对氨基苯甲酸酯类

含潜在芳伯氨基药品，先经水解得到芳伯氨基，再测定:
Ar-NHCOR + H2O
H+
Δ
Ar-NH2 + RCOOH
Ar-NO2 + Zn
药物分析胺类药物分析对氨基苯甲酸酯类药物的分析
H+
返回
Ar-NH2
第37页
第五章 胺类药品分析
第一节 对氨基苯甲酸酯类药品分析
五、含量测定
亚硝酸钠滴定法——反应条件 温度 室温（10℃～30℃）滴定
↓ 水 溶解 10％氢氧化钠溶液
加热 油状物
2ml
1ml
↑ ↓ 加热 加热
放冷 盐酸酸化
油状物消失
能使湿润红色石蕊试纸变为蓝色
药物分析胺类药物分析对氨基苯甲酸酯类药物的分析
返回
第22页
第五章 胺类药品分析
第一节 对氨基苯甲酸酯类药品分析
三、判别
氯化物反应
方法 1:
供试品溶液 硝酸
↓ 硝酸银试液
沉淀加氨试液
可用非水碱量法滴定。
药物分析胺类药物分析对氨基苯甲酸酯类药物的分析
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第9页
第五章 胺类药品分析
第一节 对氨基苯甲酸酯类药品分析
二、性质
芳伯氨基特征 多含有芳伯氨基（丁卡因无）, 能够发生重氮化-偶
合反应； 可与芳醛缩合反应, 生成schiff碱。 可用于定性判别, 含量测定。
药物分析胺类药物分析对氨基苯甲酸酯类药物的分析
使成酸性
↓ 硝酸
沉淀溶解
药物分析胺类药物分析对氨基苯甲酸酯类药物的分析
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第五章 胺类药品分析
第一节 对氨基苯甲酸酯类药品分析
三、判别
氯化物反应

第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类 局麻药物的分析
主讲人 肖国君
一、结构、性质与分析方法
O
（一）对氨基苯甲酸酯类
H R 1N
C OR2
盐酸普鲁卡因 (procaine hydrochloride)
苯佐卡因(benzocaine)
盐酸氯普鲁卡因 (chloroprocaine hydrochloride)
2010年版：检查对氨基苯甲酸，离子对色谱法 盐酸普鲁卡因注射液 均检查对氨基苯甲酸 ChP 2005年版：TLC法 2010年版：离子对色谱法
2005年版盐酸普鲁卡因注射液中检查“对氨基苯甲酸”


方法：——杂质对照品法
硅胶H薄层板
TLC法
展开剂：苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1：1：4） 对二甲氨基苯甲醛显黄色
3 指示终点的方法
（1）永停滴定法： ChP、BP多采用
主要原理：
NaNO2滴定时，达终点前， NaNO2产
生的HNO2用于重氮化反应，不与电极作
用，检流计无电流通过不偏转；达到终点
时，溶液中微量HNO2即会使电极起氧化 还原反应，检流计指针突然偏转，且不再 回复。

阳极：NO + H2O
HNO2 + H+ + e
乳白色
（二）与重金属离子反应
1、 与CuSO4反应 盐酸利多卡因 Na CO 蓝紫色
2 3
CuSO4
CHCl3
CHCl3层黄色
盐酸普鲁卡因、丁卡因、苯佐卡因，同样条件下不发生此反应。
2、 与CoCl2反应
盐酸利多卡因
CoCl2 H+
亮绿色细小
3、与Hg2+反应

与汞离子的反应
盐酸利多卡因 Hg （NO 3） 黄色 2
对氨基苯甲酸酯类 Hg （NO3） 红色或橙黄色 2
HNO3、
HNO3、
2．羟肟酸铁盐反应
盐酸普鲁卡因胺 H 2 O 2 羟肟酸 FeCl 3 羟肟酸铁（紫红色 暗棕色 棕黑色）
盐酸丁卡因 NaNO 2 （乳白色）
H
（二）与金属离子反应
1. 与铜和钴离子反应
盐酸利多卡因 硫酸铜 蓝紫色 黄色
苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因和盐酸丁卡因等 不发生此反应。
碳酸钠 氯仿
盐酸利多卡因 CoCl 2 亮绿色细小
H
（六）IR
盐酸布比卡因 ChP（2005） [鉴别] （3）本品的红外光吸收图谱与对 照的图谱（光谱集324图）一致。
第三节、特殊杂质与检查
一. 盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查
杂质来源 水解产生
检查方法 HPLC 杂质对照品法
供试液:盐酸普鲁卡因0.2mg/ ml
对照品:对氨基苯甲酸1g/ml溶液。
固定相：C18 流动相：0.1%庚烷磺酸钠的0.05M KH2PO4 （pH 3.0）-甲醇（68:32）
检测波长：279 nm
二. 盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物 的检查 杂质：4-氨基-2-氯苯甲酸 来源：生产、贮藏
色配位化合物沉淀，沉淀可溶于氯仿 显色。
（六） UV
（七） IR
二、鉴别试验
（一）重氮化—偶合反应 芳香第一胺类鉴别反应
Ar
HCl NH2 NaNO 2
OH 萘酚
-
重氮盐
橙黄～猩红色
盐酸普鲁卡因
直接：盐酸普鲁卡因、盐酸氯普

盐酸丁卡因
H2N
COOCH2CH2N(C2H5)2 HCl
Cl
盐酸氯普鲁卡因
H2N
CONHCH2CH2N(C2H5)2 HCl
盐酸普鲁卡因胺
不属对氨基苯甲酸酯类药物，但结 构与化学性质相似（酯键→酰胺键）。
二 、酰苯胺类药物 R3
R1
N C R2
HO
R4
结构特点:
苯胺的酰基衍生物, 具芳酰氨基。
具游离芳伯氨基的药物可用本法直 接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具 酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解， 芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经 还原，也可用本法测定。
取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必 要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L 亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液 数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红 色沉淀。
对乙酰氨基酚 Ch.P（2010）
【鉴别】 （2）取本品约0.1g，加稀盐酸 5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取 0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用 水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液2m1，振 摇，即显红色。
2. 硫氰酸盐衍生物
盐酸丁卡因 Ch.P（2010）
【鉴别】（1）取本品约0.1g，加5%醋酸 钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶 液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用 水洗涤，在80℃干燥，依法测定（附录 ⅥC），熔点约为131℃。
五、UV 苯环的紫外吸收特性。
六、IR 适用于结构复杂而相互差别小的
盐酸普鲁卡因（二乙胺基乙醇酯）
盐酸普 鲁卡因
NaOH ↓白（普鲁卡因）
△
油状物
△
过量
沉淀溶解 HCl ↓白
HCl 对氨基苯甲酸钠 + 二乙胺基乙醇

（3）制备衍生物测熔点
典型UV参数 lmin lmax ls Almax E1cm 1%
(4)UV
盐酸布比卡因 ChP（2005） [鉴别] 取本品，精密称定，按干燥品计算，加mol/L盐酸溶液制成每1ml中含mg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为～与～。
⑤ 判断 在254nm波长紫外灯下观察，供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较,不得超过其大小与颜色。
(3)．对氨基酚 制备中乙酰化不完全或贮存不当发生水解都能引入对氨基酚 ☆检查原理： 对氨基酚在碱性条件下，与亚硝基铁氰化钠作用，生成蓝色络合物，与对照液比较判断对氨基酚的限量。
检查方法 对照法
⑤ 与重金属离子反应
a．与铜离子的反应
b．与钴盐反应
（1）重氮化-偶合反应 具有潜在的芳伯氨基，水解或还原后，可发生重氮化-偶合反应。 例如：对乙酰氨基酚
对乙酰氨基酚 ChP（2005） [鉴别] 取本品约g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。
等可使氨基的碱性降低，重氮化反应速 度加快。
A2. 当在苯环上有供电基时， 则使反应速度降低。如 等。
供电基能使氨基碱性增强，这样氨 基成盐的机会就增大，游离芳伯胺 的浓度就减小，所以反应速度就慢。
（1）K1
（2）ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ2
∵ K1 ≈ 300 K2 加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度
苯乙胺类药物的基本结构
*
具有脂烃胺侧链，属于芳烃胺类药物。 多数在苯环上有1~2个羟基取代基。

1、盐酸利多卡因 三硝基苯酚 盐酸布比卡因
三硝基苯酚利多卡因 （mp. 228~232℃） 三硝基苯酚布比卡因
（mp. 194℃）
25％硫氰酸铵溶液
2、盐酸丁卡
丁卡因硫氰酸盐
因
5％醋酸钠溶液 （ mp. 131℃ ）
(六)UV
药物 对乙酰氨基酚
苯佐卡因 盐酸丁卡因
溶剂
浓度 (μg/ml)
稀HCl-甲醇(1:99) 10
在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：
NaNO2+HCl→HNO2+NaCl
HNO2+HCl→NOCl（亚硝酰氯）+H2O
Ar NH2 NO Ar NH NO Ar N N OH Ar N2Cl
慢
快
快
加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重 氮化反应速度。
（2）酸的种类及其浓度
4. 弱碱性：叔胺氮原子＋生物沉淀剂→沉淀
5. 酰胺氮原子与金属离子络合显色
第二节 鉴别试验
(一)重氮化-偶合反应
分子中存在芳伯胺基或存在潜在芳伯胺基的药物，均可 与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成的重氮盐可与碱性β-萘酚 偶合生成有色的偶氮染料。
NH2
+ NaNO2
R
N2+Cl-
+
R
H+
N2+Cl-
1.原理
Ar NH2 + NaNO2+ 2 HCl
+ Ar CNl- N+ NaCl+ 2 H2O
具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯
氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，
芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法

照品法。
四、HPLC
ChP2010，盐酸利多卡因：外标法
第五节 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ内药物分析
HPCE:人血中普鲁卡因、利多卡因、丁卡 因、布比卡因 HPLC:人血中利多卡因和罗哌卡因
本 章 小 结
1、掌握本类药物的分类及结构特征。 2、掌握本类药物的结构与分析方法关系
（即两类药物性质的相同与区别之处）。
3、掌握本类药物的鉴别反应（重氮化－ 偶合反应、水解产物反应）。
盐酸普鲁卡因 ChP（2010）
[鉴别] （1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应
取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓 煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴， 滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成 由橙黄到猩红色沉淀。
特殊：盐酸丁卡因 ，无重氮化反应，分 子中有芳香第二胺结构可与亚硝酸钠作 用，生成 N - 亚硝基化合物。
计算 , 加 0.01mol/L 盐酸溶液制成每 1ml 中含
0.40mg 的 溶 液 ， 照 分 光 光 度 法 测 定 ， 在 263nm 与 271nm 的波长处有最大吸收；其吸 收度分别为0.53～0.58与0.43～0.48。
2.IR 盐酸布比卡因 ChP（2010）
[鉴别] （3）本品的红外光吸收图谱与
（6）其它特性：游离碱多为碱性油状 液体或低熔点固体，难溶于水，可溶于 有机溶剂，其盐可溶于水，难溶于有机 溶剂。
第二节、鉴别试验 一、重氮化—偶合反应（芳伯氨基 或潜在的芳伯氨基）
Ar
HCl NH2 NaNO 2
OH萘酚
重氮盐
橙黄～猩红色
盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普 鲁卡因胺、盐酸氯普鲁卡因

对氨基苯甲酸钠 HCl 对氨基苯甲酸（白色 ）

苯佐卡因 → 橙红色
N2+Cl-
+ NaCl + H2O
COOCH2CH2N(C2H5)2
N2+Cl+
COOCH2CH2N(C2H5)2
OH
OH + NaOH
NN
+ NaCl + H2O
COOCH2CH2N(C2H5)2
COOCH2CH2N(C2H5)2
猩红色
盐酸普鲁卡因重氮化偶合反应
对氨基苯甲酸酯类药物结构及理化性质
二、理化性质
（二）理化性质
2. 水解特性：酯键易水解
R1HN
O C OR2
• 影响药物水解的因素：光、热 或 碱性条件 形成特殊杂质
苯佐卡因、盐酸普鲁卡因
对氨基苯甲酸（PABA）
盐酸氯普鲁卡因
4-氨基-2-氯苯甲酸
盐酸丁卡因
对丁氨基苯甲酸（BABA）
对氨基苯甲酸酯类药物结构及理化性质
二、理化性质
（二）理化性质 3. 弱碱性 脂烃胺侧链，均为叔胺氮原子（除苯佐卡因外） （1）游离碱具有弱碱性，能与生物碱沉淀剂发生沉淀反 应
对氨基苯甲酸酯类药物结构及理化性质
二、理化性质
（二）理化性质 1. 芳伯氨基特性 （1）重氮化－偶合反应 （2）能和芳醛缩合成Schiff碱 （3）易氧化变色 （4）盐酸丁卡因无此特性
对氨基苯甲酸酯类药物结构及理化性质
二、理化性质
（二）理化性质 1. 芳伯氨基特性
NH2
+ NaNO2 +2HCl
（2）存在形式： 盐酸盐 改善水溶性、稳定性
4. 吸收光谱特性 UV IR
盐酸普鲁卡因
H2N
COOCH2CH2N(C2H5)2 HCl

含量% （V V0） F T 103 100% m
（三）肾上腺素及其制剂的分析
3.含量测定
（1）盐酸肾上腺素注射液：HPLC
CH2CH3 CO2CH2CH2N CH2CH3 , HCl
NaOH
CH2CH3 CO2CH2CH2N CH2CH3
白色沉淀
O
NaOH
使湿润的
C ONa
CH2CH3 + HOCH2CH2N CH2CH3
红色石蕊 试纸变蓝
O C ONa
HCl H2N
O C OH
（白色）
白色沉淀
（一）盐酸普鲁卡因及其制剂的分析 1.鉴别 （1）水解反应
取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10%氢氧化钠溶液 1ml，即生成白色沉淀；加热，变成油状物，继续加热 ，发生的蒸气能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至 油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀； 此沉淀可溶于过量的盐酸。
（一）盐酸普鲁卡因及其制剂的分析 1.鉴别 （2）红外光谱法
（一）盐酸普鲁卡因及其制剂的分析 1.鉴别 （3）氯化物的反应 “一般鉴别试验”中“氯化物”项下的沉淀反应和氧
（三）肾上腺素及其制剂的分析 2.检查 （1）酸性溶液的澄清度与颜色 （2）酮体：紫外-可见分光光度法 （3）有关物质：高效液相色谱法
规定： A310nm≯0.05
（三）肾上腺素及其制剂的分析
3.含量测定
（1）肾上腺素原料药：非水溶液滴定法 肾上腺素的含量测定
取本品约0.15g，精密称定，加冰醋酸10ml，振摇溶解后， 加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至 溶液显蓝绿色，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml高氯 酸滴定液（0.1mol/L）相当于18.32mg的C9H13NO3

+ NaNO2 + 2HCl
N
N Cl
COOCH2CH2N(C2H2)2 + NaCl + 2H2O
N
N Cl
COOCH2CH2N(C2H2)2 +
OH + NaOH
OH N= N
COOCH2CH2N(C2H2)2
+ NaCl +H2O
橙红色沉淀
8
盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与 NaNO2 作用生成乳白色 N亚硝基化合物沉淀，可与芳伯胺基的同类药物区别。
31
（4）滴定速度 重氮化反应属分子反应，反应速度比较慢，滴定 速度不能过快。 尤其是近终点时，更要慢慢地滴定。近终点时， 游离芳伯胺浓度非常低，反应速度更慢。所以， 每加一滴滴定液，要搅拌15分钟后再判断终点。
32
中国药典规定：在 30 C 以下，把滴定管 尖端插入液面下2/3处进行滴定。在滴定 时一边搅拌一边加入大部分标准溶液。
离子对的浓度：是控制反相离子对色谱溶质保留值的主要因 素，通常对离子的浓度为320mmol/L。 流动相pH的选择：调解流动相的pH值可在较大范围内，改变 弱酸或弱碱样品的保留值和分离选择性。通常测定酸性物质
时调至pH77.5；测定碱性药物时调至pH33.5。
二、盐酸普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查：LC-
处理后亚硝酸钠滴定测定含量一般较少采用
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2. 操作中的主要条件
滴定反应特点：


重氮化反应属于分子反应
滴定液NaNO2及反应生成的重氮盐都不稳定

反应速度受多种因素影响：温度、速度等
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（1）加入溴化钾加快反应速度 重氮化反应机制：