双水相萃取
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双水相萃取名词解释双水相萃取是一种分离和提取物质的物理化学方法,它基于物质在两种不相溶的水相中的分配差异来实现。
其中,一相为有机溶剂相,另一相为水相。
双水相萃取能够实现目标物质从混合物中的分离纯化,常用于生物化学、制药、环境监测等领域。
与传统的单相溶剂萃取相比,双水相萃取具有高选择度、高灵敏度、快速分离和减少环境污染等优点,在实际应用中具有广泛的应用前景。
双水相萃取的核心原理是不同物质在两相之间的分配差异。
混合物溶解在有机溶剂相中后,目标物质会因其在两相中的溶解度不同而分配到两相中。
根据目标物质在两相中的分配系数,可以通过调整两相的物理化学性质,例如溶剂种类、pH值和离子强度等,来控制目标物质的转移和分离。
在双水相萃取中,通常使用的有机溶剂相为水不溶性有机溶剂,例如丁醚、乙醚、正己烷等。
水相通常为含有盐或酸碱调节剂的水溶液。
混合物溶解在有机溶剂相中后,通过搅拌、超声波处理等方法,使混合物中的目标物质与两相中的溶剂发生混溶,然后静置使两相分层。
最后,可以通过分液、离心等方式分离出两相,从而得到纯净的目标物质。
双水相萃取在实际应用中,常常与其他分离和纯化技术相结合,例如薄层色谱、气相色谱、高效液相色谱等,以实现更精确、高效的分离和纯化。
该技术不仅适用于分离化学品、天然产物、有机合成产物等有机化学领域,也可用于生物分子、生物体内代谢产物等在生物化学、制药等领域中的应用。
总之,双水相萃取是一种基于物质在两种不相溶的溶剂相中分配差异来实现目标物质的分离和纯化的物理化学方法。
它具有许多优点,广泛应用于化学、生物化学、制药和环境监测等领域,并与其他分离和纯化技术相结合,促进了科学研究和工业生产的发展。
蛋白分离纯化技术之双水相萃取技术双水相萃取是一项蛋白分离和蛋白纯化技术,是利用物质在两相间的选择分配差异而进行分离提纯的,目前已经被广泛应用与医药化学、细胞生物学、生物化工和食品工业等领域。
双水相萃取技术用于提取蛋白质等生物活性物质时,具有操作简单、体系含水量高,在萃取过程中可以保持物质的构象稳定、蛋白不易失活并获得高的萃取率的特点。
1、双水相萃取技术可分离和纯化蛋白双水相萃取技术可以用于蛋白分离和蛋白纯化,包含在一些蛋白分离公司提供的服务。
早期,如在20世纪60年代,有研究者全面进行了生物大分子在双水相系统中的分配行为的研究,得到了蛋白质、酶、核酸、病毒、抗体抗原复合物以及细胞等的分配数据。
双水相系统具有温和的操作条件,对于在极性条件下易造成变性失活的蛋白质和酶的提取中表现出了很大的优势。
双水相萃取法进行蛋白分离和蛋白纯化的原理是:聚合物与聚合物之间或聚合物与盐之间由于分子空间阻碍作用形成了双水相。
当待分离物质进入体系后,由于各组分表面性质、电荷作用和各种力的作用和溶液环境的影响,使其在上、下相中的分配系数不同,通过调节体系参数使被分离物质在两相间选择性分配,从而实现目标组分的分离纯化。
双水相萃取技术进行蛋白分离和蛋白纯化具有以下优点:(1)易于放大,各种参数可以按照比例放大而不降低产物收率[1];(2)双水相系统传质和平衡过程速度快,回收效率高、能耗较小;(3)易于进行连续化操作、设备简单,且可以直接与后续提纯工序相连接,无需进行特殊处理;(4)相分离条件温和,双水相体系的张力很小,有利于保持生物分子的活性,可以直接用在发酵液中;(5)影响双水相体系的因素比较复杂,可调参数多,便于改变操作条件提高纯化效果。
美迪西提供蛋白质分离纯化技术服务,可以根据客户要求,提供从小试到规模生产全程的蛋白分离纯化服务,并根据工艺的要求结合产品特点给客户定制适用的工艺和系统。
2、双水相萃取技术分离和纯化物质的研究α-淀粉酶是一类用途十分广泛的酶,在粮食、食品加工,以及医药行业等都经常使用,由于α-淀粉酶是具有重要应用价值的工业酶,周内外很多课题组对它进行了研究。
双水相萃取名词解释双水相萃取是一种分离技术,是通过在混合液体中将一种物质分离出来的过程。
该过程常用于将两种不同物质分离开来,如果它们具有相同的电荷和形状,它们就可以在混合液体中被有效分离。
双水相萃取基于一种叫作分配系数的概念。
分配系数是物质之间的电荷和形状的比率,它决定了物质在混合液体中的分布情况。
根据分配系数的不同,被萃取的物质将分布在两个不同的表面上。
在双水相萃取中,混合液体会被分为两个相分离部分,一部分富含物质A,而另一部分富含物质B。
在双水相萃取过程中,混合液体会被放入一容器中,然后以静态或动态的方式搅拌,使物质A和B之间的分配系数得到改变。
当混合液体中的物质A和B改变分布率时,它们就会被从中分离出来。
这种技术可以极大地提高物质分离的速度,从而使分离的效率极高,而且还可以分离出非常精细的物质,如大小不一的纳米粒子等。
双水相萃取技术在药物分离、石油分离、食品加工等领域具有广泛应用,可以帮助工程师们解决大量问题,提高产品质量与生产效率。
此外,双水相萃取还可以用于能源转换,可以将太阳能和风能有效转换为其它形式的能源,以满足人类的能源需求。
综上所述,双水相萃取是一种重要的技术,它可以解决大量混合液体中不同物质的分离问题,在药物分离、石油分离、食品加工等领域有着广泛应用,帮助工程师们极大地提高分离的速度和效率,并可以将能源有效转换。
虽然双水相萃取技术带来了诸多好处,但是它也有一定的局限性。
由于其基本原理是以分配系数为基础的,在进行双水相萃取时,受到混合液体种类的限制,只能用于水基混合液体。
此外,双水相萃取过程中所产生的废水也不能直接排放,必须经过处理才能安全排放。
因此,在进行双水相萃取之前,需要进行充分的技术评估,确保双水相萃取过程安全有效。
双水相萃取技术的发展越来越快,它不仅帮助我们解决了大量的分离问题,而且还能帮助满足人类能源需求。
未来,双水相萃取技术将会得到更深入的研究,希望有一天它能够应用到更加广泛的领域,为促进人类社会发展作出更多的贡献。
双水相萃取技术
实验原理
双水相系统中使用的双水相是由两种不相溶的高分子溶液或者互不相溶的盐溶液和高分子溶液组成。
双水相系统的制备,一般是将两种溶质分别配成一定浓度的水溶液,然后将两种溶液按照不同的比例混合,静止一段时间,当两种溶质的浓度超过某一浓度范围时,就会产生两相。
实验器材
聚乙二醇、硫酸钠(硫酸铵)、烧杯、玻璃棒、量筒、分析天平实验步骤
1、双水相系统的制备
(1)分别配制浓度为6g/100ml、10g/100ml、14g/100ml聚乙二醇溶液各50ml。
(2)配制50ml浓度为14g/100ml的硫酸钠溶液三份。
(3)将不同浓度的聚乙二醇溶液与硫酸钠溶液混合,充分搅拌,静置分层,得到3份双水相系统。
2、观察双水相系统,高浓度双水相系统如不成两相,可定量添加聚乙二醇和硫酸钠的高浓度溶液。
3、向双水相体系加入反应液。
双水相萃取的名词解释双水相萃取是萃取的一种方法。
两种水溶性不同的聚合物,或一种聚合物和无机盐的混合溶液,在一定的浓度下,其体系会自然分成互不相溶的两相。
当被分离物质进入双水相体系后,由于表面性质、电荷间作用和各种作用力等的影响,被分离物质在两相间的分配系数不同,导致其在上下相的浓度不同,即可达到分离的目的。
早在1896年人们就已观察到,明胶与琼脂,或明胶与可溶性淀粉溶液混合时,会得到一种不透明的混合溶液。
静置后可分为两相,上相中含有大部分的明胶,下相中含有大部分琼脂(或淀粉),这种现象称为聚合物的不相容性,从而产生了双水相。
双水相萃取与水-有机相萃取的原理相似,都是依据物质在两相间的选择性分配,但萃取体系的性质不同。
当物质进入双水相体系后,由于表面性质、电荷作用和各种力(如憎水键、氢键和离子键等)的存在和环境的影响,使其在上、下相中的浓度不同。
分配系数K等于物质在两相的浓度比。
各种物质的K值不同,例如各种类型的细胞粒子、噬菌体等分配系数都大于100或小于0.01,酶、蛋白质等生物大分子的分配系数在0.1~10之间,而小分子盐的分配系数在1.0左右。
因而,双水相体系对生物物质的分配具有很大的选择性。
双水相的优势ATPE作为一种新型的分离技术,对生物物质、天然产物、抗生素等的提取、纯化表现出以下优势:(1)含水量高(70%--90%),在接近生理环境的体系中进行萃取,不会引起生物活性物质失活或变性;(2)可以直接从含有菌体的发酵液和培养液中提取所需的蛋白质(或者酶),还能不经过破碎直接提取细胞内酶,省略了破碎或过滤等步骤;(3)分相时间短,自然分相时间一般为5min~15 min;(4)界面张力小(10-7~10-4mN/m),有助于两相之间的质量传递,界面与试管壁形成的接触角几乎是直角;(5)不存在有机溶剂残留问题,高聚物一般是不挥发物质,对人体无害;(6)大量杂质可与固体物质一同除去;(7)易于工艺放大和连续操作,与后续提纯工序可直接相连接,无需进行特殊处理;(8)操作条件温和,整个操作过程在常温常压下进行;(9)亲和双水相萃取技术可以提高分配系数和萃取的选择性。
三、双水相萃取3.1 双水相萃取的原理及特点3.1.1 双水相萃取的原理双水相萃取与水-有机相萃取的原理相似,都是依据物质在两相间的选择性分配,但萃取体系的性质不同。
当物质进入双水相体系后,由于表面性质、电荷作用和各种力(如憎水键、氢键和离子键等)的存在和环境因素的影响,使其在上、下相中的浓度不同。
分配系数K等于物质在两相的浓度比,由于各种物质的K值不同,可利用双水相萃取体系对物质进行分离。
3.1.2 双水相萃取的特点双水相体系萃取具有如下特点:(1)含水量高(70%~90%),是在接近生理环境的温度和体系中进行萃取,不会引起生物活性物质失活或变性;(2)分相时间短,自然分相时间一般为5~15min;(3)界面张力小(10-7~10-4mN/m),有助于强化相际间的质量传递;(4)不存在有机溶剂残留问题;(5)大量杂质能与所有固体物质一同除去,使分离过程更经济;(6)易于工程放大和连续操作。
由于双水相萃取具有上述优点,因此,被广泛用于生物化学、细胞生物学和生物化工等领域的产品分离和提取。
3.2 双水相萃取在分离和提取各种蛋白质(酶)上的应用用聚乙二醇(PEG)/羟丙基淀粉酶(Reppal PEG)体系经两步法可从黄豆中分离磷酸甘油酸激酶(PGK)和磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)。
在黄豆匀浆中加入PEG4000,可絮凝细胞碎片及大部分杂蛋白。
在上清液中加入PEG4000(12%)-ReppalPES(40%),PGK在上相、GAPGH在下相的收率均在80%以上。
萃取过程的放大采用离心倾析机连续处理匀浆液,用离心萃取器完成双水相体系的两相分离,整个工艺具有处理量大、接触时间短、酶收率高的特点。
用PEG/(NH4)2SO4双水相体系,经一次萃取从A-淀粉酶发酵液中分离提取α-淀粉酶和蛋白酶,萃取最适宜条件为PEG1000(15%)-(NH4)2SO4(20%),pH=8,α-淀粉酶收率为90%,分配系数为19.6,蛋白酶的分离系数高达15.1。
三、双水相萃取3.1双水相萃取的原理及特点3.1.1双水相萃取的原理双水相萃取与水-有机相萃取的原理相似,都是依据物质在两相间的选择性分配,但萃取体系的性质不同。
当物质进入双水相体系后,由于表面性质、电荷作用和各种力(如憎水键、氢键和离子键等)的存在和环境因素的影响,使其在上、下相中的浓度不同。
分配系数K等于物质在两相的浓度比,由于各种物质的K值不同,可利用双水相萃取体系对物质进行分离。
3.1.2双水相萃取的特点双水相体系萃取具有如下特点:(1)含水量高(70%〜90%),是在接近生理环境的温度和体系中进行萃取,不会引起生物活性物质失活或变性;(2)分相时间短,自然分相时间一般为5~15min ;⑶界面张力小(10-7〜10-4mN/m),有助于强化相际间的质量传递;⑷不存在有机溶剂残留问题;(5)大量杂质能与所有固体物质一同除去,使分离过程更经济;(6)易于工程放大和连续操作。
由于双水相萃取具有上述优点,因此,被广泛用于生物化学、细胞生物学和生物化工等领域的产品分离和提取。
3.2双水相萃取在分离和提取各种蛋白质(酶)上的应用用聚乙二醇(PEG)/羟丙基淀粉酶(Reppal PEG)体系经两步法可从黄豆中分离磷酸甘油酸激酶(PGK)和磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)。
在黄豆匀浆中加入PEG4000,可絮凝细胞碎片及大部分杂蛋白。
在上清液中加入PEG4000(12%)-ReppalPES(40%),PGK在上相、GAPGH 在下相的收率均在80%以上。
萃取过程的放大采用离心倾析机连续处理匀浆液,用离心萃取器完成双水相体系的两相分离,整个工艺具有处理量大、接触时间短、酶收率高的特点。
用PEG/(NH4)2SO4 双水相体系,经一次萃取从A-淀粉酶发酵液中分离提取a淀粉酶和蛋白酶,萃取最适宜条件为PEG1000(15%)-(NH4)2S04(20%),pH=8,a淀粉酶收率为90%,分配系数为19.6,蛋白酶的分离系数高达15.1。