大鼠血糖实验汇总
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实验激素对正常和糖尿病大鼠血糖和血脂的影响一、实验目的:掌握血糖血脂测定的原理及方法;了解糖尿病大鼠血糖和血脂的代谢变化;了解激素对血糖浓度的影响;了解血浆脂蛋白分类、主要功能以及各类脂蛋白的临床意义。
二、实验原理:本实验通过给大鼠注射STZ破坏β细胞功能,进而构建糖尿病大鼠模型用于观察血糖和血脂的代谢变化。
血糖测定主要应用葡萄糖氧化酶法,养品种的葡萄糖被葡萄糖氧化酶氧化为葡萄糖酸,并释放过氧化氢。
过氧化氢在过氧化物酶作用下分解为水和氧,并使4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物。
同理,甘油三酯和胆固醇在相应氧化酶的作用下也释放出过氧化氢,进而发生类似的呈色反应。
三、实验步骤:1.取成年SD大鼠,分成对照组和糖尿病组。
对糖尿病组腹腔注射柠檬酸液配置的链脲霉素,对照组则注射等体积的柠檬酸溶液。
一周后在进行血糖和血脂的检测。
2.将两组动物再次分为两组,一组大鼠腹腔注射胰岛素,0.75UI/kg,分别于注射前、注射30min后取血0.2-0.3ml,标明:注前组、胰组。
另一组大鼠皮下注射肾上腺素,0.1%肾上腺素0.2mg/kg,30min后采血0.2-0.3ml,标明:肾组。
3.按照书上表格进行三种方法的测定。
三、实验结果:指标control STZpre int adr pre int adrglucose 3.02 0.87 3.51 1.48 TG 0.61 0.46 0.41 1TC 1.28 1.28 2.47 2.45glucose 3.906 4.627TG 0.592 0.214TC 1.499 1.171glucose 2.54 1.97 15.69 10.55 TG 1.9 2.25 3.26 3.29TC 8.27 1.2 4.02 5.27glucose 3.015 7.194 5.195 18.64 TG 0.703 2.442 1.978 1.95 TC 1.504 8.634 5.018 5.179 glucose 1.253 0.683 3.721 5.923 TG 1.386 0.859 2.622 7.458TC 1.136 0.926 1.046 8.278glucose 3.15 1.5 TG 0.565 0.484TC 1.35 0.76glucose 5.03 3.53 TG 2.88 2.54TC 5.17 14.16glucose 5.08 1.75TG 7.75 1.26TC 4.47 1.72四、实验思考:1.How does insulin regulate blood glucose?胰岛素如何调节血糖?体内血糖的产生和利用,受胰岛素和胰高血糖素等激素的调节。
一、实验背景随着人们生活水平的提高,糖尿病的发病率逐年上升。
为了预防和治疗糖尿病,研究低糖饮食对机体的影响具有重要意义。
本研究旨在通过低糖刺激实验,探讨低糖饮食对机体代谢、胰岛素分泌和糖耐量等方面的影响。
二、实验目的1. 观察低糖饮食对机体代谢的影响。
2. 评估低糖饮食对胰岛素分泌的影响。
3. 分析低糖饮食对糖耐量的作用。
三、实验方法1. 实验动物:选取健康成年雄性SD大鼠,体重180-220g,随机分为低糖组和高糖组,每组10只。
2. 实验分组:低糖组采用低糖饲料喂养,高糖组采用高糖饲料喂养。
3. 实验周期:低糖组和高糖组均喂养4周。
4. 实验指标:(1)体重:每周称量一次大鼠体重,观察低糖饮食对大鼠体重的影响。
(2)血糖:采用葡萄糖氧化酶法检测大鼠空腹血糖和口服葡萄糖耐量试验(OGTT)后的血糖水平。
(3)胰岛素:采用放射免疫法检测大鼠空腹胰岛素水平。
(4)血脂:采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。
5. 数据处理:采用SPSS 22.0软件进行统计分析,计量资料以(±s)表示,组间比较采用t检验。
四、实验结果1. 体重:低糖组大鼠体重较高糖组显著降低(P<0.05),表明低糖饮食对大鼠体重具有降低作用。
2. 血糖:低糖组大鼠空腹血糖水平较高糖组显著降低(P<0.05),OGTT后的血糖水平也显著低于高糖组(P<0.05),表明低糖饮食对大鼠血糖具有调节作用。
3. 胰岛素:低糖组大鼠空腹胰岛素水平较高糖组显著升高(P<0.05),表明低糖饮食可以促进胰岛素分泌。
4. 血脂:低糖组大鼠血清TC、TG和LDL-C水平均显著低于高糖组(P<0.05),表明低糖饮食对大鼠血脂具有调节作用。
五、实验结论1. 低糖饮食可以降低大鼠体重,表明低糖饮食具有减肥作用。
2. 低糖饮食可以降低大鼠血糖,表明低糖饮食具有调节血糖作用。
辅助降血糖作用检验方法1动物实验1、1动物选择选用健康成年动物,常用小鼠(25±2g)或大鼠(180±20g),单一性别,大鼠每组812只、小鼠每组1015只。
1、2材料1、2、1试剂四氧嘧啶(或链脲霉素)小鼠3550mg/kg、bw、iv(100160mg/kg、bw、ip)、大鼠5080mg/kg、bw、iv(200250mg/kg、bw、ip)用新鲜配制。
血溏测定试纸或试剂盒。
1、2、2仪器血糖仪、全自动生化仪、721B型分光光度计。
1、3剂量分组及受试样品给予时间设1个溶剂对照组与3个受试样品剂量组,根据人体每日每公斤体重推荐摄入量,小鼠扩大10倍作为其中一个剂量组(大鼠扩大5倍),根据受试样品得具体情况另设两个剂量组。
受试样品给予时间原则上不少于30天,也可根据实验需要自行设定期限。
1、4实验方法1、4、1降低空腹血糖实验1、4、1、1高血糖模型动物1、4、1、1、1原理四氧嘧啶(或链脲霉素)就是一种β细胞毒剂,可选择性地损伤多种动物得胰岛β细胞,造成胰岛素分泌低下引起实验性糖尿病。
1、4、1、1、2造型动物禁食24小时后,给予四氧嘧啶造型,57天后禁食35小时,测血糖,血糖值1025mmol/L为高血糖模型成功动物。
1、4、1、1、3操作步骤选高血糖模型动物按禁食35小时得血糖水平分组,随机选1个模型对照组与3个剂量组(组间差不大于1、1mmol/L)。
剂量组给予不同浓度受试样品,模型对照组给予溶剂,连续30天,测空腹血糖值(禁食同实验前),比较各组动物血糖值及血糖降低得绝对值(即实验前后血糖得差值)。
1、4、1、2正常动物选健康成年动物按禁食35小时得血糖水平分组,随机选1个对照组与1个受试样品组(高剂量)。
余操作同1、4、1、1、3。
1、4、2糖耐量实验高血糖模型动物禁食35小时,剂量组给予不同浓度受试样品,模型对照组给予同体积溶剂,1520分钟后经口给予葡萄糖2、0g/kg或医用淀粉352、0g/kg,测定给葡萄糖后0、0、5、2小时得血糖值或人医用淀粉后0、1、2小时得血糖值,观察模型对照组与受试样品组给葡萄糖或医用淀粉后各时间点血糖曲线下面积得变化。
大鼠血糖测定方法引言:血糖是人体能量代谢的重要指标之一,血糖水平的变化与多种疾病的发展密切相关。
因此,准确测定大鼠血糖水平对于研究人类疾病模型以及药物研发具有重要意义。
本文将介绍几种常用的大鼠血糖测定方法。
一、口服葡萄糖耐量试验(OGTT)口服葡萄糖耐量试验是一种常用的测定大鼠胰岛功能和糖代谢的方法。
实验操作步骤如下:1. 饲养大鼠至试验前12小时内禁食,但可以饮水。
2. 在试验开始前,取大鼠空腹血样测定胰岛素和葡萄糖基线水平。
3. 给予大鼠口服葡萄糖溶液(2g/kg),记录给药时间点为0分钟。
4. 在给药后的30、60、90和120分钟,分别采集大鼠血样,测定血糖水平。
5. 同时测定各时点的胰岛素水平。
6. 通过分析血糖曲线和胰岛素水平变化,评估大鼠胰岛功能和糖代谢状态。
二、静脉注射葡萄糖耐量试验(IVGTT)静脉注射葡萄糖耐量试验是一种常用的测定大鼠胰岛素敏感性和胰岛功能的方法。
实验操作步骤如下:1. 饲养大鼠至试验前12小时内禁食,但可以饮水。
2. 在试验开始前,取大鼠空腹血样测定胰岛素和葡萄糖基线水平。
3. 通过尾静脉注射葡萄糖溶液(1g/kg),记录给药时间点为0分钟。
4. 在给药后的1、3、5、7和10分钟,分别采集大鼠血样,测定血糖水平。
5. 同时测定各时点的胰岛素水平。
6. 通过分析血糖曲线和胰岛素水平变化,评估大鼠胰岛素敏感性和胰岛功能状态。
三、糖化血红蛋白测定法(HbA1c)糖化血红蛋白测定法是一种常用的长期血糖控制指标的测定方法。
实验操作步骤如下:1. 取大鼠全血样本。
2. 提取血红蛋白,去除干扰物质。
3. 通过高效液相色谱法(HPLC)或离子交换色谱法分离和测定糖化血红蛋白(HbA1c)的百分比。
4. 根据HbA1c的百分比,评估大鼠长期血糖控制状态。
四、血糖仪法血糖仪法是一种常用的快速测定大鼠血糖水平的方法。
实验操作步骤如下:1. 取大鼠尾静脉血样或耳朵尖血样。
2. 使用血糖仪将血样放入试纸上,等待血糖仪读数。
实验大鼠血糖正常范围的估算
血糖被认为是一种营养,它与动物内环境中和整体健康状态有关。
因此,了解小鼠血糖正常范围的研究对预防疾病和改善健康非常重要。
小鼠血糖正常范围受许多因素的影响,包括年龄、性别、营养状
况和有无保健药物的摄入。
一般而言,小鼠的血糖水平应在4.4~
7.8mmol/L之间,高于7.8mmol/L时则被认为是血糖过高,而低于
4.4mmol/L的则被认为血糖过低。
此外,血糖正常范围也会随着小鼠的情绪和健康状况而发生变化。
此外,实际血糖水平也会受到实验条件影响。
为了保证血糖检测
准确性,工作人员应定期训练小鼠来控制血糖,检查供试生物的身心
健康状况,并确保实验设施条件良好。
此外,正确使用细胞内分析仪、灵敏血糖仪等仪器设备也是血糖
检测精确性的关键。
未经实验室验证的血糖检测仪器在结果可靠性方
面很可能出现偏差,因此有责任心的研究人员应定期校验仪器,以确
保可靠测量数据。
综上所述,为了确定小鼠血糖正常范围,应该充分考虑小鼠的体质、环境因素、实验条件以及正确使用仪器等因素。
此外,应定期检
查小鼠的健康状况,以便尽早发现血糖异常的症状,并及时采取相应
的措施。
糖尿病大鼠指标实验流程1、末次灌胃后,大鼠禁食不禁水12h,与麻醉前进行称重,行腹腔注射3%戊巴比妥钠,0.3ml/100g2、腹主动脉取血,留取全血标本。
3、取肝、脾、肾、胃、心脏及脑。
4、称肝、脾、肾、胃、心脏及脑组织,并分装各个组织,放入-80℃冻存。
其中肝组织剪取1g肝脏,送至肝均浆;肝10%甲醛固定做HE染色,每组5只;肝4%戊二醛固定做电镜,每组一只;5、小肠10%甲醛固定做HE染色,每组5只;小肠4%戊二醛固定做粪便电镜,每组1只;其余肠组织-80℃冻存。
6、肝;制成肝均浆,1g肝脏加入9ml冰生理盐水,制成肝均浆液,离心后,取上清液,于-80℃冻存。
7、全血标本静置30min后,进行离心,分离血清,血清和血浆均放入-80℃冻存。
检测指标:1、肝脏组织1.1HE染色观察肝脏组织的病理学改变。
1.2透射电镜观察肝脏超微结构变化1.3电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)1.4试剂盒测肝均浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、ROS活性氧水平1.5检测肝脏组织中Western blot、NF-kB、COX-2表达情况,计算其阳性表达率2、血清(血浆)2.1全自动化分析仪测谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、谷氨转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶TG2.2酶联免疫吸附法检测血浆中肠结合脂肪酸蛋白(FABp2)、D-乳酸(D-LA)及二胺氧化酶(DAO)水平评价大鼠大肠粘膜损伤2.3试剂盒测血浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、4-HNE(羟基壬烯醛)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)评价大鼠氧化应激水平2.4酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血浆中α肿瘤坏死因子(TNF α)、肿瘤坏死因子β(TNF-β)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、细胞间粘附因子-1(ICAM-1)浓度3、肠道菌群采用实时荧光定量PCR技术对粪便大肠杆菌、粪肠球菌、双歧杆菌和嗜酸乳杆菌、脆弱拟杆菌和柔嫩梭菌16SrDNA V3 可变区进行定量分析4肾脏组织4.1超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)及内皮素(ET-1)和肿瘤坏死因子( TNF-α)的影响。