46种缓冲液配制

常用试剂配方常用试剂储存注意事项：储存于阴凉、通风的地方；远离火种、热源。

避免光照。

室温不超过30℃，相对湿度不超过80％。

包装必须密封，切勿受潮。

应与易（可）燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放，切忌混储，储区应备有合适的材料收容泄漏物。

操作注意事项：尽量在通风橱操作，加强通风，避免粉尘扩散。

远离易燃、可燃物，避免与还原剂、碱类、醇类接触，防止包装及容器损坏。

使用后应留意剩余量，注意及时订购。

8M Urea（尿素）组份浓度：8mol/L Urea（MW：60.07）配制量： 1L配制方法： 1.称取尿素480g，置于1L的蓝盖瓶中。

2. 加水至1L，置于磁力搅拌器上充分搅拌。

3. 于棕色瓶中，4℃保存。

4.使用前，先在常温放置，使析出的尿素溶解。

0.25％AgNO（硝酸银）3（MW：169.87）组份浓度：0.25％（W/V）AgNO3配制量： 500ml配制方法: 1.准确称取硝酸银1.25g。

2.加入500ml的去离子水，充分溶解。

3.于棕色瓶中,常温保存。

0.5M EDTA（PH 8.0）组分浓度: 0.5 mol/L EDTA（MW：372.24）配制量: 500mlEDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。

配制方法: 1．称取93g Na22．加入400ml的去离子水，置于磁力搅拌器上充分搅拌。

3．用NaOH调节调节pH值至8.0（约需加入20g固体NaOH），当pH 接近8.0时， EDTA方可完全溶解，加入去离子水定容至1L。

4．高温高压灭菌后，室温保存半年。

5M NaCl组份浓度： 5mol/L NaCl (MW：58.5)配制量： 1L配制方法： 1.准确称取氯化钠292.5g，置于1L的蓝盖瓶中。

2.用去离子水溶解并稀释至1L。

3.高温高压灭菌后，常温保存。

50% 甘油组分浓度： 50%(V/V) glycerol配制量： 100ml配制方法: 1. 量取下列试剂，置于250ml蓝盖瓶中：100% glycerol 50ml2.加入50ml去离子水，充分搅拌溶解。

磷酸盐缓冲液(PBS配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HP，Op4H 7.2)PBS缓冲液(pH7.2〜7.4): NaCI 137mmol/L, KCI 2.7mmol/L Na2HPO44.3mmol/L，KH2PO41.4mmol/L称7.9g NaC, 0.2g KC| 0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO和) 1.8g K2HPO4 溶于800 ml蒸馏水中，用HCI调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。

保存于4C冰箱中即可。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na离子或K离子的浓度，Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。

母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O 溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O 溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4的配制：先配0.2MPB(pH=7.4, 100ml):取19ml0.2mol/L 的NaH2PO4 81ml0.2mol/L 的Na2HPO4即可。

然后只需将0.2M PB (pH=7.4按相应比例适当稀释即可，如：0.1M PB (PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.01M PB (PH=7.4 :取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.02M PB (PH=7.4 :取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。

若需要NaCI的话，加入NaCI至0.9% (g/100ml)即可。

另：其它各种另PH值的0.2M PB (100ml)配方:0.2M Na2HPO4( ml) pH0.2M NaH2PO4(ml)5.793.56.55.89285.990106.087.712.36.185156.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627.133677.228727.323777.419ml81ml7.516847.613877.710.590.57.88.591.57.97938.05.394.70.01M磷酸盐缓冲液（PBS配制方法称取8gNaC、0.2gKC、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4溶于800ml 蒸馏水中，用HCI调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。

实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种，下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方：一、试剂的配方1. Tris缓冲液：- 3 M Tris-Cl，pH 7.4（准备方法：将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2.NaCl溶液：-5MNaCl（准备方法：将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）3.验血试剂：-4%NaOH溶液（准备方法：将40gNaOH溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-5%CuSO4溶液（准备方法：将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-2%K4[Fe(CN)6]溶液（准备方法：将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）4.PBS缓冲液（磷酸盐缓冲液）：-10×PBS缓冲液（准备方法：将80gNaCl，2gKCl，11.5gNa2HPO4，2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L。

pH值可以调节至7.4左右）5. Tris-EDTA缓冲液（TE缓冲液）：- 10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 8.0（准备方法：将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中，然后加入0.37 g EDTA，使用HCl调节pH值至8.0，并将溶液体积加至1 L）二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液：- 50 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，1% Triton X-100，pH 7.4（准备方法：将6.05 g Tris，5.8 g NaCl，0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2. Tris-Borate缓冲液（TBE缓冲液）：- 89 mM Tris，89 mM boric acid，2 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将10.81 g Tris，5.49 g boric acid，3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）3. Tris-Glycine缓冲液：- 25 mM Tris，192 mM glycine，0.1% SDS，pH 8.3（准备方法：将3.03 g Tris，14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）4. Tris-Acetate缓冲液（TAE缓冲液）：- 40 mM Tris，20 mM acetic acid，1 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将4.84 g Tris，1.86 g acetic acid，0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）5. Phosphate缓冲液：- 100 mM sodium phosphate，pH 7.0（准备方法：根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0，并将溶液体积加至1 L）以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方，并不是全部。

常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种水溶液，其中含有在酸性或碱性条件下能够保持pH稳定的化学物质。

缓冲液广泛应用于生物化学、分子生物学、生物技术和医学等领域的实验和研究中。

下面是一些常用的缓冲液配方及其应用范围。

1. Tris缓冲液Tris缓冲液是一种中性缓冲液，常用于生物化学和分子生物学实验。

它的配方通常为：- 10 mM Tris base-1mMEDTA-向溶剂中调整pH至7.4Tris缓冲液可用于DNA和RNA的电泳、酶反应、细胞培养等实验中。

2.PBS缓冲液PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物学缓冲液，具有缓冲能力强和与生物体液成分相似的特点。

它的配方通常为：-137mMNaCl-2.7mMKCl-10mMNa2HPO4-2mMKH2PO4-向溶剂中调整pH至7.4PBS缓冲液可用于细胞培养、免疫荧光染色、蛋白质凝胶电泳等实验中。

3.TAE缓冲液TAE（三乙酸缓冲液）是一种常用的核酸电泳缓冲液，其配方为：- 40 mM Tris base-20mM醋酸-1mMEDTA-向溶剂中调整pH至8.0TAE缓冲液可用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳，如聚丙烯酰胺凝胶电泳（）和琼脂糖凝胶电泳（agarose gel electrophoresis）。

4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液是一种常用的酸性或碱性缓冲液。

它的配方基于Tris缓冲液，在Tris缓冲液基础上调整pH的方法是在配方中加入稀盐酸或稀氢氧化钠。

例如，对于Tris-HCl缓冲液的配方为：- 50 mM Tris base-向溶剂中加入HCl调整pH至所需的值（通常为7.2至9.0）Tris-HCl缓冲液可用于酶反应、蛋白质组学研究、PCR等实验中。

这只是一些常用的缓冲液配方，根据不同实验需求和物质稀释要求，还有其他许多缓冲液的配方。

对于缓冲液的选择，关键在于根据实验要求选取适当的缓冲体系，并对缓冲液中所需的化学物质浓度、pH值等进行精确调整。

65种溶液、指示剂配制方法1、淀粉指示液1.1称1g淀粉加入100mL H2O中煮沸完全溶解，冷却后加入几滴氯仿。

1.2称可溶性淀粉0.5g，加5mL H2O搅拌后，缓缓倾入100mL沸水中，边加边搅拌，继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清液。

此指示液应临用新配。

2、酚酞指示液：1g酚酞溶于80mL酒精，以酒精稀释到100mL，变色范围PH8.3-10.0，无色变红色3、靛红指示液：0.5g靛红+50%的酒精，以H2O稀释至100mL。

4、石蕊指示液：称10g石蕊粉末，加40mL乙醇，回流煮沸1小时，静置，倾去上层清液，再用同以方法处理2次，每次用乙醇30mL，残渣用水10mL洗涤，倾去洗液，再加H2O50mL 煮沸，放冷，滤过，即得。

变色范围：PH4.5-8.0，红色变蓝色。

5、间苯二酚指示液：0.2间苯二酚溶于20mL丙酮，以H2O稀释至100mL，摇匀。

6、甲基红指示液5.1称0.1g甲基红溶解于60mL酒精，以H2O稀释至100mL。

5.2称0.1g甲基红，加7.4mL 0.05mol/L氢氧化钠溶液，使溶解，再加H2O稀释至200mL，变色范围：PH4.2-6.3，红色变黄色。

7、甲基橙指示液：称0.1g甲基橙溶解于100mL热H2O中，若有不溶物应过滤，变色范围：PH3.2-4.4，红色变黄色。

8、二甲酚橙指示剂：称0.2g干燥的二甲酚橙，加入100g无碘氯化钠，研匀，可长期保存。

9、二甲酚橙指示液：称0.2g二甲酚橙，以H2O稀释至100mL，摇匀，变色范围：PH3.2-4.4，红色变黄色。

10、溴酚蓝指示液：称0.1g溴酚蓝溶解于3.0mL0.05N氢氧化钠溶液中，使溶解，以H2O稀释至200mL，摇匀，变色范围：PH2.8-4.6，黄色变蓝绿色。

11、铬黑T（简称EBT）10.1 称10g干燥的分析纯氯化钠研细，加入0.1g铬黑T，再研匀，可长期保存。

10.2 称0.5g铬黑T，加入盐酸羟胺4.5g，加酒精100mL溶解。

各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液Na2HPO4。

2H2O，分子量= L溶液含L柠檬酸. H2O，分子量= L溶液含L柠檬酸. H2O，分子量= L溶液含L柠檬酸钠. 2H2O，分子量=；L溶液含g/L2（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液取醋酸钠,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液,再加水稀释至1000ml，即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液取醋酸钠18g,加冰醋酸,再加水稀释至1000ml,即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液取醋酸钠,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至，再加水稀释至100ml，即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液取醋酸钠，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。

用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=*10-5（乘10的-5次方），PKa=-lgKa=，将PH=代入，可得C(NaAc)/C(HAc)= 通常我们配制时会使C(HAc)=L，或是C(HAc)=L等。

若是配制C(HAc)=L，则C(NaAc)=L 称量醋酸钠固体质量为82*=46克量取冰醋酸体积为*1000/=。

将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。

当然若想配制其它的浓度，也可照公式计算即可，通常缓冲溶液不能配的太稀，否则缓冲能力要下降，太浓的话又浪费试剂。

L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时的苯二甲酸氢钾溶于水中，稀释至500ml。

Na2HPO4 .2 H2O ,分子量=，L溶液含LNaH2PO4 . 2 H2O ,分子量=，L溶液含LNaH2PO4 . H2O,分子量=，L溶液含LNa2HPO4 .12 H2O,,分子量=，L溶液含L磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pHPBS缓冲液（～）：NaCl 137mmol/L，KCl L，Na2HPO4 L，KH2PO4 L称7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4，溶于800 ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至，最后加蒸馏水定容至1 L。

磷酸盐缓冲液配制方法磷酸盐缓冲液是一种常用于生命科学实验室的缓冲液。

它可以维持溶液的pH在特定范围内，使实验条件更加稳定。

磷酸盐缓冲液可用于多种实验，如聚合酶链式反应（PCR）、电泳、细胞培养等。

在本文中，我将介绍两种常用的磷酸盐缓冲液配制方法。

方法一：磷酸盐缓冲液的配制以下是1M磷酸盐缓冲液（pH 7.4）的配制方法：材料：- 136.89 g NaCl（分子量为58.44 g/mol）- 6.8 g KCl（分子量为74.55 g/mol）- 17.55 g Na2HPO4（分子量为141.96 g/mol）- 2.4 g KH2PO4（分子量为136.09 g/mol）- 蒸馏水步骤：1. 在500 mL的蒸馏水中溶解136.89 g NaCl，并用蒸馏水稀释至1 L。

2. 在500 mL的蒸馏水中溶解6.8 g KCl，并用蒸馏水稀释至1 L。

3. 在500 mL的蒸馏水中溶解17.55 g Na2HPO4，并用蒸馏水稀释至1 L。

4. 在500 mL的蒸馏水中溶解2.4 g KH2PO4，并用蒸馏水稀释至1 L。

5. 将上述四个溶液混合在一起，并用蒸馏水稀释至1 L。

这样就得到了1M的磷酸盐缓冲液，pH为7.4。

如果需要调整pH值，可以使用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）进行调节。

方法二：磷酸盐缓冲液的配制以下是PBS缓冲液（10x）的配制方法：材料：- 80 g NaCl（分子量为58.44 g/mol）- 2 g KCl（分子量为74.55 g/mol）- 14.4 g Na2HPO4（分子量为141.96 g/mol）- 2.4 g KH2PO4（分子量为136.09 g/mol）- 蒸馏水步骤：1. 在800 mL的蒸馏水中溶解80 g NaCl。

2. 在800 mL的蒸馏水中溶解2 g KCl。

3. 在800 mL的蒸馏水中溶解14.4 g Na2HPO4。

4. 在800 mL的蒸馏水中溶解2.4 g KH2PO4。

各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。

2柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/L2（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。

用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。

若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。

将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。

实验室常用试剂和缓冲液配方PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物化学缓冲液，用于洗涤和稀释生物化学试样。

配方：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.42g-KH2PO4：0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.4、用1M（摩尔浓度）盐酸或1M氢氧化钠进行调节。

2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基，适用于大多数细菌和酵母菌的培养。

配方：- 水解酪蛋白（tryptone）：10 g- 酵母粉（yeast extract）：5 g-NaCl：10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。

可以选择添加洗涤剂Tween-20（0.1%）以提高溶解度。

SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。

配方：-NaCl：175.3g- Na3Citrate·2H2O：88.2 g-EDTA：37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC（二硫酰二甲酯）处理，增强其功能。

4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。

配方：-甲醛：37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中，制备所需浓度的甲醛溶液。

5. β-羟丁酸钠（β-Hydroxybutyrate）溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂，用于生物化学实验中。

配方：-β-羟丁酸钠：1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。

这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方，实验室试剂和缓冲液种类丰富多样，具体使用取决于研究目的和实验要求。

在进行实验之前，建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书，并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。

1.乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml，即得。

2.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。

3.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2mol/L 三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。

4.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。

5.乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml,即得。

6.巴比妥缓冲液(pH7.4)取巴比妥钠 4.42g,加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。

7.巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml，即得。

8.巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)取巴比妥钠 5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。

然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml，即得。

9.甲酸钠缓冲液(pH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30,即得。

10.邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6) 取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml，混匀，即得。