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禽网状内皮组织增殖症病原检测及其抗体检测分析胡杰;蒋维维;李毅【期刊名称】《上海畜牧兽医通讯》【年(卷),期】2017(000)005【摘要】运用PCR方法对8种日龄(0、21、35、75、126、168、245、315 d)的400份棉拭子、水样和环境样本以及12个批次的疫苗样本进行禽网状内皮组织增殖症病毒(REV)病原检测;用间接ELISA方法对2208份8个日龄的鸡血清样品进行REV抗体检测.结果发现,400份棉拭子、水样和环境样本R EV病原检测全部为阴性,16个批次的疫苗有2个批次疫苗检测R EV病原阳性.抗体分布特点是刚出壳时R EV抗体滴度主要集中在3000~10000,占81.88%,抗体阳性率为90.58%;21~35 d抗体下降明显,抗体阳性率仅为0~1.09%;70 d抗体为0的鸡群占50.72%,1077~1500滴度之间的血清占30.43%;126~315 d抗体滴度主要集中在12000以上,占53.26%~65.94%.【总页数】3页(P21-23)【作者】胡杰;蒋维维;李毅【作者单位】广西动物疫病预防控制中心南宁530001;广西鸿光农牧有限公司容县537500;广西鸿光农牧有限公司容县537500【正文语种】中文【相关文献】1.禽网状内皮组织增殖症研究进展 [J], 李井春2.应用改良阻断ELISA检测禽网状内皮组织增殖病血清抗体 [J], 杨汉春;高云3.禽血清网状内皮组织增殖病毒抗体的检测 [J], Sasa.,T;金光明4.基于p30-gp90融合蛋白的禽网状内皮组织增生症病毒抗体间接ELISA方法的建立 [J], 栾晓宁;郭龙宗;马广斌;李玉燕;王一新;巩新民5.郑州地区鸡场禽白血病和禽网状内皮组织增殖症感染情况检测与分析 [J], 陈海燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
3种方法检测禽网状内皮组织增殖病毒人工感染鸡胚孵化雏鸡的带毒比较徐凤霞;孙万里;张亚文;常爽;王一新;赵鹏【期刊名称】《中国动物检疫》【年(卷),期】2024(41)2【摘要】为比较血液和粪便等样品采用不同方法检测禽网状内皮组织增殖病毒(REV)的准确率,从而为制定禽网状内皮组织增殖病(RE)净化程序提供参考,利用鸡胚卵黄囊接种构建REV垂直传播感染雏鸡模型,分别采用DF-1细胞病毒分离、RT-PCR检测和荧光定量RT-PCR检测,对1日龄雏鸡血液和胎粪样品,7~70日龄鸡(每隔1周)的血液和泄殖腔棉拭子样品,进行REV检测和结果比较。
结果显示:对1日龄出壳的SPF鸡血浆进行检测,荧光定量RT-PCR灵敏度最高,阳性检出率为100%(25/25),其次为病毒分离,阳性检出率为96%(24/25),RT-PCR检出率最低;对1日龄出壳的SPF鸡胎粪进行检测,荧光定量RT-PCR与病毒分离灵敏度一致,阳性检出率均为80%(20/25),RT-PCR检出率最低,为28%(7/25)。
对7~70日龄鸡(每隔1周)进行血液和泄殖腔棉拭子检测,3种方法阳性检出率与1日龄检测情况总体相似,检出率从高到低依次为荧光定量RT-PCR、病毒分离和RT-PCR。
结果表明,在同一检测时间点使用同一检测方法,胎粪/泄殖腔棉拭子REV阳性检出率基本低于血液检出率。
本研究初步比较了不同方法检测REV人工感染鸡胚孵化雏鸡的带毒情况,为实施REV净化奠定了基础。
【总页数】6页(P80-85)【作者】徐凤霞;孙万里;张亚文;常爽;王一新;赵鹏【作者单位】山东农业大学动物科技学院【正文语种】中文【中图分类】S851.3【相关文献】1.禽网状内皮组织增生病病毒感染SPF雏鸡血液淋巴细胞增殖功能及其细胞周期相关因子变化2.鸡胚中人工感染网状内皮增殖病病毒的检测3.禽网状内皮组织增殖病病毒感染鸡的外周血白细胞动态变化4.SPF雏鸡人工感染禽网状内皮组织增殖病病毒后肝组织的超微结构观察5.禽网状内皮组织增生症病毒感染鸡胚成纤维细胞的转录组学分析因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
禽活疫苗中网状内皮组织增生症病毒污染的检测方法比较作者：***来源：《家禽科学》2021年第03期摘要：本研究随机抽取4种市售活疫苗，利用RT-PCR法、IFA检测法和SPF鸡检查法，检测活疫苗中的禽网状内皮组织增生症病毒的污染，比较三种检测方法的优劣以找到更好检测的方法。
試验结果表明，RT-PCR法虽然方便、快捷，但RT-PCR法检测会产生假阳性，影响结果的判定;SPF鸡检查法操作简单结果可靠，但该方法试验周期较长，成本高;IFA检测法与传统鸡检查法相比具有快速、准确、成本低的优点，利于推广应用。
关键词：IFA检测法;RT-PCR;SPF鸡检查法;禽网状内皮组织增生症病毒;家禽活疫苗禽网状内皮组织增生症（Reticuloendotheliosis，RE）是指由反转录病毒科网状内皮组织增生症病毒（Reticuloendotheliosis virus，REV）引起的禽类以急性网状细胞肿瘤、生长抑制综合征、淋巴组织及其他组织慢性肿瘤形成为特征的一群病理综合征[1-2]。
由于REV可以通过种蛋垂直传播，如果使用污染有REV的鸡胚生产的疫苗会造成疫苗中污染REV，这是REV独特的传播途径之一[3]。
REV是活疫苗污染中常见的一种外源病毒，当被污染的疫苗免疫鸡群后可引起雏鸡免疫抑制和矮小综合征，从而给家禽养殖业造成巨大经济损失。
国内外均有因REV污染疫苗引起严重损失的案例和报道[4-6]。
对禽源活疫苗进行REV污染检测，确保疫苗使用的有效性和安全性，是防止REV传播的重要手段。
目前对疫苗中REV污染的检测，我国应用方法主要包括细胞培养法和接种SPF鸡检查法，其中接种SPF鸡检查法被认为是经典的“金标准”，检测结果相对可靠容易判定，但缺点是检测周期长。
通常情况下，家禽活疫苗中REV等外源病毒的污染需要用非常灵敏、特异性强、检测周期短的方法来进行检测。
RT-PCR法、IFA检测法和SPF鸡检查法，目的就是为了找到更为合理的检测家禽活疫苗中禽网状内皮组织增生症病毒的检测方法。
Peroxiredoxin Ⅱ酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活效应检测刘萍;奚玲;陶海鹰;卢运萍;马丁【期刊名称】《武汉大学学报：医学版》【年(卷),期】2007(28)4【摘要】目的:应用酵母双杂交体系,构建人peroxiredoxinⅡ(PrxⅡ)蛋白酵母双杂交诱饵载体,并检测该载体的表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无激活作用。
方法:用PCR扩增PrxⅡ基因cDNA中编码完整开放阅读框的基因片段;将该基因片段与pGBKT7载体定向重组;用酶切和测序鉴定重组质粒;用醋酸锂法(Li-Ac)将序列正确的重组质粒pGBKT7-PrxⅡ转化入AH109酵母菌株,在缺陷性培养基上观察pGBKT7-PrxⅡ在AH109中的表达情况,检测诱饵载体有无毒性作用和单倍体及二倍体自激活功能。
结果:成功构建pGBKT7-PrxⅡ重组质粒。
转化有重组质粒和pGBKT7空载体的酵母菌都能在SD/-Trp/X--αgal平板上长出粉红色菌落,在SD/-His/-Trp/X--αgal,SD/-Ade/-Trp/X--αgal平板上不能生长,两种酵母菌在SD/-Trp液体培养基中培养16 h后,菌液的OD600均值均为0.9,说明AH109[pGBKT7-PrxⅡ]转化成功,对酵母菌株AH109无毒性且不具自主激活报告基因的功能。
结论:成功获得了在酵母细胞中正确表达,并对酵母细胞无毒性且未自主激活报告基因的诱饵表达载体pGBKT7-PrxⅡ,该载体可作为酵母双杂交系统中的“诱饵”,该诱饵载体可应用于酵母双杂交系统3筛选PrxⅡ相互作用蛋白。
【总页数】6页(P413-417)【关键词】Peroxiredoxin;Ⅱ;酵母双杂交系统;基因;克隆【作者】刘萍;奚玲;陶海鹰;卢运萍;马丁【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心;武汉大学人民医院骨科【正文语种】中文【中图分类】Q554.6;Q782【相关文献】1.羊布鲁氏菌16M Omp25蛋白酵母双杂交诱饵表达载体的构建及其毒性和自激活效应检测 [J], 屈海龙;王海浪;李晓燕;张瑞;王秀然;陈思;钱晶;王兴龙2.CMV2b和TOMV CP酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活效应检测 [J], 王子华;郑银英;崔百明;向本春3.酵母双杂交诱饵表达载体pGBKT7-cide-3的构建、鉴定以及毒性、自激活效应的检测 [J], 闵婕;李青;马楠;康艳霞;李娜4.香蕉ROP1基因酵母双杂交体系的诱饵载体构建及毒性与自激活效应检测 [J], 王卓;杨景豪;张建彬;刘菊华;金志强;徐碧玉5.拟南芥MAPKKK16酵母双杂交诱饵载体的构建及毒性和自激活效应检测 [J], 雷柯煜;邓治;吴文冠;程汉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
多重实时荧光PCR检测禽网状内皮组织增生症病毒方法的建立以及初步应用缪佶;鲍衍清;邵红霞;钱琨;秦爱建【摘要】本文建立了一种快速、灵敏、特异性强的禽网状内皮组织增生症病毒（Reticuloendotheliosis virus，REV）检测方法，并对REV在鸡胚成纤维细胞（chick embryo fibroblast，CEF）上的增殖动态规律进行研究。
分别针对gag、env以及LTR基因的保守序列设计3对引物，利用重组质粒作为模板，绘制3种不同基因的标准曲线。
检测结果显示，本研究建立了多重实时荧光PCR检测方法，所制备的标准品模板在108~101copies范围内与Ct值之间呈现良好的线性关系，且最低检出量为101copies。
REV感染CEF后gag、env、LTR基因的拷贝数均先减少后增多。
通过实时荧光PCR技术与间接免疫荧光方法检测，发现REV在CEF上复制的初始阶段呈现病毒适应过程，此后病毒大量复制，表现出明显的增长趋势。
该研究不仅为REV的诊断技术提供了一种新的方法，同时也为深入研究REV的感染机制和致病机理奠定了基础。
%The objective of the present study was to develop a rapid, sensitive and specific method for detection of Reticuloendotheliosis virus (REV) in host cells and evaluation of replication kinetics for REV in chicken embryo fibroblasts (CEFs). Real-time PCR was developed using SYBR Green I and three pairs of primers specific to the conserved regions of gag, env and LTR genes and used to measure copies of viral genes at different days post infection. The results showed real-time PCR assay detected REV in the range of 108 to 101 copies with the detection limit at 101 copies. The copy numbers of these viral genes were detected in low level at initial infection stage followed by abundantincrease. As compared with indirect immunofluorescence assay (IFA), real-time PCR demonstrated the presence of REV in CEFs at early infection immediately following by massive virus replication. In conclusion, development of real-time PCR provided a new method for REV detection and further research on mechanisms of infection and pathogenesis.【期刊名称】《中国动物传染病学报》【年(卷),期】2015(000)001【总页数】8页(P1-8)【关键词】禽网状内皮组织增生症病毒;鸡胚成纤维细胞;实时荧光PCR;复制【作者】缪佶;鲍衍清;邵红霞;钱琨;秦爱建【作者单位】教育部禽类预防医学省部共建重点实验室，扬州225009; 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室，扬州225009;教育部禽类预防医学省部共建重点实验室，扬州225009; 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室，扬州225009;教育部禽类预防医学省部共建重点实验室，扬州225009; 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室，扬州225009;教育部禽类预防医学省部共建重点实验室，扬州225009; 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室，扬州225009;教育部禽类预防医学省部共建重点实验室，扬州225009; 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室，扬州225009【正文语种】中文【中图分类】S852.659.3禽网状内皮组织增生症病毒（Reticuloendotheliosis virus，REV）最初于1958年从火鸡脾脏中分离出，属于反转录病毒科，能引起鸡、鸭、鹅、火鸡和其他禽类发生免疫抑制、肿瘤形成和矮小综合征[1]。
