菠萝蛋白酶

菠萝蛋白酶的提取方法：（1）沉淀法沉淀法是粗提酶蛋白的方法之一，主要用于前期酶的初步分离和浓缩，常用的方法有盐析法，有机溶剂沉淀法，聚乙二醇沉淀法，等电点沉淀法等。

用新型吸附洗涤沉淀法和单宁沉淀法也可以提取菠萝蛋白酶，操作简单，产率也较高，但酶的产量与单宁的用量密切相关，而且所含单宁有毒，导致这种方法逐渐被淘汰了。

以酒精为沉淀剂提取菠萝蛋白酶时，酒精的加入量会对菠萝蛋白酶产生较大的影响，酒精的浓度太低时，不能使菠萝蛋白酶沉淀下来，浓度太高容易使酶变性失活。

酒精的浓度为80%时，酶的收率最高。

从茶叶中提取的多酚类物质茶多酚也可用于菠萝蛋白酶的分离，用0.5%的茶多酚提取物对菠萝汁中菠萝蛋白酶进行沉淀最多可达78%，其最大沉淀率明显比单宁法高。

（2）离子交换色谱法离子交换色谱层析法是蛋白质研究领域内比较高效的纯化技术，目前国外用于分离菠萝蛋白酶常用的离子交换剂有Sephacryl S-200柱、Mono S阳离子交换剂、S-Sepharose、弱酸性阳离子交换树脂、CM-纤维素阳离子交换柱、Q阴离子交换柱。

国内常用的有羧甲基纤维素（CMC）、二乙胺乙基纤维素（DEAE），酶的纯化过程通常是将若干色谱纯化技术联合使用来实现的。

Ota最早用SephadexG-75结合CM-SephadexC-25柱层析分离得到5种茎酶的组分。

用DEAE-52离子交换柱层析结合Sephadex G-75分子筛柱层析色谱法纯化果酶，能获得比活力为12.5U/mg的单一电泳纯酶制剂。

（3）固定化金属离子亲和色谱法固定化金属离子亲和色谱法是以普通凝胶作为载体，连接上合适的螯合配体和足够暴露的金属离子，制成亲和吸附剂，进行分离纯化蛋白质的方法。

此法介于高特异性的生物亲和分离法和低特异性的离子交换色谱法之间，对组氨酸基团有特异性。

Huali Nie 等（2008）首次应用固定化金属亲和膜（IMAM）—肽-尼龙膜，这是一种将七肽共价固定到复合膜上作为配体的新型尼龙膜，用其从菠萝中分离和提纯菠萝蛋白酶，可使菠萝蛋白酶纯化15.4 倍，回收率达94.6%，而且不会造成任何变性。

菠萝蛋白酶市场分析报告1.引言1.1 概述概述部分的内容应该包括对菠萝蛋白酶市场的简要介绍和概况。

菠萝蛋白酶是一种重要的蛋白水解酶，在食品、医药和美容等领域有着广泛的应用。

随着人们对健康和美容的关注度不断提升，菠萝蛋白酶市场需求逐渐增加。

在本报告中，我们将对菠萝蛋白酶市场进行深入分析，旨在为相关行业提供市场发展的参考依据和决策建议。

1.2 文章结构文章结构部分的内容:本报告分为引言、正文和结论三个部分。

引言部分主要概述了菠萝蛋白酶市场分析报告的背景和意义，介绍了文章的结构和目的，并对报告进行了总结。

正文部分包括菠萝蛋白酶的定义与作用、市场现状分析以及市场发展趋势预测，旨在全面分析菠萝蛋白酶市场的现状和发展趋势。

结论部分总结了市场分析报告的主要内容，提出了对菠萝蛋白酶市场的建议，并展望了未来发展的趋势。

通过以上分析，读者能够全面了解菠萝蛋白酶市场的现状和发展趋势，并对未来的市场走向有所把握。

1.3 目的本报告旨在对菠萝蛋白酶市场进行全面的分析和研究，以了解其当前的市场现状和发展趋势。

通过对菠萝蛋白酶的定义、作用和市场现状的分析，可以为相关企业和投资者提供决策参考，同时也可以为行业内的研究人员和从业者提供行业发展的参考和借鉴，有助于推动菠萝蛋白酶市场的健康发展。

通过对市场发展趋势的预测，可以为相关企业制定战略规划提供有益的信息，同时也可以为市场参与者提供参考，以把握时机，促进市场的良性发展。

最终目的是为了推动菠萝蛋白酶市场的发展，促进相关产业的健康快速发展。

1.4 总结本文对菠萝蛋白酶市场进行了全面深入的分析与预测，通过对市场现状的分析，我们可以清晰地看到菠萝蛋白酶市场的发展趋势。

随着人们对健康和营养需求的增加，菠萝蛋白酶将有更广阔的市场前景。

同时，本文还针对市场现状提出了一些相关建议，希望能够为菠萝蛋白酶行业的发展提供一些参考。

展望未来，菠萝蛋白酶市场的发展将更加繁荣，为消费者提供更多更好的产品和服务。

菠萝蛋白酶提取菠萝蛋白酶提取一．实验目的:1.了解菠萝蛋白酶的基本性质，设计提取方法并测性其蛋白总量及酶活性；2.计算从菠萝中提取菠萝蛋白酶时每步的回收率，判断提取方法的优劣。

二．实验原理：菠萝蛋白酶外观为白色至浅棕黄色无定形粉末；可溶于水，水溶液无色至淡黄色，有时有乳白光，不溶于乙醇、氯仿和乙醚；属糖蛋白。

主要作用原理是使多肽类水解为低分子量的肽类，尚有水解酰胺基键和酯类的作用。

其作为一种食品添加剂可用于肉质嫩化,啤酒澄清,还用于干酪、明胶及水解蛋白的生产。

在医药上它可以治疗水肿及多种炎症；它能迅速溶痂,对正常组织无害,不影响植皮,适用于中小面积深度烧伤的治疗。

提取菠萝蛋白酶的传统工艺是高岭土吸附法和单宁沉淀法。

高岭土吸附法生产工艺和操作都比较复杂,原材料消耗多,所需设备也多,酶活总回收率低,但产品质量较好,纯度较高,单宁沉淀法工艺和操作比高岭土法简单,原材料消耗少,所需设备少,但酶活回收率低。

有些研究用超滤法对传统工艺进行了改革,不仅使菠萝蛋白酶产品更纯,而且酶粉得率比传统工艺高,但超滤法生产工艺和和操作比上述两种方法复杂,工人素质要求高,且设备一次性投资大。

本实验采用新型吸附法提取菠萝蛋白酶,步骤简单,产率比传统方法有所提高,是一种有发展的方法。

在新型吸附沉淀法提取菠萝蛋白酶中,所使用的锌离子对酶有激活作用,乙二胺四乙酸是一种螯合物,可有效地螯合原料中某些重金属离子,以避免其与酶结合而使酶失去活性,抗坏血酸则具有还原性,分子上的活泼羟基氢可使酶活性中心保持还原状态,从而有效地保持酶活性,其中以EDTA 和L2半胱氨酸组合,效果最佳。

单宁用量多少会直接影响酶产量,一般范围0. 15 %～0. 25 %的浓度。

采用Folin-酚法测定蛋白酶含量，发生双缩脲反应的蛋白中酚基（酪氨酸），在碱性条件下将磷钼酸和磷钨酸还原成钼酸和钨酸，呈蓝色，在650nm和66onm处有最大吸收值。

Folin-酚试剂由甲试剂和乙试剂组成。

孤岛颠人贵阳医学院gudaodianren@菠萝蛋白酶的研究应用孤岛颠人摘要：菠萝蛋白酶是一种纯天然植物蛋白酶，菠萝蛋白酶主要提取于菠萝中茎和果质中，采用超滤方法进行过滤浓缩，低温冷冻干燥而得的，应用于食品、医药、美容业、饲养等多个领域。

关键词：菠萝蛋白酶的提取，特性，应用前言：菠萝蛋白酶（Bromelain，简称菠萝酶，亦称为凤梨酶或凤梨酵素）是从菠萝果茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。

首次成功分离出菠萝酶的历史纪录是委内瑞拉的化学家文森特‧马卡罗（Vicente Marcano）在1891年时从菠萝的果实中分离出该酶。

随后，人们对菠萝蛋白酶进行了一系列研究，发现这些蛋白酶不是单一的成分，而是由多种不同分子量和分子结构的酶系组。

粗菠萝蛋白酶是各种成分的混合物，除了蛋白水解酶系外，有的还含磷酸酯酶、过氧化物酶、纤维素酶、其它糖苷酶及非蛋白物质。

过去在临床上，大多数使用的是非单一成分的酶。

品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工，采用超滤方法进行过滤浓缩，低温冷冻干燥而得的，可广泛应用于食品、医药等行业中。

一、菠萝蛋白酶的种类及主要特性菠萝蛋白酶主要的两种蛋白酶为菠萝茎酶（存在于茎部）和菠萝果酶（存在于果质中）。

菠萝蛋白酶为白色至浅棕黄色无定形粉末。

溶于水，不溶于乙醇、氯仿和乙醚。

分子量约33000，等电点为9.55。

菠萝蛋白酶为巯基蛋白酶，其活性中心为巯基（—SH）能进行蛋白水解等各种生化反应，热分解可排出刺激烟雾。

在一定温度、PH值及底物浓度下，菠萝蛋白酶能够水解蛋白质生成蛋白胨、多肽及氨基酸等物质，尚有水解酰胺基键和酯类的作用。

（一）温度对菠萝酶的影响菠萝蛋白酶有一个较高的最适反应温度，介于55～60℃，温度再升高，酶的热失活增强，反应速度下降(图1)（二） PH对菠萝蛋白酶的影响菠萝蛋白酶的最适pH在6．5～7．5，在7．1附近达到最大值。

菠萝中的菠萝蛋白酶菠萝中的菠萝蛋白酶1、抑制血小板聚集；2、溶解纤维蛋白；3、消炎；4、抗肿瘤；5、调节细胞因子和免疫；6、对皮肤清创的特性；7、促进其它药物的吸收；8、溶解粘液；9、助消化；1、0促进伤口愈合；11、改善心血管循环系统。

菠萝蛋白酶口服易于吸收，有可靠的证据表明大剂量给药可以提高治疗效果。

虽然所有的相关机理还没有完全搞清楚，但菠萝蛋白酶已被证明是一种安全有效的药物。

在大鼠试验中，服用一定剂量的菠萝蛋白酶会降低血清纤维蛋白原水平，高浓度的菠萝蛋白酶维可明显延长凝血酶原时间（PT）和活化部分凝血酶时间(APTT)。

一定剂量下的菠萝蛋白酶通过刺激ADP、肾上腺素、前列腺素前体，可加强抑制血小板聚集的作用。

在体内和体外，菠萝蛋白酶都是一种有效的纤维蛋白溶解剂在消炎试验中，菠萝蛋白酶和强的松有相似的消炎作用。

具有免疫刺激作用曾有专利认为菠萝蛋白酶的某一组分可用于治疗免疫系统受抑制的病症或作为疫苗佐剂。

菠萝蛋白酶具有免疫刺激作用，血液中丙种球蛋白缺乏症病人的吞噬细胞表现出对这种刺激特别敏感。

体内外的研究表明，通过对辅助细胞的刺激作用和对T细胞的直接抑制反应，菠萝蛋白酶可以增强和抑制T细胞的免疫反应。

抑制毒素分泌实验证明菠萝蛋白酶能降低毒素结合活性并能抑制热不稳定毒素、霍乱毒素及热稳定毒素的分泌效应。

用于烧伤脱痂菠萝蛋白酶能选择性地除去死皮，使新皮移植得以尽早进行。

动物实验证明，菠萝蛋白酶对邻近的正常皮肤无不良影响。

局部使用抗生素不影响菠萝蛋白酶的效果。

用其制备的菠萝蛋白酶脱痂制剂治疗深2度和3度烧伤，可在3-4小时完成脱痂。

全过程无需麻醉，脱痂十分彻底，对于功能部位的烧伤治疗具有更重要的意义。

消炎作用菠萝蛋白酶在各种组织中能有效地治疗炎症和水肿（包括血栓静脉炎、骨骼肌损伤、血肿、口腔炎、糖尿病人溃疡及运动损伤），能在体外激活鼠巨噬细胞和自然杀伤（NK）细胞。

因此，对于免疫缺失的个体，菠萝蛋白酶具有激活炎症反应的潜力。

菠萝蛋白酶‎的制备及活‎性测定背景菠萝蛋白酶‎(Brome‎l ain)，别名菠萝酶‎，是存在于菠‎萝(Anana‎COmOS‎l2S)植株中的蛋‎白质水解酶‎，为浅黄色无‎定形粉末，微有异臭。

菠萝的果、茎、柄和叶片中‎都含有菠萝‎蛋白酶。

一般从菠萝‎果中提取的‎称为果菠萝‎蛋白酶，从菠萝皮、茎中提取的‎为茎菠萝蛋‎白酶。

八成熟的菠‎萝果汁含有‎约0．4％的菠萝蛋白‎酶，成熟的菠萝‎果汁含有O‎．3％左右的菠萝‎蛋白酶，茎汁含8．7％的菠萝蛋白‎酶(Murac‎h i，et a1．，1964)。

1981年‎，Marca‎n o首先发‎现菠萝汁中含‎有蛋白水解‎酶，随后Wil‎l stat‎t er，Bergm‎a nn和M‎a rtin‎相继指出，菠萝蛋白酶‎存在于果、皮和茎部中‎，存在于茎部‎的称为茎酶‎(Stemb‎r omel‎a in E．C．3．4．22．4)，存在于果汁‎中的酶称为‎果酶(Fruit‎brome‎l ainE‎．C．3．4．22．5)。

Murac‎h i和Ne‎u rath‎、E1．G harba‎w i和Wh‎i take‎r采取层析‎法分离提取‎了菠萝蛋白‎酶并研究了‎它的活性成‎分。

结构特性研‎究表明，果菠萝蛋白‎酶是酸性酶‎，等电点为p‎H4．6，茎菠，约为33，000，等电点为p‎H9．5，其活性中心‎的氨基酸顺‎序和催化机‎理与木瓜蛋‎白酶相似，并确定茎菠‎萝蛋白酶为‎糖蛋白。

Ota S et aL研究指‎出，茎菠萝酶分‎子量为36‎000，末端氨基酸‎残基是丙氨‎酸，果酶分子量‎为3000‎0，末端氨基酸‎残基也为丙‎氨酸，碳水化合物‎分析与Mu‎r acll‎i 的分析结‎果相似。

1988年‎，T．L．迈诺特等由‎十二烷基硫‎酸钠．聚丙烯胺凝‎胶电泳(SDS．PAGE)测定果菠萝‎蛋白酶分子‎量2220‎0．25080‎，等电点3．8~4．8。

菠萝蛋白酶‎是各种酶的‎混合物，已知菠萝蛋‎白酶粗品中‎包含至少五‎种蛋白水解‎酶，也包含非蛋‎白水解酶，包括酸性磷‎酸酶和过氧‎化物酶，并含有淀粉‎酶和纤维素‎酶活性，还存在其他‎成分。

菠萝酶简介
菠萝酶(全称菠萝蛋白酶)是从菠萝果茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶，其外观为浅灰色粉末状。

品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工，采用超滤方法进行过滤浓缩，低温冷冻干燥而得的，是一种天然的、无毒无害，卫生安全的蛋白酶，它可广泛应用食品、医药及生物等行业。

菠萝蛋白酶在食品加工业的应用有焙烤食品、干酪、肉类的嫩化等。

菠萝蛋白酶在医药、保健品业的应用有抑制肿瘤细胞的生长、防治心血管疾病、消炎作用、治疗腹泻、增进药物或营养物质吸收。

菠萝酶还具有嫩肤、美白去斑的优异功效。

菠萝蛋白酶是从菠萝的果、茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻、干燥而得到的一种纯天然的植物蛋白酶。

所以，是由多种不同分子量和分子结构的酶所组成的酶系，且其中至少包含了5种蛋白水解酶。

因此，不仅具有能够分解蛋白质帮助消化及一定的利尿功效，同时，还具有以下作用。

一、食品加工业：1、焙烤食品：将菠萝蛋白酶加入生面团中，可使面筋降解，生面团被软化后易于加工，并能提高饼干与面包的口感与品质；2、干酪：可用于干酪素的凝结；3、肉类的嫩化：菠萝蛋白酶可将肉类蛋白质的大分子蛋白质水解为易吸收的小分子氨基酸和蛋白质，因此，现被广泛应用于肉制品的精加工。

二、在美容化妆品业中的应用：菠萝蛋白酶因具有嫩肤、美白去斑的优异功效，所以，可作用于人体皮肤上的老化角质层，促使其退化、分解、去除，促进皮肤新陈代谢，减少因日晒引起的皮肤色深现象，使皮肤保养呈现良好白嫩状态。

三、在医药、保健品业的应用：1、肿瘤细胞的生长：经相关临床研究观察表明，菠萝蛋白酶能抑制肿瘤细胞的生长；2、心血管疾病的防治：菠萝蛋白酶作为蛋白水解酶对心血管疾病的防治是有益的；它能抑制血小板聚集引起的心脏病发作和中风，缓解心绞痛症状，缓和动脉收缩，加速纤维蛋白原的分解；3、于烧伤脱痂：菠萝蛋白酶能选择性地除皮，使新皮移植得以尽早进行；动物实验证明，菠萝蛋白酶对邻近的正常皮肤无不良影响；4、炎作用：菠萝蛋白酶在各种组织中能有效地治疗炎症和水肿(包括血栓静脉炎、骨骼肌损伤、血肿、口腔炎、糖尿病人溃疡及运动损伤)，且能促进抗生素在感染部位的传输，从而减少抗生素的用药量。

此外，还能促进营养物质的吸收。

以上就是有关菠萝蛋白酶功效以及相关作用的一些简单介绍，希望对大家进一步的了解有所帮助。

菠萝蛋白酶（菠萝酶）菠萝蛋白酶编辑词条B 添加义项 ?菠萝蛋白酶是从菠萝水果皮、茎、芯等部分经生物技术制得的一种纯天然植物蛋白酶，其分子量为33000，等电点为9.55，属于疏基蛋白酶，其活动中心为疏基（-SH），能进行蛋白质水解等各种生化反应，菠萝蛋白酶是一种天然的、无毒无害，卫生安全的蛋白酶，它可广泛应用食品、医药及生物等行业。

目录1基本介绍2组成结构3理化性质4制备方法5价值应用6注意事项折叠编辑本段基本介绍菠萝蛋白酶(Bromelain），简称菠萝酶，亦称为凤梨酶或凤111梨酵素。

是从菠萝果茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。

其外观为浅灰色粉末状，分子量为33000，等电点为9.55。

品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工，采用超滤方法进行过滤浓缩，低温冷冻干燥而得的。

产品已被广泛应用于食品、医药等行业。

折叠编辑本段组成结构菠萝蛋白酶是由多种不同分子量和分子结构的酶所组成的酶系，其中至少包含了5种蛋白水解酶。

除此之外，有的还含磷酸酯酶、过氧化物酶、纤维素酶、其它糖苷酶及非蛋白物质。

菠萝蛋白酶是一种糖蛋白，分子结构中含有一个寡糖分子，由木糖（xylose，xy1）、岩藻糖（fucose，Fuc）、甘露糖（mannose，Man）和N—乙酰葡糖胺（N—aceltylglu2cosamine，GlcNAc）组成，共价连接在肽链上，Ishihara和Yasuda等人分别推测出了糖分子的结构。

折叠编辑本段理化性质菠萝蛋白酶的分子量为30000－33000，等电点为9155，酶液的最大吸收波长为280nm。

因其由多种酶分子构成，故在催化底物上具有多样性。

它能分解蛋白质、肽、脂和酰胺，其水解蛋白的活性较木瓜蛋白酶高10倍以上。

菠萝蛋白酶催化的必需基团不是糖分子，而是所含肽链中的巯基；另外，菠萝蛋白酶分子结构中的羧基和羟基亦与酶活性无关。

菠萝蛋白酶的催化活性易受到pH、温度、金属离子、EDT A 及还原剂等的影响。

菠萝蛋白酶提取方法的研究一、本文概述Overview of this article菠萝蛋白酶是一种从菠萝茎部提取的巯基蛋白酶，具有广泛的生物活性，包括抗炎、抗水肿、抗凝血、抗肿瘤等作用。

由于其独特的生物活性，菠萝蛋白酶在医药、食品、饲料、纺织、制革、造纸和化妆品等行业中具有广泛的应用前景。

因此，研究菠萝蛋白酶的提取方法对于其工业化生产和应用具有重要意义。

Pineapple protease is a thiol protease extracted from the stem of pineapple, which has a wide range of biological activities, including anti-inflammatory, anti edema, anticoagulant, and anti-tumor effects. Due to its unique biological activity, bromelain has broad application prospects in industries such as medicine, food, feed, textiles, leather making, papermaking, and cosmetics. Therefore, studying the extraction method of bromelain is of great significance for its industrial production and application.本文旨在研究菠萝蛋白酶的提取方法，通过对不同提取方法进行比较和优化，找出最佳提取工艺条件，以提高菠萝蛋白酶的提取效率和纯度。

本文首先介绍了菠萝蛋白酶的基本性质和应用领域，然后详细阐述了各种提取方法的原理、操作步骤和优缺点，包括传统提取方法、超声波提取法、微波提取法、酶解法等。

菠萝蛋白酶药效学研究概况摘要：菠萝蛋白酶是从凤梨属植物菠萝中提取的一组复合巯基蛋白水解酶。

已有大量的研究证实，菠萝蛋白酶具有抗炎、抗血栓、抗肿瘤、抗病毒、免疫调节等作用，与其它药物配合使用时具有增效作用，在治疗各种炎症、心脑血管疾病、癌症、烧伤及呼吸道疾病等方面，有广阔的应用前景。

作者综述了历年来国外菠萝蛋白酶的主要药效学研究成果，旨在为菠萝蛋白酶制剂的开发应用提供参考。

关键词：菠萝蛋白酶；药学研究引言菠萝蛋白酶(Bromelain，以下简称BR)是从菠萝[Ananas comosus (L.) Merr.]植株中提取的一类蛋白水解酶的总称。

1876年Peckold等在巴西菠萝中发现含有蛋白酶，Chittenden 于1891从菠萝汁中分离出BR，直至Heinecke于1957年在菠萝的茎中发现含有更多的BR后，BR始得以商业化规模生产。

从菠萝的果实中提取的称为果菠萝蛋白酶(Fruit Bromelain)，从菠萝的茎中提取的称为茎菠萝蛋白酶(Stem Bromelain)。

BR的分子量约为 33000，是典型的巯基蛋白酶，能分解蛋白质，肽，酯，酰胺，因而在医药和食品领域有很高的应用价值。

我国于上世纪80年代将BR制剂作为药物正式用于临床，并正式纳入药品标准。

国内外的研究发现，BR不仅具有抗炎作用，抗血栓、抗肿瘤、抗病毒等作用，还有免疫调节功能，可用于治疗各种炎症、皮肤烧伤、上呼吸道感染和心血管疾病，并能抑制肿瘤细胞生长。

近期的研究表明，BR在治疗CoVID-19方面也有一定发展前景。

本文仅对BR的药效学研究概况作一综述，以期能对BR制剂的开发提供参考。

1、抗炎作用动物试验表明，BR具有抗炎作用。

Laura P. Hale等报导，BR可能通过多种机制发挥抗炎作用，包括改变白细胞的迁移和激活。

David J等人也证实，在3种不同的白细胞迁移到发炎的腹膜腔的小鼠模型中，BR均能有效地减少中性粒细胞向急性炎症部位的迁移，从而减少对炎症刺激的急性反应。

食品酶学综合性实验实验1 菠萝蛋白酶的提取、初步分离纯化及活性测定【目的和要求】1. 了解酶分离纯化的一般程序；2. 掌握硫酸铵沉淀法、透析法分离提取菠萝蛋白酶的基本原理和方法；3. 熟悉蛋白质含量测定、菠萝蛋白酶活力测定等实验原理和方法。

【实验原理】1.建立有效的酶纯化程序应考虑的原则（1）利用酶在分离纯化上最有利的特性；（2）尽早使用一种选择性好的方法；（3）选择交换能力高的层析技术作为第一步层析；（4）不要连续使用相同的纯化方法；（5）将各层析步骤连接起来，使前一步得到的样品适用于下一步层析；（6）在造成酶被稀释的步骤后来要用浓缩酶的方法；（7）要使每步过程的分辨能力呈递增趋势；（8）每步纯化过程后，通过量体积，酶活力和蛋白质浓度测定，监测纯化的进程。

2.菠萝蛋白酶简介菠萝蛋白酶（Bromelain，EC 3.4.22.3）简称菠萝酶，是从凤梨属植物菠萝中提取的一组复合的半胱氨酸巯基蛋白水解酶。

在食品工业中菠萝蛋白酶作为一种食品添加剂，能分解蛋白质、肽、酯和酰胺等，可用于肉质嫩化、水解蛋白、啤酒澄清、干酪生产等。

在医药上它可以治疗水肿及多种炎症。

1891年Mercaro于菠萝的汁中首先发现。

菠萝蛋白酶属于糖蛋白，是由巯基蛋白酶和非蛋白酶组分构成的复杂复合物，因含有一个不稳定的游离巯基，所以菠萝蛋白酶极易被氧化而使其酶活下降。

菠萝蛋白酶的相对分子质量大约为33 000DW，等电点9.55，最适pH在7.1左右，在偏酸环境下酶活下降较快，碱性环境能延缓失活。

菠萝蛋白酶的温度的最稳定范围是55℃~65℃。

金属盐离子中NaCl、KCl对酶活的影响不是很大，维生素C、半胱氨酸、硫代硫酸钠、2-巯基乙醇是菠萝蛋白酶的稳定剂，，EDTA能通过螯合对酶活有影响的金属离子而保护菠萝蛋白酶，有机溶剂中甲醇、乙醇、乙二醇对酶活损失较大。

3.菠萝蛋白酶的粗分离（1）盐析分离盐析法是粗分离蛋白质的重要方法之一。

在稀盐溶液中，蛋白质的溶解度随盐浓度的增加而升高，这种现象称为盐溶。