各种缓冲液的配制方法-

常见缓冲液配制方法
一、介绍
缓冲液是常见的生物或化学反应的催化剂，主要用于维持反应物的酸
碱度在一定的范围内，有利于提高反应效率。

缓冲液有许多种，其配制方
法也多种多样。

下面将介绍常见缓冲液的配制方法，包括常用缓冲液的配
制方法，复合缓冲液的配制方法，以及常见的国际标准缓冲液的配制方法。

二、常用缓冲液的配制方法
1、磷酸缓冲液的配制
磷酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的磷酸
来配制。

比如，将0.2mol/L的磷酸钠和0.2mol/L的磷酸氢钠混合，可以
得到一种磷酸缓冲液，其碱度为pH7.0。

同样，如果需要制备一种低碱度
的磷酸缓冲液，可以将3mol/L的磷酸钠和3mol/L的磷酸氢钠混合，以得
到其pH值为2.12的缓冲液。

2、碳酸缓冲液配制
碳酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的碳酸
氢钠来配制。

比如，将0.2mol/L碳酸氢钠和0.2mol/L碳酸钠混合，可以
得到一种碳酸缓冲液，其碱度为pH7.0。

同样，如果需要制备一种低碱度
的碳酸缓冲液，可以将3mol/L碳酸氢钠和3mol/L碳酸钠混合，以得到其pH值为2.12的缓冲液。

3、氨水缓冲液配制
氨水缓冲液是常用的碱性缓冲液。

各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。

2柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/LNaAC.3 H2O,分子量=136.09 0.2mol/L溶液含27.22g/L（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。

用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。

若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。

常见缓冲溶液配制方法乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L 氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)：?取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)：?取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。

乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。

巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过。

巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。

巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。

然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。

甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)：?取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。

枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。

1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。

Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液① 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH 值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

②5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L ）柠檬酸C 6H 8O 7·H 2O ：分子量210.14，0.1 mol/L 溶液为21.01克/升。

柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。

6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L ） Na 2Ac·3H 2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。

7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液为85.61克/升。

Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 358.22，0.2 mol/L 溶液为71.64克/升。

Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。

各种缓冲液的配制方法缓冲液（Buffer）在生物化学和分子生物学实验中起到了至关重要的作用，它可以维持溶液的稳定性，调节pH值，同时还提供所需的离子环境。

这是一个关于不同类型缓冲液的配制方法的综合指南。

1. Tris缓冲液Tris缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一、以下是Tris缓冲液的配制方法：- 配制0.1 M Tris缓冲液（pH 7.4）：a. 在100 mL去离子水中加入12.11 g Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane）粉末。

b.用盖住容器的滤纸纸带覆盖容器，并将其放在磁力搅拌器上。

c.用盖住容器的锡纸覆盖容器，加热至溶解。

搅拌以加速溶解过程。

d.继续搅拌，使其冷却至室温。

e.使用0.1MHCl或0.1MNaOH调节pH值至7.4，直到所需的pH值稳定。

f.用去离子水稀释至总体积100mL。

2.PBS缓冲液PBS缓冲液是生物学实验中常用的缓冲液之一、以下是PBS缓冲液的配制方法：-配制10×PBS缓冲液：a.在1L去离子水中加入80gNaCl，2gKCl，14.4gNa2HPO4，2.4gKH2PO4b.使用10MNaOH或10MHCl调节pH值至7.4c.用去离子水稀释至总体积1L。

-配制1×PBS缓冲液：a.取10×PBS缓冲液100mL，用去离子水稀释至总体积1L。

3.TAE缓冲液TAE缓冲液常用于琼脂糖凝胶电泳。

以下是TAE缓冲液的配制方法：-配制50×TAE缓冲液：a. 在1 L去离子水中加入242 g Tris base，57.1 mL 0.5 M EDTA，100 mL冰醋酸。

b.用10MNaOH或10MHCl调节pH值至8.3c.用去离子水稀释至总体积1L。

-配制1×TAE缓冲液：a.取50×TAE缓冲液20mL，用去离子水稀释至总体积1L。

4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液常用于DNA或RNA的酶切反应。

常见缓冲溶液配制方法1.醋酸钠/醋酸酸性缓冲液醋酸钠/醋酸酸性缓冲液适用于pH范围为4.0-6.0的实验。

配制方法如下：- 准备质量浓度为0.1mol/L的醋酸钠溶液和0.1mol/L的醋酸溶液。

-根据所需pH值，按照相应的比例混合醋酸钠溶液和醋酸溶液即可。

2.磷酸/盐酸性缓冲液磷酸/盐酸性缓冲液适用于pH范围为1.0-3.0的实验。

配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。

- 准备分别为0.2mol/L和0.1mol/L的磷酸溶液。

-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和磷酸溶液即可。

3.磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液适用于pH范围为2.0-7.0的实验。

配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。

- 准备分别为0.2mol/L、0.1mol/L和0.05mol/L的氢磷酸二盐溶液。

-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和氢磷酸二盐溶液即可。

4.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液适用于pH范围为5.0-8.0的实验。

配制方法如下：- 准备分别为0.2mol/L的梯度磷酸盐溶液。

-根据所需pH值，按照相应的比例混合相应浓度的磷酸盐溶液即可。

5.三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液适用于pH范围为3.0-4.6的实验。

配制方法如下：- 准备质量浓度为0.2mol/L的三氯乙酸钠溶液和0.2mol/L的三氯乙酸溶液。

-根据所需pH值，按照相应的比例混合三氯乙酸钠溶液和三氯乙酸溶液即可。

以上是一些常见的缓冲溶液配制方法，具体的配制过程可能会因实验需求和具体试剂而略有不同。

在配制缓冲溶液时，一定要注意使用高纯度的试剂，并按照配制方法进行准确的实验操作。

各种缓冲液的配制方法_
一、磷酸缓冲液的配制方法
1.准备：蒸馏水或纯净水、磷酸二铵，滴定级别不低于AR级；
2.计算配制用量：根据实验要求，计算出所需磷酸二铵的总量，用m1表示（单位：克）；
3.将磷酸二铵加入蒸馏水或纯净水中，用称取出适量的磷酸二铵，用m2表示（单位：克），加入搅拌槽中，充分搅拌均匀，然后加入剩余的磷酸二铵（m3=m1-m2，单位：克），继续搅拌；
4.检查温度：温度应大于室温；
5.检查pH值：用pH计测量溶液的pH值，调整到与实验要求相符的值；
6.搅拌均匀，过滤，储存，可使用或直接投放使用；
二、碳酸缓冲液的配制方法
1.准备：蒸馏水或纯净水、碳酸氢钠，滴定级别不低于AR级；
2.计算配制用量：根据实验要求，计算出所需碳酸氢钠的总量，用m1表示（单位：克）；
3.将碳酸氢钠加入蒸馏水或纯净水中，用称取出适量的碳酸氢钠，用m2表示（单位：克），加入搅拌槽中，充分搅拌均匀，然后加入剩余的碳酸氢钠（m3=m1-m2，单位：克），继续搅拌；
4.检查温度：温度应大于室温；
5.检查pH值：用pH计测量溶液的pH值。

各种缓冲液的配制方法缓冲液是一种用于调节溶液酸碱度（pH值）的溶液，它可以稳定溶液的pH值，满足实验的需要。

不同实验需要使用不同pH值的缓冲液，因此配制方法也会有所不同。

下面将介绍常见的几种缓冲液的配制方法。

1.磷酸盐缓冲液：磷酸盐缓冲液是最常用的一种缓冲液，在生物化学和分子生物学实验中广泛应用。

配制方法：-0.2M磷酸盐酸（pH2.5）：用稀磷酸（H3PO4）溶液调节酸度至所需pH值。

-0.2M磷酸盐盐（pH2.5）：用0.2M磷酸钠（Na2HPO4）溶液调节碱度至所需pH值。

-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的磷酸盐缓冲液。

2.乙酸缓冲液：乙酸缓冲液常用于酶催化反应的研究和生物制剂的稳定。

配制方法：-0.1M乙酸酸（pH3.6）：用浓烧碱（CH3COOH）溶液调节酸度至所需pH值。

-0.1M乙酸盐（pH3.6）：用0.1M乙酸钠（CH3COONa）溶液调节碱度至所需pH值。

-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的乙酸缓冲液。

3.碳酸氢盐缓冲液：碳酸氢盐缓冲液常用于生命科学实验中。

配制方法：-0.1M碳酸酸（pH6.0）：用稀碳酸（H2CO3）溶液调节酸度至所需pH 值。

-0.1M碳酸盐（pH6.0）：用0.1M碳酸氢钠（NaHCO3）溶液调节碱度至所需pH值。

-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的碳酸氢盐缓冲液。

4. Tris缓冲液：Tris缓冲液是一种多用途的缓冲液，在生物化学和分子生物学研究中广泛应用。

配制方法：- 0.1 M Tris酸（pH 8.0）：用三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液调节酸度至所需pH值。

- 0.1 M Tris盐（pH 8.0）：用0.1 M Tris盐溶液调节碱度至所需pH值。

- 混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的Tris缓冲液。

配制缓冲液时需要准备所需浓度的酸液和盐液，然后根据所需pH值逐渐调整酸度和碱度至目标值。

各种缓冲液配制方法不同缓冲液的缓冲范围pH缓冲液是化学实验室中常用的一种试剂，可以帮助维持溶液的酸碱度。

下面介绍三种常用缓冲液的配制方法和缓冲范围。

一、甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L甘氨酸和Y毫升0.2 mol/L 盐酸，加入适量的水稀释至200毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至3.6之间，X和Y的取值见上表。

二、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾和Y毫升0.2 mol/L盐酸，加入适量的水稀释至20毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至3.8之间，X和Y的取值见上表。

三、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制方法：根据上表中的数据，取相应的0.2 mol/L和0.1 mol/L的Na2HPO4和柠檬酸，加入适量的水稀释至20毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至8.0之间，具体取值见上表。

以上缓冲液的配制方法和缓冲范围可根据实验需要进行调整和改变。

在实验过程中，正确选择缓冲液可以提高实验的成功率和准确性。

以下是已经修改好的文章：柠檬酸的浓度可以用毫升表示，其浓度数据如下：9.28 mL8.85 mL8.40 mL7.91 mL7.37 mL6.78 mL6.15 mL5.45 mL4.55 mL3.53 mL2.61 mL1.83 mL1.27 mL0.85 mL0.55 mL对于Na2HPO4，其分子量为141.98，0.2 mol/L的溶液需要28.40 g/L。

而Na2HPO4·2H2O的分子量为178.05，0.2 mol/L的溶液需要35.61 g/L。

最后，Na2HPO4·12H2O的分子量为358.22，0.2 mol/L的溶液需要71.64 g/L。

对于C6H8O7·H2O，其分子量为210.14，0.1 mol/L的溶液需要21.01 g/L。

以下是柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液的相关数据：pH: 2.2.3.1.3.3.4.3.5.3.5.8.6.5钠离子浓度(mol/L): 0.20.0.20.0.20.0.20.0.35.0.45.0.38柠檬酸(g) 氢氧化钠(g) 盐酸(mL)C6H8O7·H2O NaOH 97% HCl (浓)210 210 210210 245 285266 84 8383 144 186156 160 116106 45 68105 126最终体积(L)：10使用时可以每升中加入1克酚。

常见缓冲溶液配制方法乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)：取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)：取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。

乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。

巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH 值至7.4，滤过。

巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。

巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g 加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。

然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。

甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)：取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。

枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。

几种溶液的配制方法1、PBS:取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸馏水中，混匀，测pH 值应在7.2~7.4之间，若偏离此范围，请用0.1N的HCL 或NaOH调整。

2、TBS：2.1 Tris缓冲液配方：（0.5 M pH7.6）Tris（三羟甲基氨基甲烷）60.57g1N HCL 约420ml双蒸水加至1000mlTris缓冲液配制方法：先以少量双蒸水（300~500ml）溶解Tris，加入HCl后，用HCl（1N）或NaOH（1N）将pH调至7.6，最后双蒸水加至1000ml。

此液为储备液，4℃冰箱中保存。

2.2 TBS配方：Tris-HCI缓冲液（0.5M pH7.6）100mlNaCI 8.5~9g (0.15mol/L)双蒸水加至1000mlTBS配制方法：先以少量双蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl 缓冲液，最后加双蒸水至1000ml，充分摇匀。

3、枸橼酸盐缓冲液（Citrat e buffer）：3.1 储存液：A. 0.1M枸橼酸溶液：称取21.01g枸橼酸（C6H8O7·H20）溶于1000ml蒸馏水中。

B. 0.1M枸橼酸钠溶液：称取29.41g枸橼酸钠（C6H5Na3O7·2H20）溶于1000ml蒸馏水中。

3.2 工作液：取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸馏水中，溶液pH值应为6.0±0.14、胰酶（Trypsin）：4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液：常用浓度为0.125%，即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合（1:3稀释），则可直接滴加使用。

胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整，浓度范围可以从0.05%（1:10稀释）至0.25%（1:1稀释）。

4.2 ZLI-9010胰蛋白酶：取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml 0.05%或0.1% pH7.8的无水氯化钙水溶液中，溶解即可。

实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液，以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。

1.NaCl溶液配制：NaCl作为实验室常用的盐类试剂，可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。

常用浓度为0.9%（w/v）的生理盐水。

配制方法如下：称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中，搅拌溶解，用蒸馏水调整至最终体积。

2.血红蛋白溶液配制：血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。

常用方法如下：从新鲜血液中分离出血红蛋白，加入适量的生理盐水或缓冲液，控制pH值为7.4-7.6，并用密闭容器保存。

3. Tris-HCl缓冲液配制：Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。

常用方法如下：按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中，搅拌溶解，用强碱（比如氢氧化钠）或强酸（比如盐酸）调整pH值至所需范围。

1. Tris缓冲液配制：Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，并用去离子水稀释至最终体积。

2.PBS缓冲液配制：PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。

配制方法如下：称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积，调整pH值至所需范围。

3. Tris-Borate-EDTA（TBE）缓冲液配制：TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，然后加入Boric acid和EDTA固体，继续搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积。

以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法，实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。

在配制试剂和缓冲液时，需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台，并遵循相应的实验操作规范和安全要求。

各种缓冲液的配制方法
缓冲液是指在化学实验或生物学实验中，为了稳定反应介质，保持反应环境不变，在
浓度比较小的溶液中加入一定量的弱酸、弱碱、盐类或其他缓冲剂来维持溶液的酸碱度，
以达到保持反应的稳定性和准确性的目的。

因此，缓冲液在各类实验技术中都发挥着非常
重要的作用。

以下是各种缓冲液的配制方法。

一、PBS缓冲液（磷酸盐缓冲盐水）
1、配制PBS缓冲液，准备好以下试剂：
10×PBS缓冲液：NaCl 80 g，KCl 2 g，Na2HPO4 14.4 g，KH2PO4 2.4 g。

用蒸馏水调节至1 L。

2、按照以下比例制备：
0.5×PBS缓冲液：10×PBS 50 mL，蒸馏水450 mL，混合搅拌均匀即可。

二、TE缓冲液
Tris-HCl pH8.0 10 mM，EDTA pH8.0 1 mM。

Tris-HCl pH7.4，Tris-HCl pH8.0，Tris-Cl pH8.0，Tris-HCl pH8.3，Tris-HCl pH8.5，Tris-HCl pH8.8，Tris-HCl pH9.5
Tris-HCl pH8.5：Tris 7.4 g，NaCl 8.8 g，HCl 2 mL，蒸馏水至1 L。

MES 20 mM，NaOH 0.5 M，NaCl 100 mM。

七、HEPES缓冲液
HEPES 1 M，NaOH。

HEPES缓冲液：HEPES 1 M约5 mL，NaOH 2 M溶液若干，蒸馏水至100 mL。

53种常见缓冲液配制方法
一、磷酸缓冲液
1.0M磷酸缓冲液的配制方法
（1）将0.883克无水磷酸二铵（Na2H2PO4·2H2O）加入5升水中，
然后煮沸，以消除少量的氧气和杂质，然后用烧杯内的冻干机进行冻干；
（2）将上述冻干的水溶液加入到10升容量的烧瓶中，加热至90℃，按1.0M标准比重进行称重，比重合适时停止加热；
（3）将上述溶液加入15升的容量瓶中，加入足够的水，使它达到正
确的pH值（也就是7.00），用它精确测量pH值；
（4）最后，用0.1N硫酸钠溶液精确测量缓冲液的比重，最终得到
1.0M磷酸缓冲液。

二、氯化缓冲液
1.0M氯化缓冲液的配制方法
（1）将0.314克氯化钠加入到5升水中，然后煮沸，以消除少量的
氧气和杂质，然后用烧杯内的冻干机进行冻干；
（2）将上述冻干的水溶液加入到10升容量的烧瓶中，加热至90℃，按1.0M标准比重进行称重，比重合适时停止加热；
（3）将上述溶液加入15升的容量瓶中，加入足够的水，使它达到正
确的pH值（也就是7.00），用它精确测量pH值；
（4）最后，用0.1N硫酸钠溶液精确测量缓冲液的比重，最终得到
1.0M氯化缓冲液。

三、氨基乙酸缓冲液
1.0M氨基乙酸缓冲液的配制方法。

常用缓冲液的配制方法1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M）X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200mlpH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml2.2 50 44.03.0 50 11.42.4 50 32.43.2 50 8.22.6 50 24.23.4 50 6.42.8 50 16.83.6 50 5.0 甘氨酸分子量＝75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05M）X ml 0.2M邻苯二甲酸氢钾 +Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200mlpH X Y pH X Y2.2 5 4.6703.2 5 1.4702.4 53.960 3.4 5 0.9902.6 53.295 3.6 5 0.5972.8 5 2.6423.8 5 0.2633.0 5 2.032邻苯二甲酸氢钾分子量＝2.4.23 0.2M邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH0.2MNa2HPO4/ml0.1M柠檬酸/mlpH0.2MNa2HPO4/ml0.1M柠檬酸/ml2.2 0.40 19.6 5.2 10.72 9.282.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.852.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.402.83.17 16.83 5.8 12.09 7.913.04.11 15.896.0 12.637.373.24.94 15.066.2 13.22 6.783.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.153.6 6.44 13.56 6.6 14.555.453.8 7.10 12.90 6.8 15.454.554.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.534.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.614.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.834.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.274.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.855.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55 Na2HPO4分子量＝141.98 0.2M溶液含28.40g/LNa2HPO4·2H2O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/LC6H8O7·H2O分子量＝210.14 0.1M溶液含21.01g/L4.柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液pH 钠离子浓度/M柠檬酸C6H8O7·H2O/g氢氧化钠NaOH/g浓盐酸HCl/ml终体积/L2.2 0.20 210 84 160 103.1 0.20 210 83 116 103.3 0.20 210 83 106 104.3 0.20 210 83 45 105.3 0.35 245 144 68 105.8 0.45 285 186 105 106.5 0.38 266 156 126 10 使用时可以每升中加入1g酚，若最后pH有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

常用缓冲溶液的配制方法缓冲溶液是在化学实验和生物实验中常用的一种溶液，用于调节溶液的pH值，使其保持在特定的pH范围内。

常用缓冲溶液的配制方法有许多种，下面将介绍几种常见的缓冲溶液的配制方法。

一、Tris缓冲液配制方法：Tris缓冲液是一种常用的生物学缓冲液，常用于蛋白质电泳、酶反应等实验中，其配制方法如下：1. 准备所需的试剂：Tris碱（Tris base，化学名三羟基甲基氨基甲烷）。

2. 在计量瓶中称取适量的Tris碱，并将其溶解于蒸馏水中，得到所需浓度的Tris碱溶液。

3. 调节溶液pH值：使用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）调节Tris溶液的pH值。

通常，Tris缓冲液的pH范围为7-9，具体的pH值取决于实验的要求。

4.定容：将溶液调节至最终所需体积，通过加入蒸馏水来调节。

二、Phosphate缓冲液配制方法：Phosphate缓冲液是生化实验中常用的一种缓冲液，其配制方法如下：1.准备所需的试剂：磷酸二氢钠（NaH2PO4）和磷酸氢二钠（Na2HPO4）。

2.在计量瓶中称取适量的NaH2PO4和Na2HPO4，分别溶解于蒸馏水中，得到所需浓度的NaH2PO4和Na2HPO4溶液。

3.调节溶液pH值：根据所需pH范围选择NaH2PO4和Na2HPO4的比例，同时用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）调节pH值。

4.定容：将溶液调节至最终所需体积。

三、Acetate缓冲液配制方法：Acetate缓冲液是一种常用的酸性缓冲液，在酶反应、DNA电泳等实验中常用，其配制方法如下：1. 准备所需的试剂：乙酸（Acetic acid）和醋酸钠（Sodium acetate）。

2.在计量瓶中称取适量的乙酸和醋酸钠，分别溶解于蒸馏水中，得到所需浓度的乙酸和醋酸钠溶液。

3.调节溶液pH值：根据所需pH范围选择乙酸和醋酸钠的比例，同时用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）调节pH值。

4.定容：将溶液调节至最终所需体积。

常见缓冲溶液配制方法乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)：取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)：取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。

乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。

巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH 值至7.4，滤过。

巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。

巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g 加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。

然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。

甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)：取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。

枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。

实验室常用缓冲液配置方案实验室里，各种缓冲液就像是实验操作的基石，有了它们，实验才能顺利进行。

今天，我就来和大家分享一下，我积累十年的实验室常用缓冲液配置经验，保证你一看就懂，一学就会！一、磷酸盐缓冲液（PBS）PBS，这可是实验室的“老熟人”了。

配置方法如下：1.称取8克NaCl，0.2克KCl，1.44克Na2HPO4，0.24克KH2PO4，放入烧杯中。

2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。

3.用pH计调整溶液至7.4。

4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。

二、Tris缓冲液Tris缓冲液，用途广泛，特别是在蛋白质实验中，是不可或缺的。

1.称取121.1克Trisbase，放入烧杯中。

2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。

3.用浓HCl调整溶液至所需pH值。

4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。

三、醋酸缓冲液醋酸缓冲液，主要用于微生物实验和细胞培养。

1.称取5.7克NaAc·3H2O，放入烧杯中。

2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。

3.用冰醋酸调整溶液至所需pH值。

4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。

四、甘氨酸缓冲液甘氨酸缓冲液，适用于蛋白质电泳等实验。

1.称取15.1克甘氨酸，放入烧杯中。

2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。

3.用NaOH调整溶液至所需pH值。

4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。

五、氨水缓冲液氨水缓冲液，主要用于微生物实验。

1.量取100毫升浓氨水，放入烧杯中。

2.加入800毫升去离子水，搅拌均匀。

3.用浓HCl调整溶液至所需pH值。

4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。

六、硼酸缓冲液硼酸缓冲液，适用于核酸实验。

1.称取12.4克硼酸，放入烧杯中。

2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。

3.用NaOH调整溶液至所需pH值。

4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。

七、EDTA缓冲液EDTA缓冲液，主要用于金属离子螯合实验。

53种常见缓冲液配制方法（总结）
第一类：氢氧化物缓冲液
1、氢氧化硫酸缓冲液：添加一定量的硫酸钾到相当量的硝酸钾中，按需可加入一定量的氢氧化钠，并使氢离子浓度保持在 0.05~0.10mol / L，即可得到pH为2.5~3.0的硫酸缓冲液，其综合离子强度约为 0.150 mol/L。

2、硝酸缓冲液：将一定量的硝酸钾溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使氢离子浓度保持在 0.1~0.2mol / L，即可得到pH 约为4.7的硝酸缓冲液，其综合离子约为 0.10~0.15 mol/L。

3、三甲基磺酰胺缓冲液：将一定量的三甲基磺酰胺溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在
0.05~0.10mol / L，即可得到pH为7.2~7.5的三甲基磺酰胺缓冲液，其综合离子约为 0.10 mol/L。

第二类：基态缓冲液
1、乙醇缓冲液：将一定量的乙醇溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在 0.1~0.2mol / L，即可得到pH 约为6.3的乙醇缓冲液，其综合离子约为 0.10~0.15 mol/L。

2、氢氟酸缓冲液：将一定量的氢氟酸溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在 0.05~0.08mol / L，即可得到pH约为2.2的氢氟酸缓冲液，其综合离子约为 0.06~0.10 mol/L。