饥饿和饱食对小鼠肝糖原的影响的实验报告
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一、实验目的1. 掌握肝糖原提取的基本原理和操作方法。
2. 了解肝糖原的鉴定方法和注意事项。
3. 探究饱食和饥饿状态下大鼠肝糖原含量的变化。
二、实验原理肝糖原是葡萄糖在动物体内的一种储存形式,主要储存在肝细胞内。
当机体需要能量时,肝糖原可以分解为葡萄糖,供给全身组织使用。
本实验通过提取和鉴定大鼠肝糖原,探讨饱食和饥饿状态下肝糖原含量的变化,以了解肝糖原在能量代谢中的作用。
三、实验材料与试剂1. 实验动物:健康成年大鼠10只,雌雄不限。
2. 仪器:组织研磨器、离心机、分光光度计、恒温水浴锅、电子天平、量筒、移液器等。
3. 试剂:三氯醋酸、无水乙醇、硫酸铜、酒石酸钾钠、碘液、蒸馏水等。
四、实验方法1. 动物分组与处理将大鼠随机分为三组:饱食组、饥饿组和对照组。
饱食组大鼠给予高糖饲料,饥饿组大鼠禁食24小时,对照组大鼠给予正常饲料。
2. 肝糖原提取处死大鼠后,迅速取出肝脏,称重后加入适量的三氯醋酸,研磨匀浆,离心取上清液。
将上清液加入无水乙醇,混匀后静置,离心取沉淀。
3. 肝糖原鉴定将沉淀用蒸馏水溶解,加入硫酸铜和酒石酸钾钠溶液,再加入碘液,观察颜色变化。
若溶液呈蓝色,则表示存在肝糖原。
4. 肝糖原含量测定将肝糖原溶液进行比色测定,计算肝糖原含量。
五、实验结果与分析1. 肝糖原提取饱食组大鼠肝糖原提取量显著高于饥饿组和对照组,饥饿组大鼠肝糖原提取量最低。
2. 肝糖原鉴定三组大鼠肝糖原溶液均呈蓝色,说明肝糖原存在。
3. 肝糖原含量测定饱食组大鼠肝糖原含量显著高于饥饿组和对照组,饥饿组大鼠肝糖原含量最低。
六、实验结论1. 饱食状态下,大鼠肝糖原含量增加,饥饿状态下,大鼠肝糖原含量降低。
2. 肝糖原是动物体内重要的能量储存形式,在饱食和饥饿状态下,肝糖原含量变化明显。
七、实验讨论1. 本实验结果表明,肝糖原在动物体内的能量代谢中起着重要作用。
饱食状态下,肝糖原含量增加,为机体提供能量;饥饿状态下,肝糖原含量降低,提示机体可能通过其他途径获取能量。
肝糖原测定实验报告引言:材料与方法:实验组织了6只健康小鼠,体重范围在18-22g之间。
为了控制干扰因素,小鼠在实验前24小时内禁食但可以饮水。
实验分为两组,其中一组为正常对照组,另一组进行饥饿处理。
正常对照组小鼠在实验前24小时内采食正常饲料,而饥饿组小鼠在实验前24小时内不提供饲料。
实验过程中,我们使用了生化试剂盒进行肝糖原测定。
结果:使用酶促色谱法测定,正常对照组小鼠肝糖原平均含量为X mg/g,标准差为S mg/g;饥饿组小鼠肝糖原平均含量为Y mg/g,标准差为Zmg/g。
根据t检验的结果,两组之间肝糖原含量存在显著差异(p<0.05)。
讨论与分析:实验结果表明,在饲养正常鼠类的情况下,小鼠肝脏中的糖原含量较高。
这与肝脏是糖原主要储存器之一的事实相符。
糖原是机体在需求能量时首先被分解的物质,在需要时可通过糖原的分解补充能量。
另一方面,饥饿组小鼠的肝糖原含量明显下降。
这意味着在长时间饥饿的情况下,小鼠体内糖原储备被耗尽。
这可能是由于机体需求能量增加,导致糖原被快速分解以满足机体各种生理活动的需要。
糖原含量的减少表明饥饿状态下机体会不断消耗储备能量,以维持正常生理功能。
然而,本实验存在一些局限性。
首先,样本容量较小,可能会影响结果的统计学意义。
其次,仅仅通过测定肝糖原含量无法全面了解机体的能量代谢情况,后续实验需要进一步考虑其他因素的影响。
结论:通过本实验发现,肝糖原在正常和饥饿状态下存在差异。
正常情况下小鼠肝中的糖原含量较高,而长时间饥饿会导致肝糖原含量的显著下降。
这些结果对于了解机体能量代谢和糖原储存具有重要意义。
在进一步研究中,我们将探索不同条件下糖原的动态变化,以更深入地了解机体能量代谢的机制。
实验三饱食和饥饿大白鼠肝糖原含量的比较实验人:刘彦汶学号:20100331024 班级:针外2010七同组人:郑婉碧、伍晓慧、刘恩茂、董摩扬、曲畅、付建平、石嘉恒实验日期:2012年3月29日指导老师:路雪雅一、实验目的1.学习肝糖原的测定方法。
2.比较饱食和饥饿大白鼠肝糖原的含量二、实验原理许多因素可以影响肝糖原的含量。
如饱食后肝糖原含量增加,饥饿时肝糖原逐渐降低。
糖原不溶于乙醇但可溶于热水,先用三氯醋酸破坏肝组织的酶和蛋白质,使其沉淀而保留糖原,再用乙醇溶液将糖原从滤液或上清液中沉淀出来,溶于热水中,即为糖原溶液。
糖原溶液呈乳样光泽,遇碘呈红棕色,经酸水解可生成还原性的葡萄糖,后者可将碱性铜溶液(班氏试剂)中二价铜还原为氧化亚铜。
利用上述性质可以进行饱食与饥饿肝糖原含量的比较。
1.糖原+碘---棕红色物质2.糖原+Hcl(水解)---葡萄糖+班氏试剂(Cu2+)+(OH-)--- Cu2O三、实验器材水浴锅(100 o C)、研钵、白磁盘、旋涡混合器、离心机、手术机械、滤纸四、实验试剂1、5%三氯乙酸2、0.3%碘液3、95%乙醇4、20%氢氧化钠5、浓盐酸6、班氏试剂五、操作步骤及实验结果1、糖原溶液的制备将大白鼠(饥饿)采用拉断脊柱使其窒息死亡的方法将大白鼠杀死,然后剖腹取出肝脏,迅速用滤纸吸去附着的血液,将整块肝脏放入研钵内剪碎、研磨。
再加5%三氯醋酸溶液20ml,再研磨到肝组织充分磨碎为止(饱食大白鼠,重复上述操作)。
过滤,每组取饱食和饥饿滤液各2ml于离心管(小试管)中,观察两种滤液并比较(解饿组滤液为淡黄色,饱食组滤液为乳白色)。
分别于滤液中加入等体积95%乙醇,混匀后离心5分钟(3000转/分钟),比较两管糖原沉淀量(饥饿组无沉淀,饱食组有白色沉淀)。
小心倾去上清液,于每管各加入蒸馏水1ml,玻璃棒搅起,水浴加热2分钟,即为糖原溶液2、糖原溶液的鉴定3、糖原水解液的比较取试管两支,各加入饥饿鼠或饱食鼠干糖原溶液2ml,每管各加入浓盐酸10滴,置沸水浴中加热10分钟,取出冷却,然后用20%氢氧化钠中和(约20滴),此即为肝糖原水解液。
饥饿、糖尿病和肥胖状态对小鼠肝脏SOCS2基因表达的影响崔安芳;马晓磊;黄延红;张向阳【摘要】Objective To determine the expression levels of SOCS2 in the mouse livers under starvation, diabetes and obese conditions and to study the effect of SOCS2 on gluconeogenesis.Methods Animals were divided into 3 groups: C57BL/6J mice, the control group was fed ad libtum and the experimental group was fasted for 24 h.Diabetes model db/db and the control db/m mice were fed ad libitum.Obese model ob/ob and the control C57BL/6J mice were fed ad libitum.All the mice above were sacrificed and total RNA was isolated from mouse livers and reverse transcribed to cDNA.The expression of SOCS2 and gluconeogenesis genes in the mouse livers in the 3 groups above were detected by real-time quantitative PCR.SOCS2 was overexpressed in the primary C57BL/6J mouse hepatocytes by the adenovirus system.The effect of SOCS2 on glucose production was measured by glucose output assay.Results C57BL/6J mouse hepatic SOCS2 expression was suppressed by starvation status.The expression of SOCS2 was decreased in the livers of db/db and ob/ob mice.In contrast, the key regulators of gluconeogenesis, PGC-1α, PEPCK and G6Pase exhibited the opposite expression pattern as SOCS2 in the livers underidentical starvation, diabetes and obese conditions.The protein was Mr 23 000 and glucose production was inhibited after SOCS2 being overexpressed in the primary C57BL/6J mouse hepatocytes by adenovirus system.Conclusions SOCS2 may inhibit gluconeogenesis in the C57BL/6Jmouse primary hepatocytes, and SOCS2 may be a potential target for the treatment of type Ⅱ diabetes.%目的确定小鼠肝脏SOCS2基因在饥饿、糖尿病和肥胖状态下的表达水平,并初步研究SOCS2对糖异生的影响.方法动物分3组:C57BL/6J小鼠、对照组(饱食)和实验组(饥饿24 h);糖尿病模型小鼠db/db及对照小鼠db/m饱食;肥胖模型小鼠ob/ob及其对照C57BL/6J小鼠(饱食).处死小鼠后提取肝脏RNA做反转录PCR,荧光实时定量PCR检测小鼠肝脏SOCS2及糖异生相关基因在3组小鼠中的表达水平;使用腺病毒表达系统在C57BL/6J小鼠原代肝细胞中过表达SOCS2,Western blot检测SOCS2蛋白的表达,葡萄糖生成实验检测糖输出.结果饥饿使C57BL/6J小鼠肝脏中SOCS2 mRNA水平下调,db/db 和ob/ob小鼠肝脏SOCS2基因表达比其对照小鼠均明显下降(P<0.05),调节糖异生的关键基因PGC-1α、PEPCK和G6Pase的mRNA水平均上升.在C57BL/6J 小鼠原代肝细胞中过表达SOCS2,得到大小为Mr 23 000的蛋白,糖输出受到明显抑制.结论初步认定SOCS2可抑制C57BL/6J小鼠原代肝细胞糖异生,可能是治疗糖尿病的一个新靶点.【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2017(037)006【总页数】5页(P855-859)【关键词】SOCS2;饥饿;糖异生【作者】崔安芳;马晓磊;黄延红;张向阳【作者单位】济宁医学院基础医学院, 山东济宁 272067;济宁医学院基础医学院, 山东济宁 272067;济宁医学院基础医学院, 山东济宁 272067;济宁医学院基础医学院, 山东济宁 272067【正文语种】中文【中图分类】Q591.4糖尿病是以机体血糖浓度异常升高为主要表现的代谢综合征,近年来发病率逐年上升,已成为严重危害人类健康的慢性代谢疾病之一。
一、实验目的本实验旨在探究饱食和饥饿状态下小鼠肝糖原含量的变化,了解肝糖原在糖代谢中的作用及其调节机制。
二、实验原理肝糖原是肝脏储存糖原的主要形式,在维持血糖稳定和能量代谢中发挥重要作用。
饱食状态下,血糖水平升高,胰岛素分泌增加,促进肝糖原合成;饥饿状态下,血糖水平降低,胰高血糖素分泌增加,促进肝糖原分解,释放葡萄糖以满足机体能量需求。
三、实验材料1. 实验动物:健康小鼠10只,体重相近。
2. 实验仪器:电子天平、手术显微镜、离心机、分光光度计、恒温培养箱、手术器械等。
3. 实验试剂:葡萄糖、胰岛素、胰高血糖素、三氯醋酸、碘试剂、标准肝糖原溶液等。
四、实验方法1. 将10只小鼠随机分为两组,每组5只,分别为饱食组和饥饿组。
2. 饱食组:正常喂食,饥饿组:禁食24小时。
3. 饥饿结束后,取饱食组和饥饿组小鼠的肝脏组织,分别称重。
4. 将肝脏组织加入三氯醋酸溶液中,研磨充分。
5. 离心去上清液,沉淀即为肝糖原。
6. 将肝糖原沉淀加入碘试剂,与标准肝糖原溶液进行比色测定,计算肝糖原含量。
五、实验结果1. 饱食组小鼠肝糖原含量显著高于饥饿组。
2. 饥饿组小鼠肝糖原含量随着禁食时间的延长而逐渐降低。
六、实验分析1. 饱食状态下,血糖水平升高,胰岛素分泌增加,促进肝糖原合成,使肝糖原含量升高。
2. 饥饿状态下,血糖水平降低,胰高血糖素分泌增加,促进肝糖原分解,释放葡萄糖以满足机体能量需求,使肝糖原含量降低。
3. 随着禁食时间的延长,肝糖原逐渐被消耗,含量降低。
七、实验结论1. 饱食和饥饿状态下,小鼠肝糖原含量存在显著差异。
2. 肝糖原在维持血糖稳定和能量代谢中发挥重要作用。
3. 胰岛素和胰高血糖素是调节肝糖原含量的关键激素。
八、实验讨论1. 本实验结果表明,饱食和饥饿状态下小鼠肝糖原含量存在显著差异,提示肝糖原在糖代谢中具有重要作用。
2. 胰岛素和胰高血糖素是调节肝糖原含量的关键激素,其作用机制可能涉及以下方面:a. 促进或抑制肝糖原合成酶的活性;b. 促进或抑制肝糖原分解酶的活性;c. 影响肝糖原的合成与分解速率。
肝糖原的提取与鉴定实验报告实验六肝糖原的提取实验六肝糖原的提取、鉴定与定量(生物化学实验操作考核卷)姓名,学号,专业,级班组,月日目的要求:1. 掌握组织样品的制备方法,了解其注意事项。
2. 了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鉴定与蒽酮比色测定糖原含量的原理和注意事项,掌握其操作方法。
3. 正确操作使用刻度吸管和可调微量取液器。
4. 熟练运用溶液混匀的各种方法(视具体情况,采用合适的混匀方法)。
5. 正确掌握溶液转移的操作。
6. 正确操作使用分光光度计。
实验原理:(一)肝糖原的提取、鉴定糖原储存于细胞内,采用研磨匀浆等方法可使细胞破碎,低浓度的三氯醋酸能使蛋白质变性,破坏肝组织中的酶且沉淀蛋白质,而糖原仍稳定地保存于上清液中,从而使用糖原与蛋白质等其它成分分离开来。
糖原不溶于乙醇而溶于热水,故先用95,乙醇将滤液中糖原沉淀,再溶于热水中。
糖原水溶液呈乳样光泽,遇碘呈红棕色。
这是糖原中葡萄糖长链形成的螺旋中,依靠分子间引力吸附碘分子后呈现的颜色。
糖原还可被酸水解为葡萄糖,利用呈色反应和葡萄糖的还原性,可判定肝组织中糖原的存在。
CuSO4十2NaOH ? Na2 SO4+Cu(OH)2?2Cu(OH)2十C6H12O6 ? 2CuOH十氧化型葡萄糖+H2O2CuOH ? Cu2O?(红色)+H2OCu(OH)CuO?(黑色)+H2O(二)肝糖原的定量糖原在浓酸中可水解成为葡萄糖,浓硫酸能使葡萄糖进一步脱水生成糠醛衍生物——5-羟甲基呋喃甲醛,此化合物再与蒽酮脱水缩合生成蓝色的化合物。
该物质在620nm处有最大吸收。
糖含量在(10?100)?g范围内,溶液颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。
利用此反应与同样处理的已知葡萄糖含量标准溶液比色,通过标准对照法(直接比较法)即可计算出样品中糖原的含量。
糖原在浓碱溶液中非常稳定,故在显色之前,肝组织先置于浓碱中加热,以破坏其它成分,而保留肝糖原。
实验材料:(一)仪器1. 普通离心机,室温?100?恒温水浴箱(×2),722型分光光度计,精度为10mg级电子天平(×1)2. 剪刀(×1),镊子(×1),研钵(×1)3. 试管架(×1),10mL离心管(×2),(100×15)mm试管(×6)4. 刻度吸量管(2mL×1,5 mL×2),1000μL微量可调取液器(×1)5. 100mL容量瓶(×1)6. 白瓷反应板(×1)(二)实验样品和试剂1. 鸡肝。
一、实验目的1. 了解肝糖原的生理作用和功能;2. 掌握肝糖原的检测方法;3. 通过实验观察肝糖原在动物体内的变化。
二、实验原理肝糖原是动物体内的一种多糖,主要储存于肝脏和肌肉中。
当血糖水平下降时,肝糖原可以分解为葡萄糖,维持血糖的稳定。
本实验通过观察小鼠肝糖原含量的变化,了解肝糖原在动物体内的作用。
三、实验材料1. 实验动物:小鼠(体重20-25g);2. 试剂:肝糖原检测试剂盒、生理盐水、葡萄糖溶液;3. 仪器:离心机、电子天平、移液器、烧杯、试管等。
四、实验方法1. 将实验小鼠分为实验组和对照组,每组10只;2. 实验组:将小鼠禁食12小时,然后腹腔注射胰岛素溶液,观察小鼠肝糖原含量的变化;对照组:将小鼠禁食12小时,然后腹腔注射等量的生理盐水,观察小鼠肝糖原含量的变化;3. 在注射胰岛素或生理盐水后,分别取实验组和对照组小鼠的肝组织,进行肝糖原检测;4. 肝糖原检测方法:将肝组织剪碎,加入肝糖原检测试剂盒中的试剂,按照说明书操作,观察颜色变化,根据比色结果计算肝糖原含量;5. 记录实验数据,分析实验结果。
五、实验结果1. 实验组小鼠在注射胰岛素后,肝糖原含量明显下降,与对照组相比有显著差异(P<0.05);2. 对照组小鼠在注射生理盐水后,肝糖原含量无明显变化;3. 在注射胰岛素后,部分实验组小鼠出现惊厥现象,经葡萄糖溶液抢救后恢复正常。
六、实验分析1. 实验结果表明,胰岛素可以降低小鼠肝糖原含量,说明胰岛素具有促进肝糖原分解的作用;2. 对照组小鼠在注射生理盐水后,肝糖原含量无明显变化,说明生理盐水对肝糖原含量没有影响;3. 实验组小鼠在注射胰岛素后出现惊厥现象,经葡萄糖溶液抢救后恢复正常,说明胰岛素过量会导致血糖降低,出现惊厥现象。
七、实验结论本实验通过观察小鼠肝糖原含量的变化,验证了胰岛素具有降低肝糖原含量的作用。
实验结果表明,胰岛素在动物体内可以促进肝糖原分解,维持血糖稳定。
饥饿和饱食对小鼠肝糖原的影响的实验报告饥饿和饱食对小鼠肝糖原的影响的实验报告实验三饱食和饥饿大白鼠肝糖原含量的比较实验三饱食和饥饿大白鼠肝糖原含量的比较实验人:刘彦汶学号:20100331024 班级:针外2010七同组人:郑婉碧、伍晓慧、刘恩茂、董摩扬、曲畅、付建平、石嘉恒实验日期:2012年3月29日指导老师:路雪雅一、实验目的1(学习肝糖原的测定方法。
2(比较饱食和饥饿大白鼠肝糖原的含量二、实验原理许多因素可以影响肝糖原的含量。
如饱食后肝糖原含量增加,饥饿时肝糖原逐渐降低。
糖原不溶于乙醇但可溶于热水,先用三氯醋酸破坏肝组织的酶和蛋白质,使其沉淀而保留糖原,再用乙醇溶液将糖原从滤液或上清液中沉淀出来,溶于热水中,即为糖原溶液。
糖原溶液呈乳样光泽,遇碘呈红棕色,经酸水解可生成还原性的葡萄糖,后者可将碱性铜溶液(班氏试剂)中二价铜还原为氧化亚铜。
利用上述性质可以进行饱食与饥饿肝糖原含量的比较。
1. 糖原+碘---棕红色物质2. 糖原+Hcl(水解)---葡萄糖+班氏试剂(Cu2+)+(OH-)--- Cu2O三、实验器材水浴锅(100 oC)、研钵、白磁盘、旋涡混合器、离心机、手术机械、滤纸四、实验试剂1、5,三氯乙酸2、0.3,碘液3、95,乙醇4、20,氢氧化钠5、浓盐酸6、班氏试剂五、操作步骤及实验结果1、糖原溶液的制备将大白鼠(饥饿)采用拉断脊柱使其窒息死亡的方法将大白鼠杀死,然后剖腹取出肝脏,迅速用滤纸吸去附着的血液,将整块肝脏放入研钵内剪碎、研磨。
再加5,三氯醋酸溶液20ml,再研磨到肝组织充分磨碎为止(饱食大白鼠,重复上述操作)。
过滤,每组取饱食和饥饿滤液各2ml于离心管(小试管)中,观察两种滤液并比较(解饿组滤液为淡黄色,饱食组滤液为乳白色)。
分别于滤液中加入等体积95,乙醇,混匀后离心5分钟(3000转/分钟),比较两管糖原沉淀量(饥饿组无沉淀,饱食组有白色沉淀)。
小心倾去上清液,于每管各加入蒸馏水1ml,玻璃棒搅起,水浴加热2分钟,即为糖原溶液2、糖原溶液的鉴定3、糖原水解液的比较取试管两支,各加入饥饿鼠或饱食鼠干糖原溶液2ml,每管各加入浓盐酸10滴,置沸水浴中加热10分钟,取出冷却,然后用20,氢氧化钠中和(约20滴),此即为肝糖原水解液。
第1篇一、实验名称饥饿实验对小鼠生理指标的影响二、实验目的1. 观察饥饿状态对小鼠生理指标的影响。
2. 了解饥饿对小鼠肝脏、血糖、体重等生理指标的影响规律。
三、实验原理饥饿状态下,小鼠的生理机能会发生变化,如肝脏糖原的分解、血糖的降低等。
本实验通过设置不同饥饿时间,观察小鼠生理指标的变化,以探讨饥饿对小鼠生理机能的影响。
四、实验材料1. 实验动物:昆明种小鼠,体重20-25g,雌雄各半。
2. 实验器材:电子秤、温度计、血压计、血糖仪、解剖器械、生理盐水、葡萄糖溶液等。
3. 实验药品:肝糖原试剂盒、血糖试剂盒等。
五、实验方法1. 实验分组:将小鼠随机分为对照组、实验组A、实验组B、实验组C,每组10只小鼠。
2. 饥饿处理:对照组小鼠正常饮食,实验组A、B、C分别进行24小时、48小时、72小时饥饿处理。
3. 生理指标检测:(1)体重:在实验开始和结束前,分别称量小鼠体重。
(2)血糖:在实验开始和结束前,分别检测小鼠血糖水平。
(3)肝糖原:在实验结束前,取小鼠肝脏组织,按照肝糖原试剂盒说明书进行检测。
(4)体温、血压:在实验开始和结束前,分别检测小鼠体温、血压。
六、实验结果1. 体重变化:- 对照组:实验前后体重无明显差异。
- 实验组A:24小时饥饿处理后,小鼠体重下降明显,约为对照组的80%。
- 实验组B:48小时饥饿处理后,小鼠体重下降更为明显,约为对照组的60%。
- 实验组C:72小时饥饿处理后,小鼠体重下降最为明显,约为对照组的40%。
2. 血糖变化:- 对照组:实验前后血糖水平无明显差异。
- 实验组A:24小时饥饿处理后,小鼠血糖水平下降明显,约为对照组的60%。
- 实验组B:48小时饥饿处理后,小鼠血糖水平下降更为明显,约为对照组的40%。
- 实验组C:72小时饥饿处理后,小鼠血糖水平下降最为明显,约为对照组的20%。
3. 肝糖原变化:- 对照组:肝糖原含量约为200mg/g肝组织。
- 实验组A:24小时饥饿处理后,肝糖原含量下降明显,约为对照组的80%。
---一、实验目的明确本次实验旨在探究减食饥饿状态对实验对象生理和心理状态的影响,以及不同减食程度对实验结果的具体影响。
二、实验名称减食饥饿实验三、实验时间[填写实验具体日期和时间]四、实验地点[填写实验进行的具体地点]五、实验者[填写实验者姓名及学号]六、实验对象[填写实验对象种类及数量,例如:10只成年小鼠]七、实验仪器与药品1. 仪器:- 电子天平- 生物显微镜- 生理信号记录仪- 计时器- 环境温湿度计2. 药品:- 营养饲料- 清水- 必要的生理学实验试剂八、实验原理本实验通过控制实验对象的进食量,模拟饥饿状态,观察并记录其在生理和心理方面的变化,以探讨减食饥饿对生物体的影响。
九、实验方法1. 分组:将实验对象随机分为若干组,每组数量相等。
2. 减食处理:根据实验设计,对实验对象进行不同程度的减食处理,如正常进食、轻度减食、中度减食和重度减食。
3. 观察指标:- 生理指标:体重、体温、心率、血压等。
- 心理指标:行为观察、情绪评估等。
4. 数据记录:定期记录实验对象的各项指标,并做好详细记录。
十、实验步骤1. 实验准备:准备实验仪器、药品和实验对象。
2. 分组与处理:将实验对象随机分组,并进行减食处理。
3. 观察与记录:按照实验设计,观察并记录实验对象的生理和心理变化。
4. 数据处理:对收集到的数据进行统计分析。
十一、实验结果1. 生理指标:记录实验对象的体重、体温、心率、血压等生理指标变化。
2. 心理指标:通过行为观察和情绪评估,记录实验对象的心理状态变化。
十二、实验讨论1. 分析减食饥饿对实验对象生理指标的影响,探讨其作用机制。
2. 分析减食饥饿对实验对象心理指标的影响,探讨其作用机制。
3. 比较不同减食程度对实验结果的影响。
十三、实验结论根据实验结果,总结减食饥饿对实验对象生理和心理状态的影响,并提出相应的结论。
十四、实验建议1. 实验过程中应注意观察实验对象的生理和心理变化,确保实验安全。
饥饿、糖尿病和肥胖状态对小鼠肝脏SOCS2基因表达的影响崔安芳;马晓磊;黄延红;张向阳【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2017(037)006【摘要】目的确定小鼠肝脏SOCS2基因在饥饿、糖尿病和肥胖状态下的表达水平,并初步研究SOCS2对糖异生的影响.方法动物分3组:C57BL/6J小鼠、对照组(饱食)和实验组(饥饿24 h);糖尿病模型小鼠db/db及对照小鼠db/m饱食;肥胖模型小鼠ob/ob及其对照C57BL/6J小鼠(饱食).处死小鼠后提取肝脏RNA做反转录PCR,荧光实时定量PCR检测小鼠肝脏SOCS2及糖异生相关基因在3组小鼠中的表达水平;使用腺病毒表达系统在C57BL/6J小鼠原代肝细胞中过表达SOCS2,Western blot检测SOCS2蛋白的表达,葡萄糖生成实验检测糖输出.结果饥饿使C57BL/6J小鼠肝脏中SOCS2 mRNA水平下调,db/db和ob/ob小鼠肝脏SOCS2基因表达比其对照小鼠均明显下降(P<0.05),调节糖异生的关键基因PGC-1α、PEPCK和G6Pase的mRNA水平均上升.在C57BL/6J小鼠原代肝细胞中过表达SOCS2,得到大小为Mr 23 000的蛋白,糖输出受到明显抑制.结论初步认定SOCS2可抑制C57BL/6J小鼠原代肝细胞糖异生,可能是治疗糖尿病的一个新靶点.【总页数】5页(P855-859)【作者】崔安芳;马晓磊;黄延红;张向阳【作者单位】济宁医学院基础医学院, 山东济宁 272067;济宁医学院基础医学院, 山东济宁 272067;济宁医学院基础医学院, 山东济宁 272067;济宁医学院基础医学院, 山东济宁 272067【正文语种】中文【中图分类】Q591.4【相关文献】1.非肥胖性糖尿病小鼠在1型糖尿病发病过程中的基因表达谱改变 [J], 李敏;宋陆军;高晓东;常文举;付亮;秦新裕2.白细胞介素10基因对未发病非肥胖型糖尿病小鼠肝脏胰-十二指肠同源盒1表达的影响 [J], 于淑凤;任安霞;张丽娟;李堂3.白细胞介素10基因对未发病非肥胖型糖尿病小鼠肝脏胰-十二指肠同源盒1表达的影响 [J], 于淑凤;任安霞;张丽娟;李堂;4.降糖消渴颗粒对糖尿病小鼠肝脏糖原储备量及糖代谢相关基因表达的影响 [J], 张毅;赵丹丹;莫芳芳;高思华5.饥饿胁迫对淡水石首鱼形体指标、肌肉脂肪酸组成及肝脏脂肪代谢基因表达的影响 [J], 刘广翔;宋长友;闻海波;吴宁远;陈健翔;李红霞;徐跑因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
饥饿小鼠和饱食小鼠肝糖原含量及血糖的比较罗永会;张翠香;徐春萍【摘要】Objective: Hunger and satiation on mouse Liver glycogen and Blood glucose determination, Awareness of hunger and satiation on blood glucose and glycogen in the original effect.. Method: Taking the weight above 25g health mice 60, Were randomly divided into two groups: The hungry group 30, Before the experiment strict fasting to restrain water30h ; Repletion group, Free feeding, drinking water. Then by anthrone colorimetric method for determination of mouse liver glycogen, Using Folin- Wu method for the determination of blood glucose in mice. Result:Hunger and satiety were compared with blood glucose and hepatic glycogen in mice showed significantly decreased or increased trend( That hungry mice blood glucose and liver glycogen reduction, Sated mice blood glucose and liver glycogen increases ) , And the P〈0.05 has statistical significance. Conclusion: Repletion after liver glycogen increases, Hunger reduced liver glycogen; Blood glucose was significantly elevated after feeding, Blood glucose was significantly reduced, hunger.%目的:通过对饥饿小鼠和饱食小鼠血糖及肝糖原测定,了解饥饿及饱食对血糖和肝糖原有影响。
进食状态对糖尿病大鼠血糖及肝糖原的影响实验目的:1.熟悉常用的糖尿病大鼠造模方法2.掌握血糖仪的使用方法3.掌握组织样品的制备方法4.了解血清胰岛素水平检测方法5.熟悉肝糖原提取、鉴定的方法与原理6.通过本实验探讨临床糖尿病患者不同进食状态对血糖的影响实验用品:一、器材:普通离心机,酶标仪,恒温水浴箱,分光光度计,0.01g电子天平、0.1g电子天平,血糖仪,棉签,干棉球,剪刀2把,镊子2把,研钵2个,白磁盘,试管架,拆条酶标板,吸水纸,5ml离心管,试管,烧杯,漏斗,玻璃棒,刻度吸量管,EP管,滤纸,1000μl微量可调取液器,50ml容量瓶3个,注射器,白瓷反应板,塑料手套,布手套,抹布,记号笔二、试剂:5%三氯乙酸溶液,蒸馏水,生理盐水,碘试剂,95%乙醇,标准葡萄糖溶液(50mg/L),98%浓硫酸,30%KOH溶液,0.2%蒽酮显色剂,柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液(PH4.4),1%链脲佐菌素(STZ)溶液,10%水合氯醛溶液,大鼠胰岛素(INF)ELISA检测试剂盒实验步骤:一、标记:二、造模:A、抓取大鼠并称重。
(结果见表一)B、大鼠先禁食12小时后(此部分为老师帮忙完成),进行血糖检测。
然后抓取大鼠单次腹腔注射按1%STZ溶液(65mg/Kg),注射后一小时,给予自由饮食、饮水。
具体抓取大鼠方法:用右手将鼠尾抓住提起,放在较粗糙的台面或鼠笼上,抓住鼠尾向后轻拉,左手紧抓两耳和头颈部皮肤,余下三指紧捏鼠背部皮肤,如果大鼠后肢挣扎厉害,可将鼠尾放在小指和无名指之间夹住。
C、以后每天安排人员进去喂养动物,记录饮食量和更换垫料。
D、待72小时后大鼠尾静脉采血再次检测血糖,以餐后血糖≥16.7mmol/L为大鼠糖尿病模型造模成功的判定标准。
血糖检测具体步骤:将血糖检测专用试纸插入血糖分析仪中,待血糖仪显示屏上显示滴血标记时,方可使用。
用剪刀剪断大鼠尾尖约<0.5cm,挤出的第一滴血用棉球擦掉不要,第二滴血滴在试纸上。
饥饿和饱食对小鼠肝糖原的影响的实验报告饥饿和饱食对小鼠肝糖原的影响的实验
报告
实验三饱食和饥饿大白鼠肝糖原含量的比较
实验三饱食和饥饿大白鼠肝糖原含量的比较
实验人:刘彦汶学号:20100331024 班级:针外2010七同组人:郑婉碧、伍晓慧、刘恩茂、董摩扬、曲畅、付建平、石嘉恒实验日期:2012年3月29日指导老师:路雪雅
一、实验目的
1(学习肝糖原的测定方法。
2(比较饱食和饥饿大白鼠肝糖原的含量
二、实验原理
许多因素可以影响肝糖原的含量。
如饱食后肝糖原含量增加,饥饿时肝糖原逐渐降低。
糖原不溶于乙醇但可溶于热水,先用三氯醋酸破坏肝组织的酶和蛋白质,使其沉淀而保留糖原,再用乙醇溶液将糖原从滤液或上清液中沉淀出来,溶于热水中,即为糖原溶液。
糖原溶液呈乳样光泽,遇碘呈红棕色,经酸水解可生成还原性的葡萄糖,后者可将碱性铜溶液(班氏试剂)中二价铜还原为氧化亚铜。
利用上述性质可以进行饱食与饥饿肝糖原含量的比较。
1. 糖原+碘---棕红色物质
2. 糖原+Hcl(水解)---葡萄糖+班氏试剂(Cu2+)+(OH-)--- Cu2O
三、实验器材
水浴锅(100 oC)、研钵、白磁盘、旋涡混合器、离心机、手术机械、滤纸
四、实验试剂
1、5,三氯乙酸
2、0.3,碘液
3、95,乙醇
4、20,氢氧化钠
5、浓盐酸
6、班氏试剂
五、操作步骤及实验结果
1、糖原溶液的制备
将大白鼠(饥饿)采用拉断脊柱使其窒息死亡的方法将大白鼠杀死,然后剖腹取出肝脏,迅速用滤纸吸去附着的血液,将整块肝脏放入研钵内剪碎、研磨。
再加5,三氯醋酸溶液20ml,再研磨到肝组织充分磨碎为止(饱食大白鼠,重复上述操作)。
过滤,每组取饱食和饥饿滤液各2ml于离心管(小试管)中,观察两种滤液并比较(解饿组滤液为淡黄色,饱食组滤液为乳白色)。
分别于滤液中加入等体积95,乙醇,混匀后离心5分钟(3000转/分钟),比较
两管糖原沉淀量(饥饿组无沉淀,饱食组有白色沉淀)。
小心倾去上清液,于每管各加入蒸馏水1ml,玻璃棒搅起,水浴加热2分钟,
即为糖原溶液
2、糖原溶液的鉴定
3、糖原水解液的比较
取试管两支,各加入饥饿鼠或饱食鼠干糖原溶液2ml,每管各加入浓盐酸10滴,置沸水浴中加热10分钟,取出冷却,然后用20,氢氧化钠中和(约20滴),此即为肝糖原水解液。
解饿组滤液为淡黄色,饱食组滤液为乳白色,说明糖原溶液呈乳样光泽
在两种滤液中加入等体积95,乙醇,离心后发现饥饿组无沉淀,饱食组有白色
沉淀,而且沉淀加水水浴后溶解,说明糖原不溶于乙醇但可溶于热水。
在糖原溶液的鉴定的试验中,试管1中产生棕红色物质,其他两个试管中均无变化,糖原溶液遇碘产生红棕色物质。
在糖原水解液的比较的实验中,试管1溶液变砖红色,其他两试管无明显变化,说明糖原经酸水解可生成还原性的葡萄糖,还原性的葡萄糖可将碱性铜溶液(班氏试剂)中二价铜还原为氧化亚铜。
上述现象都说明,饥饿大白鼠肝糖原含量明显比饱食大白鼠肝糖原含量少,甚至饥饿大白鼠肝脏中没有肝糖原。
问题分析
1、研磨要充分,否则溶液中糖原可能不足而使实验现象不够明显。
2、在溶液离心前须将对应位置上的溶液平衡,否则可能使离心不完全。
3、在糖原水解液的比较实验中,需加入过量的氢氧化钠溶液再
水浴加热,否则可能使实验现象不够明显。
篇二:饥饿对小鼠肝糖原影响的显微观察设计
饥饿对小鼠肝糖原影响的显微观察
一(实验用品
饲养笼,解剖盘,大头针,棉花,剪刀,镊子,解剖刀,溶蜡箱,切片机,载玻片,盖玻片,恒温箱,染色缸,光学显微镜,各种浓度乙醇,二甲苯,石蜡,苏木精染液,盐酸-乙醇,氨水,伊红液,石炭酸-二甲苯混合液,1%过碘酸,Schiff 试剂,0.5%偏重亚硫酸钠(Na2S2O5)溶液,醋酸酐-吡啶混合液,0.5%~1%淀粉糖化酶溶液,加拿大树胶,蒸馏水(无菌水),相同生理状态的健康小白鼠10只雄性小白鼠二(试剂配制
1(Carnoy固定液:(甲醇?冰乙酸=3?1),每次使用前需临时配制。
2(Schiff试剂:称取0.5g碱性品红加入到100ml煮沸的蒸馏水中(用三角瓶),时时振荡,继续煮5min(勿使之沸腾),充分溶解。
然后冷却致50?时用滤纸过滤,滤液中加入
10ml1mol/LHCl,冷却致25?时,加入0.5g偏重硫酸钠,充分振荡后,塞紧瓶塞,在室温暗处静置至少24h(有时需要2至3天),使其颜色退至淡黄,然后加入0.5g 活性碳,用力振荡一分钟,最后用粗滤纸过滤于棕色瓶中,封瓶塞,外包黑纸。
3(苏木精染液
苏木素1g,无水乙醇10ml,硫酸铝钾20g,蒸馏水200ml,氧化汞0.5g,冰醋酸,8ml,先用无水乙醇溶解苏木素,用蒸馏水加
热溶解硫酸铝钾;然后将该两液合并煮沸,加入氧化汞,继续加热和搅拌溶液至深紫色,随即用冰水冷却,恢复至室温后过滤备用。
使用前加入冰醋酸并混匀、过滤。
4( 盐酸,乙醇分化液浓盐酸1 ml,70%乙醇99 ml 5(伊红液伊红0.5 g,蒸馏水100 ml,无水氯化钙0.5 g 6(石炭酸-二甲苯混合液石炭酸:二甲苯=1:3
7(醋酸酐吡啶混合液:醋酸16ml,无水吡啶24ml 三(实验程序
(一)实验材料饥饿处理
取8只健康雄性小白鼠, 体重25g,动物领回后, 正常喂养一天, 室温21?, 普通饲料, 自由进食及饮自来水。
然后随机分成两组: 正常组4只, 普通饲料喂养,自由饮自来水; 饥饿组4只, 禁食仅供自来水。
一天后,从两组中各随机取出2只小白鼠,进行肝组织切片观察。
两天后,将剩下的小白鼠分别进行肝组织切片观察。
(二)肝组织石蜡切片制作与染色 1(实验片处理 (1)固定
取1~2mm 厚的肝组织,用Carnoy 固定液固定,放冰箱2~4 h 。
(2)酒精脱水依次经过95%酒精两次,每次20-30min,100%酒精两
次,分别为30、40min。
(3)二甲苯透明
将组织块置于二甲苯中透明,以二甲苯替换出组织块的中酒精。
(4)石蜡包埋
将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中,放入溶蜡箱保温。
待石蜡完全浸入组织块后进行包埋:先制备好容器(如折叠一小纸盒),倒入已溶化的石蜡,迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中,冷却凝固成块即成。
(5)切片与展片将包埋好的蜡块固定于切片机上,切成薄片,一般为5—8μm厚。
切下的薄片往往皱折,要放到加热的水中烫平,再贴到载玻片上,放45?恒温箱中烘干。
(6)脱蜡
(7)0.5%,1%过碘酸水溶液浸泡2,5min(不能过长)。
(8)蒸馏水洗。
(9)PAS反应
(10)HE染色
(11)吸干后,脱水
(12)中性树胶封藏。
2(对照片处理
(1)用乙酰作用阻断PAS反应
?对照片用醋酸酐16ml与无水吡啶24ml 混合液处理1,24小时,22?。
?水洗。
?PAS反应。
(2).淀粉糖化酶
?切片脱蜡复水,用1%淀粉糖化酶溶液pH6.0,处理40min,37?;或处理
60min,室温;或用唾液处理,每30min换一次,共两次,室温。
?流水洗5~10min,蒸馏水洗。
篇三:生化实验教案(36学时)
教案
2010 , 2011 学年第一学期
系、教研室中西医结合学院、生物化学教研室
课程名称生物化学
专业、年级、班级 09临床乙班
主讲教师施红
福建中医药大学教师姓名: 职称: 年月日教师姓名: 职称: 年月日教师姓名: 职称: 年月日。