主要溶液配制
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实验常用试剂配置1.铜标准贮备溶液:称取1.000±0.005g金属铜(纯度99.9%)置于150ml烧杯中,加入20ml1+1硝酸,加溶解后,加入10ml1-1硫酸并加热至冒白烟,冷却后,加水溶解并转入1L容量瓶中,用水稀释至标缓。
此溶液每毫升含1.00mg铜。
2.铜标准溶液:吸取5.00ml铜标准贮备溶液于1L容量瓶中,用水稀至标线。
此溶液每毫升含5.0μg铜。
3.二乙基二硫代氨基甲酸钠0.2%(m/v)溶液:称取0.2克二乙基二硫代氨基甲酸钠三水合物(C5H10NS2Na •3H2O,或称铜试剂cupral)溶于水中并稀释至100ml,用棕色玻璃瓶贮存,放于暗处可用两星期。
4.EDTA-柠檬酸铵-氨性溶液:取12g乙二胺四乙酸二钠二水合物(Na-EDTA•2H2O)、2.5g柠檬酸铵[(NH4)3•C6H5O7],加入100ml水和200ml浓氨水中溶解,用水稀释至1L,加入少量0.2%二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液,用四氯化碳萃取提纯。
4.1EDTA-柠檬酸铵溶液:将5g乙二胺四乙酸二钠二水合物(Na2-EDTA•2H2O)20g柠檬酸铵[(NH4)3•C6H5O7]溶于水中并稀释至100ml,加入4滴甲酚红指示液,用1+1氨水调至PH=8~8.5(由黄色变为浅紫色),加入少量0.2%二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液,用四氯化碳萃取提纯。
5.氯化铵-氢氧化铵缓冲溶液将70g氯化铵(NH4Cl)溶于适量水中,加入570ml浓氨水,用水稀释至1L。
6.甲酚红指示液0.4g/L:称取0.02克甲酚红(C21H18O5S)溶于50ml195%(v/v)乙醇中。
7.碘溶液C=0.05mol/L:称12.7g碘片,加到含有25g碘化钾+少量水中,研磨溶解后用水稀释至1000mL。
8.丁二酮肟[(CH3)2C2(NOH)2]溶液5g/L:称取0.5g丁二酮肟溶解于50mL浓氨水中,用水稀释至100mL9.丁二酮肟乙醇溶液,10g/L:称取1g丁二酮肟,溶解于100mL乙醇(3.4)中。
配制溶液的方法有
配制溶液的方法主要有以下几种:
1. 固体溶解法:将固体溶质加入到溶剂中,通过搅拌和加热使其溶解。
这是最常用的配制溶液的方法,比如将盐加入水中配制盐水。
2. 溶液稀释法:当需要调整溶液浓度时,可以通过溶液稀释的方法进行。
将已有的浓溶液取出一部分,加入适量的溶剂使其稀释,从而得到所需浓度的溶液。
3. 液体混合法:将两种或多种溶液混合在一起,通过计算混合前后的溶质浓度和容积,可以得到所需浓度的溶液。
这种方法常用于配制某些特定浓度的试剂液。
4. 稀酸稀碱稀化法:将浓度较高的酸、碱加入到大量的水中,通过稀化的方法得到所需浓度的酸碱溶液。
这种方法常用于配制实验室中的常用酸碱溶液。
5. 水合物溶解法:有些化合物具有结晶水,通过将结晶体加入到水中,可以得到溶解度较高的溶液。
这种方法常用于配制一些含水合物的溶液。
在配制溶液时,需要注意以下几点:
1. 需要准确称量溶质和溶剂,以保证溶液浓度的准确性。
2. 溶质的溶解度和溶剂的性质需要考虑,确保溶解度足够高,否则溶质不易溶解或溶液浓度无法满足需求。
3. 在溶质溶解过程中,可以适当加热或搅拌促进其溶解,但需注意加热时避免溶液溢出或溶质分解。
4. 配制过程中,需要注意实验室安全,避免对身体和环境造成伤害。
总之,配制溶液的方法多种多样,具体选择哪种方法要根据实际情况和需求确定。
在操作过程中,需要严格控制溶质和溶剂的量,充分考虑溶液的浓度和溶解度,以确保得到所需浓度的溶液。
同时还需注重实验室安全,遵守操作规范,保证人身安全和环境保护。
常用溶剂的配制方法1、磷酸缓冲液:0、15M,pH=7、4磷酸缓冲液:KH2PO4:2、041g+100ml水K2HPO4·3H2O:10。
3g+300mL水两液混合即成400mL,0、15M,pH=7、4的磷酸缓冲液0、2mol/L不同pH的磷酸缓冲液:先配制0。
2mol/L的磷酸二氢钾溶液和0。
2mol/L的磷酸二氢钾溶液,然后按下表配制:2、硼酸缓冲液0。
15M,pH=8、2硼酸缓冲液:四硼酸钠溶液:2g+35 mL水硼酸溶液:3。
246g硼酸+350 mL水两液混合即成700 mL,0、15M,pH=8、2的硼酸缓冲液0。
2 mol/L(硼酸根),不同pH的硼酸缓冲液:先配制0、2 mol/L的硼酸溶液和0、05 mol/L的四硼酸钠溶液,然后按下表配制:3。
甘氨酸-盐酸缓冲液:0、2 mol/L0。
2 mol/L甘氨酸溶液(15、01g/L)4。
柠檬酸缓冲液:0。
1mol/LC6H8O7·H2O:0。
1mol/L溶液为21。
01g/LNa3C6H5O7·2H2O:0、1mol/L溶液为29、41g/L5。
Tris-HCl缓冲液:0、1mol/L100mL0。
1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与一定量的0。
1mol/L盐酸混匀,可得0。
1mol/L,不同pH的缓冲液、200mL 0。
1MTris(2、42g)加入0、1M HCl 24mL→pH=9,0、1MTr is-HCl buffer6。
醋酸缓冲液:0。
2mol/L0、2mol/L醋酸钠:27、22g三水醋酸钠(无水的为16、4g)+1L水0。
2mol/L醋酸:11、55mL冰醋酸+1L水7。
碳酸缓冲液:0、1 mol/L(Ca2+、Mg2+存在时不得使用)0。
1 mol/LMES缓冲液:1。
921gMES+100mL水,pH=4、098、电泳溶液:电泳缓冲液:3gTris碱、14、4g甘氨酸和1gSDS溶于水中,调pH至8。
溶液配制方法一、指示剂配制1.0.3%二甲酚橙指示剂:称取0.15g二甲酚橙,加5ml无水乙醇,用水稀释至50ml。
2.5g/L液体铬黑T:称取0.5g铬黑T和2.0g氯化羟胺,溶于乙醇,用乙醇稀释至100ml,此使用前配备。
贮存于100ml棕色试剂瓶中。
3.固体铬黑T:称取1.0g铬黑T和100g氯化钠研磨混合均匀,贮存于100ml棕色广口瓶中备用。
4.1%紫脲酸胺:1g紫脲酸胺与100g固体氯化钠混合,研磨,烘干。
5.1g/L酚酞指示剂:称取0.1g酚酞指示剂,加乙醇100ml溶解混合。
6.10 g/L酚酞指示剂:称取1.0 g酚酞指示剂,加乙醇100ml溶解混合。
7.甲基红—溴甲酚绿指示剂:1份2g/L甲基红乙醇溶液与三份1g/L溴甲酚绿乙醇溶液混合。
8.甲基红-亚甲基蓝指示剂:一份甲基红乙醇溶液(1g/L)与两份亚甲基蓝乙醇溶液(1g/L)混合。
9.品红试剂(0.15%):称取0.15g酸性品红,加75ml水,加热到品红溶解,冷却到室温,加4ml盐酸搅拌。
再加15ml10%亚硫酸钠溶液搅匀,放置过夜,加活性炭过滤于100ml容量瓶中。
二、标准溶液的配制1.钴标准溶液:称取3.000g金属钴(99.98%)置于250ml烧杯中,加少量蒸馏水润湿,盖上表面皿,缓慢加入20ml硝酸,加热溶解完全后,洗表面皿及烧杯壁于烧杯中,移入1000ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。
此溶液1ml含钴3.000mg。
2.铁氰化钾标准溶液:C﹝K3Fe(CN)6﹞=0.03mol/L,称取9.9g铁氰化钾溶于水中,并稀释至1000ml,摇匀,贮存于棕色瓶中。
3.硫酸钴标准溶液:C(CoSO4)=0.15mol/L,称取4.2g硫酸钴(CoSO4·7H2O)溶于水中,并稀释至1000ml,摇匀,此溶液1ml含钴大约0.9mg。
4.锂标准贮存溶液:称取 5.3228g光谱纯级碳酸锂(预先于110℃、烘2个小时置于干燥器中冷却)置于250ml烧杯中,加少量水润湿,盖上表面皿,沿杯壁缓慢加入15ml盐酸,待溶解后转入1000ml容量瓶中,用蒸馏水定容。
甲醇-醋酸-水(35:4:61)取醋酸4ml,甲醇35ml,加入水61ml中,混匀,即得。
本液应临用新制。
甲醇-水-磷酸(47:53:0.2)取磷酸0.2ml、甲醇47ml,加入水53ml中,混匀,即得。
本液应临用新制。
甲醇-0.2mol/L醋酸溶液-冰醋酸(67:33:1)取3.3ml的醋酸加水至100ml,混匀;取冰醋酸1ml,甲醇67ml,加入上述醋酸溶液33ml中,混匀,即得。
甲醇-水(85:15)或(3:7)取甲醇85ml或3ml,分别加入水15ml或7ml中,混匀,即得。
15ml、即得。
2g、4g、20g、新制。
4→1→2mol/L氢氧化钾溶液取氢氧化钾11.2g,加水使溶解成100ml,即得,本液应贮存于密闭的聚乙烯塑料瓶中。
1→10氢氧化钾溶液取氢氧化钾10g,加水使溶解成100ml,即得。
本液应贮存于密闭的聚乙烯塑料瓶中。
0.01mol/L、0.05mol/L、0.1mol/L、0.2mol/L盐酸液取0.01mol/L、0.05mol/L、0.1mol/L、0.2mol/L盐酸滴定液(检验标准操作规程附录ZT-TS-02-04-042-01)。
1→2盐酸溶液取盐酸50ml,加入水中,使成100ml,混匀,即得。
1→4盐酸溶液取1→2盐酸溶液稀释,即得。
1→40盐酸溶液取1→4盐酸溶液稀释,即得。
4→10盐酸溶液取盐酸40ml,加入水中使成100ml,混匀,即得。
18→1000盐酸溶液取盐酸18ml,加入水中使成1000ml,混匀,即得。
1%盐酸溶液取盐酸10ml,加入水中使成1000ml,混匀,即得。
5%盐酸乙醇溶液取盐酸0.5ml,加入乙醇中使成100ml,混匀,即得。
本液应临用新制。
1.81→1→10%100ml1→1→1→10%30%10%3→10硫酸乙醇溶液取硫酸30ml,加入乙醇中使成100ml,混匀,即得。
30%硫氰酸铵溶液取硫握酸铵30g,加水使溶解成100ml,混匀,即得。
常用溶液的配制一、常规溶液(一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution,PBS)甲液:1/15mol/L Na2HPO4溶液Na2HPO49.465g蒸馏水加至1000ml乙液:l/15mol/L KH2PO4溶液KH2P049.07g蒸馏水加至1000m1分装在棕色瓶内,于4℃冰箱中保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需pH的缓冲液,见下表:pH 甲液ml 乙液mI pH 甲液ml 乙液mI5.29 5.595.916.24 6.47 6.64 2.55.010.020.030.040.097.595.090.080.070.060.06.816.987.177.387.738.0450.060.070.080.090.095.050.040.030.020.010.05.0(二)0.3%台盼兰染液称取台盼兰(Trypan blue)粉0.3克,溶于100ml生理盐水中,加热使之完全溶解,用滤纸过滤除渣,装入瓶内室温保存。
(三)0.5%酚红指示剂酚红0.5g0.1N(0.4%)NaOH 15ml双蒸水85ml将0.5克酚红置研钵中,缓漫滴加0.1NNaOH溶液边加边磨,并不断吸出已溶解的酚红液,直至全部溶解,然后加入85ml双蒸水,颜色为深红,经粗滤纸过滤后使用,室温保存。
(四)5.6%NaHCO3溶液称NaHCO35.6克,溶于100ml蒸馏水中,室温保存即可(如需要也可10磅15分钟高压灭菌,4℃冰箱保存)(五)10μg/ml秋水仙素秋水仙素lOmg生理盐水100ml装入茶色瓶中,为贮备液,4℃冰箱中保存。
甩时取贮备液1ml加生理盐水9ml即可。
(六)0.4%KCl-0.4%柠檬酸钠低渗液将0.4%KCl和0.4%柠檬酸钠两液等量混合即可,室温保存。
(七)2%柠檬酸钠称取柠檬酸钠2克,加100ml双蒸水即可,室温保存。
(八)0.2%次甲基兰染液称次甲基兰(Methylene blue)0.2克,加蒸馏水100ml,室温保存。
称取无水乙酸钠 79 克(或称取 150 克结晶醋酸钠 NaAC˙3H O )溶解于水, 常用试剂的配制一、常用试剂的配制:1、100g/L 钼酸铵溶液:称取 100 克钼酸铵于 500 毫升烧杯中加水溶液、移入 1 升,稀释至刻度,混匀。
(如溶液浑浊,应过滤)。
2、200g/L 硫氰酸钾溶液:称取 200 克硫氰酸钾于 500 毫升烧杯中,溶解于水,移入 1 升容量瓶中,稀释至 1 升体积。
3、50g/L 氯化钡溶液:称取 50 克二氯化钡于 500 毫升烧杯中,溶解于水,移入 1 升容量瓶中,稀释至 1 升体积。
4、100g/L 酒石酸溶液:称取 100 克酒石酸溶于水中,移入 1 升容量瓶中,稀释至刻度。
5、150g/L 氢氧化钾溶液:称取 150 克氢氧化钾溶于水中,移入 1 升容量瓶中,稀释至刻度。
6、20g/L 二安替比林甲烷(DAM )溶液:称取出 20 克二安替比林甲烷于烧杯中加水约 200 毫升,再加 1+1 盐酸 333 毫升,搅拌溶解,继续加水稀至1 升,混匀,此溶液酸度为 2mol/L 。
保存于棕色瓶中。
7、氨性缓冲液(PH=10):称取 67.5 克氯化铵溶于 200 毫升水中,加入 570 毫升浓氨水、稀释至 1 升。
8、醋酸——醋酸钠缓冲液(PH=5.2~5.9)。
2 加 7.7 毫升乙酸、稀至 1 升,用间隔为 0.2 的 PH 试纸检验其 PH 值。
9、硫酸——草酸——硫酸亚铁铵混合液:称取 30 克硫酸亚铁铵于 1 升烧杯中,加 150 毫升水,缓缓加入 166 毫升 1+1的硫酸,搅拌使其溶解。
冷却后移入 1 升的容量瓶中,再称 30 克草酸于另一烧杯中,加热水溶解,冷却后移入上述容量瓶中,稀释至刻度、混匀。
10、邻菲啰啉—盐酸羟胺—醋酸—醋酸钠缓冲混合液。
称取 100 克无水醋酸钠(或 150 克结晶醋酸钠)和 5 克盐酸羟胺,分别溶于水,另称 0.25 克邻啡啰啉溶于 15 毫升醋酸中,将三溶液混合,用水稀释 1 升、混匀。
实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解,抽滤后1mL分装到离心管中,于-30℃冻存X-gal:贮存浓度为20mg/mL称取20mg X-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中,-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存,不需要过滤除菌IPTG:贮存浓度为0.84mol/L称取2g IPTG溶于8mL超纯水中,用水定容到10mL,用0.22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2:贮存浓度为1mol/L称取1.11g CaCl (或者CaCl:2H2O 1.4698g)溶于8mL超纯水中,定容到10mL,用0,22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中,并于-30℃保存LB培养基:胰蛋白胨(Tyrtone)10g/L酵母提取物(Yeast Extraction)5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6,然后高压蒸汽灭菌,注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶:将胰RNA酶(RNA酶A)溶于10mmol/L Tris-Cl(PH7.5)、15mmol/L NaCl 中,配成10mg/mL 的浓度,于100℃加热15min,缓慢冷却至室温,分装成小份保存于-20℃Bradford 贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG 250 0.35g室温下可储存,一般4℃Bradford 工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO450 mM 6.81 gEDTA 1 mM 0.292 g (EDTA-2Na-2H2O) 0.372 g定容至1 L,调pH至8.0包涵体洗涤液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO4 50 mM 6.81 gEDTA 5 mM 1.46 g (EDTA-2Na-2H2O) 1.86 g尿素 2 M 120 gTriton X-100 0.5% 5 ml脱氧胆酸钠盐0.1% 1 g定容到1 L 调pH至8.0匀浆缓冲液(pH=7.5)成分:20mM HEPES 0.002mol=0.476g 加入0.952g1.5mM MgCl20.00015mol=0.0036g 加入0.0072g0.2mM EDTA 0.00002mol=0.00584g 加入0.01168g0.1M NaCl 0.01mol=0. 58g 加入1.16g0.5mM 钒酸钠0.00005mol=0.0092g 加入0.0184g加100mL水进行溶解,NaOH调pH至7.50.2mM DTT 总体积500μL加入0.1μL0.4mM PMSF 总体积500μL加入20μL1%SDS 加入50μL 10% SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入,SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液,溶于0.01M乙酸钠(pH=5.2)中,过滤除菌PMSF配成10mM母液,溶于异丙醇10*PBSNaCl 80.0669 gKCl 2.0129 gNa2HPO414.1960 gKH2PO4 2.4496 g水定容至1L,使用时稀释10倍,用NaOH调pH至7.4Start with 800 mL of distilled water to dissolve all salts. Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add distilled water to a total volume of 1 liter. The resultant 1x PBS should have a final concentration of 10 mM PO43−, 137 mM NaCl, and 2.7 mM KClIf used in cell culturing, the solution can be dispensed into aliquots and sterilized by autoclaving (20 min, 121°C, liquid cycle). Sterilization may not be necessary depending on its use. PBS can be stored at room temperature or in the fridge. However, concentrated stock solutions may precipitate when cooled and should bekept at room temperature until precipitate has completely dissolved before use.转膜缓冲液(含有SDS)1L剂量甘氨酸 2.9gTris 5.8gSDS 0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris 碱(Mr 121.14) 30.2g甘氨酸(Mr 75.07) 188gSDS (Mr 288.38) 10 g加水至1L用时稀释10倍即可30%丙稀酰胺1L 剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中,加热至37℃溶解,补足体积至1L,过滤,且pH不大于7.01 M Tris-Cl(pH6.8)60.55 g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml1.5 M Tris-Cl(pH8.8)90.83g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml。
1%酚酞指示剂溶液:10g的酚酞加少量无水乙醇溶解,加乙醇定容至1L ,配制好了之后只需摇匀,使之形成均匀溶液。
中性无水乙醇;乙醇对于酚酞显示酸性,中性乙醇就是用氢氧化钠滴定让他对酚酞显示中性。
碘化钾溶液(100g/L):不含碘酸盐或游离碘;称取100g碘化钾,加入适量的水容解,定容至1L。
0.5%淀粉溶液:将5g可溶性淀粉在30mL水中混合,加此混合液于1000mL 沸水中煮沸3min并冷却。
溶剂:环己烷和冰乙酸等体积混合液。
氯仿-冰乙酸混合液:取氯仿40ml加冰乙酸60ml,混匀。
饱和碘化钾溶液:取碘化钾10g,加水5ml,贮于棕色瓶中。
0.01mol/L硫代硫酸钠标准溶液:吸取约0.1mol/L的硫代硫酸钠溶液10ml,注入100ml容量瓶中,加水稀释至刻度。
氢氧化钠(400g/l):称取400g氢氧化钠,加入适量的水容解,定容至1L。
硼酸(20g/l):称取20g硼酸,加入适量的水容解,定容至1L。
甲基红乙醇(1g/l):称取1g甲基红,加入适量的乙醇容解,用乙醇定容至1L。
嗅甲酚绿乙醇(1g/l):称取1g嗅甲酚绿,加入适量的乙醇容解,用乙醇定容至1L。
盐酸(1+1):量取5000ml盐酸缓慢加入500ml的水。
20%盐酸:量取550ml盐酸,加入450ml水。
10%氨水:量取100ml氨水,加入900ml水中。
5g/L铬黑T指示剂:量取5g铬黑T加入少量的水溶解,加水定容至1L。
PH≈10氨-氯化铵缓冲液:20%硫酸:5%铬酸钾:量取50g的铬酸钾溶加少量水溶解,加水定容至1L。
海砂:取用水洗泥土的海砂或河砂,先用盐酸(1+1)煮沸0.5h,用水洗至中性,再用氢氧化钠溶液(240g/l)煮沸0.5h,用水洗至中性,经100℃±5℃干燥备用。
磷脂饱和丙酮溶液的配制取经丙酮洗除油脂等丙酮可溶物的磷脂约2g,在50ml烧杯中用10ml石油醚溶解,加25ml丙酮使磷脂析出。
通过G3玻璃过滤坩埚抽滤,用80ml丙酮分四次洗涤磷脂,最后尽量抽除残留丙酮。
主要溶液配制
LB培养基:
每升含酵母提取物5g,胰蛋白胨10g,NaCl 10g,用10mol/LNaOH调pH
至7.5,15磅高压灭菌20min,4℃保存备用。
在每100ml LB液体培养基中加
入1.5g琼脂即为固体LB培养基,15磅高压灭菌20min,4℃保存备用。
抽提/碱裂缓冲液:
碱裂解液 Ⅰ
50mmol/L 葡萄糖、25mmol/L Tris-cl ( pH 8.0)、10 mmol/L EDTA ( pH 8.0)
碱裂解液Ⅱ
0.2 mol/L NaOH、1%(m/V) SDS
碱裂解液 Ⅲ
5 mol/L 乙酸钾(60.0ml)、冰乙酸(11.5 ml)、H2O(28.5 ml)
细胞培养液: DMEM
PBS:
用800ml蒸馏水溶解8 g NaCl,0.2 g KCl, 1.44 g Na2HPO4和0.24 g KH2PO4。
用HCl调节pH值至7.4,加水至1升。
高压蒸汽灭菌后使用。
TBS:
用800 ml蒸馏水溶解8 g NaCl,0.2 g KCl, 3 g Tis 碱,用HCl调节pH值至7.4,加水至1升。
高压蒸汽灭菌后使用。
TBST:
在TBS中加入0.05%(V/V)Tween-20。
封闭液:
5%(m/V)BSA溶于TBS中。
透析缓冲液配制:
将50g蔗糖,10ml(1M pH8.0)Tris-Cl 溶液,2ml(2M)MgCl2溶液溶解
于水中,并定容于1L。
Buffer B:
8 mol/L 尿素,0.1 mol/L Sodium phosphate buffer,10 mmol/L Tris-cl, pH8.0 Ni离子亲和层析纯化用试剂:
Binding Buffer (pH 8.0)
50 mmol/L Sodium phosphate buffer、0.3 mol/L NaCl、10 mmol/L imidazole ( pH 8.0)
Washing Buffer ( pH 8.0)
50 mmol/L Sodium phosphate buffer、0.3 mol/L NaCl、20 mmol/L imidazole ( pH 8.0)
Elution Buffer ( pH 8.0)
50 mmol/L Sodium phosphate buffer、0.3 mol/L NaCl、250 mmol/L imidazole ( pH 8.0)
Tris缓冲液配制:
将8g NaCl、2.42gTris-碱,溶解并定容于1L双蒸水中,并调pH至7.6 30 % 丙烯酰胺贮存液
称取29 g丙烯酰胺,1g N-N’甲叉双丙烯酰胺,加双蒸水溶解定容至100 ml,装入棕色瓶中4℃保存。
1.5 mol/L Tris·Cl (pH 8.8)
18.15 g Tris溶于50 ml双蒸水,用浓盐酸调pH至8.8,定容至100 ml,4℃
保存。
1 mol/L Tris·Cl (pH 6.8)
12.1 g Tris溶于50 ml双蒸水,用浓盐酸调pH至6.8,定容至100 ml,4℃
保存。
TEMED (N,N,N’,N’-四甲基乙二胺)
TEMED通过催化过硫酸铵形成自由基而加速丙烯酰胺和N,N’-亚甲丙烯酰胺的聚合。
10 %(w/v) 过硫酸铵(APS)
10 %(w/v) 十二烷基硫酸钠(SDS)
称取100 g SDS溶于900 ml的双蒸水中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解,用双蒸水定容至1L。
1×SDS上样缓冲液 (10 ml)
1 M Tris·Cl (pH 6.8) 0.5 ml
甘油 1 ml
溴酚蓝 0.005 g
SDS 0.1 g
DTT 0.08 g
用水定容至10 ml,分装4℃保存。
1×Tris-甘氨酸电泳缓冲液
称取Tris 3.0 g,甘氨酸14.4 g,加入10 ml 10 % (m/v)电泳级SDS,加双蒸水溶解定容至1L。
考马斯亮蓝染色液(100 mL)
g
考马斯亮蓝R-250
0.25
甲醇45 ml
双蒸水45 ml
ml 冰乙酸10
脱色液(1 L)
ml
甲醇 500
冰乙酸100 ml
双蒸水 400 ml。