的制备取500ml玻璃瓶,加入硼砂10g、硫代硫酸钠5g及蒸馏水30ml,在蒸锅中灭菌。
冷却至体温时,采血500ml。
在采血过程中,要摇晃瓶子,以防血液凝固。
最后用灭菌翻口橡皮塞封好,放阴凉处备用。
在普通冰箱内可保存1年以上。
2.孕马血清的制备选怀孕50-120天的健康母马,最好是轻型马,由颈静脉采血于灭菌、干燥的筒状容器内,于室温中使血液凝固,析出血清(为了得到更多的血清,可在凝固的血液上加上较重的物体)。
最后吸出血清,加入0.5%石炭酸,保存于冷暗处,有效期可达1年左右。
3.PMSG的提纯选怀孕50—90天的的母马,用无菌手续采血,使自然凝固,分离血清,并加入0.5%石炭酸防腐,保存于4℃冰箱中备用。
提纯时,以偏磷酸沉淀蛋白,以苯甲酸吸附孕马促性腺激素,并以酒精加以沉淀。