海洋细菌thalassobacter stemotrophicu纤维素酶的产酶特性研究开题报告

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杭州湾海域产纤维素酶海洋真菌的分离筛选及鉴定

杭州湾海域产纤维素酶海洋真菌的分离筛选及鉴定曲均革;金甚益;绕静【摘要】[目的]筛选产纤维素酶的海洋真菌资源.[方法]从杭州湾海域采集海水和海泥(沙)等样品,采用海水PDA培养基进行富集培养,然后在羧甲基纤维素钠培养基上进行真菌分离纯化,采用刚果红染色法筛选产酶菌株,并对其中纤维素酶活性较高的菌株进行了26S rDNA ITS扩增及序列测定.[结果]共筛选到72株产纤维素酶的海洋真菌,两株高产菌株的同源序列比对结果分别与Penicillium funiculosum和Pseudocercosporella fraxini的同源性高达100％和99％.[结论]该研究为纤维素酶高产菌株的改造和定向进化奠定了资源基础%[Objective] The aim was to isolate and identify the cellulate producing marine fungi. [ Method j Thr seawater and sea mud (sand) were collected from Hangzhou Bay, PDA seawaler medium was applied for enriched culture. The medium containing CMC-Na was ap-plied for isolation and purification of marine fungi. And then the cellulose producing strains were screened by the CMC/Congo Red method. The strains with high cellulase activity were amplified by 26S rDNA ITS and then determined by sequencing, [ Result] A total of 72 strains of marine fungi which could produce cellulase were screened from Hangzhou Hay. The two high yield cellulose producing strains had 100% and 99% homology with Penicilliuni funwulosum and Pseudocercosporella fraxini, respectively. [ Conclusion ] The research laid a good foundation for the selection and directed evolution of highly cellulase-producing strains.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2012(040)016【总页数】3页(P8816-8817,8822)【关键词】纤维素酶;海洋真菌;分离;筛选;鉴定【作者】曲均革;金甚益;绕静【作者单位】浙江医药高等专科学校生物与食品系,浙江宁波315100;浙江医药高等专科学校生物与食品系,浙江宁波315100;浙江医药高等专科学校生物与食品系,浙江宁波315100【正文语种】中文【中图分类】S188;Q938纤维素是地球上最丰富的可再生资源，我国是一个农业大国，作物秸秆(如稻草、麦秆等)的年产量非常巨大，目前绝大多数只是作为燃料燃烧，造成了资源的极大浪费［1］。

海洋微生物产纤维素酶及其应用研究进展

海洋微生物产纤维素酶及其应用研究进展韩笑;闫培生;史翠娟;杨树燕;李永鹏;邹雪平【摘要】Cellulose is the most ancient, abundant and inexhaustible natural polymer resources.Cellulase widely exists in the organism including bacteria,fungi and animals.Microbial cellulase has been widely reported and utilized in industries of food, medicine, feed, detergent, textile, pulp and paper,etc..The ocean is a huge pool of resources,and cellulose-producing marine microorganisms have attracted a lot of attention.This paper briefly summarized the research progress of populations and source of marine microorganisms producing cellulase and genetic screening, the enzymatic properties and application fields of cellulase produced by marine microorganisms.Prospects of study on marine microbial cellulase were also discussed.%纤维素是地球上最古老、最丰富的天然高分子，是天然可再生资源。

纤维素酶广泛存在于自然界的生物体中，细菌、真菌和动物体内都能产生纤维素酶。

产纤维素酶海洋菌株的分离及培养条件研究

产纤维素酶海洋菌株的分离及培养条件研究
臧路平
【期刊名称】《现代食品科技》
【年(卷),期】2009(025)010
【摘要】从烟台近海处采集样品,用羧甲基纤维素钠刚果红培养基筛选得到一株高产纤维素酶的菌株,初步鉴定为革兰氏阴性芽饱杆菌.用羧甲基纤维素酶活测定法,确定了最佳酶促反应温度,并研究了培养时间、pH值,碳源、氮源等培养条件对菌体产酶的影响.结果显示,最适酶促反应温度为40℃,培养时间为54h,最适pH值为7.5,最佳碳源为羧甲基纤维素钠,最佳生长氮源为酵母膏,最佳产酶氮源为硫酸铵.与陆地纤维素酶产生菌相比,海洋纤维素产生菌所产纤维素酶具有低温催化的优势.
【总页数】4页(P1170-1173)
【作者】臧路平
【作者单位】华南理工大学轻工与食品学院广东广州 5100640
【正文语种】中文
【中图分类】Q935
【相关文献】
1.产耐热性纤维素酶菌株的分离·鉴定及其酶学性质研究 [J], 杨丽娜;杨明明;龚月生
2.产纤维素酶菌株的分离、鉴定及其酶学性质研究 [J], 杨柳;魏兆军;朱武军;叶明
3.产纤维素酶真菌菌株的分离及其降解作用的研究 [J], 陈朝辉;汪亚媛;刘胜贵
4.产低温纤维素酶菌株的分离鉴定及产酶特征研究 [J], 王继莲;陈芸;李明源;库尔
班江·艾买提
5.青藏高原高寒湿地产纤维素酶菌株的分离、鉴定和产酶的初步研究 [J], 何特;李妮;黄小菲;杨志荣;张杰
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产纤维素酶海洋微生物的筛选及其产酶优化与酶学性质初步研究

产纤维素酶海洋微生物的筛选及其产酶优化与酶学性质初步研究纤维素是地球上存量最为巨大的生物可再生资源,使用其生产能源物质对人类未来发展的可持续性具有重要意义。

纤维素酶能够将纤维素催化水解转化成葡萄糖,可为后续生产生物燃料提供原料。

产纤维素酶的生物具有广泛性和多样性,微生物、动物甚至植物都有能产生纤维素酶的种属。

纤维素酶的应用十分广泛,在食品、畜牧、纺织、造纸等行业都有很好的应用。

海洋环境的特殊性使得海洋微生物能够产生具有新特性的酶。

对海洋微生物资源的开发与利用可以极大的丰富微生物酶资源库。

本研究从舟山市桃花岛附近海域采集的样本中筛选出一株能够产纤维素酶的放线菌。

根据菌落形态、生理生化特征和16S基因序列的比对确定该菌是密旋链霉菌Streptomycespactum。

对该菌的液体发酵产酶进行了优化研究。

发现该菌发酵的最适碳源和氮源分别为麸皮和NH4NO3,然后对培养基组分进行显著性分析,发现麸皮、K2HPO4、吐温-80是影响产酶的显著因素。

对这三个显著因素进行了响应面分析,根据分析结果确定了最佳的培养基成分。

同时又结合遗传算法通过BP人工神经网络方法优化了培养基组分。

最后基于最佳配比培养基研究确定的发酵条件为:发酵温度30℃,接种量5%,摇瓶装液量70mL/150mL,转速200r/min,起始pH7,在168小时酶活达到最高值为0.455 U/mL,酶活提高了 97.82%。

对该菌液体发酵所得的酶液进行了浓缩、硫酸铵分级沉淀、脱盐处理后得到初步纯化的纤维素酶液。

对该酶液的CMC酶活性质的研究表明显示,该酶最适反应温度为60℃,在pH6-7有最高的酶活性,一定浓度(≤0.6%)的NaCl对酶活有提高作用,在NaCl浓度为2%的情况下酶活比不含NaCl的情况下提高了1.19倍;50℃以下酶的稳定性良好;低浓度(5mmol/L)的K+、Mg2+、Zn2+对酶活有促进作用,Fe2+、Cu2+、Co2+、Mn2+有较强的抑制酶活作用,高浓度(10mmol/L)时K+、Mg2+对酶活有促进作用,Fe2+、Cu2+、Co2+、Mn2+对酶有抑制作用,该酶具有良好的耐碱性、耐热性和耐盐性,在工业应用领域有一定的应用前景。

海洋微生物活性代谢产物研究进展

海洋微生物活性代谢产物研究进展摘要：由于海洋环境的特殊性，从海洋微生物中筛选生物活性物质具有广阔的开发应用前景。

本文综述了近年来产生活性物质海洋微生物代谢产物的研究进展情况。

关键词：海洋微生物；活性物质；代谢产物；筛选方法Research progress on secondary metabolites of marine microorganism(1. Shaoyang Environmental Protection Research Institute, Shaoyang422000,China 2. Faculty of Materials and Metallurgical Engineering, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650093,China;) ABSTRACT：It has powerful potential to produce bioactive substances from marine microbe owing to the special ocean condition.This artice summarized the development of study on marine microbe bioactive substances.KEY WORDS：marine microorganism; bioactive substances; secondary metabolites; method of screening一、前言海洋是地球上最大的生态环境，具有丰富的环境资源，占有约80%的地球生物。

相比陆地微生物，海洋微生物是地球上尚未充分开发的自然环境。

经过几十年的开发，现在要从陆地微生物找到新的活性物质的几率正逐渐下降，并且开发的重复率几近95%，转向从海洋微生物环境中寻找新的活性物质不失为一个很好的解决方法，还有众多类似的现象迫切需要大力开发海洋微生物[1,2]。

来自海洋的酶

来自海洋的酶海洋低温酶的种类近年来，海洋低温酶得到了广泛的研究，发现了许多具有重要价值的酶，或是新的酶系，或具有新的特性(表1)，但大多与实际应用有一定的距离。

几种重要的海洋低温酶如下：(1)核酸酶：从海洋中获得的核酸酶主要有DNA 聚合酶、DNA 修饰酶(连接酶、限制性内切酶)、RNA 聚合酶等。

美国科学家Lundberg(1995)等从嗜热古细菌激烈热球菌(Pyrococcus furiosus)中纯化了一种耐高温的DNA 聚合酶，该酶有多聚酶和校对的双重功能，应用该酶可以扩增出高保真的PCR 产物，有良好的应用潜力。

(2)蛋白酶：各国在蛋白酶领域都有较多的研究，其中以低温蛋白酶的研究最多。

特别是日本在这方面作了大量的工作。

1997年日本Fukuda K．等从海洋细菌Vibrio sp．中获得了新型碱性金属内肽酶，该蛋白酶的最适反应pH 9．5～10．0，45 C保温20 min酶失活一半，55 C则全部失活，NaC1存在下具有最大酶活性。

1995年日本理化所的Hamamoto T．等报道了海洋嗜冷细菌Vibrio sp．Strain 5709的蛋白酶。

该菌株最适生长温度为20 C，0 C也能生长，所产生的蛋白酶，最适pH 为8．5～9．0(40 C)，45℃保温20 min，酶完全失活，0‘C，10 C和20 C分别保持16 ，32 和45 9／6的活力。

该酶为丝氨酸型。

1994年的日本专利报道了一种新的耐热蛋白酶，最适pH 为9．5～10．0，50～55 C，加5 9／6 NaC1呈现最大活性，分子量为44 000 Dr，可降解贝类的足丝，应用于海洋污染处理。

我国的海洋蛋白酶研究也有较大的进展。

中国科学院微生物研究所邱秀宝(1991)报道筛选到了一种海洋中性蛋白酶。

另外中国水产科学研究院黄海水产研究所筛选到产低温蛋白酶的海洋细菌，初步鉴定为黄杆菌属新种，此低温蛋白酶的生产已达到产业化。

该酶由256个氨基酸组成，分子量为33 000 Dr，等电点pI 为9．45，米氏常数Km一5×10 mmol／L；酶的最适作用pH一9．5～ 10．5，最适作用温度3O C，具有一定的抗氧化稳定性。

海洋青霉菌IMB17-009抗菌活性次级代谢产物研究

DOI: 10.3969/j.issn.1673-713X.2021.03.001·论著·海洋青霉菌IMB17-009抗菌活性次级代谢产物研究李芳*，李娇*，李莎莎，郝晓萌，关艳，刘玉凤，王保国，甘茂罗【摘要】目的分离鉴定从红树林沉积物分离的海洋青霉菌IMB17-009 产生的抗菌活性次级代谢产物。

方法利用中压柱色谱、凝胶柱色谱和HPLC 等多种色谱分离方法对菌株固体发酵产物进行分离纯化，通过紫外可见光谱、质谱和核磁共振谱对化合物进行结构鉴定，采用微量液体稀释法评价化合物对革兰氏阳性菌、阴性菌和真菌的抗菌活性。

结果从青霉菌IMB17-009 固体发酵产物中分离获得11 个化合物，其结构分别确定为meleagrin（1）、glandicoline B（2）、roquefortine C（3）、2-(2-(1H-吲哚-3-基)乙酰基)-L-苯基丙氨酸（4）、citreohybridonol（5）、andrastin A（6）、andrastin B（7）、macrophorin A（8）、purpurogemutantin（9）、desferricoprogen（10）和deferriferrichrome（11）。

结论化合物1、3、8、9对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌或弯孢霉菌、交链孢菌、镰孢菌和白念珠菌等真菌具有一定的抗菌活性，最低抑菌浓度为8 ~ 64 μg/ml。

化合物4为一新的天然产物。

【关键词】海洋微生物；青霉属；抗菌；抗真菌；分离纯化中国医药生物技术，2021，16(3):193-200近年来，多重耐药细菌、尤其是革兰氏阴性耐药菌的不断出现和快速扩散对人类健康构成了严重的威胁[1]。

然而，进入21 世纪以来，新型抗菌药物研发速度明显减慢。

研发新型、有效的抗耐药菌药物成为全世界急需解决的重要问题[2]。

微生物是抗菌药物发现的最重要来源。

海洋由于高盐、高压、低光照、低温等特殊生境条件，使得海洋微生物可能产生与陆地微生物结构不同的产物，如生物碱、萜类、聚酮类等，这些产物不仅结构新颖而且活性多样，有望成为药物先导化合物的重要来源[3-5]。

一株产酯酶海洋细菌的筛选及酯酶性质的研究

（ｒｕｙｉ，ｌｅｎｄｃｔｒ（ｈｄｍｉｅＢ）ＴｅｅｅｚｍａｉｐｏｅｔｓｒｔｄｅｎｅｒｓｌＴｉｔｒＯｉ）ａｄｉｉａｏｓＲｏａｎ．ｈｎｔｎｙｔｒｐｒｅｅｓｉｄａｄｔｅｕｔｂｎｖｎｈｃｉｗｅｕｈｓ
面发生了较大的改观（３１。同时，微生物酯酶与其他来源的酯酶相比具有更广泛的ｐ温度、物的特异性．１１．样品．１１
取渤海湾海区的深海海泥和海水，用玻璃珠将其
立体选择性其作为生物催化剂，，可催化不同类型底物的水解和合成反应，已被广泛应用于医药、化工、食品等行业。洋生态环境复杂，海高盐度、高压力、低温及特殊的光照条件可能使海洋微生物产生不同于陆地来源的特殊次级代谢产物，海洋微生物可作为获得活
ＱｏｇＷＡＧＪｈｉＥＳｕｈｎＷＡＧＨｎＬａ，ＨＮＬ— ｅＩｎ，Ｎ－ｕ，－ｏｇＹｉＹｈ，Ｎａ，ＩｉＳＡｉｗｎＪｎ
（ｏｄＣｌｇｆｌｎＰｌｔｃｎｃＵｉｅｓｙＬａｎｎｙＬｂｒｔｒｆｏｄＢｏｅｈｏｏｙＤａｉｎＩ３，ｉｏｉｇＦｏｏｌｅｏｉｏｙｅｈｉｎｖｒｉ，ｉｏｉｇＫｅａｏａｏｙｏｏｉｔｅｎｌｇ，ｌａ０４Ｌａｎｎ，ｅＤａａｔＦ１６
ＩｏａｉｎｏｎＥｓｅａｅｐｒｄｕｉａｉｃｌｕｎｄＳｕｄｎｓｌｔｏｆａｔｒｓ－ｏｃｎｇＭｒｎｅＢａｉｌｓａｔｙｏＣｈａａｔｒｚｔｏｆＥｓｅａｅｒｃｅｉａｉｎｏｔｒｓ

海洋真菌活性代谢产物的研究进展

44 2011, Vol. 32, No. 增刊食品科学海洋真菌活性代谢产物的研究进展王劲松*，易庆平，向会耀(荆楚理工学院生物工程学院，湖北荆门 448000)摘　要：海洋微生物是天然生物活性物质的丰富源泉，从海洋微生物中寻找和开发活性代谢产物是当今天然药物化学的研究热点，海洋真菌活性代谢产物是海洋微生物代谢产物的重要分支之一。

本文对海洋真菌的特点、培养条件以及目前在国内外发现的主要生物活性代谢产物进行了介绍，这将为今后海洋真菌活性代谢产物的研究起到参考作用。

关键词：海洋真菌；微生物代谢产物；生物活性化合物Advance in Bioactive Metabolites from Marine FungusWang Jinsong,Yi Qingping(Department of Bio-Engineering，JingChu College of Technology, Jingmen, Hubei 448000)Abstract: The metabolites of marine microorganisms are rich sources for screening new leads compounds. The present study focuses on extracting and developing bioactive metabolites from marine microorganisms, the research on marine fungus are also becoming hot-spot. The review introduces the characterization, culture condition and bioactive metabolites at the country and oversea about marine fungus, to have the reference for the future research of bioactive metabolites.Key words: marine fungus; microorganism metabolites; bioactive compounds 中图分类号：TS2文献标识码：A文章编号：1002-6630(2011)增刊1-0044-03前　言自1929年弗莱明从真菌中发现青霉素以来，微生物活性代谢产物成了药物的丰富源泉。

海洋细菌Alteromonas产生的蛋白酶抑制剂Marinostatin

海洋细菌Alteromonas产生的蛋白酶抑制剂Marinostatin 张庆文
【期刊名称】《国外医药：抗生素分册》
【年(卷),期】1995(016)003
【摘要】蛋白酶及其抑制剂的生理过程已逐步被阐明了,因此阐明两者相互作用的机制的重要性大增。

另一方面艾滋病治疗是当今的重要课题,如何创制艾滋病病毒所具有的羧肽酶的酶抑制剂在加紧摸索中。

从陆栖生物中至今已获得了巨大数量蛋白质(肽)性质的蛋白酶抑制剂,虽然作为蛋白质它们在构造上有相同性,但按照其基本结构仍能分为8个种类。

从海洋微生物来源的蛋白质性的蛋白酶抑制剂至今才只有marinostatin。

【总页数】2页(P228-229)
【作者】张庆文
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】TQ465.92
【相关文献】
1.小单孢菌FIM99468产生的弹性蛋白酶抑制剂Ⅰ.菌种分类、发酵、提取和生物学活性 [J],
2.南海海洋细菌 Pseudomonas sp.产生的一种抗肿瘤蓝色素 [J], 温露;袁保红;李厚金;林永成;陈荣礼;周世宁
3.蛋白酶抑制剂可刺激产生分子伴侣Hsp70协助多肽正确折叠 [J],
4.海洋细菌产生的多不饱和脂肪酸 [J], 边际;林学政
5.海洋细菌B-9987菌株产生的抑菌物质及对几种植物病原真菌的作用 [J], 田黎;顾振芳;陈杰;黄乐平;田玲
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产碱性纤维素酶海洋细菌的筛选、鉴定及酶学性质研究

产碱性纤维素酶海洋细菌的筛选、鉴定及酶学性质研究徐庆强;张志明;王延明;卓跞;殷丽莎;杜宗军【期刊名称】《海洋科学》【年(卷),期】2009(033)007【摘要】Using CMC plate screening method,a marine strain QM11 that can produce alkaline cellulase is isolated from the seawater of Qingdao coast.According to the 16S rDNA analysis,the strain belongs to the Cytophaga fucicola.Studies of its biological characteristics have shown that the optimal growth temperature is 27 ℃,and the growth temperature range is between 4℃and 48℃,which indicates it iS a cold-resistant bacterium.Media of pH7.0～8.0 and 3.0%NaC1 are the most suitable for the growth and enzyme production.The optimal temperature for QM11 producing alkaline cellulase is 40℃.The best reacting pH is 9.0.and the strain has a high enzyme activity and a good stability in the basic conditions.Studies also show that Mn2+ and Fe3+ could stimulate the enzyme reaction.while Cu2+ and Pb2+ inhibit the reaction.%用CMC平板筛选方法,从青岛近海海域海水中分离出一株产碱性纤维素酶的海洋菌株QM11,经16S rDNA鉴定,该菌株为Cytophaga fucicola.对该菌的生物学特性研究表明,其最适生长温度为27℃,生长温度范围为4～48℃,为耐冷菌;在pH7.0～8.0、含3.0%NaC1的培养基条件下,最适宜菌株生长和产酶;QM11所产碱性纤维素酶最适反应温度为40℃,最适反应pH为9.0,在碱性条件下具有较高的酶活性和较好的稳定性.Mn2+、Fe3+对酶反应具有促进作用,Cu2+、Pb2+对酶反应具有抑制作用.【总页数】5页(P1-5)【作者】徐庆强;张志明;王延明;卓跞;殷丽莎;杜宗军【作者单位】山东大学威海分校,海洋学院,山东,威海,264209;山东大学威海分校,海洋学院,山东,威海,264209;山东大学威海分校,海洋学院,山东,威海,264209;山东大学威海分校,海洋学院,山东,威海,264209;山东大学威海分校,海洋学院,山东,威海,264209;山东大学威海分校,海洋学院,山东,威海,264209【正文语种】中文【中图分类】Q93-3【相关文献】1.产碱性纤维素酶真菌的筛选鉴定及酶学性质研究 [J], 曾青兰2.海洋细菌Bacillus sp. HN07的分离鉴定及所产碱性纤维素酶性质研究 [J], 徐庆强;王延明;张志明;卓跞;殷丽莎;郭琳;杜宗军3.产碱性纤维素酶菌株WS-135的筛选及酶学性质研究 [J], 钱娟娟;王克芬;刘胜利;王帅;王兴吉;刘文龙4.产几丁质酶海洋细菌Dyadobacter sp.CZW019的筛选、鉴定及酶学性质研究[J], 丁志雯;刘耀东;黄志发;程钰;杨光;侯晓月;刘姝;房耀维5.产几丁质酶海洋细菌 Dyadobacter sp. CZW019的筛选、鉴定及酶学性质研究[J], 丁志雯;刘耀东;黄志发;程钰;杨光;侯晓月;刘姝;房耀维因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

海洋微生物纤维素酶及半纤维素酶基因克隆与表达研究进展

海洋微生物纤维素酶及半纤维素酶基因克隆与表达研究进展刘杰凤;马超;王春;董宏坡【摘要】海洋极端酶因在极端环境中具有更高的酶活性及更好的稳定性而具有重要的理论价值和工业应用前景.由于海洋极端微生物培养条件苛刻,难以作为工业生产菌使用.采用基因工程技术,用常用的宿主表达极端酶基因,是开发海洋微生物酶的主要研究内容.随着海洋微生物极端酶的研究开发,对海洋微生物纤维素酶、半纤维素酶的研究也逐渐受到学者们的关注,相关研究取得了较大进展.综述海洋微生物纤维素酶、半纤维素酶的基因克隆与表达的国内外研究现状.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2012(000)006【总页数】7页(P36-42)【关键词】海洋微生物;纤维素酶;半纤维素酶;极端酶;基因克隆与表达【作者】刘杰凤;马超;王春;董宏坡【作者单位】广东石油化工学院生物工程系,茂名525000;广东石油化工学院生物工程系,茂名525000;广东石油化工学院生物工程系,茂名525000;广东石油化工学院生物工程系,茂名525000【正文语种】中文随着对海洋微生物及其酶研究的深入，人们发现海洋微生物酶具有极端酶的特性，如具有显著的耐压、耐碱、耐盐、耐冷或耐热等特性，以及在极端环境中具有更高的酶活性，因而它具有重要的工业应用潜力［1］。

海洋极端微生物的工业应用酶已经成为濒海国家海洋生物技术的重要领域。

近年来，海洋极端微生物纤维素酶、半纤维素酶的研究开发也逐渐受到学者们的关注，中国、日本、韩国、美国和意大利等多个国家的学者相继展开了这方面的研究工作，获得不少具有极端酶特性的海洋微生物纤维素酶、半纤维素酶新酶源［2,3］，其中一些新酶源的极端酶基因通过基因重组技术在大肠杆菌中得以活性表达。

由于海洋微生物难培养的特点，因而通过基因工程手段使海洋微生物极端酶基因在常见宿主中得以高效表达显得尤其重要。

本文在概述纤维素酶与半纤维素酶相关性的基础上，将从基因结构及表达产物特性上综述国内外海洋微生物纤维素酶、半纤维素酶的基因克隆与表达研究现状。

产纤维素酶海洋细菌的筛选和酶学性质的初步研究

（．台大学海洋学院，１烟山东烟台２４０；．６０５２中国科学院烟台海岸带研究所，山东烟台２４０）６０３
摘要：从病烂的海洋植物中分离到一株高产纤维素酶的菌株Ｔ１，兰氏阴性，Ｘ－２革经鉴定
为噬纤维茵属（ｅｕｐａａｓ．中的一个种．ＣＵｌｈｇ）ｏｐ该菌株在温度２５℃ 、培养基起始ｐ．Ｈ８０条件下培养５６ｈ产生碱性纤维素酶活力高达３４８Ｕｍ．５．／Ｌ酶学性质初步研究显示，Ｘ一２Ｔ１
作者简介：唐志红（９４）女，１７一，山东武城人，士，博副教授，研究方向：海洋生物活性洋细菌的筛选和酶学性质的初步研究等产
３５０
恒温水浴锅，海金桥科技仪器厂；Ｒ－４电上Ａ１０１子天平，克斯国际贸易上海有限公司；２Ｅ型奥７２可见分光光度计，光谱仪器有限公司；Ｄ－上海ＴＬ５
基平板中加入适量１ｍ／Ｌ的刚果红溶液染色１ｓｍ
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ｈ弃去染液，，用适量１ｍｌＬ的ＮＣ溶液，ｏ／ａ１洗涤ｌｈ若细菌产生纤维素酶，，则在菌落的周围会出现清晰的水解圈．选取产生透明圈的菌株为初筛菌
种，将所选菌株进行发酵复筛，分离纯化．
蒸馏水１００ｍｐ＝７５；酵培养基：分同０Ｌ，Ｈ．发成
初筛培养基，不含琼脂．ＹＱＬ一０Ｉ立式压力蒸汽灭菌器，海Ｘ —Ｓ５Ｓ型上博讯实业有限公司医疗设备厂；ＺＷ－ＤＫ４型电子

深海微生物来源细胞色素P450酶与天然产物生物合成

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众等:深海微生物来源细胞色素 P450酶与天然产物生物合成
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究,本课题组先后撰写了多篇 P450 酶与天然产物生
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催化机制[7,22];系统概述了 P450 酶与微生物药物创
计和改造、改善其药学性质、产生具有更好成药性的
“非天然”天然产物提供支持[11-12].
一般而言,微生物天然产物的生物合成主要分为
个阶段:
3
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环境摄取获得天然产物合成所需的骨架原料、能量和
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多出色的综述总结[21,24],本课题组长期从事 P450 酶

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毕业论文开题报告
生物工程
海洋细菌thalassobacter stemotrophicu纤维素酶的产酶特性研
究
一、选题的背景与意义
纤维素是高等植物细胞壁的主要组成成分，并且是自然界中含量最丰富的多聚糖类物质，地球上每年光合作用可产生大于100 亿吨的植物干物质，其中一半以上是纤维素和半纤维素。

纤维素酶是一类能够将纤维素降解为葡萄糖的多组分酶系的总称，属于糖苷水解酶，传统上被分为3 类组分：内切葡聚糖酶（endo-1,4-β-D-glucanase, EC 3.2.1.4）、外切葡聚糖酶（exo-l,4-β-D-glucanase，EC 3.2.1.91）、β- 葡萄糖苷酶（β-l,4-D -glucosidase，EC 3.2.1.21）[3]。

这三种酶协同作用，分解纤维素产生寡糖和纤维二糖，最终水解产物为葡萄糖。

纤维素酶在医药、日用化工、食品发酵、废水处理、工业洗涤、中草药提取、以及畜牧饲料等领域都有广泛的应用。

以往纤维素分解菌的研究多集中在真菌，而对细菌的研究很少见诸报道。

纤维素酶在食品工业中的应用
（1）果实和蔬菜加工：用纤维素酶进行果蔬处理可使植物组织软化膨松, 能提高可消化性并改良口感，降低生产成本。

（2）油料作物加工：酶处理法代替有机溶剂法, 一方面可以提高油的产量和质量; 另一方面, 控制酶反应条件, 使生产加工在较温和的条件下进行, 可以避免剧烈条件对产品质量的影响，不仅能提高主产物的产量,还能减少副产物的生成和降低废物处理费用
（3）茶叶加工：将纤维素酶加入砖茶中,缩短渥堆时间, 减少有效成分的损失, 提高水浸出物和可溶性糖的含量, 改善砖茶的品质及发展香气
酒精生产：使用纤维素酶,可同时将淀粉和纤维素转化为糖, 原料利用率提高,再经酵母分解全部转化为酒精,发酵过滤性好, 发酵时间缩短, 出酒率提高3%～5%, 且酒体质量纯正, 淀粉和纤维素利
用率高达90%, 还可降低醪液的黏度(降低2～4 倍)。

利用纤维素酶进行酒精浓醪发酵, 前景也十分看好。

（4）啤酒生产：将纤维素酶应用于啤酒工业的麦芽生产中, 可增加麦粒溶解性, 加快发芽, 减少糖化液中β- 葡萄糖含量, 改进过滤性能
食醋生产：在食醋酿造过程中, 将纤维素酶与糖化酶混合使用,可明显提高原料利用率和出品率。

（5）酱油生产：酱油的天然酿造除了用蛋白酶、淀粉酶等各种酶作用的方法, 在入池发酵时加入纤维素酶, 可使大豆类等原料的细胞膜膨胀软化破坏, 使包藏在细胞中的蛋白质、碳水化合物释放,
这样就可以缩短酿造时间, 成品酱油的氨基酸含量可提高12% , 糖分提高18% , 色泽好, 且不需要外加糖色。

此外在酱油糟利用上也有效果,
纤维素酶在饲料工业中的应用
（6）制备低纤维饲料：饲料酶制剂的制作，使用饲料纤维素酶制剂, 可以促进动物的消化吸收, 大大提高动物对饲料的利用率。

（7）植物纤维原料酶水解生产饲料酵母：纤维素酶法水解替代酸水解用于植物原料生产饲料酵母是必然趋势。

（8）纤维素酶在纺织工业中的应用
在纺织业中生物酶的应用范围较广, 已在纤维改性, 真丝脱胶, 染整的退浆、精练、整理加工等方面有所应用, 生物酶具有可降解性, 可以对织物进行可控的整理。

由细菌所产生的纤维素酶一般最适pH 为中性至偏碱性，近20 年来，随着中性纤维素酶和碱性纤维素酶在棉织品水洗整理工艺及洗涤剂工业中的成功应用，细菌纤维素酶制剂已显示出良好的应用前景。

因此，细菌纤维素酶的研究与开发已成为研究的热点
本工作意义：优化产酶工艺，为深入研究和推广应用奠定基础
二、研究的基本内容与拟解决的主要问题：
1、研究碳源、氮源、培养温度、培养基初始pH、盐度等对生长及产酶的影响
2、研究温度、pH、金属离子等对纤维素酶活力和稳定性的影响
3、确定最佳产酶工艺
三、研究的方法与技术路线：
1、酶活测定方法：3，5-二硝基水杨酸法（DNS）
2、测定产酶菌株的生长与产酶曲线，确定最佳产酶时间
3、考察不同碳源、氮源、培养温度、培养基初始pH、盐度条件下菌株的生长及产酶情
况
4、考察不同温度、pH、金属离子等条件下的酶活和稳定性
5、用单因素优化到的最佳条件组合进行培养，验证菌株生长及产酶效果
四、研究的总体安排与进度：
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及鉴定张丹, 许景钢, 路伟明, 李淑芹( 东北农业大学资源与环境学院, 哈尔滨150030)。