Mfn2基因沉默对HepG2细胞葡萄糖代谢和胰岛素信号通路的影响

高糖高脂诱导胰岛素抵抗HepG2细胞模型的建立及活性成分的功能评价一、本文概述随着现代生活节奏的加快和饮食结构的改变，高糖高脂饮食已成为导致胰岛素抵抗（IR）等代谢性疾病的重要因素。

胰岛素抵抗是指胰岛素在靶组织（如肝脏、肌肉和脂肪组织）中的生物学作用受损，导致血糖调节失衡，是2型糖尿病和心血管疾病的主要发病机制之一。

研究高糖高脂诱导的胰岛素抵抗机制及防治策略具有重要意义。

本研究旨在通过建立高糖高脂诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗模型，模拟人体内的代谢环境，为深入研究胰岛素抵抗的分子机制提供实验基础。

同时，通过对活性成分的功能评价，筛选出具有改善胰岛素抵抗潜力的天然产物或药物，为开发新型抗糖尿病药物提供候选物质。

本文首先介绍高糖高脂饮食对胰岛素抵抗的影响及其机制，阐述建立胰岛素抵抗细胞模型的重要性和必要性。

接着，详细描述高糖高脂诱导HepG2细胞胰岛素抵抗模型的建立过程，包括细胞培养、高糖高脂处理、胰岛素抵抗指标检测等。

在此基础上，对活性成分进行筛选和功能评价，探讨其作用机制。

总结本文的主要研究内容和成果，展望未来的研究方向和应用前景。

通过本研究，不仅有助于深入了解高糖高脂诱导胰岛素抵抗的分子机制，还可为开发新型抗糖尿病药物提供理论支持和实验依据，对预防和治疗代谢性疾病具有重要意义。

二、材料与方法高糖DMEM培养基、胎牛血清（FBS）、胰蛋白酶、青霉素-链霉素双抗溶液、MTT、DMSO等购自Gibco公司；棕榈酸、油酸购自Sigma 公司；胰岛素、葡萄糖测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所；其他常用化学试剂均为国产分析纯。

CO2培养箱（Thermo Fisher Scientific）、倒置显微镜（Olympus）、酶标仪（Bio-Rad）、低速离心机（Eppendorf）、超净工作台（苏州净化设备公司）等。

HepG2细胞用含10% FBS、1%青霉素-链霉素双抗溶液的高糖DMEM 培养基，在37℃、5% CO2的饱和湿度培养箱中培养。

HIF-2α基因沉默对人肝癌细胞株HepG2增殖能力的影响李伟伟;耿晓松;王宏伟;侯丽娟;宋新文【摘要】目的探讨缺氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factors-2α,HIF-2α)表达水平对人肝癌细胞株HepG2增殖能力的影响.方法用氯化钴(CoCl2)诱导细胞模拟缺氧微环境,并根据CoCl2浓度不同分为50 μmol/L、100 μmol/L、200μmol/L、400 μmol/L组,选择CoCl2浓度为200 μmol/L模拟肿瘤内缺氧微环境.采用siRNA干扰沉默HepG2细胞中HIF-2α的表达,分别应用RT-PCR、Western blotting方法检测HIF-2α mRNA和蛋白的表达,MTT方法检测HepG2细胞增殖,绘制细胞生长曲线,流式细胞技术观察细胞周期的改变.结果建立细胞缺氧模型,作为低氧组;采用浓度为50 nmol/L的HIF-2α siRNA转染缺氧环境下的HepG2细胞,作为低氧+HIF-2α siRNA组,结果显示:低氧组、低氧+Control siRNA组的HIF-2α mRNA和蛋白表达显著高于常氧组和低氧+HIF-2α siRNA组(P<0.05);细胞生长曲线结果显示:低氧组、低氧+Control siRNA组的光密度值显著高于常氧组和低氧+HIF-2α siRNA组(P<0.05);细胞周期结果显示:低氧组、低氧+Control siRNA组HepG2细胞在DNA合成前期(G0/G1期)细胞比率显著低于常氧组和低氧+HIF-2α siRNA组,合成期(S)及合成后期(G2/M)细胞比率显著高于常氧组和低氧+HIF-2α siRNA组(P＜0.05).结论缺氧微环境通过促进人肝癌细胞株HepG2细胞中HIF-2α的表达进一步促进 HepG2细胞增殖,而针对HIF-2α的靶向siRNA能有效抑制肝癌HepG2细胞中HIF-2α的表达,从而抑制HepG2细胞的增殖.%Objective To investigate the impacts of expression level of hypoxia-inducible factors-2α (HIF-2α) on the multiplication capacity of human hepatocellular carcinoma cell HepG2.Methods Cobalt chloride (CoCl2) cells were induced by simulated hypoxic microenvironment, anddepending on the concentration of CoCl2 into 50 μmol/L group, 100μmol/L group, 200 μmol/L group, 400 μmol/L group, 200 μmol/L concentration of CoCl2 was selected to simulate hypoxia in tumor microenvironment.siRNA was transfected into human hepatocellular carcinoma HepG2 cell to silent HIF-2α.Application of RT-PCR and Western blotting method respectively to detect the expression of HIF-2α mRNA and protein, MTT method to detect the proliferation of HepG2 cells, to curve the cell growth, and Flow cytometry to observe the changes of cell cycle.Results Establishment of cellular hypoxia model as the hypoxia group.The concentration of 50 nmol/L HIF-2α siRNA transfection of HepG2 cells under hypoxia environment as the hypoxia+HIF-2α siRNAgroup.Results showed that the HIF-2α mRNA and protein expression of hypoxia group and hypoxia+control siRNA group were significantly higher than normal oxygen group and hypoxia+HIF-2α siRNA group (P<0.05).The results of cell growth curve showed that the optical density of hypoxia group and hypoxia+control siRNA group were significantly higher than normal oxygen group and hypoxia+HIF-2α siRNA group (P<0.05).Cell cycle showed that in the beginning of DNA synthesis in HepG2 cells (G0/G1 period) cells of hypoxia group and hypoxia+control siRNA group were significantly lower than normal oxygen group and hypoxia+HIF-2α siRNA group;but synthesis phase (S) and later synthesis (G2/M) cell rate were significantly higher than normal oxygen group and hypoxia+HIF-2α siRNA group (P<0.05).Conclusion Hypoxic microenvironment can promote the expression of HIF-2α in HepG2 cells to further promote the proliferation ofHepG2 cells.Whereas, for siRNA targeting HIF-2α can effectively inhibit the expr-ession of hepatocellular carcinoma HepG2 cells in the HIF-2α, thus inhibit the proliferation of HepG2 cells.【期刊名称】《胃肠病学和肝病学杂志》【年(卷),期】2017(026)008【总页数】5页(P921-925)【关键词】缺氧诱导因子-2α;氯化钴;RNA干扰;肝癌;细胞增殖【作者】李伟伟;耿晓松;王宏伟;侯丽娟;宋新文【作者单位】新乡医学院第一附属医院感染疾病科,河南卫辉 453100;新乡医学院护理学院;新乡医学院第一附属医院感染疾病科,河南卫辉 453100;新乡医学院第一附属医院感染疾病科,河南卫辉 453100;新乡医学院第一附属医院感染疾病科,河南卫辉 453100【正文语种】中文【中图分类】R735.7恶性肿瘤在生长过程中会出现肿瘤内部的缺氧微环境，肿瘤细胞通过改变自身内源基因的表达来适应变化的微环境，缺氧诱导因子家族能够适应细胞内氧气浓度的降低，并对多种基因进行调控［1-2］。

肝癌是世界上第六大常见恶性肿瘤，有进展快，致病率高的特点[1]，并且治疗难度大、疗效差，一般发病后生存时间仅为6个月，堪有“癌中之王”之称。

肝癌可分为原发性肝癌和继发性肝癌，原发性肝癌在我国占有一半以上的病例[2]，每年约有38.3万人死于原发性肝癌，约占全球原发性肝癌死亡病例数的51%[3]。

临床上大多数是通过手术和化疗对肝癌进行治疗，虽然肝移植、肝切除及术后化疗药物的发展改沉默Prx II基因促进5-FU诱导HepG2细胞凋亡研究毛莹莹，冯琳，于楠楠，陈冬勤，刘芳美，任晨曦，金美华（黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院，大庆163319）摘要：旨在探究PrxⅡ对5-FU诱导HepG2（人肝癌细胞系）细胞凋亡的影响，阐明沉默PrxⅡ基因提高5-FU促进HepG2发生细胞凋亡的作用。

利用慢病毒介导的shRNA干扰技术建立PrxⅡ基因沉默的HepG2细胞系、MTT法检测细胞存活率、荧光显微照相测定凋亡情况、蛋白质免疫印迹检测凋亡相关蛋白表达水平。

结果表明PrxⅡ基因沉默的HepG2细胞系构建成功；MTT检测发现在1mmol·L-15-FU处理下，shPrxⅡ组细胞存活率明显低于Scramble组；荧光显微照相结果表明shPrxⅡ组细胞凋亡率明显高Scramble组；蛋白质免疫印迹结果表明PrxⅡ基因沉默的HepG2细胞中凋亡标志物PARP、促凋亡蛋白Bad的表达水平明显升高，抗凋亡蛋白Bcl-xL表达水平明显下降。

研究表明，沉默PrxⅡ基因能提高HepG2对5-FU促凋亡作用的敏感性，导致HepG2细胞凋亡水平上升，研究结果可为提高肝癌细胞对于5-FU的敏感性提供新的潜在靶目标。

关键词：HepG2细胞系；PrxⅡ；慢病毒载体；5-氟尿嘧啶；shRNA干扰中图分类号：Q28文献标识码：A文章编号：1002-2090（2019）05-0091-07 Effect of Silencing Prx II Gene on HepG2Apoptosis Induced by5-FUMao Yingying，Feng Lin，Yu Nannan，Chen Dongqin，Liu Fangmei，Ren Chenxi，Jin Meihua（College of Life Science and Technology，Heilongjiang Bayi Agricultural University，Daqing163319）Abstract：To investigate the effect of Prx II on the5-FU-induced HepG2(human hepatoma cell line)apoptosis,and to clarify that Prx II gene deletion could improve the sensitivity of HepG2cells to5-FU and stimulate apoptosis.Lentivirus-mediated shRNA interference was used to establish Prx II silenced HepG2cell line.MTT assay was used to detect cell viability,fluorescence microscopy was used to detect apoptosis,and Western blot was used to detect apoptosis-related protein expression.The results showed that the silent HepG2cell line was successfully constructed,and the expression of Prx II was significantly lower in shPrx II group than in Scramble group;MTT assay showed that5-FU could effectively inhibit cell viability.In1mmol·L-1，the cell survival rate in shPrx II group was significantly lower than that in Scramble group.At the same time,the results of fluorescence microscopy showed that the apoptosis rate in shPrx II group was significantly higher than that in Scramble group.After that,the expression of apoptotic markers PARP and pro-apoptotic protein Bad by Prx II gene silencing in HepG2cells was increased significantly,while the expression of anti-apoptotic protein Bcl-xL decreased significantly.The conclusion showed that silencing Prx II gene could enhance the sensitivity of HepG2to5-FU and induce the HepG2apoptosis,which could provide a new potential target for improving the sensitivity of hepatocellular carcinoma cells to5-FU.Key words：HepG2cell line；Prx II；lentivirus；5-FU；shRNA interference收稿日期：2018-10-22基金项目：黑龙江八一农垦大学大学生创新创业训练计划项目（XC2018055）。

芒果苷对胰岛素抵抗HepG2细胞糖脂代谢的影响作者：黎梓霖金惠杰方佳刘奕明林爱华来源：《中国药房》2021年第09期中圖分类号 R285.5 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）09-1082-07DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.09.10摘要目的：分析芒果苷（MGF）对胰岛素抵抗HepG2细胞（IR-HepG2细胞）糖脂代谢的影响，并探讨潜在机制。

方法：以人肝癌HepG2细胞为对象，以1 mmol/L棕榈酸+2 mmol/L油酸联合培养建立IR-HepG2细胞模型。

以盐酸二甲双胍为阳性对照，分别检测低、中、高浓度MGF（125、250、500 μmol/L）作用24 h对IR-HepG2细胞中校正葡萄糖耗氧量和三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）含量的影响;采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术检测细胞中腺苷一磷酸活化蛋白激酶（AMPK）通路上游关键因子脂联素（APN）、脂联素受体2（AdipoR2）、APPL1、AMPK以及下游胰岛素信号通路关键因子胰岛素受体底物1（IRS-1）、蛋白激酶B（Akt）、葡萄糖转运体4（GLUT4）mRNA的相对表达量;采用Western blot 法检测AMPK蛋白的磷酸化水平。

结果：与对照组比较，模型组细胞校正葡萄糖消耗量和APN、AdipoR2、APPL1、AMPK、IRS-1、GLUT4 mRNA的相对表达量以及AMPK蛋白磷酸化水平均显著降低，TG、TC含量均显著升高（P关键词芒果苷;胰岛素抵抗;人HepG2细胞;糖脂代谢;腺苷一磷酸活化蛋白激酶信号通路;脂联素Effects of Mangiferin on Glucose and Lipid Metabolism of Insulin-resistant HepG2 CellsLI Zilin1，JIN Huijie1，FANG Jia1，LIU Yiming1，2，LIN Aihua3（1. Phase Ⅰ Clinical Trial Center， Guangdong Provincial Hospital of TCM/the Second Affiliated Hospital of Guangzhou University of TCM， Guangzhou 510120， China; 2. Guangdong Provincial Key Laboratory ofClinical Research on Traditional Chinese Medicine Syndrome， Guangdong Provincial Hospital of TCM/the Second Affiliated Hospital of Guangzhou University of TCM， Guangzhou 510120，China; 3. Dept. of Pharmacy， Guangdong Provincial Hospital of TCM/Zhuhai Hospital， the Second Affiliated Hospital of Guangzhou University of TCM， Guangdong Zhuhai 519000，China）ABSTRACT OBJECTIVE： To analyze the effects of mangiferin （MGF） on glucose and lipid metabolism in insulin resistance （IR） HepG2 cells， and to explore the potential mechanism. METHODS： Using human hepatoma HepG2 cells as research objects， 1 mmol/L palmitic acid and 2 mmol/L oleic acid were used to establish the IR-HepG2 cell model. Using metformin hydrochloride as positive control， the effects of low-concentration， medium-concentration and high-concentration MGF （125， 250，500 μmol/L） on the corrected glucose consumption， the contents of triglyceride （TG） and total cholesterol （TC） in IR-HepG2 cells were detected. The mRNA expression of APN， AdipoR2， APPL1， AMPK in the upstream of AMPK signaling pathway and IRS-1， Akt and GLUT4 in the downstream insulin signaling pathway were detected by RT-PCR. The phosphorylation level of AMPK protein was detected by Western blot assay. RESULTS：Compared with control group， corrected glucose consumption， mRNA expression of APN，AdipoR2， APPL1， AMPK， IRS-1 and GLUT4， as well as the phosphorylation level of AMPK protein were decreased significantly in model group， while the contents of TG and TC were increased significantly （PKEYWORDS Mangiferin; Insulin resistance; Human HepG2 cells; Glucose and lipid metabolism; AMPK signaling pathway; APN2型糖尿病（T2DM）多由胰岛素抵抗（IR）和B细胞功能障碍所致[1]，其中IR主要表现为肝脏、肌肉、脂肪等靶组织对胰岛素的敏感性下降以及对葡萄糖的摄取及利用减少[2]。

沉默TCF7L2对胰岛素抵抗HepG2细胞胰岛素降解酶表达的调控作用观察夏佳佳;郑晓雅;刘婵;胡钰梅;任伟【期刊名称】《解放军医学杂志》【年(卷),期】2015(40)2【摘要】目的探讨沉默转录因子7类似物2(TCF7L2)对胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞胰岛素降解酶(IDE)表达的调控作用及可能机制.方法将HepG2细胞分为空白组、TCF7L2干扰组、空载体组、IR组、IR+TCF7L2干扰组、IR+空载体组.采用高浓度胰岛素(5×106mol/L)持续作用24h诱导IR模型(IR-HepG2细胞)生成.以人TCF7L2 mRNA编码序列为干扰靶点构建TCF7L2特异性小干扰RNA慢病毒载体(LV-TCF7L2-siRNA)转染空白组及IR组细胞,空载体病毒转染空载体组及IR+空载体组细胞.qRT-PCR法检测各组细胞TCF7L2及IDE mRNA的表达,Western blotting检测各组细胞TCF7L2、IDE、胰岛素刺激后蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达的变化,流式细胞术检测各组2-脱氧-D-葡萄糖(2-NBDG)荧光葡萄糖摄取率.结果与空白组比较,IR组细胞葡萄糖消耗量及2-NBDG摄取率均明显降低(P＜0.01),证明IR细胞模型建立成功.qRT-PCR及Western blotting结果显示,IR组TCF7L2及IDE mRNA种蛋白表达水平均明显低于空白组(P＜0.05),TCF7L2干扰组TCF7L2、IDE mRNA和蛋白表达水平较空白组、空载体组明显下降,IR+TCF7L2干扰组TCF7L2、IDE mRNA和蛋白表达水平较IR组、IR+空载体组均明显下降(P＜0.05).生理剂量胰岛素刺激后,IR组、IR+TCF7L2干扰组p-AKT蛋白水平较空白组明显下降(P＜0.01),各组总AKT水平差异无统计学意义.TCF7L2干扰组2-NBDG荧光葡萄糖摄取率较空白组和空载体组明显下降,IR+TCF7L2干扰组2-NBDG荧光葡萄糖摄取率较IR组、IR+空载体组明显下降(P＜0.01).结论 TCF7L2联合IDE致肝细胞IR,其机制可能与减少胰岛素信号通路关键酶p-AKT蛋白的表达有关.【总页数】7页(P110-116)【作者】夏佳佳;郑晓雅;刘婵;胡钰梅;任伟【作者单位】400016 重庆重庆医科大学附属第一医院内分泌科;400016 重庆重庆医科大学附属第一医院内分泌科;400016 重庆重庆医科大学附属第一医院内分泌科;400016 重庆重庆医科大学附属第一医院内分泌科;400016 重庆重庆医科大学附属第一医院内分泌科【正文语种】中文【中图分类】R587.1【相关文献】1.经沉默免疫负调控基因技术处理的树突状细胞联同细胞毒性T淋巴细胞对HepG2细胞移植瘤的抑制作用 [J], 付海峰;周文波;丁佑铭;汪斌;徐军辉;徐彦哲2.吡格列酮对胰岛素抵抗HepG2细胞胰岛素受体底物表达的影响 [J], 陈秋;朱玉霞;苏言辉;张蓉;刘学鹏;邱宗荫3.鬼针草黄酮对HepG2胰岛素抵抗细胞PI3K/AKT1/GLUT4信号通路的调控作用[J], 黄桂红;刘天旭;朱钊铭;邹勇;董晓敏;廖曾珍;李娟;蒋国君4.蜕皮甾酮对胰岛素抵抗HepG2细胞胰岛素受体表达的影响 [J], 陈秋;邹德平;张蓉;邱宗荫;夏永鹏5.异鼠李素调控AKT-FOXO1通路改善胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢作用机制[J], 包桥桥;李梦茹;黄榕;陈金娇;刘洪章;刘树英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

线粒体融合蛋白2对检测细胞压力水平起关键作用[导读]据物理学家组织网近日报道,西班牙巴塞罗那生物医学研究所(IRB)科学家最近发现,线粒体融合蛋白2(Mfn2)对于正确检测细胞压力水平起着关键作用,并保证细胞修复或死亡路径的有效性.相关论文发表在最近出版的《自然》集团旗下的《欧洲分子生物学组织杂志》上.有机体的每个细胞中都有一种传感器,能检测自身"内部"环境是否健康.这种"报警器"存在于内质网(ER)中,能感知细胞所受的压力,引发修复反应或让细胞走向死亡.据物理学家组织网近日报道,西班牙巴塞罗那生物医学研究所(IRB)科学家最近发现,线粒体融合蛋白2(Mfn2)对于正确检测细胞压力水平起着关键作用,并保证细胞修复或死亡路径的有效性.相关论文发表在最近出版的《自然》集团旗下的《欧洲分子生物学组织杂志》上.研究人员揭示了把Mfn2和内质网压力联系在一起的分子机制.在实验中,他们将Mfn2从细胞中去除,当细胞受到压力时,内质网会过度激活修复路径.如此一来它的反向功能就会变差,降低了细胞克服压力的能力,减少细胞凋亡的程度.巴塞罗那生物医学研究所分子医学项目协调人、"异型与多种疾病"小组负责人安东尼奥·佐扎诺说:"当Mfn2被去除时,细胞的压力反应路径完全被打乱了."研究人员说,Mfn2是一种线粒体蛋白,糖尿病的发生就和缺乏这种蛋白有关.佐扎诺小组曾在以往研究中证明,如果去除Mfn2,机体组织会对胰岛素产生抗性,这正是糖尿病的关键特征,称为代谢综合征.在新研究中,他们调查了线粒体和内质网之间的关系,发现Mfn2蛋白造成了线粒体的变化,也会直接影响内质网功能.缺乏Mfn2会导致细胞的内质网压力更高.论文第一作者、该校博士后研究员胡安·巴勃罗·姆诺兹说:"Mfn2对细胞的生存发育能力非常重要,而且对许多疾病都有影响,如神经退行性疾病、癌症、心血管疾病以及糖尿病等."Mfn2可能是一个很好的治疗标靶."利用Mfn2,我们能调节细胞对伤害的反应,这为进一步研究它的治疗途径开辟了广阔空间."姆诺兹说,比如肿瘤细胞就是不能恰当地激活死亡路径,导致细胞不受控制地增生."人们已经注意到,癌细胞的Mfn2水平偏低,如果我们提高Mfn2水平,就有可能促进细胞走向凋亡."针对这一点,其他研究小组已经有论文发表,指出Mfn2过度表达会诱发细胞凋亡.如果要把Mfn2作为治疗标靶,研究人员还要先找到一种小分子或药物在动物身上实验,看能否调节Mfn2的表达.佐扎诺指出,目前的研究还属于概念性论证,但它强调了这种线粒体蛋白对细胞健康的重要性.接下来的挑战是完成大规模分子筛选,找到能调节Mfn2表达的药物,并在小鼠模型上实验其效果.。

抵抗素通过AMPK途径对HepG2肝细胞葡萄糖代谢的影响罗招凡;李芳萍;程桦【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2016(032)010【摘要】目的：研究抵抗素对肝细胞株HepG2葡萄糖代谢的影响，探讨抵抗素致糖尿病发生的可能机制。

方法：50 ng／mL抵抗素作用HepG2肝细胞24 h ，利用siRNA技术抑制HepG2细胞腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）α2亚基表达，实时定量RT-PCR技术检测葡萄糖代谢的相关基因AMPKα2、葡萄糖转运蛋白2（Glut2）、葡萄糖-6-磷酸酶（G6Pase）、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）mRNA表达水平的变化，用 Western blot检测AMPK磷酸化水平，液体闪烁技术检测肝细胞糖原的生成。

结果：在基础及胰岛素刺激状态下，抵抗素降低肝细胞AMPKα2、Glut2 mRNA 的表达及 AMPK 磷酸化水平（P ＜0．05），肝糖原合成减少（P ＜0．05），而G6Pase、PEPCK mRNA的表达增加（P ＜0．05）。

结论：抵抗素可通过AMPK途径影响葡萄糖代谢，使糖异生增加，而肝糖原合成减少，从而导致肝糖输出增多。

%Objective To investigate the effect of rh-resistin on glucose metabolism in HepG2 cells and to elucidate whether the underlying mechanisms are related to AMPK pathway. Methods Cells transfected with control siRNA or AMPKα2 siRNA were cultured in 6-well plates and then treated with 50 ng/mL rh-resistin for 24 hours , while untransfected cells were treated with or without 50 ng/mL rh-resistin on the same conditions , followed by serum-starving in glucose-free DMEM for 3 ~ 5 hours in the continued absence or presence of rh-re-sistin. Thenthe cells were treated with or without insulin for 2 hours. AMPKα2, G6Pase, PEPCK and Glut2 mRNA expression levels were determined by quantitative RT-PCR. The phosphorylation state of AMPK was deter-mined by Western blotting. Glycogen synthesis was measured by the incorporation of D-[U-14C] glucose to glycogen. Results Rh-resistin suppressed the AMPKα2,Glut2 mRNA expressions, and reduced the phosphory-lation level of AMPK and glycogen synthesis on both basal and insulin-stimulated conditions (P < 0.05), while it accelerated G6Pase and PEPCK mRNA expressions on the same conditions (P < 0.05). The mRNA expression levels of G6Pase , PEPCK , Glut2 and the phosphorylation level of AMPK and glycogen synthesis were signifi-cantly different between the rh-resistin group andthe rh-resistin in conjunction with AMPKα2 siRNA-treated group. Conclusion Rh-resistin may affect glucose metabolism in HepG2 cell via AMPK pathway.【总页数】5页(P1556-1560)【作者】罗招凡;李芳萍;程桦【作者单位】510120 广州市，中山大学孙逸仙纪念医院检验科，内分泌科;510120 广州市，中山大学孙逸仙纪念医院检验科，内分泌科;510120 广州市，中山大学孙逸仙纪念医院检验科，内分泌科【正文语种】中文【相关文献】1.抵抗素对 HepG2肝细胞胰岛素信号通路 IRS－2／Akt 的影响 [J], 罗招凡;李芳萍;程桦2.抵抗素对C2C12肌细胞株葡萄糖代谢的影响 [J], 李芳萍;李志臻;张淼;付玉如;严励;傅祖植3.抵抗素介导AMPK信号通路对HepG2细胞脂质代谢的影响 [J], 罗招凡;李芳萍;程桦4.抵抗素对内皮细胞活性氧生成及AMPK磷酸化水平的影响 [J], 李志臻;李芳萍;叶建红;严励;李焱;傅祖植5.Mfn2基因沉默对HepG2细胞葡萄糖代谢和胰岛素信号通路的影响 [J], 陈小琳;雷幼蓉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

MFN2调控线粒体动态变化的研究进展线粒体是细胞内的重要器官，除了参与能量代谢外，还参与调控细胞的生存和死亡。

线粒体动态变化包括线粒体的形态、数量和位置的变化，受到多种因素的调控。

MFN2（mitofusin 2）是一种线粒体融合蛋白，近年来的研究表明，MFN2在调控线粒体动态变化中发挥着重要作用。

本文将从MFN2的功能及调控机制、其在线粒体动态变化中的作用以及其在疾病中的意义等方面对MFN2调控线粒体动态变化的研究进展进行探讨。

一、MFN2的功能及调控机制MFN2是线粒体外膜融合蛋白，其主要功能是通过调控线粒体融合和分裂来维持线粒体的形态和功能。

线粒体融合是指两个线粒体通过外膜相互融合形成一个大的线粒体，使其内膜融合而形成连续的内膜结构，从而实现物质和能量的混合和交换；线粒体分裂则是指线粒体通过外膜和内膜的分裂，形成两个独立的线粒体。

MFN2通过促进线粒体膜的融合和分裂来维持线粒体的形态和功能。

MFN2的调控机制主要包括磷酸化和泛素化。

MFN2的功能受到蛋白磷酸化的影响，磷酸化可增强MFN2的融合功能；反之，磷酸化不足则影响线粒体的融合。

MFN2的泛素化还可以调控其融合和分裂功能。

泛素化可促使MFN2的降解，并抑制线粒体融合，导致线粒体的形态和功能的改变。

二、MFN2在线粒体动态变化中的作用1. 调控线粒体融合线粒体融合是线粒体动态变化的重要过程，MFN2通过促进线粒体外膜的融合来维持线粒体的形态和功能。

研究表明，MFN2缺失会导致线粒体的扩散和分散，线粒体形态不规则，膜电位降低，呼吸链活性下降，ATP合成减少，细胞发生凋亡。

MFN2对于线粒体融合的调控在维持线粒体的功能和稳定性方面起着至关重要的作用。

线粒体的位置与其功能有密切关系，线粒体靠近细胞核可促进能量代谢和细胞代谢的稳定，而离细胞核较远则可能影响细胞功能。

研究表明，MFN2可以调控线粒体的位置，使其更靠近细胞核，从而维持线粒体的功能和稳定性。

沉默PrxⅡ基因促进巨噬细胞对肝癌细胞的杀伤作用冯琳;孙率洋;姜鹏;吕树旗;韩英浩【期刊名称】《黑龙江八一农垦大学学报》【年(卷),期】2024(36)2【摘要】为探究PrxⅡ对RAW264.7(小鼠单核巨噬细胞系)细胞杀伤HepG2(人肝癌细胞系)细胞的影响,阐明PrxⅡ基因调控RAW264.7细胞分泌细胞因子杀伤HepG2细胞的作用,利用慢病毒干扰技术制备PrxⅡ基因沉默的RAW264.7细胞系、MTT assay测定HepG2细胞存活情况、ELISA法测定RAW264.7细胞分泌炎性因子情况、蛋白质免疫印迹法检测NF-κB信号通路相关蛋白质表达水平。

结果表明:已成功制备PrxⅡ基因沉默的RAW264.7细胞系;MTT检测发现RAW264.7细胞上清液处理HepG2细胞后,shPrxⅡ组HepG2细胞存活率明显低于mock组,且呈时间依赖性;ELISA结果表明shPrxⅡ组RAW264.7细胞分泌的TNF-α含量明显高于mock组,IL-6和IL-1β含量明显低于mock组;蛋白质免疫印迹结果与mock组相比,PrxⅡ基因沉默的RAW264.7细胞中NF-κB信号通路明显被激活。

由此得出结论,PrxⅡ基因能调控RAW264.7细胞分泌细胞因子,杀伤HepG2细胞,导致HepG2细胞死亡水平上升,研究结果可为以巨噬细胞为靶点的免疫疗法提供理论基础,为肝癌患者的免疫治疗提供新思路。

【总页数】7页(P77-83)【作者】冯琳;孙率洋;姜鹏;吕树旗;韩英浩【作者单位】黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院【正文语种】中文【中图分类】Q28【相关文献】1.双特异单克隆抗体介导的人单核－巨噬细胞对肝癌细胞的杀伤作用2.沉默Prx Ⅱ基因促进5-FU诱导HepG2细胞凋亡研究3.新城鸡瘟病毒激活的鼠巨噬细胞对肝癌细胞(H_(22))杀伤作用的探讨4.NDV7793体外激活的小鼠单核巨噬细胞(MΦ)对小鼠肝癌细胞的杀伤作用及其机制5.杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因在肝癌细胞免疫杀伤中的作用因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

线粒体融合素基因-2对肝癌细胞凋亡的影响及其机制王尧;郑启昌;胡文君;胡青钢;夏耘;张景辉【期刊名称】《中国普通外科杂志》【年(卷),期】2008(17)7【摘要】目的探讨外源性线粒体融合素基因-2(mfn2)对肝癌细胞株HepG2凋亡的影响及其机制。

方法利用脂质体2000将质粒mfn2转染HepG2细胞。

RT-PCR检测转染后细胞mfn2 mRNA的表达水平;Weastern Blot法检测mfn2蛋白的表达;MTT检测mfn2对HepG2细胞增殖的影响;Annnexin-V/PI双标记法检测转染前后细胞凋亡的变化;RT-PCR检测凋亡相关基因的表达;电镜观察超微结构的变化。

结果转染mfn2基因的HepG2细胞可以稳定表达Mfn2蛋白;MTT实验提示转染mfn2基因后,HepG2细胞增殖受到抑制;转染组与转染空质粒组和空白对照组相比前者可促进细胞凋亡(P<0.05);电镜示mfn2转染后HepG2细胞线粒体嵴断裂、消失、基质疏松;RT-PCR结果示Bcl-2和survivin基因表达下调。

结论外源性mfn2基因可抑制HepG2细胞的增殖,诱导其凋亡。

凋亡相关基因的表达下调可能是其诱导凋亡的机制。

【总页数】5页(P673-677)【关键词】肝肿瘤;线粒体基因;细胞凋亡【作者】王尧;郑启昌;胡文君;胡青钢;夏耘;张景辉【作者单位】华中科技大学同济医学院附属协和医院普通外科【正文语种】中文【中图分类】R735.7【相关文献】1.去除穿膜区序列的线粒体融合素2基因通过线粒体凋亡路径促进大鼠血管平滑肌细胞凋亡 [J], 赵丽;周炜;王四坤;廖华;张文娟;陈光慧;郭小梅2.线粒体融合素基因-2对乳腺癌细胞凋亡的影响 [J], 夏耘;吴亚群;郑启昌;张玮;龚建平;裘法祖3.重组人促红细胞生成素对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡与线粒体融合基因2表达的影响 [J], 孙瑜;涂志业;糜涛;王颖;赵金平;曹文静;陈莉莉;郭小梅4.去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因对血管平滑肌细胞凋亡的影响 [J], 周炜;曹文静;陈莉莉;郭小梅5.酮康唑通过下调COX-2过度激活线粒体自噬促进肝癌细胞凋亡的分子机制【据《J Hepatol》2019年1月报道】题:酮康唑通过下调COX-2过度激活线粒体自噬促进肝癌细胞凋亡的分子机 [J], 制(作者ChenY等)因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。