HER_2_neu胞外配体第2结_省略__neu乳腺癌细胞杀伤作用的研究_钟国成

抗体制备技术的发展及其医学应用抗体是在对抗原刺激的免疫应答中，B淋巴细胞产生的一类糖蛋白。

它是能与相应抗原特异的结合、产生各种免疫效应（生理效应）的球蛋白。

国际卫生组织将具有抗体活性及化学结构与抗体相似的一类蛋白统一命名为免疫球蛋白，它与抗体都是指同一类蛋白质。

抗体的2条重链和2条轻链根据氨基酸序列变化程度分为V区和C区，其抗原结合特异性主要由V区中高度变异的超变区决定，3 个超变区共同形成1个抗原决定簇互补的表面，故又称为互补决定区( comp lementarity determining region，CDR)。

常规的抗体制备是通过动物免疫并采集抗血清的方法产生的，因而抗血清通常含有针对其他无关抗原的抗体和血清中其他蛋白质成分。

一般的抗原分子大多含有多个不同的抗原决定簇，所以常规抗体也是针对多个不同抗原决定簇抗体的混合物。

即使是针对同一抗原决定簇的常规血清抗体，仍是由不同B细胞克隆产生的异质的抗体组成。

因而，常规血清抗体又称多克隆抗体（polyclonal antibody，PcAb），简称多抗。

多克隆抗体是由多克隆B细胞群产生的、针对多种抗原决定簇的混合抗体。

因为天然抗原是由多种抗原分子组成的，每种抗原分子又含有许多抗原决定簇，每一种抗原决定簇可激活相应的B细胞克隆，进而分化、成熟并合成相应的抗体。

由于常规抗体的多克隆性质，加之不同批次的抗体制剂质量差异很大，使它在免疫化学试验等使用中带来许多麻烦。

因此，制备针对预定抗原的特异性均质的且能保证无限量供应的抗体是免疫化学家长期梦寐以求的目标。

随着杂交瘤技术的诞生，这一目标得以实现。

1 抗体的发展抗体的研究过程经历了免疫血清学研究、单克隆抗体研究和基因工程抗体研究3个不同阶段。

1.1 免疫血清学研究阶段免疫动物产生的抗体是多种抗体的混合物，所以早期制备的抗体是多克隆抗体. 多克隆抗体是人类有目的地利用抗体的第1步，其在生物医学等方面的应用已有上百年的发展历史. 但多克隆抗体具有不均一性，特异性差且动物抗体注入人体会产生严重的过敏反应等特性，限制了其在疾病诊断和治疗中的应用。

·综述·巨噬细胞在周围神经损伤中的作用研究进展黄善敏1,2，许林杰2，谢翠梅2，钱长晖2作者单位1.福建中医药大学中西医结合研究院福州3501222.福建中医药大学中西医结合学院福州350122基金项目国家自然科学基金项目（No.81873167）；福建省自然科学基金（No.2023J01147）收稿日期2023-05-16通讯作者钱长晖chanqian168@摘要周围神经损伤是临床常见的损伤，影响患者的生活质量，严重者会导致永久性残疾，因此深入研究神经损伤的修复具有重要现实意义。

许多研究表明巨噬细胞在周围神经损伤与修复中扮演重要的角色。

本文主要从巨噬细胞的迁移、吞噬、极化和分泌功能以及其对血管生成和施万细胞活性影响的角度出发，阐述其在周围神经损伤与修复中发挥的调控作用。

关键词巨噬细胞；周围神经损伤；综述中图分类号R741；R741.02；R745文献标识码A DOI 10.16780/ki.sjssgncj.20230354本文引用格式：黄善敏,许林杰,谢翠梅,钱长晖.巨噬细胞在周围神经损伤中的作用研究进展[J].神经损伤与功能重建,2023,18(10):597-600.Progress in the Study of the Role of Macrophages in Peripheral Nerve Injury HUANG Shanmin 1,2,XU Linjie 2,XIE Cuimei 2,QIAN Changhui 2.1.Institute of Integrated Chinese and Western Medicine,Fujian University of Traditional Chinese Medicine,Fuzhou 350122,China;2.College of Integrated Chinese and Western Medicine,Fujian University of Traditional Chinese Medicine,Fuzhou 350122,ChinaAbstract Peripheral nerve injury (PNI)is a common clinical injury that affects patients'quality of life and can re-sult in permanent disability in severe cases.Therefore,it is important to deeply study the repair of nerve injuries.Many studies have shown that macrophages play an important role in PNI and repair.This review mainly discusses the regulatory role of macrophages in PNI and repair from the perspectives of macrophage migration,phagocyto-sis,polarization,secretion function,and its effects on angiogenesis and Schwann cell activity.Keywords macrophages;peripheral nerve injury;review周围神经损伤主要是由于压迫、牵拉、缺血等原因造成，通常表现为运动、感觉功能障碍，常伴随神经性疼痛，影响患者的生活质量。

蛋白酪氨酸激酶综述目前至少已有近六十种分属20个家族的受体酪氨酸激酶被子识别。

所有受体酷氨酸激酶都属于I型膜蛋白，其分子具有相似的拓朴结构：糖基化的胞外配体结合区，疏水的单次跨膜区，以及胞内的酪氨酸激酶催化结构域及调控序列。

不同受体酪氨酸激酶结合，将导致受体发生三聚化，并进一步使受体胞内区特异的受体酪氨酸残基发生自身磷酸化或交叉磷酸化，从而激活下游的信号转导通路。

许多肿瘤的发生、发展都与酪氨酸激酶的异常表达有着极其密切的联系，下面将对几类与肿瘤的发生发展最为密切的受体酪氨酸激酶的研究迸展做一简介。

一、表皮生长因子受体（Epidermal grovth factor receptor, EGFR）家族EGFRPE包括EGFR、ErbB2、ErbB4等4个成员，其家族受体酪氨酸激酶（RTK）以单体形式存在，在结构上由胞外区、跨膜区、胞内区3个部分组成，胞外区具有2个半氨酸丰富区，胞内区有典型的ATP结合位点和酪氨酸激酶区，其酪氨酸激酶活性在调节细胞增殖及分化中起着至关重要的作用。

人的egfr基因定位于第7号染色体的短臂（7p12.3-p12.1），它编码的产物EGFR由1210个氨基酸组成，蛋白分子量约为170kDa，其中，712-979位属于酪氨酸激酶区。

EGFR的专一配体有EGF、TGF、amphiregulin,与其他EGFR家庭成员共有的配体有（cellulin(BTC)、heparin-bindingEGF(HB-EGF)、Epiregulin(EPR) ）等。

EGFR在许多上皮业源的肿瘤细胞中表达，如非小细胞性肺癌，乳腺癌、头颈癌，膀胱癌，胃癌，前列腺癌，卵巢癌、胶质细胞瘤等。

另外，在一些肿瘤如恶性胶质瘤、非小细胞性肺癌、乳腺癌、儿童胶质瘤、成神经管细胞瘤及卵巢癌等中还可检测到EGFR缺失。

最为常见的EGFR缺失突变型是EGFRⅧ，EGFR Ⅷ失去了配体结合区，但是可自身活化酪氨酸激酶，刺激下游信号通路的激活，而不依赖于与其配全结合。

干扰素-γ对乳腺癌细胞Her2／neu表达及^131I—Herceptin抑制肿瘤细胞增殖的影响《癌症》ChineseJournalofCancer,2006,25(4):443—446443干扰素一y对乳腺癌细胞Her2/neu表达及1311.Herceptin抑制肿瘤细胞增殖的影响?基础研究?范义湘,罗荣城,方永鑫,严晓,吕成伟EffectsofInterferon—yonHer一2/neuExpressionandAntitumorActivityOf'I—HerceptininBreastCancerCellLinesFANYi—Xiang,LUORong—Cheng,FANGYong—Xin,YANXiao,LUCheng—Wei南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东广州510515DepartmentofOncology,NanfangHospital,SouthMedw~Universay,Guangzhou,Guangdong,510515,PR.China通讯作者:罗荣城Correspondenceto:LU0Rong-ChengTel:86-20—61641651E—mail:lrc@收稿日期:2005.07.05修回日期:2005-08—29[ABSTRACT]BACKGROUND&OBJECTIVE:Herceptinplaysanimportant roleintreatingmetastaticbreastcancerbytargetingHer2/neu,therefore, combiningHerceptinwithiodine一13113,I)mightenhanceitsantitumoractivity. Thisstudywastoup—regulateHer2/neuexpressionbyinterferon—y(IFN—y), andexploreitseffectonbindingandantitumoractivityof'I-Herceptinin breastcancercelllinesMCF-7,SKBR一3andBT一474.METHODS:MCF-7.SKBR一3andBT-474cellswereculturedwithorwithoutIFN—y(500U/mI)for48h.Thepositiverateandmeanfluorescenceintensity(MFI)OfHer2/neuonthe3celllinesweretestedbyflowcytometry.HerceptinwasIabeledwith1311 byIodogenmethod,anditsradiochemicalpurity(RCP)wastestedbysize—exclusionhigh—pressureliquidchromatography(HPLC).Thebindingrateof竹11_Herceptinoncellswasmeasuredbynon—competitivesaturationanalysis. anditskillingeffectwasestimatedbycolony—formingassay.Thepositiverate andMFIofHer2/neu,bindingrateof埘1.Herceptin,andcolony—formingrate werecomparedbetweenIFN—y—inducedgroupandcontrolgroupbyftest.RESUL-TS:FOrMCF.7cells,thepositiverateandMFIofHer2/neuwere significantlyhigherinIFN—y—inducedcellsthanincontrolcells[(15.2~4.7)%vs.(8.5士1.9)%,t=3.515,P<0.05;121士17vs.38~7,t=7.823,P<0.002];f0rSKBR一3andBT-474cells.noobviousdifferenceofHer2/neupositiverate wasobse~edbetweenIFN—y—inducedcellsandcontroIcells『(99.7±0.9)%vs.(98.9士1.1)%,P>0.05;(99.5士1.2)%vs.(98.1士0.9)%,P>0.05],butthe MFIofHer2/neuwassignificantlyhigherinIFN—y—inducedcellsthanincontrolcells(1608~201vs.952~125,t--4.802,P<0.01:1968~192vs.1020~98.t=7.614.P<0.002).ThebindingratesofHer2/neuwereincreasedfrOm(5.2士1.4)%to(12.3~3.4)%by2.4foIdsinMCF-7cells,from(35.8~4.5)%to(48.9士7.1)%by1.4foldsinSKBR一3cells,andfrom(37.2~3.6)%to(59.5~8-7)%by1.6foldsinBT-474cellsafterinducementwithIFN—Y.The colony—formingratesweresignificantlylowerinIFN—y—inducedMCF一7,SKBR一3andBT-474cellsthanincontroIcells[(30士4)%vs.(49士3)%,t=6.574,P<0.05;(23~5)%vs.(37~6)%t=3.105,P<0.05;(19~6)%vs.(34~5)%.f=3.323,P<0.05].CONCLUSION:IFN—ycanup—regulateHer一2/neu expressionandincreasethebindingof'I-Herceptin,hence,improvethe inhibitoryeffectof'I-Herceptinonproliferationofbreastcancercells.KE,nⅣORDS:BreasttumorcellIine;Her2/neu;Interferon.y;Inducedexpression;lodineisotopes;Radioimmunotherapy【摘要】背景与目的:利用Herceptin对Her2/neu的靶向特性.将放射性核素"'I联结到Herceptin进行放免靶向治疗,是治疗转移性乳腺癌的方法之一.而肿瘤摄取标记抗体的量与肿瘤细胞靶位分子的表达量密切相关.本研究应用IF/Y.上444范义湘,等.干扰素一对乳腺癌细胞Her2/neu表达及I-Herceptin抑制肿瘤细胞堕墅堕调乳腺癌细胞系Her2/neu的表达,以提高I-Herceptin在乳腺癌细胞系的结合,及31I—Herceptin对乳腺癌细胞增殖的抑制作用.方法:取对数生长期乳腺癌细胞系MCF一7,SKBR一3和BT一474.实验组以终浓度为500U/ml的IFN一诱导培养48h.对照组加入不含IFN一的等量培养液.诱导前后采用流式细胞仪(FACS)检测3种细胞Her2/neu的表达率及平均荧光强度(MFI).采用Iodogen法对Herceptin进行"I标记.以高压液相层析法(HPLC)测定"I-Herceptin的放射化学纯度(RCP),以非竞争性饱和结合法测定3种细胞诱导前后1311一Herceptin的结合率(B/T).采用克隆形成实验评价诱导后1311一Herceptin对3种细胞杀伤效应的变化.实验组与对照组间Her2/neu表达率,MFI,B/T及克隆形成率的差异采用t检验.结果:MCF一7细胞Her2/neu基础表达率为(8.5~1.9)%,诱导后升高至(15.2~2.7)%(￡:3.515,P<0.05),MFI从38~7升高至121~17(t=7.823,P<0.01);SKBR一3细胞和BT一474细胞的基础表达率分别为(98.9~1.1)%和(98.1±0.9)%,诱导后分别为(99.7~0.9)%和(99.5~1.2)%,无明显改变(P>0.05),但MF1分别从952±125,1020~98增高至1608~201(￡=4I802,P<0.叭)和1968~192(t=7.614,P<0.002).nI—Herceptin在MCF一7,SKBR一3和BT一474的基础结合率分别为(5.2~1I4)%,(35.8~4.5)%和(37.2~3.6)%,诱导后分别升高为(12.3~3-4)%,(48.9~7.1)%和(59.5±8.7)%,对1311一Herceptin的结合倍增比分别为2.4,1.4和1.6倍.实验组3种细胞的克隆形成率分别为(30±4)%,(23~5)%及(19~6%),均显着低于对照组[分别为(49~3)%,(37±6)%,(34~5)%](￡=6.574,3.105,3.323,P<0.05).结论:IFN一可以上调乳腺癌细胞系Her-2/neu的表达和肿瘤细胞对"'I—Herceptin的结合量.因此也提高了"I-Herceptin对乳腺癌细胞的增殖抑制作用.关键词:乳腺肿瘤细胞系;Her2/neu;干扰素;表达诱导;"I;放射免疫效应中图分类号:R737.9:R817.4文献标识码:A文章编号:1000—467X(2006)04—0443—04约20%30%的晚期乳腺癌患者伴有Her.2的过度表达,该类患者疾病发展快,预后差,对化疗及三苯氧胺抗拒,缺乏有效治疗手段[.以Her.2为靶点的分子靶向药物Herceptin,虽可通过多种途径抑制Her.2过度表达的乳腺癌细胞生长f21.但已有研究显示[,Herceptin单药治疗晚期乳腺癌,其总有效率仅为12%一24%.因此,应用放射性核素标记Herceptin,对肿瘤进行放射免疫治疗(Radioimmunotherapy,RIT),是解决上述问题的方法之一.本研究应用干扰素~(interferon.^y,IFN一^y)诱导乳腺癌细胞系Her2/neu的表达,以提高放免靶向药物在肿瘤细胞的结合量及其杀伤效应,现将结果报道如下.1材料与方法1.1试剂与仪器RPMI.1640培养液购自美国Gibco公司,胎牛血清(FCS)购自美国Hyclone公司,小牛血清购自兰州民海生物公司,0.25%的胰蛋白酶和台盼蓝购自上海化学试剂公司,Anti.Her2/neuAPC鼠抗人单克隆抗体由BECTONDICKINSON公司购进, IFN.^y由本院生物治疗中心提供,Herceptin由上海罗氏公司购进.Na",I由中国核动力院第一研究所购进.人乳腺癌细胞系MCF.7和SKBR.3由上海细胞所购进.BT.474由北京协和医科大学基础医学研究所细胞室购进.流式细胞仪(FACS)采用BectonDickinsonFACSCalibur,^y计数器为上海核福光电有限公司产的SN.682型.1.2方法1.2.1IFN.^y诱导实验MCF.7,SKBR.3细胞培养于含10%dx牛血清的RPMI.1640液中.BT.474细胞培养于含l0%FCS的RPMI.1640液中[.取对数生长期细胞,用l2孔培养板培养,每孔细胞数量调整为5×10s/ml,于37℃,5%C02培养箱中培养24h 后,镜下观察细胞呈贴壁生长.IFN.^y以RPMI. 1640液稀释.每种细胞设实验组和对照组,每组设3个复孔.参照文献[5],在实验组细胞培养液中加人IFN.^y并调整其终浓度为500U/ml,对照组加人等量不含IFN.^y的RPMI.1640培养液,各组细胞均培养48h[.实验组和对照组细胞达到预定培养时间后,MCF.7,SKBR.3细胞以0.25%胰蛋白酶液消化收集,BT.474细胞以0.125%胰蛋白酶+0.02%EDTA消化.上述细胞以RPMI.1640培养液调整为悬液留待实验.实验前作台盼蓝染色以观察细胞活性.1.2.2Her2表达的FCM测定将上述实验组及对照组细胞移人Ependorf管,以0.0lmol/L,pH7.4的PBS洗涤2次,调整细胞密度为每管300l(约2xl05个细胞),各管加入Anti.Her2/neuAPC5l,吹打混匀,避光于室温反应30min后,1000xg离心3min,弃上清.并以0.0lmol/L,pH7.4的PBS洗涤2次以去除游离Anti.Her2/neuAPC.以FACS检测各组细胞Her2/neu表达率及Her2/neu表达的平均荧光强度meanfluorescenceintensitv.MFI).1.2.3Herceptin的"'I标记及质控采用Iodogen标记法.Herceptin溶于生理盐水中.浓度22ms/rIIl.取NaI111MBq(3mCi)加入Iodogen管.冰浴范义湘,等.干扰素.对乳腺癌细胞Her2/neu表达及I-Herceptin抑制肿瘤细胞增殖的影响445振摇反应2min后,加入Herceptin3.0mg,冰浴振摇反应2min.SephadexG25凝胶柱分离,纯化,测定比活度并以HPLC测定标记物的放射化学纯度(RCP).1.2.41311.Herceptin细胞结合率测定采用非竞争性饱和结合法.将上述收集的各组细胞密度调整为每管2×105/100l,根据比活度及放射化学纯度各管加入n-I—Herceptin25trl.取过量标记抗体(0.5m1)加入上述各细胞悬液中,充分混匀,于37℃振摇反应2h.反应终止,各组取20l做集落形成实验.其余细胞1000xg离心3min,去上清液后洗涤细胞2次,沉淀部分于^y计数器测放射性计数(cpm).特异结合管先加入过量非标记单抗Herceptin于4℃反应2h.再加入I.Herceptin25l于37℃反应2h.各管重复实验3次.-I—Herceptin细胞结合率=『(反应管cpm一非特异管cpm)/25l"I-Herceptin总cpm]x100%.摄取倍增比=(实验管cpm一非特异管cpm)/(对照管cpm一非特异管cpm).1.2.5克隆形成实验分别取上述各组预留的20l细胞,根据细胞计数用含10%胎牛血清的RPMI.1640培养基调整细胞浓度后接种至24孔板中,每孔100个细胞(1m1).于37℃,5%CO培养箱中培养2周.于倒置显微镜计数.将含有15个细胞以上的集落判定为一个克隆,各孔集落数除以接种细胞数即为克隆形成率.每组设3个复孔.1.3统计学处理实验组与对照组之间3种细胞Her2/neu的表达率,MFI,T/B以及克隆形成率采用s表示.差别显着性采用SPSS10.0统计学软件进行t检验.2结果2.1细胞及标记物鉴定实验前各组细胞经台盼蓝染色表明.MCF一7,SKBR一3及BT一474细胞的活性分别为94.0%,95.5% 和93.0%."I-Herceptin的放射化学纯度为95%.比活度为31.45kBq/~g.25l"I—Herceptin总计数为18502cpm.2.2IFN?y诱导对乳腺癌细胞系Her一2/neu表达的影响MCF一7,SKBR一3和BT一474经IFN一^y诱导前后Her2/neu表达率及MFI升高.其中MCF.7细胞Her2/neu表达率升高显着(t=3.515.P<O.05).SKBR一3和BT一474细胞Her2/neu表达率升高不明显(尸>0.05).3种细胞MFI均显着升高(表1).表1IFN.^r诱导对乳腺癌细胞系Her2/neu表达的影响Table1Inducementeffectofinterferon-^r(IFN-^r)onHer2/neuexpressiononbreastcancercellsCelllineControlcellsIFN—ly-inducedcellsPositiverate(%)MFIPositiverate(%)MFIMFI:meanfluorescenceintensity.Allvalues8iepresentedasmean4. SDof3experiments.=3.515,P<0.05,bt=4.802,P<0.0l,=7.614, P<0.002,VS.controlcells.2.3IFN—y诱导对乳腺癌细胞系结合埘1.Herceptin的影响"I-Herceptin在MCF.7,SKBR一3及BT一474细胞的非特异性结合率分别为(3.8±0.5)%,(4.2±0.6)%和(5.2+1.2)%.诱导后对"I—Herceptin的结合均增高(表2).表2IFN-^r诱导对乳腺癌细胞系结合mI-Herceptin的影响Table2EffectofIFN-^ronbindingrateof"iI-Herceptin inbreastcancerceIlsCelllineControlcells(%)IFN—ly—inducedcells(%)Multipleratio 2.4克隆形成实验对照组MCF一7,SKBR一3及BT一474细胞的克隆形成率分别为(49~3)%,(37±6)%及(34_+5)%,实验组相应细胞的克隆形成率分别为(30±4)%,(23+5)%及(19±6)%,均显着低于对照组(t=6.574,3.105,3.323.P<0.05).3讨论放射免疫治疗是借助单克隆抗体将放射性核素特异性靶向到肿瘤表达抗原或受体部位.利用射线对肿瘤的放射生物效应而达到治疗肿瘤的目的."I—Herceptin治疗晚期转移性乳腺癌.具有以下优点:①目前碘标记蛋白质技术成熟.Herceptin经"I标记后,其免疫反应活性仍然很高.因此."-I—Herceptin作为一种放射免疫靶向治疗药物.既可保留Herceptin本身所固有的抗肿瘤活性.又可发挥"I的内照射产生的放射生物学效应:②已有研446范义湘,等.干扰素一对乳腺癌细胞Her2/neu表达及I-Herceptin抑制肿瘤细胞增殖的影响究表明[,Herceptin与乳腺癌细胞表面的Her一2受体结合以后,通过下调Her一2受体水平,引起蛋白激酶Akt及有丝分裂活化蛋白激酶MAPK磷酸化作用降低,减少细胞受照射后修复水平的蛋白质合成.从而提高肿瘤细胞的放射敏感性.即Herceptin可提高I对肿瘤细胞的放射生物效应;③由于受抗体渗透性的影响以及肿瘤异质性影响,同一瘤体不同部位摄取抗体量不一样而产生"治疗逃逸"现象.而"tI发射的B射线在组织内的有效射程最大可达2.2mm.其有效射程可以覆盖因Herceptin结合量不够而产生的盲区.肿瘤靶位抗原是分子靶向药物结合定位的物质基础,它在肿瘤细胞上的密度与肿瘤摄取靶向药物密切相关,其表达量越高,肿瘤的摄取量越大[s-.在本实验条件下,IFN一诱导3种乳腺癌细胞Her2/neu的表达.在Her2/neu低表达的MCF一7细胞,其表达率明显提高,而在Her2/neu高表达的细胞系如SKBR一3,BT一474,表达率虽无明显增高,但3种细胞的MFI均明显提高.说明肿瘤细胞表达Her2/neu的量增加.由于Her2/neu在肿瘤细胞的表达量增加.细胞对标记抗体的结合率均相应提高.实验证明[引.干扰素可使细胞内基因的转录活性增强,mRNA水平提高,或者可进行翻译后调节,以缩短蛋白质合成周期.从而诱导肿瘤相关抗原表达,使肿瘤抗原数目增多,或更多肿瘤细胞表达肿瘤抗原.在许多种细胞系和细胞类型中,包括单核白细胞,巨噬细胞,小胶质细胞,成纤维细胞和上皮细胞.IFN一主要激活MHC2TA基因的PIV启动子,其诱导PIV的激活依赖于三个顺式序列.即一个GAS元件,一个IRF结合位点和一个E盒.IFN一与其受体相互作用,激活Jakl和Jak2激酶,引起STAT1的磷酸化,形成二聚体并转位进细胞核内. STAT1与上游刺激因子1(USF.1)协同作用结合到MHC2TA基因PIV启动子的GAS/E盒上.STAT1也能激活IRF一1的表达,STAT1和IRF一1这两个转录因子都可以介导其它系统中IFN一诱导的基因表达.IRF一1随即结合到PIV启动子的相应位点上,被STAT1,USF一1和IRF一1激活的PIV启动子导致CIITA的表达.进而激活MHCII类基因的表达[10,11].单细胞分离培养又称细胞克隆,适应性较大和活力好的细胞能增殖形成细胞小群[].本研究通过IFN一上调3种乳腺癌细胞Her2/neu的表达,由于增加肿瘤细胞对I-Herceptin的结合,与对照组比较细胞克隆形成能力存在显着差别,说明细胞结合一,一I-Herceptin越多.更能有效抑制乳腺癌细胞的生长.[参考文献][1]NahtaR,HungMc,EstevaFJ.TheHER一2一targeting antibodiestrastuzumabandpertuzumabsynergisticallyinhibit thesurvivalofbreastcancercells[J].CancerRes,2004,64(7):2343—2346.[2]ChoHS,MasonK,RamyarKX,eta1.Structureofthe extracellularregionofHER2aloneandincomplexwiththe HereeptinFab【J].Nature,2003,421(6924):756—760.[3]AlbanellJ,CodonyJ,RoviraA,eta1.Mechanismofaction ofanti?HER2monoclonalantibodies:scientificupdateon trastuzumaband2C4【J].AdvExpMedBiol,2003,532(2):253-268.[4JLuoLY,GrassL,DiamandisEP.Thenormalepithelialcell? specific(NSE1)geneisup—regulatedbysteroidhormonesin thebreastcarcinomacelllineBT一474[J].AnticancerRes, 2000,20(2A):981—986.【51KominskySL,HobeikaAC,LakeFA,eta1.Down—regulationofneu/HER一2byinterferon一inprostatecancer cells[J].CancerRes,2000,6o(14):3904—3908.【6]WroblewskiJM,BixbyDL,BorowskiC.eta1.Characterization ofhumannon—smallcelllungcancer(NSCLC)celllinesfor expressionofMHC,CO—stimulatorymoleculesandtumor—associatedandgens【J].LungCancer,200l,33(2):181—194. 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中级卫生专业资格肿瘤内科学主治医师（中级）模拟题2021年(30)(总分94.XX99,考试时间120分钟)A1/A2题型1. 属于上皮组织来源的肿瘤是( )。

A. 间皮瘤B. 癌肉瘤C. 黑色素瘤D. Bowen病E. 滑膜瘤2. EGFR的下列外显子位点突变提示易瑞沙，特罗凯有效的可能性大的是( )。

A. 19和21外显子B. 15和22外显子C. 14和19外显子D. 18和19外显子E. 20和21外显子3. 不属于严重不良事件的是A. 致命的或威胁生命的事件B. 导致门诊患者住院的事件C. 导致住院时间延长的事件D. 超量用药E. 患者自行退出临床试验4. 肺癌筛查最有价值的影像学方法是A. X线胸透B. X线胸片C. 低剂量螺旋CTD. MRIE. PET5. 肿瘤是局部组织的A. 变性B. 化生C. 畸形D. 异常增生E. 再生6. 某肿瘤与某因素的联系强度，最好由以下哪一项来测定A. 人群中该病的死亡率B. 人群中该病的发病率C. 人群中该病患病率D. 暴露于某因素的频率E. 相对危险度7. LAK细胞是由外周血淋巴细胞经与白细胞介素Ⅱ一道培养多长时间而形成的A. 6～8hB. 12hC. 1dD. 3～4dE. 9～12d8. 现代手术切除肿瘤最有代表性的是A. Yong的前列腺癌根治术B. Halsted的乳癌根治术C. Werthein的宫颈癌根治术D. Mile的经腹会阴直肠癌根治术E. Whipple的胰十二指肠切除术9. 杂交捕获实验检测HPV的灵敏度为哪一项A. (4+248)/1838=0.137B. 79/327=0.242C. (79+1507)/1838=0.863D. 1507/1511=0.997E. 79/83=0.952女，56岁，剑突下不适2个月，体检无明确异常，X线钡剂造影示胃体小弯3cm×4cm的龛影，位于胃轮廓内，龛影周围黏膜中断、破坏10. 中年男性患者，近日无诱因出现鼻腔少量出血，右颈部淋巴结肿大，质硬。

- 172 -*基金项目：国家自然科学基金青年项目（81903119）；中山大学高校基本科研业务费青年教师培育项目（20ykpy52）①中山大学附属第一医院　广东　广州　510080通信作者：毕月乳腺癌放疗抵抗机制的研究进展*毕月① 【摘要】　放疗是鼻咽癌、乳腺癌及直肠癌等多种恶性肿瘤的重要治疗手段，不过部分患者会出现放疗抵抗的现象，造成转移及复发，从而降低患者生存率。

乳腺癌患者放疗抵抗的发生与多种因素有关，如肿瘤干细胞及肿瘤微环境等。

乳腺癌放疗患者的治疗效果与放疗抵抗密切相关，对放疗抵抗的产生机制进行研究有助于减少或者抑制放疗抵抗，提高放疗效果，改善患者预后。

本文从肿瘤干细胞、自噬性调节及DNA 损伤修复等多个方面做一综述，旨在为随后研究提供思路。

【关键词】　乳腺癌　放疗抵抗　肿瘤干细胞　自噬性调节　细胞周期调控　上皮间充质转化　DNA 损伤修复 Research Progress on the Mechanism of Radiotherapy Resistance in Breast Cancer/BI Yue. //Medical Innovation of China, 2023, 20(30): 172-176 [Abstract]　Radiotherapy is an important treatment method for nasopharyngeal carcinoma, breast cancer, rectal cancer and other malignant tumors. However, some patients may experience resistance to radiotherapy, which may cause metastasis and recurrence, thus reducing the survival rate of patients. The occurrence of radiotherapy resistance in breast cancer patients is related to many factors, such as cancer stem cell and tumor microenvironment. The therapeutic effect of breast cancer patients undergoing radiotherapy is closely related to their resistance to radiotherapy. Studying the mechanism of resistance to radiotherapy can help reduce or inhibit resistance to radiotherapy, improve the effect of radiotherapy, and improve the prognosis of patients. This article reviews cancer stem cell, autophagy regulation, DNA damage repair and other aspects in order to provide ideas for subsequent research. [Key words]　Breast cancer　Radiotherapy resistance　Cancer stem cell　Autophagy regulation　Cell cycle regulation　Epithelial mesenchymal transformation　DNA damage repair First-author's address: First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou 510080, China doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2023.30.040 乳腺癌是严重危害女性身心健康的一种恶性肿瘤。

免疫组化指标 her2HER2（Human Epidermal growth factor Receptor 2）是一种与身体免疫系统有关的蛋白质指标。

该指标主要用于乳腺癌的免疫组化诊断，对于乳腺癌的个性化治疗也有着极为重要的作用。

以下是围绕“免疫组化指标HER2”的阐述。

一、什么是免疫组化指标？免疫组化指标（IHC，Immunohistochemistry）是一种将抗体与组织学技术相结合的方法，通过检测某一蛋白质在组织学的免疫反应性，以此来判断该蛋白质在细胞和组织中的分布、表达量和活性等相关信息的指标方法。

二、HER2是什么？HER-2/neu是人类表皮生长因子受体家族中的一员，是一种细胞表面蛋白，在正常的生理过程中发挥着细胞分化、增殖和存活等重要生理功能作用。

但是当该基因或蛋白发生改变使其表达量增高或活性异常时，会引发多种癌症的发生，如乳腺癌、卵巢癌等。

三、HER2阳性的意义是什么？正常情况下，HER2在乳腺组织中的表达量很低，但在部分人群中，HER2的表达量明显升高，即HER2阳性，会导致肿瘤的增殖、侵袭和转移等恶化的表现。

因此，HER2阳性是乳腺癌治疗和预后的重要参考指标。

四、HER2检测的方法是什么？HER2的检测通常采用IHC和原位杂交（FISH）技术，其中IHC是更为常用的一种技术。

在IHC检测中，使用染色剂标记对HER2蛋白进行染色，根据染色的颜色强弱或染色核数来确定HER2的表达水平，并进行分类评估。

五、HER2检测结果的意义如何？HER2检测结果常常用来评估乳腺癌患者的预后情况以及制定个性化的治疗方案。

在HER2阳性的肿瘤中，由于HER2通路的异常激活使得强烈的增殖和存活信号会被发送到肿瘤细胞，因此使用HER2激动剂（如曲妥珠单抗、赫赛汀等）可以有效阻断该通路，抑制癌细胞的增殖和扩散，提高治愈率和生存质量。

综上所述，HER2免疫组化指标在乳腺癌诊断和治疗中具有重要的作用。

通过对HER2进行检测，可以为医生制定相应的治疗策略、预测患者的预后情况、提高治愈率和生存质量，有利于乳腺癌患者尽早获得更好的治疗效果。