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常见缓冲液配制方法
一、介绍
缓冲液是常见的生物或化学反应的催化剂，主要用于维持反应物的酸
碱度在一定的范围内，有利于提高反应效率。
缓冲液有许多种，其配制方
法也多种多样。
下面将介绍常见缓冲液的配制方法，包括常用缓冲液的配
制方法，复合缓冲液的配制方法，以及常见的国际标准缓冲液的配制方法。
二、常用缓冲液的配制方法
1、磷酸缓冲液的配制
磷酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的磷酸
来配制。
比如，将0.2mol/L的磷酸钠和0.2mol/L的磷酸氢钠混合，可以
得到一种磷酸缓冲液，其碱度为pH7.0。
同样，如果需要制备一种低碱度
的磷酸缓冲液，可以将3mol/L的磷酸钠和3mol/L的磷酸氢钠混合，以得
到其pH值为2.12的缓冲液。
2、碳酸缓冲液配制
碳酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的碳酸
氢钠来配制。
比如，将0.2mol/L碳酸氢钠和0.2mol/L碳酸钠混合，可以
得到一种碳酸缓冲液，其碱度为pH7.0。
同样，如果需要制备一种低碱度
的碳酸缓冲液，可以将3mol/L碳酸氢钠和3mol/L碳酸钠混合，以得到其pH值为2.12的缓冲液。
3、氨水缓冲液配制
氨水缓冲液是常用的碱性缓冲液。
实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。
将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中，调节pH值至7.4，溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。
2、二氧化碳水。
将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液（NaHCO3，0.5mol/L）加入1L水中，经过气泡交换，可制得CO2水。
3、磷酸盐缓冲液。
将200mL磷酸盐溶液（K2HPO4，0.5mol/L）加入800mL水中，调节pH值至7.2，搅拌均匀，即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。
4、EDTA标准溶液。
将25.0g EDTA·4Na（C10H14N2O8Na2）加入
1000mL水中，热溶解，调节pH值至7.0，搅拌均匀，得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。
5、肌酐标准溶液。
将10.0g肌酐（C10H13N3O8)=14.2H2O）加入
1000mL的水中，搅拌，调节pH值至7.4，搅拌均匀，即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。
二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液（Na2HPO4）加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液（Ca(H2PO4)2）中，搅拌均匀，即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。
2、弱碱缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液（NaH2PO4）
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液（Ca(HCO3)2）中，搅拌均匀，即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。
3、弱盐缓冲液。
各种缓冲液的配制方法缓冲液（Buffer）在生物化学和分子生物学实验中起到了至关重要的作用，它可以维持溶液的稳定性，调节pH值，同时还提供所需的离子环境。
这是一个关于不同类型缓冲液的配制方法的综合指南。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一、以下是Tris缓冲液的配制方法：- 配制0.1 M Tris缓冲液（pH 7.4）：a. 在100 mL去离子水中加入12.11 g Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane）粉末。
b.用盖住容器的滤纸纸带覆盖容器，并将其放在磁力搅拌器上。
c.用盖住容器的锡纸覆盖容器，加热至溶解。
搅拌以加速溶解过程。
d.继续搅拌，使其冷却至室温。
e.使用0.1MHCl或0.1MNaOH调节pH值至7.4，直到所需的pH值稳定。
f.用去离子水稀释至总体积100mL。
2.PBS缓冲液PBS缓冲液是生物学实验中常用的缓冲液之一、以下是PBS缓冲液的配制方法：-配制10×PBS缓冲液：a.在1L去离子水中加入80gNaCl，2gKCl，14.4gNa2HPO4，2.4gKH2PO4b.使用10MNaOH或10MHCl调节pH值至7.4c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×PBS缓冲液：a.取10×PBS缓冲液100mL，用去离子水稀释至总体积1L。
3.TAE缓冲液TAE缓冲液常用于琼脂糖凝胶电泳。
以下是TAE缓冲液的配制方法：-配制50×TAE缓冲液：a. 在1 L去离子水中加入242 g Tris base，57.1 mL 0.5 M EDTA，100 mL冰醋酸。
b.用10MNaOH或10MHCl调节pH值至8.3c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×TAE缓冲液：a.取50×TAE缓冲液20mL，用去离子水稀释至总体积1L。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液常用于DNA或RNA的酶切反应。
常见缓冲溶液配制方法1.醋酸钠/醋酸酸性缓冲液醋酸钠/醋酸酸性缓冲液适用于pH范围为4.0-6.0的实验。
配制方法如下：- 准备质量浓度为0.1mol/L的醋酸钠溶液和0.1mol/L的醋酸溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合醋酸钠溶液和醋酸溶液即可。
2.磷酸/盐酸性缓冲液磷酸/盐酸性缓冲液适用于pH范围为1.0-3.0的实验。
配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L和0.1mol/L的磷酸溶液。
-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和磷酸溶液即可。
3.磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液适用于pH范围为2.0-7.0的实验。
配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L、0.1mol/L和0.05mol/L的氢磷酸二盐溶液。
-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和氢磷酸二盐溶液即可。
4.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液适用于pH范围为5.0-8.0的实验。
配制方法如下：- 准备分别为0.2mol/L的梯度磷酸盐溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合相应浓度的磷酸盐溶液即可。
5.三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液适用于pH范围为3.0-4.6的实验。
配制方法如下：- 准备质量浓度为0.2mol/L的三氯乙酸钠溶液和0.2mol/L的三氯乙酸溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合三氯乙酸钠溶液和三氯乙酸溶液即可。
以上是一些常见的缓冲溶液配制方法，具体的配制过程可能会因实验需求和具体试剂而略有不同。
在配制缓冲溶液时，一定要注意使用高纯度的试剂，并按照配制方法进行准确的实验操作。
缓冲溶液及其配制方法
以下是一些常见的缓冲溶液及其配制方法：
1.甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25mL，加酚酞
指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75mL，用水稀释至200mL，调节pH值至
3.25～3.30即可。
2.邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)：取邻苯二甲酸氢钾10g，加
水900mL，搅拌使溶解，用氢氧化钠试液（必要时用稀盐酸）调节pH值至5.6，加水稀释至1000mL，混匀即可。
3.氨-氯化铵缓冲液(pH8.0)：取氯化铵1.07g，加水使溶解成
100mL，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0即可。
4.氨-氯化铵缓冲液(pH10.0)：取氯化铵
5.4g，加水20mL溶
解后，加浓氯溶液35mL，再加水稀释至100mL即可。
5.硼砂-碳酸钠缓冲液(pH10.8～11.2)：取无水碳酸钠5.30g，
加水使溶解成1000mL；另取硼砂 1.91g，加水使溶解成100mL。
各种缓冲液的配制方法_
一、磷酸缓冲液的配制方法
1.准备：蒸馏水或纯净水、磷酸二铵，滴定级别不低于AR级；
2.计算配制用量：根据实验要求，计算出所需磷酸二铵的总量，用m1表示（单位：克）；
3.将磷酸二铵加入蒸馏水或纯净水中，用称取出适量的磷酸二铵，用m2表示（单位：克），加入搅拌槽中，充分搅拌均匀，然后加入剩余的磷酸二铵（m3=m1-m2，单位：克），继续搅拌；
4.检查温度：温度应大于室温；
5.检查pH值：用pH计测量溶液的pH值，调整到与实验要求相符的值；
6.搅拌均匀，过滤，储存，可使用或直接投放使用；
二、碳酸缓冲液的配制方法
1.准备：蒸馏水或纯净水、碳酸氢钠，滴定级别不低于AR级；
2.计算配制用量：根据实验要求，计算出所需碳酸氢钠的总量，用m1表示（单位：克）；
3.将碳酸氢钠加入蒸馏水或纯净水中，用称取出适量的碳酸氢钠，用m2表示（单位：克），加入搅拌槽中，充分搅拌均匀，然后加入剩余的碳酸氢钠（m3=m1-m2，单位：克），继续搅拌；
4.检查温度：温度应大于室温；
5.检查pH值：用pH计测量溶液的pH值。
各种缓冲液的配制方法缓冲液是一种用于调节溶液酸碱度（pH值）的溶液，它可以稳定溶液的pH值，满足实验的需要。
不同实验需要使用不同pH值的缓冲液，因此配制方法也会有所不同。
下面将介绍常见的几种缓冲液的配制方法。
1.磷酸盐缓冲液：磷酸盐缓冲液是最常用的一种缓冲液，在生物化学和分子生物学实验中广泛应用。
配制方法：-0.2M磷酸盐酸（pH2.5）：用稀磷酸（H3PO4）溶液调节酸度至所需pH值。
-0.2M磷酸盐盐（pH2.5）：用0.2M磷酸钠（Na2HPO4）溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的磷酸盐缓冲液。
2.乙酸缓冲液：乙酸缓冲液常用于酶催化反应的研究和生物制剂的稳定。
配制方法：-0.1M乙酸酸（pH3.6）：用浓烧碱（CH3COOH）溶液调节酸度至所需pH值。
-0.1M乙酸盐（pH3.6）：用0.1M乙酸钠（CH3COONa）溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的乙酸缓冲液。
3.碳酸氢盐缓冲液：碳酸氢盐缓冲液常用于生命科学实验中。
配制方法：-0.1M碳酸酸（pH6.0）：用稀碳酸（H2CO3）溶液调节酸度至所需pH 值。
-0.1M碳酸盐（pH6.0）：用0.1M碳酸氢钠（NaHCO3）溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的碳酸氢盐缓冲液。
4. Tris缓冲液：Tris缓冲液是一种多用途的缓冲液，在生物化学和分子生物学研究中广泛应用。
配制方法：- 0.1 M Tris酸（pH 8.0）：用三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液调节酸度至所需pH值。
- 0.1 M Tris盐（pH 8.0）：用0.1 M Tris盐溶液调节碱度至所需pH值。
- 混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的Tris缓冲液。
配制缓冲液时需要准备所需浓度的酸液和盐液，然后根据所需pH值逐渐调整酸度和碱度至目标值。
各种缓冲液配制方法不同缓冲液的缓冲范围pH缓冲液是化学实验室中常用的一种试剂，可以帮助维持溶液的酸碱度。
下面介绍三种常用缓冲液的配制方法和缓冲范围。
一、甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L甘氨酸和Y毫升0.2 mol/L 盐酸，加入适量的水稀释至200毫升。
缓冲范围：pH值在2.2至3.6之间，X和Y的取值见上表。
二、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾和Y毫升0.2 mol/L盐酸，加入适量的水稀释至20毫升。
缓冲范围：pH值在2.2至3.8之间，X和Y的取值见上表。
三、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制方法：根据上表中的数据，取相应的0.2 mol/L和0.1 mol/L的Na2HPO4和柠檬酸，加入适量的水稀释至20毫升。
缓冲范围：pH值在2.2至8.0之间，具体取值见上表。
以上缓冲液的配制方法和缓冲范围可根据实验需要进行调整和改变。
在实验过程中，正确选择缓冲液可以提高实验的成功率和准确性。
以下是已经修改好的文章：柠檬酸的浓度可以用毫升表示，其浓度数据如下：9.28 mL8.85 mL8.40 mL7.91 mL7.37 mL6.78 mL6.15 mL5.45 mL4.55 mL3.53 mL2.61 mL1.83 mL1.27 mL0.85 mL0.55 mL对于Na2HPO4，其分子量为141.98，0.2 mol/L的溶液需要28.40 g/L。
而Na2HPO4·2H2O的分子量为178.05，0.2 mol/L的溶液需要35.61 g/L。
最后，Na2HPO4·12H2O的分子量为358.22，0.2 mol/L的溶液需要71.64 g/L。
对于C6H8O7·H2O，其分子量为210.14，0.1 mol/L的溶液需要21.01 g/L。
以下是柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液的相关数据：pH: 2.2.3.1.3.3.4.3.5.3.5.8.6.5钠离子浓度(mol/L): 0.20.0.20.0.20.0.20.0.35.0.45.0.38柠檬酸(g) 氢氧化钠(g) 盐酸(mL)C6H8O7·H2O NaOH 97% HCl (浓)210 210 210210 245 285266 84 8383 144 186156 160 116106 45 68105 126最终体积(L)：10使用时可以每升中加入1克酚。
几种溶液的配制方法1、PBS:取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸馏水中，混匀，测pH 值应在7.2~7.4之间，若偏离此范围，请用0.1N的HCL 或NaOH调整。
2、TBS：2.1 Tris缓冲液配方：（0.5 M pH7.6）Tris（三羟甲基氨基甲烷）60.57g1N HCL 约420ml双蒸水加至1000mlTris缓冲液配制方法：先以少量双蒸水（300~500ml）溶解Tris，加入HCl后，用HCl（1N）或NaOH（1N）将pH调至7.6，最后双蒸水加至1000ml。
此液为储备液，4℃冰箱中保存。
2.2 TBS配方：Tris-HCI缓冲液（0.5M pH7.6）100mlNaCI 8.5~9g (0.15mol/L)双蒸水加至1000mlTBS配制方法：先以少量双蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl 缓冲液，最后加双蒸水至1000ml，充分摇匀。
3、枸橼酸盐缓冲液（Citrat e buffer）：3.1 储存液：A. 0.1M枸橼酸溶液：称取21.01g枸橼酸（C6H8O7·H20）溶于1000ml蒸馏水中。
B. 0.1M枸橼酸钠溶液：称取29.41g枸橼酸钠（C6H5Na3O7·2H20）溶于1000ml蒸馏水中。
3.2 工作液：取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸馏水中，溶液pH值应为6.0±0.14、胰酶（Trypsin）：4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液：常用浓度为0.125%，即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合（1:3稀释），则可直接滴加使用。
胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整，浓度范围可以从0.05%（1:10稀释）至0.25%（1:1稀释）。
4.2 ZLI-9010胰蛋白酶：取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml 0.05%或0.1% pH7.8的无水氯化钙水溶液中，溶解即可。
核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加入57.1 ml的乙酸，充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度 890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度 200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称41.8 g MOPS，置于1 L烧杯中。
2.加约700 ml DEPC处理水，搅拌溶解。
3.使用2 N NaOH调节pH值至7.0。
6.用0.45 m滤膜过滤除去杂质。
7.室温避光保存。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用，但变黑时不要使用。
溴乙锭 (10 mg/ml)组份浓度 10 mg/ml溴乙锭配制量 100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭，加入到100 ml容器中。
2.加入去离子水100 ml，充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。
3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。
4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml。
注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。
Agarose凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是0.5×TBE或1×TAE)。
2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。
3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。
注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。
4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。
加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套。
小心摇动锥形瓶。
使琼脂糖充分均匀熔化。
此操作重复数次，直至琼脂糖完全熔化。
必须注意，在微波炉中加热时间不宜过长，每次当溶液起泡沸腾时停止加热，否则会引起溶液过热暴沸，造成琼脂糖凝胶浓度不准，也会损坏微波炉。
熔化琼脂糖时，必须保证琼脂糖充分完全熔化，否则，会造成电泳图像模糊不清。
5.使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时加入溴乙锭溶液(终浓度0.5 µg/ml)。
并充分混匀。
注：溴乙锭是一种致癌物质。
使用含有溴乙锭的溶液时，请戴好手套。
6.将琼脂糖溶液倒入制胶模中，然后在适当位置处插上梳子。
凝胶厚度一般在3~5 min之间。
7.在室温下使胶凝固(大约30 min~1 h)，然后放置于电泳槽中进行电泳。
注：凝胶不立即使用时，请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存，一般可保存2~5天。
琼脂糖凝胶浓度与线形DNA的最佳分辨范围6× Loading Buffer(DNA电泳用)组份浓度配制量 500 ml配制方法3.加入180 ml的甘油(Glycerol)后，使用2 N NaOH调节pH值至7.0。
4.用去离子水定容至500 ml后，室温保存。
10 × Loadlng Buffer(RNA电泳用)组份浓度配制置配制方法3.加入5 ml的甘油(Glycerol)后，充分混匀。
4.用DEPC处理水定容至10 ml后，室温保存。
四、核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法20×SSC组份浓度 3.0 M NaCl，0.3 M Na3citrate·2H2O(柠檬酸钠)配制量 1 L配制方法 1.3滴加14 N HCl，调节pH值至7.0后，加去离子水将溶液定容至1 L。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
20×SSPE Buffer组份浓度 3.0 M NaCl，0.2 M NaH2PO4，0.02 M EDTA配制量 1.L配制方法3.加NaOH 调节pH 值至7.4(约6.5 ml 的10 N NaOH)。
4.加去离子水将溶液定容至l L 。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
50 X Denhardt’S 溶液组份浓度 配制量500 ml 配制方法 1.称量下列试剂，置于500 ml 烧杯中。
2.加去离子水约400 ml ，充分搅拌溶解3.加去离子水将溶液定容至500 ml 。
4.用0.45µm 滤膜过滤后，分装成每份25 ml 。
5.-20℃保存。
0.5 M 磷酸盐Buffer组份浓度 0.5 M Na2HPO 4。
配制量 l L配制方法 1.称量134 g Na 2HPO 4·7H 2O 置于l L 烧杯中。
2.加入约800 ml 的去离子水充分搅拌溶解。
3.加入85%的H 3PO 4(浓磷酸)调节溶液pH 值至7.2。
4.加去离子水定容至1 L 。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
Salmon DNA (鲑鱼精DNA)组份浓度 10 mg/ml Salmon DNA配制量 约100 ml配制方法 1.称取鲑鱼精DNA 2 g 置于500 ml 烧杯中，加入约200 ml 的TE Buffer 。
2用磁力搅拌器室温搅拌2~4 h ，溶解后加入4 ml 的5 M NaCl ，使其终浓度为0.1 M 。
3.用苯酚和苯酚/氯仿各抽提1次。
4.回收水相溶液后，使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20次，以 切断DNA 。
5.加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀。
6.离心回收DNA 后，溶解于100 ml 的去离子水中。
测定溶液的OD 260值。
7.计算溶液的DNA 浓度后，稀释DNA 溶液至10 mg/ml 。
8.煮沸10min 后，分装成小份(1 ml/份)。
-20℃保存。
9.使用前在沸水浴中加热5min 后，迅速冰浴冷却。
DNA 变性缓冲液组份浓度 1.5 M NaCl ，0.5 M NaOH配制量 1 L配制方法3.加去离子水将溶液定容至l L 后，室温保存。
预杂交液/杂交液 (DNA 杂交用)组份浓度配制置 100 ml配制方法 1.称量下列试剂，置于200 ml 烧杯中。
2.充分混匀后，使用0.45 µm 滤膜滤去杂质后使用。
预杂交液/杂交液(RNA 杂交用)组份浓度配制量 100 mL配制方法 1.称量下列试剂，置于200 ml 烧杯中。
2.充分混匀后，使用0.45µm 滤膜滤去杂质后使用。
膜转移缓冲液(Western 杂交用)组份浓度 39 mM Glycine ，48 mM Tris ，0.037%(W/V)SDS ，20%(V/V)甲醇 配制量 1 L配制方法3.加去离子水将溶液定溶至800 ml 后，加入200 ml 的甲醇。
4.室温保存。
TBST Buffer(Western 杂交膜清洗液)组份浓度 20 mM Tris-HCl ，150 mM NaCl ，0.05%(V/V)Tween 20配制量 1 L配制方法3.加入0.5 ml Tween 20后充分混匀。
4.加去离子水将溶液定容至l L 后，4℃保存。
封闭缓冲液(Western 杂交用)组份浓度 5%(W/V)脱脂奶粉/TBST Buffer配制量 100 ml配制方法 1.称5 g 脱脂奶粉加入到100 ml TBST Buffer 中，充分搅拌溶解。
2.4℃保存待用(本封闭液应该现配现用)。
五、实验室常用培养基的配制方法Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml)组份浓度 100 mg/ml Ampicillin配制量 50 ml配制方法 1.称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中。
2.加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。
3.用0.22 µm过滤膜过滤除菌。
4.小份分装(1 ml/份)后，-20℃保存。
IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml)组份浓度 24 mg/mL IPTG配制量 50 mL配制方法 1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中。
2.加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。
3.用0 22 µm过滤膜过滤除菌。
4小份分装(1 ml，份)后，-20℃保存。
X-Gal (20 mg/ml)组份浓度 20 mg/ml X-Gal配制量 50 ml配制方法 1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中。
2.加入40 ml DMF(二甲基甲酰胺)，充分混合溶解后，定容至50 ml。
3.小份分装(1 ml/份)后，-20℃避光保存。
LB培养基组份浓度 1%(W/V)Tryptone(胰蛋白胨)，0.5%(W/V)Yeast Extract(酵母提取物)，1%(W/V)NaCl配制量 1 L配制方法3.滴加5 N NaOH(约0.2 m1)，调节pH值至7.0。
4.加去离子水将培养基定容至1 L。
5高温高压灭菌后，4。
C保存。
LB/Amp培养基组份浓度配制量配制方法3.滴加5 N NaOH(约0.2 mL)。
调节pH 值至7.0。
4.加去离子水将培养基定容至1 L 。
5.高温高压灭菌后，冷却至室温。
6.加入1 ml Ampicillin(100 mg/ml)后均匀混合。
7.4℃保存。
TB 培养基组份浓度配制量 1.L配制方法 1.配制磷酸盐缓；中液(0.17 M KH 2PO4，0.72 M K 2HPO 4)100 ml 。
溶解2.31 g KH 2PO 4和l2.54 g K 2HPO 4于90 ml 的去离子水中，搅拌溶解 后，加去离子水定容至100 ml ，高温高压灭菌。
4.加去离子水将培养基定容至1 L 后，高温高压灭菌。
5.待溶液冷却至60℃以下时，；加入100 ml 的上述灭菌磷酸盐缓冲液。
6.4℃保存。
TB/Amp培养基组份浓度配制量配制方法 1.配制磷酸盐缓冲液(0.17 M KH2PO4，0.72 M K2HPO4)100 ml。
溶解2.31 g KH2PO4,和12.54g K2HPO4于90 ml的去离子水中，搅拌溶解后，加去离子水定容至100 ml，高温高压灭菌。
4.加去离子水将培养基定容至l L后，高温高压灭菌。
5.待溶液冷却至60℃以下时，加入100 ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液。
6.均匀混合后4℃保存。
SOB培养基组份浓度配制量配制方法 1.配制250 mM KCl溶液。
在90 ml的去离子水中溶解l.86 g KCl后，定容至100 ml。
2.配制2 M MgCl2溶液。
在90 ml去离子水中溶解19 g MgCl2后，定容至100 ml，高温高压灭菌。
5.量取10 m1 250 mM KCl溶液，加入到烧杯中。
6.滴加5 N NaOH溶液(约0.2 m1)，调节pH值至7.0。
7.加入去离子水将培养基定容至l L。
