食品实验 食品中合成着色剂的测定 4.28

食品中人工合成着色剂的测定序列号：DM-P1071、适用范围本方案适用于糕点、果酱、水果罐头、黑芝麻糊、果冻、冰淇淋、乳饮料、糖果和红酒中人工合成着色剂的检测；检出限：亮蓝是1.0 mg /kg，其他的是0.2 mg /kg；2、提取2.1 糕点、果酱(1) 取1.0 g样品，加入20 mL提取液A*，振荡2 min，40℃水浴超声提取10 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；(2) 取下层残留物，加入10 mL提取液A*，振荡2 min，40℃水浴超声提取15 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；(3) 将下层残留物用10mL提取液A* 按照步骤(2)重复提取一次，合并三次上清液；(4) 将上清液在40℃水浴条件下，减压蒸至约15 mL，再加入3 mL甲酸混匀，待净化。

2.2 水果罐头、黑芝麻糊(1) 取1.0 g样品，加入20 mL提取液A*，振荡2 min，40℃水浴超声提取10 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；(2) 取下层残留物，加入10 mL提取液A*，振荡2 min，40℃水浴超声提取15 min，6000 rpm下离心2 min，合并两次上清液；(3) 将上清液在40℃水浴条件下，减压蒸至约15 mL，再加入3 mL甲酸混匀，待净化。

2.3 冰淇淋(1) 取1.0 g样品，加入20 mL提取液A*，振荡2 min，40℃水浴超声提取10 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；(2) 将上清液在40℃水浴条件下，减压蒸至约7 mL，再加入1.5 mL甲酸混匀，待净化。

2.4 果冻取1.0 g样品，加入10 mL水，40℃水浴超声提取15 min，加入5 mL甲醇和3 mL甲酸混匀，待净化。

2.5 乳饮料、糖果取1.0 g样品，加入10 mL水、5 mL甲醇和3 mL甲酸混匀，待净化。

2.6 红酒取1.0 mL样品，加入0.5 mL甲醇和0.3 mL甲酸混匀，待净化。

食品中合成着色剂的测定1 范围本标准规定了食品中合成着色剂的测定方法。

本标准适用于食品中合成着色剂的测定。

本方法检出限：新红5ng，柠檬黄4ng,苋菜红6ng，胭脂红8ng,日落黄7ng，赤鲜红18ng，亮蓝26ng，当进样量相当0.025g时，检出浓度分别为0.2mg/Kg,0.16mg/Kg,0.24mg/Kg,0.32mg/Kg,0.28mg/Kg,0.72mg/Kg,0.72mg/Kg,1.04mg/Kg.第一法高效液相色谱法2 原理食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或掖-液分配法提取，制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。

3 试剂3.1 正己烷。

3.2 盐酸。

3.3 乙酸。

3.4 甲醇：经0.5um滤膜过滤。

3.5聚酰胺粉（尼龙6：过200目筛。

3.6 乙酸铵溶液（0.02mol/L）;称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL，溶解，经0.45um滤膜过滤。

3.7 氨水：量取氨水2Ml.加水100Ml.混匀。

3.8 氨水-乙酸铵溶液（0.02,mol/L）:称取氨水0.5mL，加乙酸铵溶液（0.02mol/L）至1000mL，混匀。

3.9 甲醇-甲酸（6+4）溶液：量取甲醇60mL，混匀。

3.10 柠檬酸溶液：称取20g柠檬酸，加水至100mL，溶解混匀。

3.11 无水乙醇-氨水-水（7+2+1）溶液：量取无水乙醇70mL，氨水20mL，水10mL，混匀。

3.12 三正辛胺正丁醇溶液（5％）：量取三正辛胺5mL，加正丁醇至100mL，混匀。

3.13 饱和硫酸钠溶液。

3.14 硫酸钠溶液（2g/L）。

3.15 pH6的水：水加柠檬酸溶液pH值到6。

3.16 合成着色剂标准溶液：准确称取按其纯度折算为100％质量的柠檬黄，日落黄，苋菜红，胭脂红,新红，赤鲜红，亮蓝，靛蓝各0.100g，置100mL容量瓶中，加Ph6水到刻度，配成水溶液（1.00mg/mL）。

液相色谱法测定食品中合成着色剂作者：***来源：《食品安全导刊·下》2024年第05期摘要：目的：建立一种液相色谱法测定食品中合成着色剂的方法。

方法：用乙醇氨水溶液提取食品中的合成着色剂，经固相萃取柱净化后，用液相色谱仪（配二極管阵列检测器）测定，外标法定量。

结果：11种合成着色剂在0.2～10.0 μg·mL-1线性关系良好，线性相关系数为0.999 4～1.000 0，加标回收率为94.2%～109.6%，相对标准偏差在0.55%～5.52%。

柠檬黄、喹啉黄、日落黄、胭脂红、新红和赤藓红的检出限均为0.5 mg·kg-1，定量限均为1.5 mg·kg-1；苋菜红、诱惑红、亮蓝、酸性红和靛蓝的检出限均为0.3 mg·kg-1，定量限均为1.0 mg·kg-1。

结论：该方法的重复性好、灵敏度高、实用性强，可以同时测定食品中多种合成着色剂的含量。

关键词：合成着色剂；液相色谱法；固相萃取Determination of Synthetic Colorants in Food by Liquid ChromatographyZHU Xiaolei（Guangdong Dongguan Quality Supervision & Testing Center， Dongguan 523000， China）Abstract： Objective： To establish a method for the determination of synthetic colorants in food by liquid chromatography. Method： The synthetic colorants in food were extracted with ethanol ammonia solution， purified by solid phase extraction column， determined by liquid chromatography （ with diode array detector ）， and quantified by external standard method. Result： The linear range of 11 synthetic colorants was 0.2～10.0 μg·mL-1， the linear correlation coefficient was 0.999 4～1.000 0， the recovery rate was 94.2%～109.6%， and the relative standard deviation was 0.55%～5.52%. The detection limits of tartrazine， quinoline yellow， sunset yellow， carmine， new red and erythrosine were 0.5 mg·kg-1， and the limits of quantification were 1.5 mg·kg-1. The limits of detection of amaranth， allura red， brilliant blue， acid red and indigo were 0.3 mg·kg-1， and the limits of quantitation were1.0 mg·kg-1. Conclusion： The method has good repeatability， high sensitivity and strong practicability， and can simultaneously determine the content of various synthetic colorants in food.Keywords： synthetic colorants; liquid chromatography; solid-phase extraction着色剂在食品加工过程中可以改善食品的口感和外观，但过量使用会对人们的健康造成不良影响。

食品中合成着色剂的测定食品安全检验手册33~35页1.原理食品中合成着色剂用聚酰胺粉吸附或液-液分配法提取，制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性与峰面积定量。

2.试剂（1）正己烷 分析纯。

（2）盐酸 分析纯。

（3）甲醇 经滤膜（0.45µm）过滤。

（4）乙酸。

（5）聚酰胺粉（尼龙6） 80目。

（6）乙酸铵溶液（0.02mol/L） 称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL，溶解，混匀后，经滤膜（0.45µm）过滤。

（7）氨水 量取氨水2mL，加水至100mL，混匀。

（8）甲醇+甲酸（6+4）溶液 量取甲醇60mL，甲酸40mL，混匀。

（9）柠檬酸溶液 称取20g柠檬酸（C6H8O7·H2O），加水至100mL，溶解混匀。

（10）无水乙醇+氨水+水（7+2+1）溶液量取无水乙醇70mL、氨水20mL、水10mL，混匀。

（11）三正辛胺正丁醇溶液（5%）量取三正辛胺5mL，加正丁醇至100mL，混匀。

（12）饱和硫酸钠溶液。

（13）pH6的水水加柠檬酸溶液调pH值到6。

（14）合成着色剂标准溶液准确称取柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、新红、赤藓红、诱惑红、亮蓝、靛蓝各0.1000g，置于100mL容量瓶中，加pH4水至刻度。

此溶液含着色剂1mg/mL。

（15）合成着色剂标准使用液：临用时取上述溶液2.0mL，加水稀释至100.0Ml，摇匀，配成每毫升相当20.0µg的合成着色剂。

然后稀释成2、4、6、8、10µg/ mL系列标准溶液。

3.仪器高效液相色谱仪，带紫外检测器，500nm波长。

4.测定方法（1）样品处理①橘子汁、果味水、果子露汽水等：称取20.0～40.0g，放入100mL烧杯中。

含二氧化碳样品加热驱除二氧化碳。

②配制酒类：称取20.0～40.0g，放入100mL烧杯中，加小碎瓷片数片，水浴加热驱除乙醇、加水30mL，温热溶解，若样品溶液pH值较高，用柠檬酸溶液调pH值到4左右。

食品中合成着色剂的测定摘要:食品中合成着色剂高效液相色谱的测定。

方法采用c18(10?%em,4.6mm??50mm)不锈钢色谱柱，流动相为乙酸铵+甲醇，流速1.0ml/min，检测波长254nm，柱温设为23℃，进样量20?%el。

本检测方法对gb/t5009.35-2003食品中合成着色剂的测定进一步细化，使用着色剂小柱代替gb/t5009.35-2003食品中合成着色剂的测定中色素提取，检测时间缩短，检测结果精确度提高，具有一定的实践指导作用。

关键词:食品合成着色剂1、前言食品中合成着色剂是一种已知的有害物质，其随食物被摄入人体内后,很快被肠道吸收。

由于着色剂在人体中具有累积作用,长期过量摄入直接危害到人们的健康特别是对少年儿童的健康危害更为严重，孩子的肝脏解毒和代谢功能都比较脆弱，如果摄入过多的人工合成色素，会加重肝脏及胃肠道的负担，干扰体内正常的代谢反应，出现不同程度的食欲不振、消化不良、腹痛、腹泻等症状2、原理样品经水溶解，通过活化的着色剂小柱吸附色素，用洗脱试剂洗脱，用高效液相色谱分离，紫外检测器检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。

3、试验部分3.1所用试剂3.1.1水：符合gb/t6682规定的一级水要求3.1.2 甲醇：色谱纯。

3.1.3 氨水：分析纯3.1.4乙酸铵溶液（0.02mol/l）：称取1.54g乙酸铵加水至1000ml 溶解，经0.45?%em滤膜过滤3.1.5标准品：柠檬黄、日落黄、胭脂红、苋菜红、亮蓝3.1.6氨化甲醇5%：95ml甲醇加5ml氨水3.2仪器与设备3.2.1高效液相色谱仪3.2.2色谱工作站3.2.3紫外检测器3.2.4 c18(10?%em,4.6mm??50mm)不锈钢色谱柱3.2.5固相萃取装置3.2.6着色剂小柱3.2.7氮吹仪3.2.8漩涡混合器3.2.9高速离心机3.3方法3.3.1合成着色剂标准溶液浓度的配制准确称取标准品着色剂各100mg,置于100 ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,该贮备液浓度1mg/ml。

食品中人工合成着色剂的测定摘要：在日常试验用HPLC测定食品品中人工合成着色剂的国家标准GB/T5009.35- 2003时，我们发现该方法测定高蛋白质油脂等固态样品的前处理方法以及梯度洗脱程序存在一定的不足，因此，对该方法的前处理以及梯度洗脱程序加以改进，使得样品前处理简便快捷，六种色素回收率均在90%以上，而且延长了色谱柱的寿命。

关键词：人工合成着色剂 HPLC 食品前处理Through daily test with HPLC determination food products in the artificial synthesis colors agent of national standard GB/T5009.35-2003， we found law determination high protein oil，solid samples of processing method and gradient wash program exists must of insufficient， therefore， on the method of processing and gradient wash program be improved， makes samples processing easy shortcut， six kind of pigment recovery are in 90% above， and extended the spectrum column of life人工合成着色剂作为一种添加剂广泛用于食品中，GB2760-2011对其使用有明确的限量标准，但在市场上却时有发现这些人工合成着色剂被滥用，如染色馒头，所以对它的检测监管是相当重要的，测定这些人工合成着色剂方法有高效液相色谱法、薄层色谱法等[1] ，但无论哪一种方法都涉及样品前处理。

国标法第一法是用HPLC测定合成着色剂，将食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性和峰面积比较进行定量[1] 。

浅谈食品检测中合成着色剂的测定方法俗话说“人是铁，饭是钢，一顿不吃饿得慌”，可见食品对于人类的重要性。

随着全球经济的高速发展，食品安全成了民众关心的大事，如何才能确保食品安全则成为热点问题，其中作为食品安全的一种监控手段，食品检测的重要性就在过程中凸显出来了。

食品中的着色剂的检测是食品检测中的一项重要检测项目，受到了相关部门的高度关注。

鉴于此，作者全面分析了食品检测中合成着色剂的检测方法，以期提高食品检测的效率，保障食品安全。

标签：食品检测；合成着色剂；测定方法与食品安全相对的就是食品安全危害，食品安全危害可以大致分为生物危害、化学危害和物理危害。

食品添加剂就是化学危害的一个重要来源。

按照国家食品添加剂的管理规定，对允许使用的添加剂按照规定量添加使用不会对人产生危害，但是对于在食品添加剂名单上明确规定不可以添加或是超量添加允许添加的添加剂，都会产生食品安全危害。

合成着色剂目前的使用范围广、用量大，长期过量摄入会对人体产生很大的危害。

但是要想对为数繁多的食品进行是否含有合成着色剂的检测，则需要采取适宜的测定方法，方可提高检测效率，提高监管力度和监管的有效性，从而打击违法添加有害物质的行为，保障人民的生命安全。

1 合成着色剂概述着色剂作为食品添加剂使用的主要作用就是改变食品的色彩，是一种相对传统的食品色彩调节方法。

根据市场调查分析，消费者在购买食品时，一般会考虑食品的色、香、味、形情况，同时，根据研究显示，食品的色彩对于人的食欲有刺激作用，可以勾起消费者的购买欲。

因此，食品生产商为了所生产食品的销量，在食品色彩上大下功夫，着色剂也就被广泛的应用开来。

近年来，国际国内的食品安全事故频发，其中不乏着色剂的滥用导致的食品安全事故。

事故频发导致了民众对于着色剂产生了怀疑与强力排斥，同时也受到了国家相关部门的关注与大力监督治理，在消费者的排斥与国家部门的监管下，着色剂滥用的情况得到了一定的遏制。

但是一些不法商家为了经济利益，不惜冒着触犯法律的风险，试图通过食品检测的漏洞来避免不法行径被发现。

一、编制目的为规范食品中合成着色剂的检验方法，编制本指导书。

二、适用范围本作业指导书规定了饮料、配置酒、硬糖、蜜饯、淀粉软糖、巧克力豆及着色糖衣制品中合成着色剂（不含铝色锭）的测定方法。

本作业指导适用于饮料、配制酒、硬糖、蜜饯、淀粉软糖、巧克力豆及着色糖衣制品中合成着色剂（不含铝色锭）的测定。

三、编制依据GB5009.35-2016《食品中合成做着色剂的测定》四、实验原理食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取，制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。

五、试剂和材料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1 试剂5.1.1甲醇（CH3OH):色谱纯。

5.1.2 正乙烷（C6H14）。

5.1.3 盐酸（HCl）。

5.1.4冰醋酸（CH3COOH）。

5.1.5 甲酸（HCOOH）5.1.6 乙酸铵（CH3COONH4）。

5.1.7柠檬酸（C6H8O7 〃H2O）。

5.1.8硫酸钠（Na2SO4）。

5.1.9 正乙醇（C4H10O）。

5.1.10 三正辛铵（C24H51N）。

5.1.11 无水乙醇(CH3CH2OH).5.1.12氨水（NH3〃H2O):含量20%-25%。

5.1.13 聚酰胺粉（尼龙6）：过200μm（目）筛。

5.2 试剂配置5.2.1 乙酸铵溶液( 0.02mo l/L):称取1.54g乙酸铵,加水至1000mL,溶解,经0.45μm微孔滤膜过滤。

5.2.2 氨水溶液:量取氨水2mL,加水至100mL,混匀。

5.2.3 甲醇-甲酸溶液( 6+4,体积比):量取甲醇60mL,甲酸40mL,混匀。

5.2.4柠檬酸溶液:称取20g柠檬酸,加水至100mL,溶解混匀。

5.2.5无水乙醇-氨水-水溶液(7+2+1,体积比):量取无水乙醇70mL、氨水溶液20mL、水10mL,混匀。

5.2.6 三正辛胺-正丁醇溶液:量取三正辛胺5mL,加正丁醇至100mL,混匀。

食品科学学‎院本科实验‎项目实验7 食品中着色‎剂的测定1 实验目的(1) 学习各类色‎素测定的原‎理与方法；(2) 掌握纸层析‎定性法与提‎纯色素的定‎量法。

2 实验原理聚酰胺是具‎有二极性的‎化合物，水溶性酸性‎染料在酸性‎条件下被聚‎酰胺吸附，而在碱性条‎件下解吸附‎，再用纸色谱‎法或薄层色‎谱法进行分‎离后与标准‎比较定性、定量。

3 试剂与仪器‎主要试剂：聚酰胺粉(尼龙6)、硫酸（1：10）、甲醇-甲酸溶液（6：4）、甲醇、20％柠檬酸溶液‎、10％钨酸钠溶液‎、石油醚、海砂、乙醇-氨溶液、50％乙醇溶液、硅胶G、盐酸（1：10）、5％氢氧钠溶液‎、碎瓷片、展开剂[a、正丁醇-无水乙醇-1％氨水(6：2：3)；b、正丁醇-吡啶-1％氨水(6：3：4)；c、甲乙酮-丙酮-水(7：3：3)；d、甲醇-乙二胺-氨水(10：3：2)；e、甲醇-氨水-乙醇(5：1：10)；f、2.5％柠檬酸钠-氨水-乙醇(8：1：2)。

]：供薄层色谱‎用、色素标准品‎（胭脂红；苋菜红；柠檬黄；靛蓝；日落黄；亮蓝：纯度均为6‎0％。

）。

主要仪器：分光光度计‎、微量注射器‎或色素吸管‎、展开槽（25×6×4cm）、层析缸、薄层板（5×20cm）、电吹风机、水泵。

4 操作与结果‎(1) 样品处理①果味水、果子露、汽水：吸取50.0毫升样品‎于100毫‎升烧杯中，汽水需加热‎驱除二氧化‎碳。

②配制酒：吸取100‎.0毫升样品‎于烧杯中，加碎瓷片数‎块，加热驱除乙‎醇。

③硬糖：蜜饯类，淀粉软糖：称取5.0或10.0克粉碎的‎样品，加30毫升‎水，温热溶解，若样液PH‎值较高，用20％柠檬酸溶液‎调至PH4‎左右。

④含蛋奶的样‎品a奶糖：称取10.0克粉碎均‎匀的样品，加30毫升‎乙醇-氨溶液溶解‎，置水浴上浓‎缩至约20‎毫升，立即用1：10硫酸调‎溶液至微酸‎隆再加1.0毫升1：l0硫酸，加1毫升l‎0％钨酸钠溶液‎，使蛋白质沉‎淀，过滤，用少量水洗‎涤，收集滤液。