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气相色谱毛细管柱使用知识根据一些文献和多年的使用经验，对毛细管柱的性质和使用进行了一个归纳总结。
希望能对刚刚接触这一工作的初学者有一点点帮助。
1简介气相色谱毛细管柱因其高分离能力、高灵敏度、高分析速度等独特优点而得到迅速发展。
随着弹性石英交联毛细管柱技术的日益成熟和性能的不断完善，已成为分离复杂多组分混合物、及多项目分析的主要手段，在各领域应用中大有取代填充柱的趋势。
现在新型气相色谱仪、气相色谱-质谱联用仪基本上都是采用毛细管色谱柱进行分离分析。
但是，毛细管色谱柱柱内径较小，固定液的膜薄，用于食品中残留物分析时，若使用不当，色谱柱性能很快就会下降。
本文旨在向初次接触气相色谱毛细管柱的操作者介绍不同类型的毛细管色谱柱的性质、选择、使用方法及注意事项等。
毛细管柱只能安装在配有专用毛细管柱连接装置的气相色谱仪上。
现在购买仪器时最常规的配置是配毛细管分流/ 不分流进样口。
2毛细管色谱柱的类型毛细管色谱柱的类型有很多种，但目前最常用和商品化的，是开口熔融石英交联毛细管色谱柱。
本文仅介绍此类毛细管色谱柱的性能特点。
2.1熔融石英毛细管柱2.1.1熔融石英毛细管柱材料现在市售商品化的气相色谱用毛细管柱几乎都是由熔融石英制作的，简称石英毛细管柱。
制作毛细管柱用的石英纯度非常高，几乎无其它杂质。
它具有熔点高（近2000 C）、热膨胀系数低、化学稳定性好和抗张强度高等特点，是制备毛细管柱的理想材料。
毛细管柱内壁存在有许多具有吸附活性的基团，这些基团的存在直接影响固定相涂渍效果，所以，在涂渍固定相之前，柱表面必须经过适当预处理，以期得到较高的柱效和对称的色谱图形。
2.1.2石英毛细管柱的聚酰亚胺外涂层石英毛细管柱很脆，只有在毛细管柱外涂一层聚酰亚胺保护材料后才具有很好的弹性，在使用这样的色谱柱时应十分小心，避免将聚酰亚胺涂层损坏，导致毛细管柱易折断。
通常商品毛细管柱出厂时都固定在一个金属丝制作的柱架上，柱架的直径与毛细管柱的直径成正比，即：毛细管柱的直径越大，固定架的直径也就越大。
脂肪酸的检测方法
脂肪酸的检测方法主要有以下几种：
1. 毛细管气相色谱法（Capillary gas chromatography，CGC）：通过气相色谱仪分离和定量脂肪酸。
首先脂肪酸样品被甲醇和硫酸甲酯化，生成甲酯化产物。
然后将甲酯化产物通过气相色谱柱分离，并通过检测器进行定量测量。
2. 高效液相色谱法（High-performance liquid chromatography，HPLC）：先将脂肪酸样品经过酯化反应，生成酯化产物。
然后将酯化产物通过高效液相色谱柱进行分离，并通过紫外检测器或荧光检测器进行定量。
3. 核磁共振（Nuclear magnetic resonance，NMR）：利用核磁共振技术对脂肪酸样品进行分析。
通过分析样品中的脂肪酸的质谱图谱、化学位移和峰面积等信息，可以定量和鉴定脂肪酸。
4. 质谱法（mass spectrometry，MS）：将脂肪酸样品经过适当的前处理后，通过质谱仪进行分析。
质谱仪可以测定样品中脂肪酸的分子量、分子结构和相对丰度等信息。
以上列举的方法只是脂肪酸检测的常见方法，实际上还有其他一些方法，如红外光谱法、荧光光谱法等。
在实际应用中，选择合适的检测方法取决于需要分析的
样品类型、所需的分析精度和设备条件等因素。
实验七 毛细管气相色谱法测定苯系物一、目的1、学习气相色谱法的基本知识。
2、了解气相色谱仪的基本结构、分析流程，初步掌握气相色谱仪的使用。
3、练习用微量注射器手动进样技术，掌握气相色谱保留值定性及归一化法定量的方法。
二、原理苯系物系指苯、甲苯、乙苯、二甲苯（包括对位、间位和邻位异构体）乃至异丙苯、三甲苯等，可用气相色谱法进行分离分析。
本实验苯系物组成为苯、甲苯、乙苯、间二甲苯。
气相色谱法是以气体（载气）为流动相的色谱分析法，当载气携带气化后的组分进入色谱柱，混合物中不同组分与柱中固定相作用力不同，在柱中移动速度不同而分离，分离后的组分先后流出色谱柱进入检测器，产生的信号记录即为色谱图。
根据色谱图中各峰的位置可定性，根据峰面积或峰高可定量。
毛细管气相色谱法是用毛细管柱作为气相色谱柱的一种高效、高速、高灵敏度的分离分析方法，毛细管柱的应用大大提高了气相色谱法对复杂物质的分离能力。
由于毛细管柱的柱容量很小，常采用分流方式将极少量的试样引入色谱柱；同时为了减小组分的柱后扩散及提高氢火焰离子化检测器的灵敏度，柱后还增加了尾吹气。
各种物质在一定的色谱条件下有各自确定的保留值，因此保留值（通常用保留时间）可作为一种定性指标。
对于较简单的多组分混合物，若其中所有待测组分均为已知且它们的色谱峰均能分开，则可将各个色谱峰的保留值与各相应的纯物质在同一条件下所得的保留值进行对照比较，就能确定各色谱峰所代表的物质。
当相邻两组分的保留值接近，且操作条件不易控制稳定时，可以将纯物质加到试样中，如果某一组分的峰高增加，则表示该组分可能与加入的纯物质相同。
由于同一种检测器对不同物质具有不同的响应值，这样就不能用峰面积来直接计算物质的含量，需要对响应值（峰面积A 或峰高h ）进行校正。
为了消除色谱条件对响应值的影响，在色谱定量分析中通常采用相对质量校正因子f i ，即被测物质i 与标准物质s 的绝对质量校正因子之比值： //i i i s i i s s s i sf m A A m f f m A A m '==='g g测定f i 时，先准确称量被测物i 和标准物s 的质量m i 和m s ，混合后在一定条件下进行色谱测定，然后根据相应的峰面积A i 和A s ，按上式计算f i 值。
毛细管色谱法测定洛美沙星中的有机溶剂残留量来源: 作者:王国成,陈莹,徐波摘要：目的:建立毛细管气相色谱法测定洛美沙星中的有机溶剂残留量。
方法: 用INNOWAX 毛细管气相色谱柱,FID检测器, 以22戊酮为内标进行测定。
结果: 乙酸乙酯、四氢呋喃、乙醇、乙腈的线性范围分别为0～80μg/m l ( r =0.999 7)、0～11.52μg/ml( r=0.9996)、0～80μg/ml( r=0.9997) , 0～6.56 μg/ml( r= 0.9996);平均回收率分别为100.5%、100.1%、101.2%、100.1%; RSD 分别为1.30%、0.9%、1.18%和1.23% (n = 9)。
结论: 本方法简单、准确、灵敏度高、重现性好, 适用于洛美沙星中有机溶剂残留量的测定。
关键词洛美沙星,毛细管气相色谱法,有机溶剂残留量药物生产过程中残存的有机溶剂均有不同程度的毒性, 不仅对人体有害, 而且这些溶剂与药物的治疗作用无关, 原则上应愈少愈好。
洛美沙星为第三代喹诺酮类广谱抗菌药, 是由日本北陆株式会社研制的第一代口服长效抗菌药。
该药物在合成过程中采用了乙酸乙酯、四氢呋喃、乙醇、乙腈等有机溶剂, 故对此4种有机溶剂加以检测有利于药物质量控制。
本试验采用毛细管色谱法测定洛美沙星原料药中有机溶剂的含量,方法简便,结果准确可靠。
1 仪器与试剂Agilent6890 增强型气相色谱仪, Agilent6890 工作站。
乙酸乙酯、四氢呋喃、乙醇、乙腈均为分析纯(上海化学试剂公司) , 22戊酮(内标物) 为色标试剂(天津化学试剂一厂) , 1-甲基-2-吡咯烷酮, 溶解样品用溶剂为化学纯(上海化学试剂公司)。
2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱: Agilent HP-NNOWAX (固定液为键合聚乙二醇, 30m×0.53mm,1.0μm) 毛细管柱; 气化室温度: 220℃; 程序升温: 起始温度为40℃, 保持10min, 然后以20℃/min 升温至220℃,保持4 min;载气为氮气;分流比:1∶1; 进样量2μl; 检测器温度: 氢焰离子化检测器(FID) , 240 ℃。
2.2 溶液及试样制备2. 2. 1 内标溶液的制备精密量取色标试剂2-戊酮124.0μl (约相当于100mg) , 置100ml 量瓶中, 用1-甲基-2-吡咯烷酮稀释至刻度, 摇匀; 精密量取1m l, 置10ml容量瓶中, 用1-甲基-2-吡咯烷酮稀释至刻度, 摇匀, 作为内标溶液。
2. 2. 2 对照溶液的制备精密量取乙酸乙酯111. 1μl (约相当于100mg) , 乙醇126.6μl(约相当于100mg) 置100ml 量瓶中, 用1-甲基-2-吡咯烷酮稀释至刻度,摇匀,作为对照贮备液A; 精密量取四氢呋喃162.2μl(约相当于144m g) , 乙腈105.0μl (约相当于82mg) 置100ml量瓶中, 用1-甲基-2-吡咯烷酮稀释至刻度, 摇匀, 作为对照贮备液B。
精密量取对照贮备液A 10ml 与对照贮备液B 1ml 置同一100ml 量瓶中, 用1-甲基-2-吡咯烷酮稀释至刻度, 摇匀,作为对照贮备液。
精密量取对照贮备液5ml, 置10ml 量瓶中,精密加入内标溶液1ml, 加1-甲基-2-吡咯烷酮稀释至刻度, 摇匀, 即得对照溶液。
2. 2. 3 供试品溶液的配制取本品约0.1g, 精密称定, 置10ml 量瓶中, 精密加入内标溶液1ml, 加1-甲基-2-吡咯烷酮适量, 振摇使溶解并稀释至刻度, 摇匀,作为供试品溶液。
2.3 系统适用性试验精密量取对照品溶液2μl, 注入气相色谱仪, 记录色谱图, 测定各有机溶剂的分离度及柱效。
结果表明, 以上各有机溶剂计算的理论塔板数均达到2500 以上, 相邻溶剂的分离度均符合要求。
2.4 线性关系精密量取对照贮备液0.5、1. 0、2. 0、4. 0、5. 0、6.0 和8.0ml 分别置10ml量瓶中,各精密加入内标溶液1ml, 加1-甲基-2-吡咯烷酮稀释至刻度, 摇匀。
分别精密量取上述各浓度溶液2μl, 注入气相色谱仪,测定。
分别以乙酸乙酯、四氢呋喃、乙醇、乙腈对照液的峰面积与22戊酮(内标) 峰面积的比值为纵坐标( Y ) , 以乙酸乙酯、四氢呋喃、乙醇、乙腈的浓度为横坐标( X ) , 进行线性回归。
结果表明, 四氢呋喃、乙酸乙酯、乙醇、乙腈在相应的线性范围内线性关系良好。
2.5 回收率试验分别取本品约0.1g, 精密称定, 置10 ml量瓶中(共10份) , 精密加入对照贮备液4ml(3份)、5ml(3 份)、6ml(3 份),另取1份不加贮备液, 作为空白, 再精密加入内标溶液1ml, 加1-甲基-2-吡咯烷酮稀释至刻度, 摇匀(共10份)。
分别精密量取上述各浓度溶液2μl, 注入气相色谱仪, 记录峰面积,计算回收率。
2. 6 精密度试验精密量取对照溶液2μl, 按上述测定法操作, 重复进样6次, 四氢呋喃、乙酸乙酯、乙醇和乙腈RSD 分别为0.40%、0.59%、0.60% 和0.63%。
2. 7 最低检出限的测定取对照品溶液逐步稀释进样, 测得乙酸乙酯、四氢呋喃、乙醇、乙腈的最低检出限为50.3.6.25和102.5 μg/ml。
2. 8 样品测定按“2. 2. 3”项制备供试品试样, 按“2.2.2”项制备对照品试样, 分别测定, 记录色谱图, 按内标法以峰面积计算各溶剂含量。
3 讨论3.1 色谱柱的选择4种有机溶剂中乙醇和乙腈较难分离, 试验采用DB2624 气相色谱柱不能达到基线分离, 选用Agilent HP-NNOWAX 毛细管柱, 在本试验条件下,各物质均可达到有效分离,4种有机溶剂和内标的出峰顺序依次为四氢呋喃(2.142min)、乙酸乙酯(2.455min) , 乙醇(3.233min)、2-戊酮(4.118min)和乙腈(5.074min) , 整个分析过程在20min内完成,快速简便。
3.2 内标物的选择内标物的选择应在分析的样品中间出峰, 且不干扰被测成分的物质, 采用内标法测定有机溶剂含量, 可以减少仪器及实验者的操作误差。
经过多种有机溶剂的筛选, 选择22戊酮为内标可以和这4种有机溶剂达到有效分离,无干扰,方法学验证得到满意结果, 精密度符合中国药典要求(RSD< 5%) ,因此该方法应用于有机溶剂的含量测定准确、可信。
3.3 柱温的选择柱温升高可使有机溶剂的出峰时间提前, 但升高温度不利于此4种有机溶剂的分离, 因此初始柱温选择40℃, 在此温度下, 溶剂1-甲基-2-吡咯烷酮的出峰时间保留时间过长, 在保证有机溶剂和内标得到有效分离的情况下, 利用程序升温使溶剂峰快速出峰, 缩短分析所用时间。
参考文献1 周海钧, 金少鸿. 人用药品注册技术规范国际协调会( ICH)-质量的技术要求. 中国药学杂志, 1996, 31 (11) : 6942 中国药典.2000. 二部. 附录64高效毛细管气相色谱法测定保心安油中(一)-薄荷酮、薄荷脑和桂皮醛的含量来源: 作者:郑纯;曾洁摘要：目的：采用高效毛细管气相色谱法同时测定保心安油中(一)-薄荷酮、薄荷脑和桂皮醛的含量。
方法：采用HP-INNOWAX毛细管柱 (Crosslinked Polyethylene Glycol，0.25μm×0.25 mm×30m)，GC-MS分离鉴定保心安油10种成分，3种成分的含量采用内标法测定，用HP-FFAP毛细管柱(Crosslinked Polyethylene，0.25μm×0.25 mm×30m)，柱温：115℃→155℃→230℃（4min），分流进样，分流比40：1；进样口温度：180℃；检测器：FID，温度：250℃。
结果：3种成分均达到良好的分离，(一)-薄荷酮、薄荷脑和桂皮醛线性范围分别为0.83～4.16μg(r=0.9999)，2.52—12.60μg (r=0.9999)，0.20～1.00μg (r=0.9999)；重现性均小于1.5％，平均回收率分别为(一)-薄荷酮：99.18％，RSD=1.4％；薄荷脑：99.92％，RSD= 1.1％；桂皮醛：99.22％，RSD=1.4％。
关键词：保心安油毛细管气相色谱气质联用分离定量(一)-薄荷酮薄荷脑桂皮醛Capilary Column Gas Chromatography Determination of(一)-Menthone，Menthol，Cinnamic Aldehyde in Po Sum On Oil保心安油由薄荷油、肉桂油、细辛、黄芩、血竭等数10味药组成的进口中成药。
具镇痛、驱风、通窍、消肿等功效，主治伤风鼻塞、感冒头痛、蚊叮虫咬、跌打损伤、肠胃不适等症。
本文采用HP-INNOWAX毛细管柱GC-MS分离、鉴定该制剂10种主要活性成分，用FFAP毛细管柱内标法测定了(一)-薄荷酮、薄荷脑和桂皮醛的含量。
本法快速，准确，可靠。
1 仪器与材料气相色谱／质谱系统HP-5973；气相色谱仪HP- 6890型；色谱工作站：HP-Chemstation；毛细管色谱柱：HP-INNOWAX(Crosslinked Polyethylene Glyco1)，0.25μm×0.25mm ×30m；HP-FFAP(Crosslinked Polyethylene)，0.25μm×0.25mm×30m；HP-5(Crosslinked 5％PH ME Siloxane)，0.25μm×0.25mm×30m；对照品：(一)-薄荷酮，Aldrich Chemical Company，Inc．；(一)-薄荷脑、桂皮醛、萘(内标物)均为美国Sigma公司产品。
所用试剂均为分析纯。
2 实验部分2． 1 GC-MS鉴定油中主要化学成分 GC-MS色谱条件：GC-MS接口温度280℃；载气：氦气；分流比：10：1；色谱柱：HP-INNOWAX(Crosslinked Polyethylene Glycol，0.25μm ×0.25mmx30m)；柱温：60℃(通过3℃/min)→110℃(2min) (通过3℃/min) →150℃(1min) (通过100℃/min)→ 230℃(1 min)；MS条件：离子源温度300℃，电子能量7OeV，倍增电压1.6kV，扫描速度：1s／dec，检测质荷比范围m／z：40—425，检索谱库DATABASE／NIST98L，对保心安油进行GC-MS分析，结果鉴定1O个主要化学成分。
