基因工程模拟试卷一及参考答案

高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)XXX《基因工程》练题题号得分一一、单选题（本大题共20小题，共20.0分）1.如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（）二总分A.解旋酶、限制酶、DNA连接酶C.限制酶、DNA连接酶、解旋酶B.限制酶、解旋酶、DNA连接酶D.DNA连接酶、限制酶、解旋酶2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快D.只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达3.如图为基因表达载体的模式图。

以下有关基因工程的说法错误的是（）A.基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建B.任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别C.图中启动子和终止子分歧与起始暗码子和终止暗码子D.抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了载体4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者，而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避限定酶的降解。

以下在动物体内发生的过程当中，与上述细菌行为相似的是（）A.巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体B.T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子C.组织液中抗体与抗原的特异性结合D.疫苗诱导机体发生对病原体的免疫5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示，最好应选用下列哪种质粒作为载体（）XXX.C.D.6.下图是研究人员使用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。

以下相关叙述精确的是（）A.酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键B.Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞C.筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测D.上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术7.下列关于基因工程技术的说法，正确的是（）A.切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列B.PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合C.载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因D.目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制8.在其他条件具备的情况下，在试管中进入物质X和物质Z，可得到相应产物Y．下列叙述正确的是（）A.若X是DNA，Y是RNA，则Z是逆转录酶B.若X是DNA，Y是mRNA，则Z是脱氧核苷酸C.若X是RNA，Y是DNA，则Z是限制性内切酶D.若X是mRNA，Y是核糖体上合成的大分子，则Z是氨基酸9.下图透露表现的是三种黏性末端，以下说法精确的是A.甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的B.若甲中的G处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C.乙中的酶切位点在A与G之间D.目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物10.如图是利用基因工程技术生产可使用疫苗的部分过程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。

《基因工程》一、选择题（每小题1.5分，共15分）1．基因工程的创始人是( )。

A A. KornbergB W. GilbertC P. BergD S. Cohen2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。

A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统3．在DNA的3’-5’链上，基因的起始密码子是( )A ATG（或GTG）B AGTC TAGD TGA4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别( )。

A 双链DNA的特定碱基对B 双链DNA的特定碱基序列C 特定的三联密码D 以上都正确5．末端转移酶是合成酶类，具有( )活性。

A 3’5’DNA聚合酶B 5’3’DNA聚合酶C 5’3’DNA内切酶D 5’3’DNA外切酶6．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，( )是不正确的。

A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。

B 可以在氯霉素作用下进行扩增。

C 通常带有抗药性标记。

D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。

7．关于cDNA的最正确的说法是( )。

A 同mRNA互补的单链DNAB 同mRNA互补的双链DNAC 以mRNA为模板合成的双链DNAD 以上都正确8．关于T4 DNA Ligase，下列说法中哪一项不正确? ( )A 是最常用的DNA连接酶。

B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。

C 不但能连接粘性末端。

D 最适温度37 ℃。

9．下列关于建立cDNA文库的叙述中，( )是错误的?A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNAB 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNAC 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAD 新合成的双链DNA克隆到载体上，并导入受体细胞10．用下列方法进行重组体的筛选，只有( )说明外源基因进行了表达。

基因工程试卷及答案(1)(总4页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--一、名词解释1、基因治疗：是将目的基因放进特定载体中导入靶细胞或组织，通过替换或补偿引起疾病的基因，或者关闭或抑制异常表达的基因来克服疾病的治疗方法。

2、反义核酸：是指能与特定mRNA精确互补、特异阻断其翻译的RNA或DNA分子。

3、反义DNA：也称反义寡核苷酸或反义脱氧寡核苷酸，是一种人工合成的、能与mRNA互补的、用于抑制翻译的短小反义核酸分子。

4、同尾酶：指切割DNA可产生相同的黏性末端的限制酶5、转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。

6、ａ-互补：指半乳糖苷酶的两个无活性片段组合而成为功能完整的酶的过程。

7、转化：指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主细胞，并使其获得新的表型的过程。

8、基因克隆：通过体外重组技术，将一段目的DNA经切割、连接插入适当载体，并导入受体细胞，扩增形成大量子代分子的过程。

9、核酶：是一类具有催化活性的RNA分子，具有核苷酸水解活性，可特异性剪切RNA分子，相当于RNA酶。

10、位点偏爱：某些限制酶对同一底物中的有些位点表现出偏爱性切割，即对不同位置的同一识别序列表现出不同的切割效率，这种现象称作为位点偏爱。

二、选择1.在( B )诱导下，目的蛋白与lacZ就会以融合蛋白的形式表达出来。

A. dNTP C. DMSO2.（ A ）可使表达蛋白避免被细胞内蛋白降解，或使表达的蛋白正确折叠，从而达到维护目的蛋白的目的。

A.分泌表达载体融合表达载体 C.组氨酸标签表达载体 D.内含肽表达载体的琼脂糖凝胶电泳方向为（ B ）A. 正极向负极B. 负极向正极C浓度高向浓度低. D. 浓度低向浓度高4.影响脉冲场凝胶电泳电泳分辨率的最关键因素是（D ）A.电场强度B. 缓冲液浓度C. 温度D.脉冲时间5.控制潜在RNA酶活性最重要的是（C）A.使用RNA酶抑制剂B.实验用具C.细致谨慎的操作D.温度控制6.酵母基因表达系统的宿主不具有以下哪一条件(B )A.安全无毒B.载体DNA转化频率低C. 发酵周期短D.蛋白质分泌能力好7. 酿酒酵母的附加体形表达载体有（D）的缺点A.蛋白分泌能力差B.无终止子C.不能独立复制D.无选择压力时不稳定8.（C）不能用大肠杆菌表达系统来生产。

（15）基因工程——2023年高考生物真题模拟试题专项汇编1.【2023年山东卷】“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解→分离→沉淀→鉴定。

下列叙述错误的是( )A.裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质B.分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等C.沉淀：可反复多次以提高DNA的纯度D.鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色2.【2023年湖北卷】用氨苄青霉素抗性基因（Amp R）、四环素抗性基因（Tet R）作为标记基因构建的质粒如图所示。

用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。

下列叙述错误的是( )A.若用Hin dⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同B.若用PvuⅠ酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因C.若用SphⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否D.若用SphⅠ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落3.【2023年浙江6月】某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。

实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。

为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。

下列叙述正确的是( )A.Gata3基因的启动子无法控制GFP基因的表达B.翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白C.2号条带的小鼠是野生型，4号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子D.若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子4.【2023年北京卷】抗虫作物对害虫的生存产生压力，会使害虫种群抗性基因频率迅速提高，导致作物的抗虫效果逐渐减弱。

为使转基因抗虫棉保持抗虫效果，农业生产上会采取一系列措施。

以下措施不能实现上述目标( )A.在转基因抗虫棉种子中混入少量常规种子B.大面积种植转基因抗虫棉，并施用杀虫剂C.转基因抗虫棉与小面积的常规棉间隔种植D.转基因抗虫棉大田周围设置常规棉隔离带5.【2023年新课标综合卷】某同学拟用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA连接酶为工具，将目的基因（两端含相应限制酶的识别序列和切割位点）和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。

高考生物专题复习《基因工程》一、单选题1．（2023·山东青岛·高三期末）自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。

我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）构建基因表达载体（如下图），通过农杆菌转化法导入白玫瑰中，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。

下列叙述错误的是（）A．上述获得蓝色玫瑰的方案中需要转入能调控液泡pH的基因B．将idgS基因插入Ti质粒时使用的限制酶是SpeI和SacIC．sfp和idgS基因具有各自的启动子，前者调控后者的表达D．农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上【答案】A【详解】A、分析题意，用农杆菌转化法将链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）导入白玫瑰后，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝，所以无需转入能调控pH的基因，A错误；B、分析题图可知，将idgS基因插入Ti质粒时可用SpeI和SacI以避免产生的黏性末端环化，增加构建成功的概率，B正确；C、分析题图可知，sfp和idgS基因具有各自的启动子，sfp可激活idgS的表达，C正确；D、将目的基因导入植物细胞可用农杆菌转化法，故农杆菌可将Ti质粒上的T—DNA整合到白玫瑰染色体DNA上，D正确。

故选A。

2．（2023春·江苏徐州·高二统考期中）土壤农杆菌侵染植物细胞时，Ti质粒上的T-DNA片段转入植物的基因组。

利用农杆菌以Ti质粒作为载体进行转基因，下列相关叙述正确的是（）A．T-DNA片段有利于介导外源DNA整合到植物的染色体DNA上B．用Ca2+处理农杆菌，以利于其侵染植物细胞C．Ti质粒是一种环状DNA分子，属于细菌的拟核DNAD．目的基因应插入T-DNA片段外，以防止破坏T-DNA【答案】A【详解】A、Ti质粒上的T-DNA片段能转入植物的基因组中，因此T-DNA片段利于介导外源DNA整合到植物的染色体，A正确；B、农杆菌转化法中不需要用Ca2+处理农杆菌，应直接利用土壤农杆菌感染植物细胞，B错误；C、Ti质粒是一种环状DNA分子，是存在于细菌细胞质中的DNA，C错误；D、在农杆菌转化法中，需要将目的基因插入到T﹣DNA片段上，D错误。

基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是：A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案：D2. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案：C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案：C二、填空题1. 基因工程中，常用的运载体有____、____和____。

答案：质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____和____。

答案：抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。

答案：基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。

在农业中，基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物；在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等；在工业上，基因工程可以用于生产酶、疫苗等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。

2. 基因工程中，如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达？答案：确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面：首先，目的基因需要有合适的启动子和终止子，以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止；其次，需要考虑目的基因的密码子偏好性，以确保其在宿主细胞中能被高效翻译；再次，需要考虑目的基因的稳定性，避免其在宿主细胞中被降解；最后，还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。

四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。

答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。

重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病；基因治疗可以用于治疗遗传性疾病；疾病诊断可以通过基因检测来实现；基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。

然而，基因工程的应用也带来了伦理问题，如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。

高中基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然选择B. 基因的人工选择C. 基因的人工重组D. 基因的自然重组答案：C2. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体答案：A3. 基因枪法属于哪种基因转移技术？A. 化学法B. 物理法C. 生物法D. 机械法答案：B4. 以下哪个不是基因工程的步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的自然选择答案：D5. 基因工程在医学领域的应用不包括：A. 基因治疗B. 基因检测C. 基因编辑D. 基因克隆答案：D二、填空题6. 基因工程的核心技术是________。

答案：重组DNA技术7. 基因工程中常用的受体细胞有________和________。

答案：大肠杆菌、酵母菌8. 基因工程在农业上的应用包括________和________。

答案：转基因作物、基因改良9. 基因工程在环境保护中的应用包括________和________。

答案：生物修复、污染物降解10. 基因工程在工业生产中的应用包括________和________。

答案：生物催化剂、生物制药三、简答题11. 简述基因工程的基本原理。

答案：基因工程的基本原理是利用分子生物学技术，将目的基因从一种生物体中提取出来，然后通过重组DNA技术将其插入到另一种生物体的基因组中，使其在新的宿主细胞中表达，从而获得具有特定性状的生物体或生产特定的生物产品。

12. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括基因治疗，通过将正常基因导入患者体内以治疗遗传性疾病；基因检测，用于疾病诊断和风险评估；基因编辑，通过修改基因序列来治疗疾病；以及生产生物药物，如胰岛素、干扰素等。

四、论述题13. 论述基因工程的伦理问题及其解决途径。

答案：基因工程的伦理问题主要包括对人类基因组的修改可能带来的未知风险、基因歧视、生物多样性的减少等。

大学基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶属于哪一类酶？A. 核酸酶B. 蛋白酶C. 脂肪酶D. 淀粉酶答案：A2. 以下哪个不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的克隆B. 目的基因的表达C. 目的基因的检测D. 目的基因的复制答案：D3. 基因工程中常用的运载体有哪些？A. 质粒B. 噬菌体C. 动植物病毒D. 所有以上答案：D二、填空题1. 基因工程中常用的_________技术可以用于目的基因的检测。

答案：PCR2. 基因工程中，_________是将目的基因导入受体细胞的关键步骤。

答案：转化3. 在基因工程中，_________是将目的基因插入到运载体中形成重组DNA分子的过程。

答案：克隆三、简答题1. 简述基因工程在医学领域的应用。

答案：基因工程在医学领域的应用包括生产重组药物、基因治疗、疾病诊断和疫苗开发等。

2. 描述基因工程中目的基因的克隆过程。

答案：目的基因的克隆过程包括提取目的基因、构建基因文库、筛选含有目的基因的克隆、目的基因的扩增和纯化等步骤。

四、论述题1. 论述基因工程技术在农业中的应用及其可能带来的问题。

答案：基因工程技术在农业中的应用包括改良作物品质、提高作物产量、增强作物抗病虫害能力等。

可能带来的问题包括生态平衡的破坏、基因污染、食品安全问题等。

2. 分析基因工程中目的基因表达调控的重要性及其策略。

答案：目的基因表达调控在基因工程中至关重要，它决定了基因工程产品的功能和产量。

调控策略包括启动子的选择、增强子的应用、转录后调控等。

《基因工程》模拟试题1一、选择题1．我国科学家在利用基因工程培育抗虫棉的过程中，经提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞这三个步骤后，在全部受体细胞中，能够摄入抗虫基因的受体细胞占A．全部B．大部分C．一半D．很少2．质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA ⑥环状DNA ⑦能“友好”地“借居”A．①③⑤⑦B．②④⑥C．①③⑥⑦D．②③⑥⑦3．下列含有内含子的生物是A.大肠杆菌B.青霉C.放线菌D.蓝藻4．基因工程的设计施工是在什么水平上进行的A.细胞B.细胞器C.分子D.原子5．细胞内合成RNA聚合酶的场所是A.细胞核B.核区C.核糖体D.内质网6．下列属于基因运载体所必须具有的条件是①具有某些标志基因②具有环状的DNA分子③能够在宿主细胞内复制④具有多种限制性内切酶A. ①②B.③④C. ①③D. ②④7．细菌抗药性基因存在于A．核DNA B．质粒C．RNA D．小的直线型DNA 8．（多选）目前常被使用的基因载体有A．质粒 B．噬菌体C．染色体D．动、植物病毒9．某科学工作者把兔子的血红蛋白的信使RNA加入到大肠杆菌的提取液中，在这个细胞的合成系统中能合成兔子的血红蛋白，这个事实说明A．蛋白质合成是在核糖体上进行的 B．各种生物共用一套遗传密码C．兔子和大肠杆菌的基因发生了重组 D．兔子的基因发生了突变10．小麦根尖细胞基因分布在A.染色体，核糖体B.染色体，叶绿体C.染色体，线粒体D.染色体，线粒体，叶绿体11．人类基因组是指人体DNA分子所携带的全部遗传信息。

人类基因组计划就是分析测定人类基因组的核苷酸序列。

其主要内容包括绘制人类基因的遗传图、物理图、序列图和转录图。

工作艰巨可见一斑。

科学家应对多少染色体进行分析A.46条B.24条C.23条D.22条12．基因治疗是把健康的外源基因导入A.有基因缺陷的细胞中B.有基因缺陷的染色体中C.有基因缺陷的细胞器中D.有基因缺陷的DNA分子中13．下列不属于获取目的基因的方法是A.“鸟枪法”B.转录法C.反转录法D.根据已知氨基酸序列合成法14．用“鸟枪法”提取目的基因的步骤为①用限制性内切酶将供体细胞DNA切成许多片段②将许多DNA片段分别载入运载体③选取目的基因片段插入运载体④通过运载体转入不同的受体细胞⑤让供体DNA片段在受体细胞内大量繁殖⑥找出带有目的基因的细胞，并分离出目的基因A．①③④⑤⑥B．①②④⑤⑥C．①②③④⑤⑥D．①②③④⑤15．关于真核细胞基因结构的表达中，正确的是A.不同基因中外显子的碱基对在整个基因碱基对中所占比例很大B.外显子所含碱基对一般多于内含子C.内含子是不能转录，不能编码蛋白质的序列D.非编码区对基因的表达起调控作用16．有关基因工程的叙述正确的是A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成在细胞内完成C.质粒都可以作为运载体D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料17．细胞核基因与细胞质基因相比，相同的是A.载体B.数目C.分离时机D.随机分离18．植物学家将胡萝卜的韧皮部细胞分离出来，将单个细胞放入特定培养基中培养，获得了许多完整的植株，这些植株的特点是A．彼此性状极为相似B．都是单倍体植株C．植株的变异频率较高D．都是纯合体植株19．控制细菌合成抗生素的基因、控制放线菌主要性状的基因、控制病毒抗原特异性的基因依次在①核区大型环状DNA ②质粒上③细胞染色体上④衣壳内核酸上A．①③④B．①②④C．②①③D．②①④20．基因工程中常作为基因的运载体的一组结构是A．质粒、线粒体、噬菌体B．染色体、叶绿体、线粒体C．质粒、噬菌体、动植物病毒D．细菌、噬菌体、动植物病毒21．科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并分泌抗体。

基因⼯程模拟试卷⼀及参考答案模拟试卷⼀及参考答案⼀、名词解释（20分）1.基因⼯程;2.基因⽂库;3. RT-PCR ;4. 同裂酶;5. gel retardation;6. Oligonucleotide-directed mutagensis;7. 反义RNA技术;8. α-互补;9. YAC（Yeast artificial chromosome）;10. 基因治疗⼆、填空（20分）1. _________ 、_____________和逆转录酶的发现是基因⼯程诞⽣的三⼤技术⽀持。

2. 1977年第⼀次在E. coli中合成了第⼀个⼈类蛋⽩。

3. 质粒是存在于细菌细胞中能独⽴于染⾊体DNA⽽⾃主复制的、、环状的双链DNA分⼦。

4. DNA提取过程中，苯酚的作⽤是。

⼄醇或异丙醇的作⽤是。

5. 将噬菌体DNA转⼊细菌的⽅法主要有、两种。

6. M13载体最多只能插⼊3kb的⽚段，⽽pUC8与M13的杂交载体称为，如pEMBL8可以克隆10kb的⽚段。

7. 建⽴⽣物的基因⽂库需要的克隆数⽬，可以通过公式进⾏计算。

8. Ti质粒分⼦太⼤，很难找到单⼀酶切位点，不适于直接作为载体使⽤，为此可以采⽤、两种策略。

9. E. coli中，基因表达的启动与终⽌依赖于基因周围的⼀组信号，其中最重要的三个信号是、、。

10. 碱性磷酸酯酶可以去掉DNA分⼦5’端的基团，防⽌载体⾃连，提⾼重组率。

11. 酵母中，主要有YEp、YIp、YRp三种类型的载体，其中的转化频率最⾼，⽽最稳定。

12. 受体细胞经过⼀些特殊⽅法的处理后，细胞膜的通透性发⽣变化，成为能容许有外源DNA的载体分⼦进⼊的细胞，这种细胞称为。

13. 限制性内切酶Eco R I，其中Eco表⽰_________________，R表⽰___________，I表⽰_________________。

14. PCR反应的每⼀次循环都包括、、_____________三个步骤，这样通过25-30cycles，可以扩增⼤量的⽬的⽚段。