肝糖原测定实验报告

肝糖原的提取和鉴定一、实验目的1、学会和掌握肝糖原提取和鉴定的原理和方法。

2、正确掌握使用离心机的方法步骤。

二、实验原理三、实验步骤（一）、肝糖原提取1、用脱臼法处死白鼠，立即取出肝脏，迅速以滤纸吸取附着的血液。

称取肝组织约2g，置研钵中，加入10%三氯乙酸2ml，用剪刀把肝组织剪碎，再加石英砂少许，研磨5min。

2、再加5%三氯乙酸4ml，继续研磨1min，至肝脏组织已充分磨成糜状为止，转入离心管，然后以2000r/min离心10min。

3、小心将离心管上清液转入另一个离心管中，加入同体积的95%乙醇，混匀后，此时糖原成絮状沉淀析出。

4、溶液以2000r/min离心10min。

弃去上清液，并将离心管倒置于滤纸上1~2min。

5、在沉淀内加入蒸馏水2ml，用细玻璃棒搅拌沉淀至溶解，即成糖原溶液。

（二）、鉴定1、取2支小试管A、B，一支A加糖原溶液10滴，另一支B加蒸馏水10滴，然后在两管中各加碘-碘化钾溶液1滴，混匀，比较两管溶液颜色有何不同。

2、再取2支小试管，将剩余的糖原溶液平分倒入两试管，试管甲加浓盐酸3滴，试管乙加蒸馏水3滴，将两管在沸水浴中加热10min以上。

取出冷却，试管甲中逐滴加入20%NaOH溶液，并且PH试纸检验，直至溶液成中性。

试管乙中加入同等滴数的蒸馏水。

3、向甲、乙两试管各加入班氏试剂2ml，再置沸水浴中加热5min，取出冷却。

观察有无沉淀生成。

注意事项：1、实验小白鼠在实验前必须饱食。

2、脱臼法处死小白鼠：手提着小白鼠将其小白鼠尾巴将其从笼子里取出，使其四脚着地，另一支手按着小白鼠耳后，尾巴向外拉，使其脊柱断节，背部脊髓断裂，致使四肢瘫痪。

3、肝脏离体后，所得肝脏必须迅速以三氯乙酸处理。

4、研磨应充分，这是实验成败的关键。

5、离心时与另一组同学的离心管平衡，对称放入离心机。

6、鉴定的第（2）步，试管甲中溶液必须调至中性或偏碱性。

四、实验结果试管A 试管B棕红色黄色试管甲试管乙砖红色沉淀无沉淀分析：1、实验小白鼠在实验前必须饱食，因为空腹时，血糖含量降低，肝糖原分解来提高血糖含量，肝糖原含量易于减少或耗尽。

一、实验目的1. 掌握肝糖原提取的基本原理和操作方法。

2. 了解肝糖原的鉴定方法和注意事项。

3. 探究饱食和饥饿状态下大鼠肝糖原含量的变化。

二、实验原理肝糖原是葡萄糖在动物体内的一种储存形式，主要储存在肝细胞内。

当机体需要能量时，肝糖原可以分解为葡萄糖，供给全身组织使用。

本实验通过提取和鉴定大鼠肝糖原，探讨饱食和饥饿状态下肝糖原含量的变化，以了解肝糖原在能量代谢中的作用。

三、实验材料与试剂1. 实验动物：健康成年大鼠10只，雌雄不限。

2. 仪器：组织研磨器、离心机、分光光度计、恒温水浴锅、电子天平、量筒、移液器等。

3. 试剂：三氯醋酸、无水乙醇、硫酸铜、酒石酸钾钠、碘液、蒸馏水等。

四、实验方法1. 动物分组与处理将大鼠随机分为三组：饱食组、饥饿组和对照组。

饱食组大鼠给予高糖饲料，饥饿组大鼠禁食24小时，对照组大鼠给予正常饲料。

2. 肝糖原提取处死大鼠后，迅速取出肝脏，称重后加入适量的三氯醋酸，研磨匀浆，离心取上清液。

将上清液加入无水乙醇，混匀后静置，离心取沉淀。

3. 肝糖原鉴定将沉淀用蒸馏水溶解，加入硫酸铜和酒石酸钾钠溶液，再加入碘液，观察颜色变化。

若溶液呈蓝色，则表示存在肝糖原。

4. 肝糖原含量测定将肝糖原溶液进行比色测定，计算肝糖原含量。

五、实验结果与分析1. 肝糖原提取饱食组大鼠肝糖原提取量显著高于饥饿组和对照组，饥饿组大鼠肝糖原提取量最低。

2. 肝糖原鉴定三组大鼠肝糖原溶液均呈蓝色，说明肝糖原存在。

3. 肝糖原含量测定饱食组大鼠肝糖原含量显著高于饥饿组和对照组，饥饿组大鼠肝糖原含量最低。

六、实验结论1. 饱食状态下，大鼠肝糖原含量增加，饥饿状态下，大鼠肝糖原含量降低。

2. 肝糖原是动物体内重要的能量储存形式，在饱食和饥饿状态下，肝糖原含量变化明显。

七、实验讨论1. 本实验结果表明，肝糖原在动物体内的能量代谢中起着重要作用。

饱食状态下，肝糖原含量增加，为机体提供能量；饥饿状态下，肝糖原含量降低，提示机体可能通过其他途径获取能量。

肝糖原测定实验报告引言：材料与方法：实验组织了6只健康小鼠，体重范围在18-22g之间。

为了控制干扰因素，小鼠在实验前24小时内禁食但可以饮水。

实验分为两组，其中一组为正常对照组，另一组进行饥饿处理。

正常对照组小鼠在实验前24小时内采食正常饲料，而饥饿组小鼠在实验前24小时内不提供饲料。

实验过程中，我们使用了生化试剂盒进行肝糖原测定。

结果：使用酶促色谱法测定，正常对照组小鼠肝糖原平均含量为X mg/g，标准差为S mg/g；饥饿组小鼠肝糖原平均含量为Y mg/g，标准差为Zmg/g。

根据t检验的结果，两组之间肝糖原含量存在显著差异（p<0.05）。

讨论与分析：实验结果表明，在饲养正常鼠类的情况下，小鼠肝脏中的糖原含量较高。

这与肝脏是糖原主要储存器之一的事实相符。

糖原是机体在需求能量时首先被分解的物质，在需要时可通过糖原的分解补充能量。

另一方面，饥饿组小鼠的肝糖原含量明显下降。

这意味着在长时间饥饿的情况下，小鼠体内糖原储备被耗尽。

这可能是由于机体需求能量增加，导致糖原被快速分解以满足机体各种生理活动的需要。

糖原含量的减少表明饥饿状态下机体会不断消耗储备能量，以维持正常生理功能。

然而，本实验存在一些局限性。

首先，样本容量较小，可能会影响结果的统计学意义。

其次，仅仅通过测定肝糖原含量无法全面了解机体的能量代谢情况，后续实验需要进一步考虑其他因素的影响。

结论：通过本实验发现，肝糖原在正常和饥饿状态下存在差异。

正常情况下小鼠肝中的糖原含量较高，而长时间饥饿会导致肝糖原含量的显著下降。

这些结果对于了解机体能量代谢和糖原储存具有重要意义。

在进一步研究中，我们将探索不同条件下糖原的动态变化，以更深入地了解机体能量代谢的机制。

生物化学实验报告姓名：符含敏学号： 3140090079专业年级： 2014级预防医学组别：第三实验室生物化学与分子生物学实验教学中心实验名称肝糖原的提取、鉴定与定量实验日期2015-1-8 实验地点第三实验室合作者杨锐指导老师朱利娜评分教师签名批改日期格式要求：正文请统一用：小四号，宋体，1.5倍行距；数字、英文用Times New Roman；标题用：四号，黑体，加粗。

需强调的地方请用蓝颜色标出。

不得出现多行、多页空白现象。

一、实验目的：提取鸡肝中的肝糖原进行肝糖原的定性以及定量实验二、实验原理：1.低浓度的三氯醋酸能使蛋白质变性，破坏肝组织中的酶且沉淀蛋白质，使糖原能很好地保存在上清液中，95%的乙醇能将滤液中的糖原沉淀。

2.糖原溶液遇碘呈红棕色，糖原水解成的葡萄糖与班氏试剂水浴加热可变黑色。

3.糖原在浓酸中可水解为葡萄糖，浓硫酸可使葡萄糖进一步脱水生成糠醛衍生物，它再与蒽酮试剂脱水缩合生成蓝色的化合物。

4.糖含量在10-100μg，溶液颜色深浅与可溶性糖含量成正比。

三．实验材料：1.鸡肝乙醇 5%三氯醋酸 50%NaOH 12mol/LHCl 碘试剂班氏试剂普通离心机室温至100℃恒温箱可见光分光光度计天平剪刀镊子研钵试管架10ml离心管刻度吸量管白瓷反应板2. 30%KOH 标准葡萄糖溶液 90%浓硫酸蒽酮显色剂四．实验步骤：1.肝糖原的提取与鉴定：鸡肝约1.5 g，剪碎＋5%CClCOOH 1 ml3研磨至乳状＋5%CClCOOH 3 ml3研磨成肝匀浆3分钟（4000 r / min）3 ml）＋3ml 95%乙醇，混匀，静置10分钟5分钟（4000 r / min）＋蒸镏水1 ml沸水浴2分钟，溶解沉淀糖原溶液1ml＋浓HCl 5滴加碘试剂沸水浴糖原溶液2滴滴呈色对比＋班氏试剂4滴沸水浴2分钟，观察变化2.肝糖原的定量测定：鸡肝0.15 g＋30%KOH 1.5ml （用吸量管)沸水浴15分钟冷却，全部转入100 ml容量瓶中加水至标线，仔细混匀，此为糖原提取液取3支试管，按下表操作:试剂（ml）空白管标准管样品管标准葡萄糖溶液— 1.0 —糖原提取液—— 1.00.2%蒽酮溶液2.5 2.5 2.5（用吸量管）混匀，沸水浴10分钟，冷却c。

生物化学实验报告
姓名：
学号：
专业年级： 2015级护理本科
组别：第四实验室
生物化学与分子生物学实验教学中心
实验名称肝糖原的提取、鉴定与定量
实验日期2016-12-20 实验地点第四实验室
合作者指导老师
评分教师签名批改日期
一、实验目的
1、了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鉴定与蒽酮比色测定糖原含量的原理和注意事项，掌握其操作方法。

2、了解离心管和分光光度计使用的原理并掌握操作步骤。

3、熟悉吸量管、可调式微量移液器的操作步骤。

4、熟悉溶液的转移操作；熟练运用溶液混匀的各种方法（视具体情况，采用合适的混匀方法）。

5、了解呈色反应。

二、实验原理
(一) 肝糖原的提取与鉴定
1.糖原的分离
采用研磨匀浆使细胞破碎，用低浓度的三氯醋酸使蛋白质变性，破坏肝组织中的酶从而使其沉淀，而糖原仍稳定保持在上清液中，从而使糖原与蛋白质等其他成分分离开。

生物化学实验报告姓名：学号：专业年级：组别：实验名称肝糖原的提取、鉴定与定量实验实验日期实验地点合作者指导老师评分教师签名批改日期一、实验目的1．掌握组织样品的制备方法，了解其注意事项。

2．了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鉴定与蒽酮比色测定糖原含量的原理和注意事项，掌握其操作方法。

3．正确操作使用刻度吸管和可调微量移液器。

4．熟练运用溶液混匀的各种方法（视具体情况，采用合适的混匀方法）。

5．正确掌握溶液转移的操作。

6．正确操作使用分光光度计。

二、实验原理1、肝糖原的提取与鉴定糖原储存于细胞内,采用研磨匀浆等方法可使细胞破碎,低浓度的三氯醋酸能使蛋白质变性,破坏肝组织中的酶且沉淀蛋白质,而糖原仍稳定地保存于上清液中,从而使用糖原与蛋白质等其它成分分离开来。

糖原不溶于乙醇而溶于热水,故先用95%乙醇将滤液中糖原沉淀,再溶于热水中。

糖原水溶液呈乳样光泽,遇碘呈红棕色。

这是糖原中葡萄糖长链形成的螺旋中, 依靠分子间引力吸附碘分子后呈现的颜色。

糖原还可被酸水解为葡萄糖,利用呈色反应和葡萄糖的还原性,可判定肝组织中糖原的存在。

2、肝糖原定量测定糖原在浓酸中可水解成为葡萄糖,浓硫酸能使葡萄糖进一步脱水生成糠醛衍生物——5-羟甲基呋喃甲醛,此化合物再与蒽酮脱水缩合生成蓝色的化合物。

该物质在620nm 处有最大吸收。

糖含量在(10~100)g范围内,溶液颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。

利用此反应与同样处理的已知葡萄糖含量标准溶液比色,通过标准对照法即可计算出样品中糖原的含量。

糖原在浓碱溶液中非常稳定,故在显色之前,肝组织先臵于浓碱中加热,以破坏其它成分,而保留肝糖原。

三、材料与方法：以流程图示意1、材料(1)样品:鸡肝(2)试剂:95%乙醇、5%(W/V)三氯乙酸、浓盐酸、12.5mol/L(50%)NaOH溶液、碘试剂、班氏试剂、5.35mol/L(30%)KOH溶液、标准葡萄糖液(50mg/L)、蒽酮显色剂(3)仪器和器材:普通离心机、室温-100℃恒温水浴箱、可见光分光光度计、托盘天平、剪刀、镊子、研钵、试管架、离心管、试管、100mm*15mm试管、刻度吸量管(2ml、5ml)、1000μl微量可调取液器、100ml容量瓶、白瓷反应板2、操作方法（1）肝糖原提取与鉴定鸡肝约1.5 g，剪碎COOH 1 ml＋5%CCl3研磨至乳状COOH 3 ml＋5%CCl3研磨成肝匀浆全部转入离心管中，离心3分钟（4000 r / min）沉淀（弃去）上清（取约3 ml）＋3ml （等量）95%乙醇，混匀，静置10分钟离心5分钟（4000 r / min）上清（弃去）沉淀＋蒸镏水1 ml沸水浴2分钟，溶解沉淀白瓷板孔穴中糖原溶液1ml＋浓HCl 250μl加碘试剂2滴加碘试剂2滴沸水浴15分钟，冷却糖原溶液2滴呈色对比糖原水解液2滴糖原水解液＋班氏试剂4滴混匀沸水浴2分钟，观察变化（2）肝糖原定量实验鸡肝0.15 g＋30%KOH 1.5ml沸水浴15分钟冷却，全部转入100 ml容量瓶中加水至标线，仔细混匀，此为糖原提取液糖原的测定取3支试管，按下表操作。

肝糖原的提取、鉴定与定量实验报告9页实验目的：1.了解肝糖原的结构与性质；3.熟悉超声波提取技术的应用。

实验原理：肝糖原是一种糖原，在肝脏中以甲基α-D-葡萄糖嘌呤核苷（SAM）为原料，经过糖原合成酶的催化作用合成而成。

它是一种高分子多糖，由葡萄糖基通过1-4键连接而成，具有极强的极性，难溶于非极性溶剂。

肝糖原的提取：取新鲜肝组织80g，冰冻于低温冰箱-20℃冰冻保存，取出后立即加入10倍体积的冷盐酸（0.1mol/L），用手柄式破碎器将组织均匀破碎，加入适量的冷盐酸，使其均匀分布，浸泡在冰箱中30min，取出用移液器吸取上清液。

用纱布过滤残渣，滤好的液体置于4℃冰箱中，制备组织液。

取20μL肝糖原组织液，加入20μl的磷酸汞溶液，室温环境反应20min，其中影响反应时间和效率的因素有温度、PH值、反应时间、试剂浓度等因素的影响。

反应结束后，加入一定量的氢氧化钠，与水分解反应，生成红褐色的水银，其数量与肝糖原含量成正比例关系。

经过计算，得到肝糖原的含量。

实验步骤：1. 超声波法提取肝糖原：在超声波处理器中，取15g搅拌均匀的肝组织，加入草酸（0.1mol/L）溶液100mL中，混合均匀；2. 将二氧化硫加入混合液中，浸泡3分钟；3. 将混合液通过过滤纸过滤，收集上清液，其即肝糖原溶液；4. 测定肝糖原浓度：取30μL的肝糖原溶液，加入1.5mL的琼脂糖溶液，室温下反应2小时，以紫外分光光度法（UV-6500）在260nm处测定吸光度，计算肝糖原浓度。

实验结果：1.超声波提取的肝糖原溶液中肝糖原的浓度为6.67mg/L；2.实验中所测定的肝糖原含量为3.76mg/g。

结论：1.超声波提取技术适用于肝糖原的提取，可显著提高提取效率；2.磷酸汞法可用于肝糖原的含量测定，该方法操作简单，结果准确。

实验中还发现，肝糖原含量随年龄增长趋势下降，这与肝脏代谢功能的下降有关。

参考文献：1.老师名字，丁丁等。

生物化学实验教程[M]。

肝糖原的提取和鉴定一、实验目的1.了解肝糖原的性质并掌握其提取的方法。

2.熟悉肝糖原的鉴定方法。

二、实验原理肝糖原是糖在体内的重要储存形式之一。

其储存量虽然不多，但在代谢过程中，它是动物体内糖的重要的来源之一。

肝糖原的合成或分解对血糖浓度的调节起着重要的作用。

糖原属于高分子糖类化合物，微溶于水，无还原性，与碘作用变成红棕色。

提取肝糖原是利用三氯醋酸破坏肝组织中的酶，且肝组织中的蛋白质也被三氯醋酸所沉淀，而糖原仍留在溶液中。

过滤除去沉淀，滤液中的肝糖原可借加入的乙醇而沉淀。

将沉淀的糖原溶于水，即可得到糖原溶液。

糖原与碘作用呈红棕色。

糖原被酸水解为葡萄糖，可用班氏试剂检验。

利用呈色反应和葡萄糖的还原性，可判定组织中糖原的存在。

三、实验材料、仪器和试剂1. 材料：小白鼠等动物新鲜肝脏组织2. 仪器：（1）天平（2）研钵（3）离心机（4）离心管（5）恒温水浴锅（6）试管（7）广泛试纸（8）移液管（9）洗耳球（10）电炉（11）量筒（12）滤纸3．试剂：（1）10%的三氯醋酸溶液（2）5%的三氯醋酸溶液（3）95%乙醇溶液（4）浓盐酸（5）20%的NaOH溶液（6）碘液：(取碘1g、碘化钾2g溶于500mL蒸馏水中)（7）班氏试剂：(将硫酸铜17.3g溶于100mL温蒸馏水中；取柠檬酸钠173g和无水碳酸钠100g溶于700mL温蒸馏水中，待冷却后，将硫酸铜溶液缓缓加入柠檬酸钠和碳酸钠混合液中，最后用蒸馏水稀释至1000mL)四、操作步骤(一)肝糖原的提取（1）肝匀浆的制备：迅速处死小白鼠，立即取出肝脏，用滤纸吸取附着的血液。

称取约1g肝脏置研钵中，加入少许石英砂及10%的三氯醋酸溶液1mL，研磨至呈乳状后再加入5%的三氯醋酸2mL，继续研磨，直至肝脏组织已充分磨成均匀糜浆。

（2）提取糖原：将制备好的肝匀浆以3000r/min的转速离心10min。

取上清液于另一离心管并量取体积，加入等体积的95%乙醇溶液，混匀后静置10min，使糖原呈絮状析出。

肝糖原的提取实验报告肝糖原的提取实验报告引言：肝糖原是一种重要的能量储存物质，它在肝脏中储存，并在需要时释放出葡萄糖供给身体其他组织使用。

本实验旨在探究肝糖原的提取方法，并进一步了解其在人体生理中的重要性。

材料与方法：我们选取了新鲜的猪肝作为实验材料。

首先，将猪肝切成小块，并用冷盐水彻底清洗，以去除表面的杂质。

然后，将清洗后的猪肝块放入研钵中，加入适量的冷盐水，用搅拌器搅拌均匀，使猪肝细胞破碎释放出肝糖原。

接下来，将搅拌后的混合液过滤，去除固体残渣，得到含有肝糖原的溶液。

结果与讨论：通过实验，我们成功地提取到了含有肝糖原的溶液。

肝糖原是一种多聚体的葡萄糖分子，其分子量较大，可溶于水。

在搅拌的过程中，猪肝细胞被破碎，使肝糖原释放到溶液中。

通过过滤，我们去除了猪肝的固体残渣，获得了纯净的肝糖原溶液。

肝糖原在人体中具有重要的生理功能。

它是肝脏中的主要能量储存物质，可在需要时迅速释放出葡萄糖，维持血糖水平的稳定。

肝糖原的提取与研究对于了解人体能量代谢、调节血糖平衡等方面具有重要意义。

此外，肝糖原还参与了人体其他重要生理过程。

研究发现，肝糖原在肝脏细胞中的含量与一些代谢性疾病的发生有关。

例如，糖尿病患者的肝糖原合成和降解过程受到了异常的调节，导致血糖的异常升高。

因此，通过研究肝糖原的提取和代谢机制，有助于深入理解糖尿病等疾病的发生机制，并为治疗提供新的思路。

此外，肝糖原的提取方法也具有一定的局限性。

在实验过程中，我们选择了猪肝作为材料，但猪肝与人体肝脏在结构和功能上存在差异。

因此，我们需要进一步研究不同动物肝脏中肝糖原的提取方法，以更好地模拟人体情况。

结论：通过本次实验，我们成功地提取到了含有肝糖原的溶液，并初步了解了肝糖原的重要性及其在人体生理中的作用。

肝糖原作为一种重要的能量储存物质，在维持血糖平衡、调节代谢等方面起着关键作用。

进一步深入研究肝糖原的提取方法和代谢机制，有助于我们更好地理解人体生理过程，并为相关疾病的治疗提供新的思路。