【解析】(1)PCR技术可在体外大量扩增目的基因。
(2)图中质粒上有多个限制性核酸内切酶的切割位点,但用PstⅠ切割会破坏抗 生素抗性基因(标记基因),用KpnⅠ切割会破坏复制原点,用XbaⅠ切割会去除 终止子,用EcoRⅠ切割会破坏终止子,用HindⅢ切割会破坏启动子,为使获得的
BglB基因与质粒载体连接,为了防止目的基因和运载体自身环化,应该用两种限
4.与DNA有关的几种酶的比较:
种类
限制性核酸 内切酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 DNA(水解)酶 DNA解旋酶
项目 作用底物
作用部位
DNA分子
两个相邻脱氧核苷酸之间
DNA分子片段 两个相邻脱氧核苷酸之间
脱氧核苷酸 两个相邻脱氧核苷酸之间
DNA分子
两个相邻脱氧核苷酸之间
DNA分子
碱基对间的氢键
作用结果 形成粘性 末端(或平末端) 形成重组DNA分子 形成新的DNA分子 形成脱氧核苷酸 形成单链DNA分子
【解析】选D。过程①表示通过反转录法合成目的基因,该过程需要逆转录酶和 脱氧核糖核苷酸,A项错误;过程②需使用限制性核酸内切酶和DNA连接酶构建基 因表达载体,是基因工程的核心步骤,B项错误;过程③常用Ca2+处理大肠杆菌使 其成为易于吸收DNA的感受态细胞,C项错误;过程④可利用DNA分子杂交技术鉴 定CarE基因是否成功导入受体细胞,D项正确。
制酶切割,则BglB基因两端需分别含有NdeⅠ和BamHⅠ不同限制酶的识别序
列。
(3)将重组DNA分子导入受体细胞,为了促进该过程,应该用氯化钙处理大肠杆 菌,其目的是增加大肠杆菌细胞壁的通透性,使大肠杆菌处于感受态。 (4)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述构建好的表达载体后则获得了降解纤 维素的能力,这是因为转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶。