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肿瘤动物模型的构建——白血病篇肿瘤动物模型的构建——白血病篇导读白血病（Leukemia）是一种常见的恶性血液疾病，俗称血癌。
据统计，白血病是儿童恶性肿瘤的头号原因，在儿童及35岁以下成人中发病率位居第一[1]。
同时也是十大恶性肿瘤之一。
目前，白血病具体的发病原因至今尚未研究透彻，因此建立合适的白血病动物模型，对于白血病发病机制及药物研发具有重要意义。
本期为大家综述了白血病的基本情况及小鼠模型的分类、建立方法和应用。
第一章：白血病基本常识白血病是常见液体瘤白血病是常见的液体瘤，与结肠癌、肝癌等实体瘤不同的是，它是造血干细胞的异常分化和过度增殖导致，因此肿瘤细胞会遍布全身，会侵犯身体的每个脏器，造成全身衰竭。
造血干细胞是血液系统中的成体干细胞，具有长期自我更新和分化成各类成熟血细胞的能力。
如下图为造血干细胞可分类形成各种血细胞，如红细胞、血小板和白细胞：造血干细胞分化成各类血细胞（图片来自网站）白血病致病因素有哪些呢？现阶段认为白血病的发病因素：化学因素、电离辐射、药物、毒物、病毒、遗传因素等有关。
白血病主要分为四类根据白血病细胞的成熟程度和自然病程，白血病可分为急性和慢性两大类，临床上，白血病共分为四大类：急性髓系白血病（AML）、急性淋巴细胞白血病（ALL）、慢性髓系白血病（CML）和慢性淋巴细胞白血病（CLL）。
儿童白血病90%以上是急性的，其中急性白血病中70%～80%是ALL。
第二章：实验研究所用白血病模型首先，来了解一下常用的细胞株白血病中常用的小鼠品系用于建立白血病小鼠模型的小鼠可分为近交系和突变系。
根据不同类型和目的选择不同的小鼠品系，具体如下图所示：最后说说常用的动物模型，主要分为三类：一、异种移植模型异种移植模型是最常用的淋巴瘤动物模型。
根据实验目的选择相应的小鼠品系和细胞株后，通常细胞的接种方式为皮下注射、腹腔注射和尾静脉注射。
皮下注射和腹腔注射操作简单，很快在接种部位形成肿瘤或腹腔内形成多发性肿瘤，适合筛选针对白血病的药物。
肿瘤预测模型的构建与优化研究第一章引言肿瘤是一种危害人类健康的疾病，其发病与个体基因、环境及生活方式等多种因素相关。
为了更早地发现和治疗肿瘤，科学家们通过构建预测模型来预测肿瘤的发生与发展。
本章节将介绍肿瘤预测模型的研究背景、意义以及研究目的。
第二章肿瘤预测模型的构建方法2.1 数据收集与预处理在构建肿瘤预测模型之前，首先需要收集与肿瘤相关的数据。
常用的数据来源包括医学图像、病例数据等。
收集到的数据需要经过预处理，包括数据清洗、标准化等步骤，以确保数据的准确性和一致性。
2.2 特征提取与选择特征提取是指从原始数据中提取出与肿瘤相关的特征。
常用的特征提取方法包括主成分分析（PCA）、独立成分分析（ICA）等。
在提取到特征之后，还需要进行特征选择，即从所有特征中选择出最具有代表性的特征，以降低模型的复杂度和提高模型的泛化能力。
2.3 模型选择与训练在构建肿瘤预测模型时，需要选择适合的模型算法。
常用的算法包括逻辑回归、支持向量机（SVM）、决策树等。
选择合适的模型算法后，使用训练数据对模型进行训练，并调整模型参数以获取最佳的预测效果。
第三章肿瘤预测模型的优化方法3.1 数据扩充技术在实际应用中，往往面临样本数量不足的问题，导致模型训练效果不佳。
数据扩充技术通过人工合成新的训练样本，以增加训练数据的数量，提高模型的鲁棒性。
3.2 特征选择方法在特征选择的过程中，常常存在特征冗余或者噪声特征等问题。
为了提高模型的性能，可以引入正则化、信息增益等方法对特征进行筛选，以减少特征的数量，并提高模型的解释性和泛化能力。
3.3 模型参数调优模型的参数对模型的性能起到至关重要的作用。
通过使用网格搜索、遗传算法等优化方法，在给定的参数空间中搜索最优的参数组合，以提高模型的准确性和稳定性。
第四章实验与结果分析本章节将具体介绍肿瘤预测模型的实验过程和结果分析。
我们将使用某个公开的肿瘤数据集作为实验数据，通过构建和优化的预测模型，对肿瘤进行预测，并评估模型的预测性能。
戳这里！原来高分文章的肿瘤模型是这样？（内附高清视频）导读上一期我们介绍了各种肿瘤转移模型的构建，主要是尾静脉和左心室注射肿瘤模型，除此之外，肿瘤的原位模型或者器官倾向性转移模型也是模拟临床中肿瘤自发转移的重要模型。
不同类型癌症具有不同的器官转移倾向性，应针对不同类型的肿瘤选择不同器官荷瘤，尽可能准确地模拟转移过程。
本文将介绍研究中常用的肿瘤原位转移模型及肝转移模型。
一、原位注射（自发性转移模型）基本定义：将肿瘤细胞注射到动物原位器官组织内，形成原位肿瘤病灶，是研究肿瘤生长和转移的经典动物模型。
模型优点：为肿瘤提供了最适宜的生长环境，能较好的模拟人体内肿瘤的发生、发展、侵袭及转移的全过程。
举例：以乳腺癌为例，如下图所示，临床中乳腺癌从原位向肺，骨，脑等器官转移。
图1.乳腺癌常见的转移器官[1]下面为大家介绍乳腺癌原位注射的步骤：1. 准备步骤1.细胞系选择：临床中高侵袭性且带有荧光素酶（Luciferase）标签的三阴性乳腺癌细胞：MDA-MB-231-Luc、4T1-Luc，可在IVIS 小动物活体光学成像系统上直观地检测原位肿瘤细胞向内脏器官的转移情况。
2.细胞接种量：每只注射50μL含有1×105个4T1-Luc（小鼠）或2×106MDA-MB-231-Luc细胞（裸鼠）。
3.小鼠品系的确定及数量：6-8周龄BALB/c雌性小鼠或者裸鼠，每组10只。
4.其他准备器材：冰盒、麻醉剂阿佛丁，注射器，剃毛器，75%酒精棉球，灭菌手术剪和手术镊，医用缝合针线、手术保温机。
2. 操作步骤1.胰酶消化处于对数生长期的4T1-Luc细胞，离心后用PBS清洗细胞以除去培养基中残留的血清成分，并再次离心。
2.用适当的PBS重悬细胞调整其密度至1×105个4T1-Luc/50μL，放置在冰盒中待用。
3.①麻醉：向BALB/c雌性小鼠腹腔注射300μL麻醉剂阿佛丁，放置5min待小鼠完全麻醉；②剃毛并消毒：用剃毛器对小鼠第四对乳房区域脱毛，并用酒精棉球擦拭消毒；③剪开表皮找到第四对乳房垫位置：用手术剪在离乳头1cm处剪开表皮，找到乳头下层的乳房垫；④注射细胞：用镊子挑起乳房垫组织，向乳房垫注射50μL细胞悬液；⑤缝合并复苏：医用缝合针线缝合伤口，酒精棉球轻轻擦拭后，将小鼠放到预热好的37℃手术保温机上等待其复苏。
免疫疗法相关肿瘤模型介绍导读前两期我们介绍了常见的肿瘤动物模型，考虑到肿瘤免疫疗法不同于普通抗癌药物的作用方式和评价体系，有必要在此单独介绍一下肿瘤免疫疗法研究领域常用的肿瘤动物模型。
为此，笔者专门搜集和整理了一些相关资料，以当前较为成熟的CAR-T/TCR-T以及免疫检查点阻断技术为例，对免疫疗法肿瘤模型的特点、常用实验动物及细胞株、建立方法以及药物评价方式等关键点做个简要介绍，以期为有志于从事肿瘤免疫疗法研究的同行们提供些许参考。
背景在当今众多的癌症治疗手段中，免疫疗法无疑是近年来最为吸引人们眼球的“明星”治疗手段，普遍引起学术界及医学界的强烈关注和研究兴趣。
随着以T细胞受体T细胞技术（TCR-T）、嵌合抗原受体T细胞技术（CAR-T）以及免疫检查点阻断技术（Immune Checkpoint Blockade）为代表的新兴肿瘤免疫疗法不断取得临床上的突破和成功，奇迹频现，捷报频传，持续更新着人们对机体免疫系统潜在的强大肿瘤杀伤能力的认知，进一步提高人们战胜恶性肿瘤的信心，当然也持续激发着科研人员对“肿瘤免疫疗法”这一强大抗癌利器的研究和开发热情。
而对于肿瘤免疫疗法的研究，离不开相关动物模型的选择和建立。
事实上，目前已经取得临床成功的肿瘤免疫疗法中，无一例外都已经过大量严格的临床前动物实验进行验证、评估和预测。
可见，相关动物模型的建立对于肿瘤免疫疗法的开发和应用是至关重要且必不可少的。
免疫疗法相关肿瘤模型一、以CAR-T/TCR-T为代表的细胞过继性疗法（Adoptive Transfer）常用肿瘤动物模型细胞过继性疗法是指将供体（donor）细胞（此处主要是T淋巴细胞）经体外刺激活化或者基因修饰后再次回输入受者（Recipient）体内，从而达到相关治疗目的的治疗方式。
供体细胞可以是来源于受者自身，也可以来自于其他个体，前者称为自体移植（Autograft），后者则有两种情况，如果受者与供者属于相同种属，称为同种异体移植（Allograft），反之则为异种移植（Heterograft）。
肿瘤的小鼠模型研究引言：肿瘤是一种常见的疾病，造成了全球广泛的健康问题。
为了研究这种疾病的发生机制以及开发有效的治疗方法，科学家们一直在寻找合适的动物模型来进行实验。
其中，小鼠模型已经成为肿瘤研究领域最常用的模型之一。
本文将介绍小鼠模型在肿瘤研究中的应用，包括模型建立、体内实验和数据分析等方面。
一、小鼠模型的建立1.1 选择适当的小鼠品系建立肿瘤小鼠模型时，选择合适的小鼠品系非常重要。
由于不同品系的小鼠在遗传背景、免疫系统和易感性等方面存在差异，因此需要根据具体的研究目的选择合适的品系。
目前常用的小鼠品系包括NOD/SCID小鼠、BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠等。
1.2 形成肿瘤模型形成肿瘤模型的方法有很多种，常用的方法包括植入肿瘤细胞、化学诱导和基因敲除等。
其中，植入肿瘤细胞是最常用的方法之一。
这种方法将肿瘤细胞注射到小鼠体内，使其形成肿瘤。
根据不同的实验目的，可以选择不同的细胞类型，如肿瘤细胞系、原代肿瘤细胞或转基因小鼠肿瘤细胞等。
此外，还可以通过化学物品诱导小鼠形成肿瘤，或者利用基因敲除技术使小鼠体内特定基因缺失从而形成肿瘤。
二、小鼠模型的应用2.1 病理学研究小鼠模型可以用于病理学研究，通过对小鼠形成的肿瘤进行组织学和病理学检查，可以了解肿瘤的组织结构、细胞类型和病理特征等。
这对于肿瘤的诊断和鉴别诊断非常重要。
2.2 药物筛选小鼠模型可以用于筛选新的抗肿瘤药物。
通过将候选药物注射到小鼠体内，观察其对肿瘤的治疗效果，可以评估药物的抑制肿瘤生长的能力。
这种方法可以帮助科学家们确定哪些药物具有潜在的治疗效果，并优先发展。
2.3 肿瘤发生机制研究肿瘤的发生机制是肿瘤研究的重要课题之一。
小鼠模型可以通过研究肿瘤的发生过程以及相关信号通路的调控机制，揭示肿瘤的发生机制。
这对于进一步了解肿瘤的发生发展规律以及找到干预和预防肿瘤的新途径具有重要意义。
三、小鼠模型研究的数据分析小鼠模型研究产生的数据通常需要进行统计分析，以便得出可靠的结果。
肿瘤小鼠造模方法肿瘤小鼠模型是研究肿瘤发展、治疗和预防的重要工具。
通过模拟人类肿瘤的形成和发展过程，可以更好地了解肿瘤的病理生理特征，并为肿瘤的早期诊断和治疗提供有益的信息。
下面我们将介绍几种常用的肿瘤小鼠造模方法。
1. 异种移植模型异种移植模型是最常用的肿瘤小鼠模型。
它通过将人类肿瘤细胞或肿瘤组织移植到小鼠体内形成肿瘤。
该方法可以用于研究肿瘤的生长、转移、侵袭和药物敏感性等方面。
在异种移植模型中，首先需要获取人类肿瘤细胞或肿瘤组织样本。
常用的来源包括人类肿瘤细胞株、肿瘤切片、肿瘤移植瘤等。
然后，将这些样本注射到小鼠体内，通常是通过皮下注射、腹腔注射或静脉注射的方式。
注射后，观察肿瘤的生长情况，定期测量肿瘤体积，并进行影像学检测以评估肿瘤的进展和治疗效果。
2. 转基因小鼠模型转基因小鼠模型是通过改变小鼠基因组中的特定基因，使其表达或缺失某种特定基因，从而模拟人类特定基因异常引起的肿瘤。
这种模型常用于研究特定基因对肿瘤发生和发展的影响。
转基因小鼠模型的制备通常分为两个步骤：基因敲除和基因敲入。
基因敲除是指将目标基因从小鼠基因组中彻底删除，而基因敲入是指将目标基因导入小鼠基因组中，使其表达或缺失。
基因敲除通常采用胚胎干细胞技术。
首先，通过体外培养的方法获得小鼠胚胎干细胞，然后，通过基因编辑技术，将目标基因从胚胎干细胞基因组中删除。
最后，将这些基因敲除的胚胎干细胞注入到小鼠的早期胚胎中，使其发育成为具有目标基因敲除的小鼠。
基因敲入通常采用质粒转染、病毒载体转染或基因修复等方法。
通过以上方法，将目标基因导入小鼠的基因组中，使其表达或缺失。
这种模型的制备过程比较复杂，需要专业的实验条件和技术支持。
3. 化学诱导模型化学诱导模型是通过给予小鼠特定的诱癌物，如化学物质或药物，来诱发肿瘤的形成。
这种模型可以模拟某些环境因素或生理机制与肿瘤发生的关系。
在化学诱导模型中，首先选择合适的诱癌物，如DMBA（二甲基苯并[a]芘）、DEN（二乙胺）等。
《肿瘤生长的动力学建模及抑制策略的研究》篇一一、引言随着科技的不断进步，癌症的治疗方法不断改进。
为了更深入地了解肿瘤生长的过程和规律，从而开发出更为有效的治疗方案，进行肿瘤生长的动力学建模成为科研领域的热门话题。
本篇文章旨在详细研究肿瘤生长的数学模型以及相关的抑制策略。
二、肿瘤生长的动力学建模1. 模型建立肿瘤生长的模型通常基于生物数学原理，通过数学方程来描述肿瘤细胞的增长、扩散和转移等过程。
这些模型通常包括细胞增殖、凋亡、营养供应等多个方面。
2. 模型分析通过对模型的深入分析，我们可以了解肿瘤生长的规律和特点。
例如，通过分析模型的参数，我们可以了解肿瘤细胞的增殖速度、凋亡速度等关键信息。
此外，我们还可以通过模拟实验来验证模型的准确性。
三、肿瘤生长的抑制策略1. 药物治疗药物治疗是当前最常用的肿瘤治疗手段之一。
通过使用化疗药物、靶向药物等，可以抑制肿瘤细胞的增殖和扩散。
然而，药物治疗也存在一定的副作用和耐药性问题，因此需要结合其他治疗方法进行综合治疗。
2. 免疫治疗免疫治疗是一种新兴的肿瘤治疗手段，通过激活或增强机体的免疫系统来对抗肿瘤。
这种方法具有较低的副作用和较好的耐受性，且对某些类型的肿瘤有较好的治疗效果。
然而，免疫治疗的疗效和安全性仍需进一步研究。
3. 放射治疗放射治疗是利用高能射线来杀死或抑制肿瘤细胞的治疗方法。
这种方法对某些类型的肿瘤有较好的治疗效果，但也可能对正常组织造成损伤。
因此，在制定放射治疗方案时需要权衡治疗效果和副作用。
四、综合策略及未来展望针对不同类型的肿瘤，我们需要制定综合的治疗策略。
这通常包括药物治疗、免疫治疗、放射治疗等多种方法的结合。
此外，我们还需要关注肿瘤的预防工作，如改善生活习惯、加强体检等。
未来，随着科技的不断进步，我们将有望开发出更为精准的肿瘤治疗方法和抑制策略。
例如，通过基因编辑技术来修复肿瘤细胞的基因缺陷，从而抑制其增殖；或者通过深度学习等技术来预测肿瘤的生长趋势和转移路径，为制定个性化的治疗方案提供依据。
肿瘤模型专题肿瘤模型专题1.最新的药效学指导原则要求化药临床前进行至少5种人源肿瘤的体内抗癌活性评价，以确定药效及抗瘤谱。
2.瘤株对药物的敏感性通过体外筛选可以说明，而体内评价更大程度上是考虑药物经体内吸收、分布、代谢之后的活性，由于目前的肿瘤模型多采用皮下接种，并不能完全反映药物的组织分布对其影响，所以感觉这种要求就显得不是很必要。
注解：体内的敏感性不是仅考虑吸收分布代谢的影响，一些样品，体外活性都是不错的，体内甚至是瘤内直接注射给到很高剂量都没有效果，肿瘤细胞在体内和体外的生存环境差别很大，体外模拟的生存环境完全不能体现出体内的状态。
3.皮下接种是一个目前能找到的最好的权宜之计了，实际上，SFDA明确表示，鼓励原位肿瘤模型，但是由于技术的原因，很多瘤株都无法实现。
而皮下模型有它的一系列优点：稳定，便于观察，易于构建，易于控制等等，能够在一定程度上反映药物经过体内过程的疗效，所以目前只能用它来进行评价。
4.实际上原位肿瘤模型仍然不能很好的反映临床肿瘤的特点，目前能够预见得到最好的模型应该是经过基因修饰（转基因等）的能够集中比较均匀的自发模型，这才是和临床最接近的肿瘤模型。
但是目前的经过基因修饰的自发肿瘤模型种类很少，而且可控制性差，周期长，所以还要经过很长时间的改善才能大规模的应用。
5.常规的肿瘤细胞株接种后如果不能成瘤，细胞悬液就会被动物吸收6.瘤体积可用游标卡尺量最长径（a)和最短径（b），体积计算公式：V=πab^2/6,每2-3天测一次。
体积=宽^2*长/2的公式计算肿瘤体积；抑瘤率=（对照组-治疗组）/对照组*100%；；tumor size = width2· length · 0.52).；Πab2/6；关于肿瘤体积的计算：3.1415926....../6约等于/2。
如果想做得讲究一点，应该用RTV计算肿瘤体积： RTV（某日某老鼠的相对肿瘤体积）=TV(测量当天该老鼠的肿瘤体积）/TV（分组当天该老鼠的肿瘤体积）*100，在此基础上进行平均值SD等数据的计算7.是否必须称重小鼠的胸腺和脾脏8.超过7天的腹水再传代就很容易出现血性；动物的周龄也不要太大，6周左右。
传代次数太多也很容易出现血性腹水。
血性腹水可以离心后加0.17 N的NH4CL溶液破红细胞，然后精确一些的控制条件（接种量，传代时间，动物周龄等）传几代，很多情况下再传一两代后会有不血性的种鼠出现，然后用这只种鼠的腹水继续传代9.皮下接种与剥瘤子：小鼠肿瘤剥瘤子是一个艰难的过程，但是可以一定程度上的改善一下：接种的时候要精确控制接种在皮下，靠皮内会与皮肤强烈粘连，靠肌肉会与肌肉强烈粘连，而且不要太靠腋窝里面，可以往尾部靠一些，也可以稍微的往背部靠一点，不要往腹部靠，容易使肿瘤被垫料磨烂。
10.LD50是毒理中的半数致死量，ED50是体外试验中的半数有效量，一般体内实验没有类似的指标，如果想比较几个类似物的药效还是做量效曲线比较好。
11.剂量设置应该按照LD10(10%致死剂量，也叫最大耐受剂量）来分组，一般分别采用 1/2 LD10, 1/4 LD10, 1/7 LD10 或 1/10 LD,但最大剂量不得超过LD10。
这里面还得考虑ED 50，LD10与ED50的剂量相差越大越好。
用LD50作为标准设置剂量是不现实的，因为动物实验是不可能允许10%以上动物死亡的。
12.说到疗效的比较，如只是发文章，比较不同基团之间可能对母体抑瘤率的影响，一般做做体外试验，比一比大家的IC50就好了，不太做体内。
如是真正的筛药，我个人有些观点：这个不是孤立起来看某个或者某几个剂量下谁比谁的抑瘤率高。
主要要看谁更具有可开发性。
首先，要考虑它的毒性以及治疗窗口的大小，通俗的说，就是这个要在发挥疗效的剂量下，毒性是否大？比如A药，10mg抑瘤率有50%，但是体重下降了20%;而B药，10mg的时候根本无效，30mg的时候有40%的抑瘤率，60mg的时候抑瘤率高达80%，而且体重几乎没有下降，这个时候A药与B药如何比较？特别如果是公司筛选新药，还要考虑成本，病人可接受度（动物上的有效剂量换算到人一天要吃2斤，这种药也是不现实的），制剂，工艺等等方面。
如果单纯从药理的角度给出答案，至少要考虑毒性和剂量限制的问题。
13.关于剂量选择，LD50的几分之一是一种比较通用的方法，目前相对更合理一些的剂量选择是做一个简单的多次给药的毒理试验来确定剂量，我们一般会连续给药一周，然后再观察一周，这样摸出来的最大剂量可以直接用于药效试验，然后其他的剂量都在此剂量的基础上往下减。
14.说到给药疗程，一般初筛的药物都是连续天天给药，qd。
但是给药途径，特别是i.v与i.p的选择，我们都是先做一个简单的PK试验考察一下，再确定，特别是如果PK试验的结果显示，血药浓度甚至达不到体外IC50的浓度，那么是否进行体内试验，就有待商榷了。
连续i.p，小鼠的皮肤有时候会变厚，你可以换一边给药。
15.动物选择: KM小鼠,裸鼠,C57 等均可作为,但是个人认为KM能做出来最好,毕竟比较有普遍性,还是正常生理状态的健康动物,比较有说服力,还便宜,裸鼠或者其他特定品种,比较适合特定的瘤株16.关于肿瘤细胞活力的问题: 一般培养的肿瘤细胞活力往往是不够的,很难在短时间内长到规定重量,所以建议至少在动物体内传2代,让肿瘤细胞活力充分体现以后再开始用于实验.传代数次的原因在于让肿瘤细胞充分活化，要不活化也行，多接种点吧17.关于接种部位的问题:以小鼠为例一般可以选择腋下或者后肢,背部血管不发达,营养不够,一般不建议采用.接种一般采用皮下注射,针头沿皮肤水平进入,然后挑起表皮,注射18.关于肿瘤重量的问题: 模型组肿瘤重量应该不低于0.5g19.肺内原位注射制作肿瘤模型效果颇好,流程如下:麻醉->固定->皮肤消毒->剪开左侧胸部皮肤,大约第2-3肋间的位置->用镊子轻轻拨开皮下筋膜,可以看到呼吸运动的肺叶->将准备好的肿瘤细胞注射入肺,<30微升->分层缝合OK20.胸膜活检穿刺针规格：#20 #25(14G 12G) L 65 mm；用途：供人体胸腔穿刺，钩取胸膜活体组织用21.开始做肿瘤药效评价，应该采用s180这些小鼠肿瘤模型。
一个方面这些肿瘤对于药物很敏感，而且周期短，花费也少。
但如果要成药，裸鼠模型是必需的。
22.一般瘤重的SD在平均值的70~80%以下就还凑活，漂亮一点的是在30%以下，实在不行，100%也勉强，就是特别难看，但是SD越大，统计上就越不利23.皮下肿瘤模型中，腋下最适合肿瘤生长。
接种时由裸鼠体侧腰部稍靠上的部位进针，要保证与接种点的距离小于针头的长度，向头部方穿行，绝对不能刺破皮肤或者刺破肌肉层，当针头到达接种位点时注射，退出针头，这样操作的目的并不完全是避免漏液，其实熟练后，不需要皮下穿行也不会漏液，主要是避免污染，进针点还有少量污染的可能性的，针头在皮下穿行一段后，接种点离进针点较远，最大限度减少污染的可能。
24.如果是药效试验，不建议你用手术标本，因为SFDA的临床前研究指导原则上明确指出要用建株的肿瘤株进行试验，因为用手术标本的试验可重复性太差25.一般用4-5WK，体重15－17g鼠，年轻鼠接种瘤容易长26.种植肾被膜下：第一该区免疫豁免，第二贴近肾可以从此获得充分的养料.在实验时先用显微用的镊子在肾被膜上撕慨一个小口子,然后种植。
注意:肾被膜和肾脏是有一个间隙可以用镊子在被膜下赶肿瘤组织到远离撕开口处,不用缝合被膜.这样就可以了27.人肿瘤模型用裸鼠，基本上没有可成腹水的，只能皮下接种传代28.nude mice的数据在SCID mice上是比较有参考价值的，另外，因为免疫系统的进一步缺乏，肿瘤生长的进程可能会比nude mice上更快一点29.接种后，用干净的棉签按住注射部位才拔针,拔针后再按住10秒种左右,一般不会有液体渗出30.K562第一代细胞接种的成瘤很好，传一代就很差了，没有几只成瘤的，到第三代就全军覆没31.不赞同用7901这个瘤株，国际公认度比较差32.分组要求平行性，尽量缩小组间差异，组内差异是实际情况的反映。
你可以按照肿瘤体积分层随机分组，这样平行性比较好33.肿瘤细胞悬液裸鼠接种前稀释效果顺序：相应的无血清培养基>PBS>saline34.现在常用的阳性对照药物是CTX和cisplatin，另外乳腺癌可以用Taxol。
阳性药的剂量途径和疗程不要求和样品一致，不过给药途径尽量一样。
还有，最好选用机制类似或者结构类似的阳性对照。
一般来说阳性对照的抑制率都会在60%以上或者更大，少数情况下只有50%左右。
35.细胞毒类抗肿瘤药物临床前体内试验一般至少应选用6种人癌移植瘤模型，其中应包括II期临床试验中拟筛选的肿瘤组织类型。
36.针对每一种人癌移植瘤模型，推荐采用相对肿瘤增殖率T/C（%）作为试验评价指标，评价标准通常为：T/C（%）>40 %为无效；T/C（%）≤40%，并经统计学处理P < 0.05为有效。
在体内有效性试验采用的全部人癌移植模型中，一般至少应有1/3达到有效标准。
注解：对于T/C<40%，按照这个标准，很多现有的一线化疗药物都会被淘汰37.适于接种的瘤源的直径最好为1cm或者稍大一点，直径2cm可能对于有些瘤株来说会太大了一点。
一般来说，插块法，一个瘤源接种30只动物是没有问题的，匀浆法一般2只也可以接种30只了38.新的抗肿瘤药物指导原则上强调要3代以上才能用，并且不能超过15~20代（人肿瘤）。
39.只有少部分的小鼠实体瘤可以腹水传代，人实体瘤几乎没有能够腹水传代的40.一般来说，小鼠肿瘤比较推荐路易斯肺癌和B16。
国内的S180并不好，各实验室之间的变异很大。
国外基本都不用它。
其实并不是因为S180有多好大家才选用他，而是他进行实验的成本低，周期短，操作较容易41.灌胃药溶解用生理盐水可以吗：不一定，根据混悬效果来看，一般多用0.5-2% 甲基纤维素钠（CMC-Na）42.实体肿瘤不可以采用生命持续时间这个指标，这个是明确有规定的43.正常的实体肿瘤都是越长越大，最后可能会溃破，但是没有消亡这个现象，如果肿瘤整体的自发消亡，说明模型有问题，最大可能是被污染了44.出针挂组织的问题，关键在于针头的磨制，在针后部的小突起于小缺口吻合后，实体针弯曲方向应该与套管针磨制的斜面一致，接种时，实体针要推到底，也就是后面的小突起与小缺口契合，然后针头“舔住”肌肉层转一圈再退针，还有就是瘤块一定要完全塞入针头内，外面不能有漏出来的。
45.S180、H22不需要测量肿瘤体积，试验结束后直接剥取肿瘤成瘤重46.瘤株皮下成瘤率好，那么到了原位应该会更好47.建议最好流水线操作，确保每一个步骤都是同一个人做到底的，比如插块法，可以一个人切，一个人塞瘤块，一个人接种；比较忌讳每个人自己切自己塞自己接种，然后只做一部分的动物48.B16是小鼠黑色素瘤，宿主一般多用C57小鼠，因为这个肿瘤的细胞是黑色的，用它做肺转移，在白色的肺叶上是黑色的转移灶，很容易分辨。
