地衣芽孢杆菌发酵培养基的优化

高产纳豆激酶地衣芽孢杆菌工程菌全合成培养基优化赵新宇;陈杨阳;陈敬帮;蔡冬波;魏雪团【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2016(037)007【摘要】以产纳豆激酶的地衣芽孢杆菌基因工程菌BL10 (pP43SNT-SsacC)为出发菌株,开展其全合成培养基的发酵优化研究.通过单因素试验和正交试验优化了全合成培养基成分,获得了最优的培养基组成(g/L):葡萄糖30、NaNO330、谷氨酸钠20、柠檬酸钠15、MgSO4·7H2O 0.5、K2HPO4·3H2O 1.5、CaCl20.5,pH 7.2.在优化的全合成培养基中,纳豆激酶最高酶活力达到25.59 FU/mL,相比于初始培养基发酵活性(4.27 FU/mL),提高了5倍.对比分析了全合成培养基和半合成培养基的发酵产物,结果表明,全合成培养基可显著提高纳豆激酶的纯度,与半合成培养基相比,纳豆激酶比活力提高了2倍.本研究获得了纳豆激酶的全合成培养基成分,显著提高了纳豆激酶发酵活性,并进一步提高了纳豆激酶发酵纯度.【总页数】6页(P140-145)【作者】赵新宇;陈杨阳;陈敬帮;蔡冬波;魏雪团【作者单位】华中农业大学食品科学技术学院,湖北武汉 430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,湖北武汉 430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,湖北武汉 430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,湖北武汉430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,湖北武汉 430070;华中农业大学食品科学技术学院,湖北武汉 430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,湖北武汉 430070【正文语种】中文【中图分类】Q812【相关文献】1.地衣芽胞杆菌工程菌高产纳豆激酶的发酵罐工艺优化及中试放大 [J], 祝亚娇;宋嘉宾;陈杨阳;孙炳刚;陈敬帮;魏雪团2.地衣芽孢杆菌YTDY_01高产芽孢的培养基优化 [J], 解顺昌[1,2];刘扬科;胡国春;成鹏;路广亮;李林;3.高产地衣芽孢杆菌LB8培养基的优化研究 [J], 张晓晴;闵钟熳4.产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌发酵条件的\r响应面优化 [J], 田莉;卢轶男;朱建;张佑红5.具群体感应淬灭作用地衣芽孢杆菌T-1株培养基及发酵条件的优化 [J], 童文涛; 陈彪; 彭孟凡; 赵祯; 肖翎; 宋增福; 张庆华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

地衣芽孢杆菌在营养肉汤中生长条件优化作者：丁康宁，张梦洁，张艾珈，张旭来源：《畜牧兽医科学》 2019年第18期丁康宁，张梦洁，张艾珈，张旭（金陵科技学院，南京 210038）摘要：地衣芽孢杆菌有调节动物肠道内微生态平衡、增强机体的抵抗力、保护动物健康等重要的作用。

试验研究了NaCl质量分数、pH值和温度对营养肉汤培养基中地衣芽孢杆菌生长状态的影响。

结果表明：地衣芽孢杆菌在营养肉汤中的最佳生长条件为，NaCl质量分数范围为1%，pH值为8.0，最适生长温度为37 ℃。

关键词：地衣芽孢杆菌；营养肉汤；生长条件中图分类号：TQ464文献标识码：Bdoi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.18.0060 引言地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）是一种常见的革兰氏阳性菌。

该菌能产生多种生物活性物质，包括多糖、蛋白质、非肽类物质等，它们能促进饲料中营养素降解，提高饲料利用率[1]。

此外地衣芽孢杆菌还能产生多种活性酶，这些酶可以促使细胞营养物质的释放，消除饲料中的抗营养物质[2]。

在不良环境中，地衣芽孢杆菌可以形成芽孢，经受颗粒饲料加工和储存中一系列恶劣环境。

因此，地衣芽孢杆菌被我国农业部 2003 年 318 号公告《饲料添加剂品种目录》批准使用为饲料级菌株[3]。

试验研究了地衣芽孢杆菌在营养肉汤培养基中不同温度、不同NaCl质量分数以及不同pH值条件下的生长特性，探索地衣芽孢杆菌的最优生长条件，可以为更好的筛选地衣芽孢杆菌益生菌，研发益生菌制剂提供依据。

1 材料1.1 试剂营养肉汤培养基、营养琼脂培养基为杭州百思生物科技有限公司产品。

蛋白胨、牛肉浸膏、NaCl、HCl、NaOH、琼脂等为国药集团化学试剂有限公司产品。

1.2 试验菌株地衣芽孢杆菌菌种为本实验室保存，分离于60日龄樱桃谷鸭的小肠。

2 方法2.1 制备种子液从保存菌种的斜面培养基上挑取菌落，接种于营养琼脂培养基，37 ℃培养24 h。

地衣芽孢杆菌活化方法一、地衣芽孢杆菌的概况地衣芽孢杆菌是一种革兰氏阳性杆菌，能够产生芽孢，能够抵抗较高温度和低温度，对pH的适应能力也很强。

地衣芽孢杆菌广泛存在于土壤、河流、湖泊、经常消毒的食品包装纸上、食品加工厂等环境中，对环境和人体健康具有一定的影响。

地衣芽孢杆菌主要通过形成芽孢的方式来在恶劣环境中生存，当环境条件再度适宜时，芽孢会迅速萌发成为活跃的细菌细胞，进行繁殖。

地衣芽孢杆菌在生物防治、有机肥料生产、酶制剂生产等方面发挥着巨大作用，因此，地衣芽孢杆菌的活化方法变得尤为重要。

二、地衣芽孢杆菌活化的必要性地衣芽孢杆菌作为一种益生菌，在农业、饲料、水产养殖、环保等诸多领域有着广泛的应用前景。

但作为一种生物制剂，其存活能力和活性都会受到环境的限制，因此需要对其进行活化处理，以提高其活性和生物效果，从而增强其应用价值。

地衣芽孢杆菌在商业化生产过程中，会受到很多因素的影响，比如适宜的培养基、培养条件、发酵时间等因素，这些因素都会对地衣芽孢杆菌的活性产生影响。

通过合理的活化方法，可以有效提高地衣芽孢杆菌的活性和生物效果，使其在商业应用中更具竞争力。

三、地衣芽孢杆菌活化方法地衣芽孢杆菌的活化方法主要包括培养基优化、发酵条件优化、生长调节剂、基因工程等多种方式。

下面对这些方法进行详细介绍：1. 培养基优化培养基是影响地衣芽孢杆菌生长和活化的重要因素之一。

通过优化培养基的成分和比例，可以提高地衣芽孢杆菌的生长速度和代谢活性，从而增加其活性和生物效果。

常用的培养基成分包括碳源、氮源、磷源、微量元素、生长因子等。

在培养基中添加适量的有机物质以及一些可以促进地衣芽孢杆菌生长的元素，如氨基酸、维生素等，可以有效提高地衣芽孢杆菌的活性。

此外，还可以通过添加一些促进细菌生长和代谢的有机酸、氨基酸和细胞生长因子等来优化培养基成分，进一步提高地衣芽孢杆菌的活性和生物效果。

例如，研究表明在培养基中添加一定比例的蔗糖和脲，有助于地衣芽孢杆菌的生长和代谢，从而提高其活性。

地衣芽孢杆菌活化方法
1.菌种取出：
-从超低温冰箱中取出保存的地衣芽孢杆菌菌种，通常为冻干粉或者以斜面形式保存的菌株。

2.无菌操作：
-在无菌条件下，使用接种环或接种针将菌种接入到适宜的培养基上。

例如，可以将菌种接种到无菌斜面培养基上。

3.恢复培养：
-将接种了菌种的斜面置于恒温培养箱中进行活化，温度通常设定在37℃左右，培养时间一般为24小时，使菌体从休眠状态恢复至生长活跃状态。

4.液体活化培养（如适用）：
-对于需要大量菌液的情况，可能还需进一步将斜面上活化的菌种转接到液体培养基中，在适宜温度和时间内进行扩大培养，如采用含有红糖等碳源以及必要营养成分的液体培养基，并保证充足的氧气供应。

5.条件优化：
-根据具体应用需求和菌株特性，可能还需要调整活化过程中的条件，如有的资料提到按照一定的比例添加红糖和水进行浸泡，增加溶解氧并利于菌种的复苏与增殖。

6.环境因素控制：
-确保环境温度、湿度以及光照等条件适合地衣芽孢杆菌的生长，例如在晴天上午9-11点进行操作，利用自然光合作用产生的氧气有利于某些需氧型芽孢杆菌繁殖。

微生物发酵培养基的优化方法微生物发酵培养基是指为微生物提供合适的生长环境、碳源、氮源以及其他必需营养物质的复杂液体或固体介质。

优化培养基是通过调整培养基成分来提高微生物的生长速度和产物产量，保证产物质量和生产效率。

本文将介绍一些优化微生物发酵培养基的方法。

1.确定微生物的需求不同的微生物对培养基的成分有着不同的要求，包括碳源、氮源、矿物质以及其他生长因子等。

因此，首先需要明确所需微生物对营养物质的需求，有助于指导后续优化工作。

2.碳源优化3.氮源优化氮源对微生物生长和代谢至关重要，可以通过改变氮源种类和浓度来优化培养基。

常用的氮源包括氨基酸、尿素、硝酸盐等。

可以试验不同的氮源和浓度，根据微生物生长状况和产物产量来确定最佳氮源。

4.矿物质优化5.添加生长因子一些微生物需要特定的生长因子才能生长和产生产物，如一些维生素、辅酶等。

了解微生物所需的生长因子并添加到培养基中，可以提高微生物的生长速度和产物产量。

6.调整pH值和温度微生物对pH值和温度的要求较为敏感，因此需要优化培养基的pH值和温度来提供最适宜的生长条件。

通过试验不同pH值和温度对微生物的影响，选择最佳的pH值和温度来优化培养基。

7.添加表面活性剂表面活性剂可以增强微生物与培养基之间的接触，促进培养基中的气液传质。

添加适量的表面活性剂，可以提高微生物的生长速率和产物产量。

8.优化培养条件除了调整培养基的成分外，优化微生物发酵培养基还需要考虑一些培养条件，如培养基的搅拌速度、培养温度、空气进气率等。

通过优化这些培养条件，可以提高微生物的生长速度和产物产量。

综上所述，优化微生物发酵培养基是一个复杂而繁琐的过程，需要根据具体微生物的要求和反应机制来选择合适的调整方法。

通过调整培养基成分、添加生长因子、调整pH值和温度、添加表面活性剂以及优化培养条件等方法，可以提高微生物的生长速率和产物产量，保证产品质量和生产效率。