食用菌各级菌种的制作

勋业食用菌菌种制作工艺流程及各工序生产规程一：生产工艺流程培养基配制→分装→灭菌→冷却→接种→培养(检查)→成品二：生产规程0：母种使用玻璃试管和棉塞，试管18 mm×180 mm．1或20mm×200mm，棉主要使用梳棉，不应使用脱脂棉。

0：原种使用650 mL-750 ml，耐126℃高温的五色或近五色的玻璃茵种瓶，或850 ml耐126℃高温白色半透明符合《食品包装用聚乙稀成型品卫生标准》规定的塑料菌种瓶，或15cm×28cm 耐126℃高温符合《食品包装用聚乙烯成型品卫生标准》规定的聚丙烯塑料袋．各类容器部应使用棉塞，棉塞应符合规定；也可用能满足滤菌和透气要求的无棉塑料盖代替棉塞。

0：栽培种使用符合原种规定的容器，也可使用≤17 cm×35 cm耐126℃高溫符合《食品包装用聚乙烯成型品卫生标准》规定的聚丙烯塑料袋。

各类容器都应使用棉塞或无棉塑料盖，并符合原种规定。

0：母种常用培养甚及其配方培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)马铃薯200 g(用浸出汁)，葡萄糖20g，琼脂20g，水1000mL，PH值自然。

培养基(综台马铃薯葡萄糖琼脂培养基)马铃薯200g(用浸出汁)，葡萄糖20g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁o.5g，琼脂20g，水1000 mL，pH值自然。

0：生物制剂和天然材料类生物制剂如酵母粉和蛋白胨，天然材料如木屑、棉籽壳、麦麸等，要求新鲜、无虫、无螨、无霉、洁净；干燥。

0：净化工作台的消毒处理方法先用75％酒精或新洁尔灭溶液进行表面擦拭消毒，然后预净20min．0：培养期的检查各级菌种培养期间应定期检查，及时拣出不合格菌种．0:培养条件要求不同种类或不同品种应分区培养。

根据培养物的不同生长要求，给予其适宜的培养温度（多在室温20℃～24℃），保持空气相对湿度在75%以下，通风，避光。

0:灭菌效果的检查方法培养基配制后应在4h内进锅灭菌。

母种培养基灭菌0.11MPa～0.12MPa，30min。

菌种怎么制作，菌种保藏方法1、将土豆切成块，放入烧杯中煮半个多小时，煮好后过滤溶液备用。

2、将琼脂放入溶液中，然后重新将其烧开，琼脂完全溶化后继续煮一段时间。

3、煮好后将汁液分放至试管内，并用高压锅消毒杀菌，消毒后斜放试管，待凝固后开始接种。

4、用酒精对嫩蘑菇进行杀菌，并在无菌箱内将其切成小块，切好后可接种至琼脂基质上。

5、堵上试管口，将琼脂基质放入培养箱，长满菌丝后便可形成一级菌种。

一、菌种怎么制作1、一级菌种（1）向烧杯内放入切成块的土豆，然后煮30多分钟，煮好后过滤溶液备用。

（2）向溶液内放入琼脂，再将其烧开，待琼脂完全溶化后继续煮一段时间。

（3）煮好后，将汁液分放至试管，再用高压锅消毒杀菌。

消毒后将试管斜放，直到冷凉凝固后即可开始接种。

（4）用酒精对嫩蘑菇做杀菌处理，然后在无菌箱内切成小块，接种至琼脂基质上面。

（5）用塞子堵上试管口，再将琼脂基质放入培养箱内，待长满菌丝后即可形成一级菌种。

2、二级菌种（1）将煮熟的大豆和谷粒置于无菌的条件下晾干，再装入经过高温杀菌的玻璃瓶内。

（2）将瓶子封口，放入高压锅中，经高压灭菌后放在无菌室冷凉。

（3）将培养瓶放至无菌箱内，再放入一级菌种，用的小匙挖出黄豆大小的菌种接种入玻璃瓶。

（4）接种后要封口，再将玻璃瓶放到培养室中，待长满菌丝后即可备用。

3、三级菌种（1）制备方法与二级菌种基本一致，培养基可使用煮熟的麦粒、玉米粒及棉籽。

（2）三级菌种的菌丝长满后即可取出来培育，经历三级菌种的培育后可完全制成平菇菌。

二、菌种保藏方法1、斜面低温保藏法将菌种接种至适宜的固体斜面培养基上，待菌种充分生长后用油纸将棉塞部分包扎好，然后放入冰箱，温度控制在2-8°C即可。

2、甘油管保存法（1）将80%甘油用高压蒸汽做灭菌处理，再将菌种放置在斜面培养基上培养，用无菌水制成高浓度的菌悬液。

（2）将1毫升甘油与菌液混匀，使甘油的浓度达到10-30%，然后放在-70°C的环境中冻存。

食用菌菌种制作技术作者：夏宏志李希政路晓玉来源：《农业与技术》2017年第23期摘要：本文简要说明了菌种培养基的分类，从消毒、灭菌、菌种制作、菌种培养、菌种污染原因分析上进行了论述，并对菌种老化与退化标准，菌种质量标准，菌种质量鉴别标准上进行了论述，给菌种质量判别提供了依据。

关键词：食用菌；菌种；培养基；菌种制作中图分类号：S646 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.201712320091 菌种的级别划分1.1 母种母种又称一级种，试管种，是食用菌的原始出发菌株。

母种的来源：通过组织分离法或孢子分离法自己选育而成；向有信誉的科研单位购买（引种必须作出菇试验，验证考核后方能用于大面积生产）。

母种转接一般以1支母种可转10～20支，在25℃培养，6～22d长满（因品种而异），母种必须纯度高，活力强。

1.2 原种原种又称二级种。

是由母种扩繁而来。

一般1支母种可转接5～6瓶，25℃培养30d左右长满。

原种要求必须纯度高，活力强，营养丰富。

1.3 生产种生产种又称三级种，栽培种。

是由原种扩繁而来，直接用于生产的菌种[1]。

一般一瓶原种可转接50～60瓶。

25℃下培养20～30d能长满瓶。

一级菌种培养基配方（适用于平菇、香菇、金针菇、木耳、滑菇等大多数食用菌）：土豆200g、葡萄糖20g、琼脂20g、蛋白胨2g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁2g、维生素B1或B2 6片、水1000mL。

1.4 二、三级种配方粉碎玉米芯70%、玉米面30%，另外加石膏1%、白灰2%、磷酸二氢钾0.3%、硫酸镁0.2%、多菌灵0.1%。

1.5 粮食菌种制作选用干净无霉变小麦粒或玉米粒、高粱粒，用清水浸泡12h以上，捞出用水煮，煮至熟而不烂、不开花为准，捞出控干水分，加入石膏粉2%～3%，有条件加入30%木屑拌匀，装点滴瓶较好。

优点：菌丝生长健壮有力，可最大限度提高产量，生长速度较常规配方缩短50%以上时间。

缺点：制作较繁琐，容易污染。

食用菌菌种的制作与培养一、母种制作（一）母种培养基制作1.母种培养基的种类母种是菌种生产的关键，要求纯度高，不能混生杂菌，同时母种的菌丝体较为纤细，分解培养料的能力较弱。

因此，母种菌丝体需要培养在营养丰富，易被吸收，表面光滑易于鉴别有无杂菌感染的琼脂培养基上。

适合母种菌丝生长的琼脂培养基种类很多，常用的有下列几种：（1）马铃薯一葡萄糖一琼脂培养基马铃薯（去皮）200克琼脂20克葡萄糖（或蔗糖）20克水1000毫升（2）麦芽汁一葡萄糖一琼脂培养基干麦芽250克琼脂15〜20克葡萄糖（或蔗糖）10克水 1000毫升（3）胡萝卜一葡萄糖一琼脂培养基胡萝卜100克琼脂20克葡萄糖（或蔗糖）20克水 1000毫升（4）蘑菇汁一葡萄糖一琼脂培养基（适用于蘑菇）鲜蘑菇250克琼脂20克葡萄糖（或蔗糖）20克水 1000毫升（5）蛋白胨一葡萄糖一琼脂培养基蛋白胨2克葡萄糖20克磷酸氢二钾2克维生素B1 （硫胺素）0.5毫克磷酸二氢钾0.5克琼脂18克硫酸镁0.5克水1000毫升2.母种培养基的制法以最常用的马铃薯一葡萄糖一琼脂培养基的制法为例介绍如下：先将马铃薯去皮，洗涤，切成小块加水1000毫升，煮沸15〜20分钟，取双层纱布过滤，取其滤液，加入琼脂和葡萄糖（或蔗糖），用文火加热使其溶化，最后补足水分，使其容量仍为1000 毫升。

趁热分装于试管中，装量约为试管长度的1/5左右，装管时要注意不使培养基沾污试管壁和试管口。

试管口塞上大小合适的棉花塞，塞入试管口内的长度为棉塞总长的3/5。

塞好棉塞后，每10 支作一捆，用牛皮纸包扎好后，置铁丝网笼中，然后进行高压灭菌。

如作为抱子分离用，则将培养基分装于三角瓶或培养皿中，然后高压灭菌。

3.母种培养基的消毒灭菌：母种培养基通常用高压蒸汽灭菌锅来消毒灭菌，常用的高压蒸汽灭菌锅有直式、卧式和手提式三种。

将配制好后的母种培养基移入上述任何一种高压蒸汽灭菌锅中，在15公斤/平方厘米压力下，灭菌30分钟。

[基础]食用菌菌种制作技术图文1图文食用菌菌种制作技术一、菌种生产程序母种繁殖栽培种示意图菌种生产程序，通常分为母种、原种和栽培种3个层次，也就是通常所说的一级、二级、三级菌种。

其中母种的分离选育技术性强，一般由专业制种单位制作。

而原种和栽培种的制作则比较简单。

下面介绍各级菌种的制作技术。

二、母种的分离选育母种可以采用人工选择方式分离培育母种，具体步骤与操作方法如下：1、采集种源采集种源用具选择有八成熟、朵形圆正、肉质肥厚、无病虫害的优良菇体作为种源。

采集1～2朵装入灭菌纸袋，带回接种箱进行消毒。

2、母种培养基配制母种培养基常用的是琼脂培养基又叫PDA培养基，常用配方为：马铃薯200～250g，琼脂15～20g，葡萄糖20～25g，清水1000ml。

也可以加硫酸镁1～1.5g，维生素B1微量，磷酸二氢钾2～3g。

先将马铃薯洗净去皮，切成薄片，置于烧杯（或铝锅）内加水煮沸30分钟，捞起后用4层纱布过滤，取汁。

然后将琼脂加入汁内，边加热边搅拌，让琼脂充分溶化。

再将葡萄糖等加入，并补水至1000ml。

稍煮几分钟后，同样用4层纱布过滤，取其汁液。

将汁液趁热装入玻璃试管内，装至管长的1/5。

管口用棉花塞塞紧。

或将汁液装入玻璃三角瓶内，装量为20ml。

然后置于高压锅内，在98～108千帕/cm2的压力下灭菌30分钟左右。

灭菌后及时取出，趁热将试管斜排于桌上，冷却后即成为固体斜面培养基。

3、母种分离方法①、孢子弹射法将种菇表面消毒，吸干水分后，将菇体悬挂于装有琼脂培养基的三角瓶内，让菇体内的孢子自然散落在培养基上萌发菌丝。

也可以剪取一小块菇体，贴附在试管斜面培养基表面，让孢子散落在培养基上萌发菌丝，即能获得母种。

②、组织分离法将消毒过的种菇，在接种箱内用手从菇柄处对半掰开，或用刀片切开，使菇体形成对开。

在菌盖和菌柄交界处或菌褶处，用接种刀切取一小块菇体，然后纵切成5mm×10mm的小薄片，用接种针挑取1块薄片，接入斜面培养基的中央，每支试管接种一小块薄片，待其萌发菌丝，即可得到母种。

食用菌栽培技术一、菌种制备菌种制备包括母种、原种、栽培种三级菌种。

1、母种培养基的制作。

常用的主要有以下几种：（1）马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基（PDA培养基）。

马铃薯（去皮）200克，葡萄糖20克，琼脂18～20克，水1000毫升。

（2）猴头菌培养基。

黄豆芽250克加水1000毫升，煮沸15～20分钟，过滤取汁，补足失水至1000毫升。

加入葡萄糖30克、蛋白胨5克、酵母膏1克、琼脂20克，加热溶化，然后分装。

适用于猴头母种培养。

（3）玉米粉培养基。

玉米粉30克左右，葡萄糖20克，琼脂20克，磷酸二氢钾1克，硫酸镁0.5克、蛋白胨0.5克。

玉米粉煮至70℃左右保持1小时，然后加上其余的成分。

2、原种培养基的制作。

常用配方：（1）棉耔壳培养基。

棉耔壳100斤，麦麸15斤，石膏粉1.5斤，料水比1:1.1～1.2。

该培养基适合于大多数食用菌品种。

（2）木屑培养基。

干木屑100斤，麦麸20斤，蔗糖1斤，石膏粉1.5斤，硫酸镁0.5斤，料水比按1：1.1～1.2。

该培养基适合于银耳、黑木耳、猴头、金针菇、平菇等原种培养。

（3）粪草培养基。

稻草63斤，玉米粉4斤，大豆粉3斤，干牛粪25斤，过磷酸钙3斤，硫酸镁2斤，料水比1：1.1～1.3。

适合于双孢菇原种培养。

其中牛粪也可以鸡粪等等畜粪来代替，只是所加的量根据其所含氮量而定。

（4）谷粒培养基。

选新鲜、无虫、无霉变的小麦、（大麦、谷子、高粱、玉米粒均可），淘洗干净，按1：2.0比例加水，煮沸30分钟，闷4～6个小时，沥去水分，标准是“煮透晾干”，再加入干料1%的石膏粉，0.5%的石灰拌匀、装瓶。

适用于平菇、双孢菇原种培养。

该种培养基发菌快，在时间紧迫的情况下采用此培养基可以大大的节省时间。

3、培养基灭菌。

（1）高压蒸汽灭菌法。

主要用于母种，灭菌的条件是0.11～0.12千帕。

原种灭菌一般是0.12千帕，1.5小时。

（2）常压蒸汽灭菌。

主要用于原种和栽培种。

灭菌的条件一般是灭菌器内达到100℃后保持8～10个小时。

食用菌原种的制作方法食用菌原种是培育高品质食用菌的开始，其制作方法关系到菌种的品质和生长效果。

下面将介绍10种关于食用菌原种的制作方法，并详细讲解每种方法的具体操作步骤、注意事项和优缺点。

1. 伏击法制种法伏击法制种法是一种常见的食用菌原种制作方法，其操作简单，适用于多种食用菌的原种制作。

具体方法如下：步骤一：准备原料。

选一定数量的食用菌菌盖和菌蒂，尽量选用种粒外形完整、表面干净、无病害的菌盖和菌蒂。

步骤二：将菌盖和菌蒂归并，放到70%酒精中清洗30秒，然后取出沥干。

步骤三：将菌盖和菌蒂放到滤纸上，擦干表面水分，放到蒸汽锅中蒸10分钟，杀灭病菌和杂菌。

步骤四：将蒸好的菌盖和菌蒂拿出来，再次擦干表面水分，放到培养基上。

步骤五：放到恒温摇床上培养，震荡180rpm，28℃，恒温培养7-14天，即可获得食用菌原种。

优点：操作简单，适用范围广，菌株易保存。

缺点：成活率较低，制作时间较长。

2. 含砂蒸法制种法含砂蒸法制种法是应用含石英砂的菌种培养基来制作食用菌原种，能提高种粒触蒸面积，提高出菌率和菌株的品质。

具体方法如下：步骤一：准备含砂菌种培养基。

将玉米粉、蔗糖、石英砂和蒸馏水按一定比例混合，制作含砂菌种培养基。

步骤二：准备原料。

选一定数量的食用菌菌盖和菌蒂，按照比例加入含砂菌种培养基中。

步骤三：将含菌培养基放在琼脂板上，在30℃下反复震动震荡搅拌。

步骤四：将培养好的固体菌种放在75%-80%的相对湿度内，保持湿润并置于通风且恒温保持在22℃下。

步骤五：待菌体生长到一定大小时，再将其移植到适宜的菌床中。

优点：出菌率高，菌株品质好。

缺点：制备过程中需掌握好配方和稠度。

3. 傅里叶红外辐射制种法傅里叶红外辐射制种法是利用电极辐射灯产生的热量来使制种容器内的培养液升降温，低温使菌体沉积在液表面，高温则使其下沉到液底，实现制种的目的。

具体方法如下：步骤一：将食用菌种子与蔓茎切片、米糠混合后，加入到恒温恒湿的发酵箱内。

食用菌菌种制备技术菌种：原意是指孢子(相当于植物的种子) ，但在实际生产中，常将经过人工培养的纯菌丝体连同培养基质一同叫做菌种。

菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。

母种（一级）：将纯菌丝体或孢子在试管培养基中繁殖而成。

可以繁殖原种，也适宜菌种保藏。

原种（二级）：母种菌丝在固体培养基上繁殖而成。

这一过程增强菌丝对培养环境的适应性，又起到扩繁的作用。

原种可以直接出菇。

栽培种（三级）：由原种扩繁而成。

主要是为了扩繁，为生产提供足够的菌种。

菌种制备：也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。

以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

种子制备包括孢子制备和菌丝体制备（见图）。

其中(1)～(4)为孢子制备过程。

保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，无菌操作挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天(或较长时间)。

所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子，对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基。

将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。

将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入4℃冰箱中备用。

一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

放线菌孢子的培养基大多是采用麸皮或豌豆浸出液、牛肉膏及无机盐与琼脂制成的。

将斜面孢子接入扩大的扁瓶孢子培养基中，于28～37℃培养5～14天。

所获得的大量孢子可直接作为种子罐(6)的种子。

如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶（5）液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。

种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。

其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆等），及无机盐(如磷酸盐)等。

作为发酵罐(7)的种子应是生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。