第1章生物化学基础
1、一句话问题
1.生命形式虽然千差万别，在就化学本质而言，他们具有一致性。
2.生命体区别于非生命体的四个基本特征。
3.有机体遵行热力学第一定律，通过增大环境的无序而使得自身有序化。
4.生命体的信息流基本类同。
5.根据SSU RNA序列细胞分为三类，细菌、古细菌和真核细胞。古细菌与真核细胞更接近。
6.线粒体和叶绿体是通过内共生进入真核细胞。线粒体来源于紫细菌，叶绿体来源于蓝细菌。
7.细胞与细胞器<--超分子复合体<---- 大分子<--单体
8.生物分子结构决定反应性、结构决定功能、结构也代表一种信息。
9.细胞内是一个水环境，水为细胞内生化反应提供了反应介质，甚至直接参与反应。
第2章氨基酸与肽
概念
蛋白氨基酸:参与蛋白质组成的20种氨基酸。
非蛋白氨基酸：不参与蛋白质的组成的氨基酸。
兼性离子：既有带负电荷基团，又有带正电荷基团的离子称为兼性离子或两性离子，亦称偶极离子。
pI （等电点）：在一定PH值时，氨基酸以兼性离子形式存在，此时该离子所带的静电荷为零，在电场中不会向正负极移动，此时溶液的PH称为该离子的等电点。不同结构的两性离子有不同的
等电点。
pI= 1/2 (pK1’ +pK2’)
酸性Aa pI= 1/2(pK1’ +pKR’)
碱性Aa pI= 1/2(pK2’ +pKR’)
Paralogues 并系同源物：一个个体中既有一定关系却又不相同的蛋白质。
orthologues 直系同源物：具有相同功能的蛋白质
写出20中氨基酸的三字母和单字母缩写，哪些属于酸性，哪些属于碱性，哪些含羟基，哪些含硫元素。（1）中性氨基酸：
1、glycine 甘氨酸 Gly G
2、alanine 丙氨酸 Ala A
3、valine 缬氨酸 Val V
4、leucine 亮氨酸 Leu L
5、isoleucine 异亮氨酸 Ile I
(2)含羟基或巯基氨基酸
6、 serine 丝氨酸 Ser S
7、threcnine 苏氨酸 Thr T
8、 cysteine 半胱氨酸 Cys C
9、methionine 甲硫氨酸 Met M
(3)酸性氨基酸及其酰胺
10、aspartate 天冬氨酸 Asp D 11、glutamate 谷氨酸 Glu E 12、ASPARAGINE 天冬酰胺 Asn N 13、glutamine 谷氨酰胺 Gln Q
（4）碱性氨基酸
14、lysine 赖氨酸 Lys K 15、arginine 精氨酸 Arg R 16、histidine 组氨酸 His H 17、proline 脯氨酸 Pro P
（5）芳香族氨基酸
18、phenylalenine 苯丙氨酸 Phe P 19、tyrosine 酪氨酸 Tyr Y 20、tryptophan 色氨酸 Trp W
氨基的化学反应:
◆与茚三酮 (ninhydrin) 的反应定量反应
◆与亚硝酸的反应 Van Slyke定氮
◆与2,4-二硝基氟苯 (FDNB) 的反应测序
◆与甲醛的反应氨基滴定
◆与酰化基的反应氨基保护基
◆与二甲基氨基萘磺酰氯 (DNS-Cl)的反应测序
◆与荧光胺的反应微量检测
◆与Edman试剂 (苯异硫氰酸酯)反应测序
与茚三酮反应：氨基酸脱羧脱氨被氧化，水合茚三酮被还原，氧化型和还原型的水合茚三酮与
氨反应生成二酮茚-二酮茚胺的取代盐等蓝紫色化合物。
二甲基氨基萘磺酰氯 (DNS-Cl，Dansyl chloride)，目前用于蛋白质微量测序的主要试剂。
4-(N,N-二甲基氨基)偶氮苯-4‘-磺酸氯Dabsyl chloride
1、什么是sanger反应
在弱碱性溶液中，氨基酸的α-氨基很容易与2，4-二硝基氟苯作用，生成稳定的黄色2，4-二硝基苯氨基酸。2，4－二硝基氟苯被称为Sanger试剂。在弱碱性（pH 8~9）、暗处、室温或40℃条件下，氨基酸的α-氨基很容易与2,4-二硝基氟苯（缩写为FDNB或DNFB）反应，生成黄色的2,4-二硝基氨基酸（dinitrophenyl amino acid，简称DNP-氨基酸）。多肽或蛋白质的N-末端氨基酸的α-氨基也能与FDNB反应，生成一种二硝基苯肽（DNP-肽）。由于硝基苯与氨基结合牢固，不易被水解，因此当DNP-多肽被酸水解时，所有肽键均被水解，只有N-末端氨基酸仍连在DNP上，所以产物为黄色的DNP-氨基酸和其它氨基酸的混合液。混合液中只有DNP-氨基酸溶于乙酸乙酯，所以可以用乙酸乙酯抽提并将抽提液进行色谱分析，再以标准的DNP-氨基酸作为对照鉴定出此氨基酸的种类。因此2,4-二硝基氟苯法可用于鉴定多肽或蛋白质的N-末端氨基酸。
什么是Edman反应
在弱碱条件下Aa与异硫氰酸苯酯（PITC）反应生成苯乙内酰硫脲衍生物，生成的衍生物可
通过层析法分离鉴定，Edman首先用此反应鉴定多肽的N-端AA。
从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程。N末端氨基酸残基被苯异硫氰酸酯修饰，然后从多肽链上切下修饰的残基，再经层析鉴定，余下的多肽链（少了一个残基）被回收再进行下一轮降解循环。
肽(peptide )
氨基酸之间通过肽键联结起来的化合物称为肽。两个氨基酸形成的肽叫二肽，三个氨基酸形成的肽叫三肽……，十个氨基酸形成的肽叫十肽，一般将十肽以下称为寡肽(oligopeptide)，以上者称多肽(polypeptide)或称多肽链。
氨基酸残基(amino acid residues )
肽链中的氨基酸在参加肽键形成时失去了1分子水，已经不是原来完整的分子，称为氨基酸残基。
命名及书写方式
1.一条肽链通常含有一个游离的α-氨基端(N-末端)和一个游离的α-羧基端(C-末端)。
2.规定肽链的氨基酸排列顺序从其N-末端开始，到C-末端终止。常把N-末端氨基酸残基放
在左边，C-末端氨基酸残基放在右边。
3.小分子肽一般按其氨基酸残基排列顺序命名，如：Tyr-Gly-Gly-Phe-Met称为：酪氨酰甘
氨酰甘氨酰苯丙氨酰蛋氨酸（脑啡肽）。
它们在蛋白质测序过程中有何用途？
2、如何测定蛋白质的序列？
1肽链的拆开和分离
●2测定蛋白质分子中多肽链的数目
●3二硫键的断裂
●4测定每条多肽链的氨基酸组成，并计算出氨基酸成分的分子比
●5N端、C端的测定
●6多肽链断裂
●7测定每个肽段的氨基酸顺序。
●8确定肽段在多肽链中的次序。
●9确定原多肽链中二硫键的位置。
亚基还原解离，N末端确定，氨基酸组成确定，两组以上酶解，Edman降解确定每一个小片段的序列，序列拼接，对角线电泳确定二硫键位置。
第3章蛋白质的空间结构
1、概念
肽键：蛋白质分子中氨基酸连接的基本方式。
肽平面：肽键是一个共振杂化体，共振的后果是肽键具有部分双键性质，不能饶键轴自由旋转，主键肽基或成为刚性平面，称为肽平面。
ψ角，φ角：绕C---N键轴旋转的二面角称为φ角，绕C---C键轴旋转的二面角称为ψ角。
超二级结构：由若干相邻的二级结构单元组合在一起，彼此互相作用，形成有规则、在空间上能辨认的二级结构组合体，充当三级结构的构件，称为超二级结构。
结构域：蛋白质的三级结构常可分为1个和数个球状区域，折叠的较为紧密，个行其功能，称为结构域。
2、简答
1、如何确定蛋白质的空间结构
（1）X射线衍射法
（2）1.紫外差光谱 2.荧光和荧光偏振 3.圆二色性 4.核磁共振
2、蛋白质的二级结构形式主要有哪几种，它们结构特点如何，主要由那种最用了驱动。
二级结构：а—螺旋、β—折叠、β—转角、β-凸起、无规则卷曲
а—螺旋特点：重复性结构，相互之间紧密盘曲成稳固的右手螺旋，肽平面维持刚性结构。
β—折叠特点：重复性结构，有平行和反平行两种方式，多肽链充分伸展，构想稳定。
β—转角特点：非重复性结构，其构象是由第二残基а—碳和第三残基а—碳的二面角所规定的。
无规则卷曲特点：非重复性结构，肽链主链的某些区域形成不规则的结构。
β-凸起特点：是一种小片的非重复结构，能单独存在，但大多数经常作为反平行β折叠中的一种不规则情况存在β-凸起可认为是β折叠的一股肽链上额外插入了一个残基，造成凸起股产生微小弯曲。β凸起可引起多肽链方向的改变，但改变的程度不如β-turn。
3、驱动蛋白质形成空间结构的作用力是什么？
氢键范德华力疏水键盐键（二硫键离子键）
疏水相互作用：非极性侧链在极性溶剂中，为避开水彼此靠拢所产生的一种内聚力，其本质也是范德华力，主要存在蛋白质的内部结构中
4、四级结构的形成对蛋白质由何意义。
1.增强结构稳定性
2.提高遗传经济性和效率а
3.使催化基团汇集在一起
4.具有协同性和别构效应
5、蛋白质中超二级结构主要有哪几种？
答：主要有：аа、βаβ、ββ
аа：这是一种а螺旋束，它经常是由两股平行或反平行排列的右手螺旋段互相缠绕而成的左手卷曲螺旋或称超螺旋。
βаβ:它是由两段平行β折叠股和一段作为连接链的а螺旋组成，β股之间还有氢键相连。
ββ：反平行β折叠片
6、什么是蛋白质变性与复性，蛋白变性后都能复性吗，细胞内有一些蛋白质可辅助其它蛋白质的折叠，
它们是什么，如何起作用（分子伴侣，二硫键异构酶PDI，肽基脯氨酰顺反异构酶PPI）？
答：蛋白质变性：天然蛋白质分子受到某些物理因素如热、紫外线照射、高压和表面张力等或化学因素如有机溶剂、脲、胍、酸、碱等的影响时，蛋白质分子的构象发生了异常变化。使其生物活性丧失，溶解度降低，不对称性增高以及其他的物理化学常数发生改变，这种过程称为蛋白质变性。
蛋白质的复性：当变性因素出去后，变性蛋白质又可重新回复到天然构象，这一现象称为蛋白质的复性。
不是所有的蛋白质变性后都能复性，主要是因为所需条件复杂。
辅助折叠的有分子伴侣，二硫键异构酶PDI,PDI与蛋白质底物的多肽主链结合，并优先与含半胱氨酸残基的肽发生相互作用。分子伴侣他们通过抑制新生肽链不恰当的聚集并排除与其他蛋白质不合理的结
合，协助多肽的正确折叠。肽基脯氨酸顺反异构酶是蛋白质三维构象形成的限速酶，在肽链合成需形成顺式构型时，可使多肽在各脯氨酸弯折处形成准确折叠。
第4章蛋白质功能
?概念
氧饱和曲线
肌红蛋白的氧饱和曲线
BPG：---2，3-二磷酸甘油酸
Hbs：镰刀形细胞贫血症的红细胞之所以变性是因为不正常的血红蛋白引起的，这种蛋白称为HBs.
抗原:能引起免疫反应的任何分子或病原体称为抗原(antigen).
表位:一个单独的抗体或T细胞受体只能结合抗原内的一个特定分子结构，称为它的抗原决定簇或表位单克隆抗体:有同一个B细胞克隆合成并分泌，是一种均一的抗体，识别同一个抗原决定簇
多克隆抗体：是识别一个抗原的不同决定簇的多种抗体的混合物。
ELISA：即酶联免疫吸附测定，它能快速筛查和定量一个抗原在样品中的存在。
Western blot：免疫印迹测定，对蛋白质样品进行凝胶电泳分离，然后凝胶板与硝酸纤维模板贴在一起，进行电泳转移，将凝胶上的蛋白条带转印到纤维模板上。
Fab:两个单价的臀片段（Mr45000）
Fc : 释放基部片段（Mr50000）
HMC: 称为主要组织相容性复合体的膜蛋白结合
?简答
?以血红蛋白和肌红蛋白为例说明蛋白质结构与功能的关系。
血红蛋白是一种寡聚蛋白，由α2β 2组成的四聚体，每个亚基均有一个血红素，且有与氧结合的高
亲和力，每个血红素都可以和一个氧分子结合，当四个亚基组成血红蛋白后其结合氧的能力就会
随氧分压及其他因素的改变而改变，由于血红蛋白的分子构象可以发生一定程度的变化，从而影
响了血红蛋白与氧结合能力，另外血红蛋白分子上残基若发生变化，也会影响其功能的改变，如
血红蛋白β链中的N-末端第六位上谷氨酸被缬氨酸取代，就会产生镰刀形细胞贫血症使细胞不能
正常携带氧。
肌红蛋白其主要功能是储存氧，Mb是由一条肽链（153个氨基酸残基）和一个辅基血红素构成。
它由8个a-螺旋组成。其三级结构折叠方式使辅基血红素对环境中氧浓度的改变非常敏感，当环
境中氧分压高时，mb与氧结合能力极高，起到对氧的储存功能，当环境中氧分压低时，肌红蛋白
与氧结合能力大大降低，对外释放氧气，为环境提供氧气，供机体所需。
?血红蛋白是，每个亚基都有一个血红素辅基，和一个氧结合部位。每一个亚基相当于一个肌红蛋白。
血红蛋白的四个亚基之间通过次级键结合在一起，其中unlike的亚基之间
的结合紧密，在血红蛋白和氧结合的过程中，亚基之间的缔合会受到影响。
血红蛋白亚基之间可通过离子键相互作用，从而稳定其四级结构。在与氧
结合的过程中，亚基间的离子键发生变化。未结合氧的T态，T态时，形
成盐桥
?与氧结合的R态，R态时，盐桥断裂
?血红蛋白对氧的结合具有分子开关效应。血红蛋白中各亚基之间存在协同效应。
?胎儿与成人的血红蛋白和肌红蛋白有何不同 ?
人在不同的发育阶段血红蛋白亚基的种类是不同的。至少有7种基因：α、β、Aγ、Gγ、δ、ε、ζ（zita）
成人血红蛋白主要是Hb A(Hb A1),其亚基组成为α2β2; 次要组分是Hb A2，其亚基组成为α2 δ2（约占总Hb的2%）胎儿血红蛋白简称Hb F，亚基组成为α2γ2（Aγ和Gγ均存在于Hb F中，其差别仅在于第136位上的Ala改变为Gly）。Hb F的γ链和β链很相似，也由146个氨基酸组成但是γ链中的H21（第143位）残基是Ser，而不是β链中的His。这样就减少了BPG（2，3-二磷酸甘油酸）分子结合部位的正电荷，也即减低了对BPG的亲和力。Hb F对BPG的亲和力减低使得它对氧的亲和力增高。因此独立循环系统的胎儿能有效地通过胎盘从母体的血循环中吸收氧。BPG和血红蛋白的结结合位点远离氧结合位点。胎儿通过脐带从母体中获得氧，所以胎儿的血红蛋白和氧的亲和力必须大于成年人。a2r2,r亚基和PBG结合力下降。PBG表面的负电荷和分子表面的正电荷相互作用。R态，PBG不能和HB结合。
?抗体分为哪几类，含量最多的是那种，它的结构特征是什么？
分为IgG,IgA,IgM,IgD和IgE
最主要的是IgG，它是由4条多肽链组成的，两条大的链称为重链或H链，两条小的链称为轻链或L链。他们通过非共价键和二硫键连接成Mr150000的复合体。IgG分子的两条重链在一端彼此相互作用，在另一端分别于轻链相互作用，形成Y形结构。
?什么是分子病，举例说明一级结构和高级结构的关系。
由于基因或DNA分子的缺陷，致使细胞内RNA及蛋白质合成出现异常、人体结构与功能随之发生变异的疾病。蛋白质的一级结构决定其高级结构。如：镰刀型红细胞贫血症仅仅是因为在血红蛋白分子的4条肽链的574个氨基酸残基中只有两条β链中的两个谷氨酸残基分别为两个缬氨酸残基所代替而引起的严重的分子病。又如核糖核酸酶含124个氨基酸残基，含4对二硫键，在尿素和还原剂β-巯基乙醇存在下松解为非折叠状态。但去除尿素和β—巯基乙醇后，该有正确一级结构的肽链，可自动形成4对二硫键，盘曲成天然三级结构构象并恢复生物学功能。
?参与肌肉收缩的两种主要蛋白是什么，如何实现肌肉的收缩。
一类是所谓发动机蛋白质也称分子发动机，这类蛋白质主要有肌球蛋白、动力蛋白和驱动蛋白。另一类是作为分子发动机的基地或运动轨道的蛋白质，如微丝和微管他们是细胞骨架的重要成分。
发动机蛋白质是一类涉及移动或转运的机械化学酶，例如肌球蛋白实际上是一种ATP酶，酶的活性中心在它的头部，这类酶能把核苷三磷酸（一般是ATP）形式的化学能转变为收缩、游动一类的机械能。ATP的水解驱动并控制蛋白质的构象变化，结果是一个分子（分子发动机）相对于另一个分子（微丝或微管）发生相对滑动或步行运动。
抗体是由那种类型细胞产生，为什么抗体的数目远大于人类基因的数目，对应于某一种抗原的抗体是如何产生的？
答：抗体是由淋巴细胞产生的，抗体具有特异性和多样性的特点。特异性只抗体只能与引起它产生的相应抗原发生反应。多样性指抗体可以喝成千上万的各种抗原（天然的和人工的）起反应。所以抗体的数目要远大于人类基因数目。少数抗原的抗原决定簇与B细胞表面的受体分子结合，从而直接刺激B细胞使之活化长大并迅速分裂。
多数抗原要先经过吞噬细胞无特异性的吞噬后，一些抗原分子穿过吞噬细胞的细胞膜而露到细胞表面，夹在吞噬细胞本身的组织相容性附合体分子的沟中。T细胞中有一类助T细胞，不同的助T细胞表面带有不同的受体，能识别不同的抗原。那些能识别吞噬细胞表面组织相容性抗原加上特异的抗原分子结合物的助T细胞，在遇到这些吞噬细胞后，就活化分裂而产生更多有同样特异性的助T细胞。B细胞表面也带有组织相容性附合体，可和特异的抗原分子结合。上述特异的助T细胞的作用是刺激已经和特异的抗原分子结合的B细胞，使之分裂分化。这一B细胞依靠助T细胞和吞噬细胞而活化的步骤，比第一个不需要助T细胞参与的步骤作用更强大。
反应阶段：指B细胞接受抗原刺激后，增殖分化形成效应B细胞和记忆细胞的过程。所谓效应B细胞也称浆细胞，一般停留在各种淋巴结中，它们产生抗体的能力很强，每个效应B细胞每秒钟能产生2 000个抗体，可以说是制造特种蛋白质的机器。浆细胞的寿命很短，经过几天大量产生抗体以后就死去。抗体离开浆细胞后，随血液淋巴流到全身各部，发挥消灭抗原的作用。记忆细胞的特点是寿命长，对抗原十分敏感，能“记住”入侵的抗原。如果有同样的抗原第二次入侵时，记忆细胞比没有记忆的B细胞更快地做出反应，很快分裂产生新的效应B细胞和新的记忆细胞。
第5章蛋白质分离与纯化
一、简答
1.简述离子交换层析、亲和层析、凝胶过滤、疏水层析分离的原理及样品洗脱方法？
答：（1）离子交换层析：是一种用离子交换树脂作支持剂的层析方法。
洗脱方法：蛋白质混合物的分离可以由改变溶液中的盐离子强度和pH来完成，对离子交换剂结合力最小的蛋白质首先从层析住中洗脱出来。层析洗脱，可以采用保持洗脱液成分一直不变的方法，
也可以采用改变洗脱的盐浓度或和pH的方式洗脱。
（2）亲和层析：是把待纯化的某一蛋白质的特异配体通过适当的化学反应共价地连接到像琼脂糖凝胶一类的载体表面的功能基上。
洗脱方法：当蛋白质混合物加到填有亲和介质的层析柱时，待纯化的某一蛋白质则被吸附在含配体的琼
脂糖颗粒表面上而其他的蛋白质（称杂蛋白）则因对该配体无特意的结合部位而不被吸附，
他们通过洗涤即可除去，被特异结合的蛋白质可用含游离的相应配体溶液把它从柱上洗脱下
来。
（3）凝胶过滤：当不同分子大小的蛋白质流经凝胶柱层析柱时，比凝胶珠孔径大的分子不能进入珠内网状结构，而被排阻在凝胶珠之外随着溶剂在凝胶珠之间的空隙向下移动并最先流出柱外；比
网孔小的分子不能同程度的自由出入凝胶珠内外，这样由于不同大小的分子所经的路径不同
而得到的分离，大分子物质先被洗脱出来，小分子物质后被洗脱出来。
（4）疏水层析分离：就是根据蛋白质表面的疏水性差别，在疏水作用层析中，不是暴露的疏水基团促进蛋白质与蛋白质之间的相互作用，而是连接在支持介质上的疏水基团与蛋白质表面上暴露的
疏水基团结合。
洗脱方法：由于疏水作用层析要求盐析化合物如硫酸铵的存在以促进蛋白质分子的疏水区域暴露。为使吸附达到最大，可将蛋白质样品的pH调至等电点附近。一旦蛋白质吸附于固定相，则可利用
多种方式进行选择洗脱，包括使用逐渐降低离子强度或增加pH的洗脱液（增加蛋白质的亲水
性），或使用对固定相的亲和力比对蛋白质更强的置换剂进行置换洗脱。
?测定蛋白质分子量方法有哪些，列举3种？
渗透压法测定分子量；沉降分析法测定分子量；凝胶过滤法测定分子量
化学组成法，凝胶过滤法，SDS-PAGE法
1.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
2.凝胶过滤
3.质谱----质谱是目前最为精确的分子量测定方法。
首先将蛋白质变成高速带电离子流，然后蛋白离子在真空电场中运动，在重力作用下偏转，蛋白离子在电场中偏转的距离与其分子量成比例关系。在质谱分析方法中，蛋白质分子的离子化是关键的技术。
?什么是蛋白质组，研究蛋白组常用的方法是什么。
某一组合细胞表达的全部蛋白---蛋白质组
?双向电泳
?质谱
?蛋白质芯片
?酵母双杂交
?常用的蛋白质沉淀方法有哪些（列三种）。
1.盐析法：加入高浓度的中性盐（如[H4N]2SO4、Na2SO3 、NaCl等），可有效破坏蛋白质颗粒的水化层，同时又中和了蛋白质的电荷，使蛋白质产生沉淀
2.金属盐沉淀法：当溶液pH值高于等电点时，蛋白质颗粒带负电荷，它易与重金属离子（Hg2+、Pb2+、Cu2+、Ag+）结合成不溶性盐而沉淀
3.有机溶剂沉淀法：可与水混合的有机溶剂，如酒精、甲醇、丙酮等，对水的亲和力很大，能破坏蛋白质颗粒的水化膜，使蛋白质颗粒容易凝集而沉淀。
4.生物碱试剂和某些酸类沉淀法：pH小于等电点时蛋白质带正电荷，易与带负电（酸根阴离子）的生物碱试剂(如苦味酸、钨酸、鞣酸)以及某些酸(如三氯醋酸、过氯酸、硝酸) 生成不溶性盐而沉淀。
5.加热变性沉淀
?列举三种测定蛋白质含量的方法。
1.凯氏定氮法
2.双缩脲法
3.Flin-酚试剂法
4.紫外吸收法
5.染料结合法
6.胶体全测定法
第6章酶通论
?名词、符号、结构
1.单纯酶：是基本组成单位仅为氨基酸的一类酶不含其他成分，它的催化活性仅仅决定于它
的蛋白质结构。如脲酶，蛋白酶，脂肪酶、淀粉酶、酯酶、核糖核酸酶等水解酶。
2.复合酶：双成分酶（结合酶）：这类酶分子中除了蛋白质部分（酶蛋白）外还有非蛋白质成分（辅
因子），两者结合成的复合物称作全酶。
全酶 = 酶蛋白 + 辅因子（辅酶、辅基、金属离子）
3.辅酶：辅酶与酶蛋白结合较疏松（非共价键相连），可用透析或超滤方法除去，一种辅酶可为几种
酶的辅酶。
4.辅基：辅基与酶蛋白结合紧密（共价键相连），不易用透析或超滤方法除去，需经化学处理才能将
其与酶蛋白分开，辅基一般为一种酶专有--
5. 单体酶：单体酶只有一条多肽链，这一类酶很少，一般为水解酶类，相对分子质量为13000～35000。
6.寡聚酶：寡聚酶由几个甚至几十个亚基组成，亚基相同或不同，亚基间以非共价键结合，用4 mol
／L尿素溶液或其它方法可以把它们彼此分开。寡聚酶的相对分子质量从35 000到几百万。
例如磷酸化酶a和3-磷酸甘油醛脱氢酶等。
7.多酶复合体：多酶复合体是由几个酶聚合(嵌合)而成的复合体。一般由在系列反应中2~6个功能相关
的酶组成，它有利于一系列反应的连续进行，以提高酶的催化效率，同时便于机体对酶的调
控。
8.多酶体系：在完整细胞内的某一代谢过程中，由几种不同的酶联合组成的一个结构和功能的整体，
催化一组连续的密切相关的反应
9.活力：酶催化一定化学反应的能力，测定方法：分光光度法，荧光法，同位素测定法，电化学
方法
10.比活力：每毫克蛋白所具有的酶活力（U/mg Protein）。用以表示酶的纯度
11.Kcat ：酶促反应的催化速度常数。等于每个酶活中心每分钟将底物转化为产物的分子数。其数值
等于Vmax /[E]0，其中Vmax是最大速度，[E]0是酶的初始浓度自杀性底物
12.Kat：酶活力的国际单位。在最适条件下，每秒钟内，能使1mol底物转化成产物所需要的酶量，定
为一个Kat单位（1Kat＝1mol/s）
13.U：酶的活力单位，是酶活力大小和酶量的量度。指在一定时间内，将一定量的底物转化为产物
所需的酶的量。1个酶活力单位(IU，国际单位)，是指在最适条件(温度25℃)下，每分钟内催
化1微摩尔(μmol)底物转化为产物所需的酶量。
14.ribozyme：是具有催化活性的RNA
15.活化能：1mol底物全部进入活化状态所需要的自由能称为活化能。
16.诱导契合：酶分子的活性部位结构原来并不与底物分子的结构互补，但活性部位有一定的柔性，当
底物分子与酶分子相遇时可以诱导酶蛋白的构象发生相应的变化，使活性部位上各个结合基团
与催化基团达到对底物结构正确的空间排布与定向从而使酶与底物互补结合，产生酶–底物复
合物，并使底物发生化学反应。
17.必须基团：分子中与酶活性有关的基团。是指直接参与对底物分子结合和催化的基团以及参与维持
酶分子构象的基团。
18.活性中心：酶的催化活力只集中表现在少数特异氨基酸残基的某一区域，这些特异氨基酸残基比较
集中并构成一定构象，此结构区域与酶活性直接相关称为酶的活性中心酶分子很大，其催化作
用往往不需要整个分子催化活性，仅与酶的一小部分区域有关，这部分就是活性中心
19.初速度：酶促反应动力学中所指的速率是反应的初速率, 酶促反应的速率（v），一般是以单位时
间内底物被分解的量来表示（mmol/min、mg/min等）。通过测定单位时间内底物的消耗量或产
物的生成量可以得到酶促反应速率。
二、简答
1.酶促反应分为哪六类，EC1.1.1.1属于那类酶？
1 氧化还原酶类 2转移酶类 3 水解酶类 4 裂合酶类 5 异构酶类 6 连接酶类
醇脱氢酶
2.酶与化学催化剂相比，有什么特点？
高效性专一性易失活活性受调节控制有些酶的活性与辅因子参与相关
?制备聚丙烯酰胺凝胶的单体是什么，催化剂是什么，诱发剂是什么，如何对凝胶中的样品进行染色。答：单体：丙烯酰胺；催化剂：过硫酸铵；诱发剂:交联剂甲叉双丙烯酰胺。
染色：现在乙酸缓冲液中浸泡，后加抗坏血酸—联苯胺染色液进行染色。
第7章酶促反应动力学
?名词、符号、结构
DIFP ：二异丙基氟磷酸(DIPF)
Ks：亲和标记试剂。 ES的解离常数（底物常数）
Km ：是当酶反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。
Vmax：酶完全被底物饱和是的最大反应速率。
?简答
1.举两个例子说明抑制剂在药物开发中的应用？
答：抑制剂分为可逆抑制剂和不可逆抑制剂：
不可以抑制剂：青霉素是一种不可逆抑制剂，青霉素可以与糖肽转肽酶活性部位丝氨酸羟基共价结合，使酶失活，而糖肽转肽酶是细胞壁合成中使聚肽糖链交联。一旦酶失活，细菌细胞壁合成受阻，细菌生长被损害，因此青霉素可以起到抗菌作用。
可逆抑制剂：磺胺药是通过干扰敏感菌的叶酸代谢而抑制其生长繁殖的，对磺胺类药敏感的细菌在生长繁殖过程中，不能直接从生长环境中利用外援叶酸，而是利用对氨基苯甲酸（PABA）喋啶和谷氨酸，在二氢叶酸合成酶的催化下合成二氢叶酸的，再经二氢叶酸还原酶还原为四氢叶酸是一碳单位转移酶的辅酶，参与嘌呤、嘧啶、氨基酸的合成，磺胺类药物的化学结构与PABA竞争二氢叶酸合成酶，抑制二氢叶酸的形成，或者形成以磺胺代替PABA的伪叶酸，最终使核酸合成受阻，阻止细菌生长繁殖，高等动植物能够利用外源叶酸，所以代谢不影响。
2.可逆抑制作用分为哪几种，每一种的动力学特征有何不同？
答：竞争性抑制：有些抑制剂和底物结构极为相似，可和底物竞相与酶结合，当抑制剂与酶结合后，就妨碍了底物与酶的结合，减少了酶的作用机会，因而降低了酶的活力。这种抑制作用叫竞争性抑制作用。
常见的竞争性抑制剂如对氨基苯磺酰胺(磺胺药)
Vmax不变Km增大
?非竞争性抑制
Km不变，Vmax减小
?反竞争性抑制
?Km Vmax
?
3.什么是米氏方程，米氏常数，米氏常数与酶和底物亲和力的关系，如何计算米氏常数和最大反应速度。
反应速度和底物浓度关系的数学方程式---米式方程
V：某一底物浓度时的反应速度； Vmax：最大反应速度[S]：底物浓度Km； Km值是当酶反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。其单位是底物浓度的单位，一般用mol/L或mmol/L表示。
米氏常数（Michaelis constant）：Km是酶的特征常数，它与酶反应性质有关，它是在特定的底
物、pH、温度、离子强度等条件下，该酶反应速度常数kl，k﹣l，k2的函数。如果一种酶有几种底物时，则对每种底物各有一特定Km值，其中Km值最小的底物称为该酶的最适底物或天然底物。因此Km 可作为鉴别酶的一种手段。
（2）当酶促反应处于υ═ 1/2Vmax 时，Km ═[S]。可见，Km的物理意义是当酶反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。Km的单位与底物浓度一样，范围一般在10–7mol／L～10–1mol／L。
（3）由于ES →E + P的反应为限速步骤，kl 和 k-1>> k2，结果Km≈Ks，Km可看作是复合物ES 的解离常数。因此1/Km近似地表示酶对底物亲和力的大小，1/ Km值越大，表明酶对底物的亲和力强，因为1/ Km越大，Km越小，达到最大反应速度一半所需要的底物浓度也就愈小。反之，1/ Km值越小，表明酶对底物的亲和力弱。
（4）Km是代谢物对多种代谢途径选择取向的决定因素之一。在生物体内，一个代谢物如果可以进入不同的代谢途径，哪一个代谢途径反应的第一个酶Km最小，那么该代谢物就优先进入那一个途径。
（5）对于Vmax= k2[ES]又可以表达为Vmax= kcat[Et]。kcat代表单位时间内每个酶分子将底物分子转换成产物的最大值，kcat称为转换数。对于大多数酶而言，转换数在每秒1～104范围内。如果一个酶有两个竞争性底物，kcat / Km比值可衡量酶对底物的专一性。比值越大，专一性越强。
（6）在已知Km值的情况下，应用米氏方程即可计算任意底物浓度时的反应速度，或任何反应速度下的底物浓度。
当 V=1/2 V MAX Km=[S] Km单位为浓度单位。
米氏常数是酶的特征物理常数。一个酶在一定条件下，对某一底物的Km为一定值，故通过测定Km
如果一个酶可催化几个底物，对每个底物用一个Km。
Km越小，酶对底物的亲和力越大，反之已然。Km可表征酶对底物的亲和力。
米氏常数的求法：
最常用的是Lineweaver–Burk的作图法（双倒数作图法）
第8章酶的活性调节
名词、符号、结构
酶原激活：有些酶在其生物合成后即可自发地折叠成一定的构象，表现出全部活性，如溶菌酶；而有些酶在生物体内先合成出来的是其无活性前体称为酶原（enzymogen），这些酶原必需在一定的
条件下（某种酶或酸），被打断一个或几个特定的肽键，从而使构象发生一定的变化后才表
现出活性，这一过程称为酶原激活
共价修饰：修饰酶即共价调节酶(covalent regulatory enzyme)，它可在其他酶的作用下，将其结构进行共价修饰，使该酶活性发生改变
别构酶：变构酶也称别构酶，是一类重要的调节酶。由于其本身结构及性质上的特点，能够调节酶促反应速度
变构部位：有些酶除了活性中心外，还有一个或几个部位，当特异性分子非共价地结合到这些部位时，可改变酶的构象
正协调：正协同效应(positive cooperative effect) ：可增加反应速度的作用。具有这种效应的物质为正调节物（变构激活剂）。多为别构酶的底物
副协同：负协同效应(negative cooperative effect) ：降低反应速度。具有这种效应的物质为负调节物（变构抑制剂）。常为代谢反应序列的终产物
同促效应( homotropic)：底物分子本身对别构酶的调节作用
异促效应(heterotropic)：非底物分子的调节无对别构酶的调节作
用。它是发生在不同种类的配体的结合部位间的协同作用。可在底物、激
活物、抑制剂与别构酶的结合时发，调节物是非底物分子异促效应别构酶
的动力学曲线,随着正调节剂的增加,K0.5减小。随着别构抑制剂浓度的增
加，K0.5增大。Vmax不变。
齐变模型：主张别构酶的所有亚基或全部呈紧密的、不利于结合底物
的“T”状态；或者全部是松散的、有利于结合底物的“R”状态。这两种
状态间的转变对于每个亚基都是同时的、齐步发生的。与序变模型相对立。相同配体与寡聚蛋白协同结合的一种模式，
序变模型：主张酶分子中的亚基结合小分子物质(底物或调节物)后，亚基构象逐个地依次变化，当底物或调节物浓度上升，升到可以与其中的一个亚基牢固地结合时，这时剩下的亚基就会按次序迅速地改变构象，形成一个有活性的四聚体，并给出S形动力学曲线。此模型既可解释正调节分子的作用，也可解释负调节分子的作用。相同配体与寡聚蛋白协同结合的另一种模式
简答
列举酶活性调节的方式？
答：温度、PH、别构调节、酶原激活、可逆共价修饰
别构调控：酶分子的非催化部位与某些化合物可逆地非共价结合后发生构想的改变，进而改变酶活性状态的调节方式。
酶原激活：将生物体中无活性的蛋白质（前体/酶原）通过专一性的蛋白水解作用来活化酶和蛋白质的过程称为酶原激活。
可逆的共价修饰：共价调节酶通过其他没对其多肽链上某些基团进行可逆的共价修饰与非活性的互变状态，从而调节酶活性。
?胰凝乳蛋白酶如何激活，如何实现催化？
答：胰凝乳蛋白酶通过裂解芳香氨基送如像Phe和Tyr羰基侧链使酶激活。
胰凝乳蛋白酶中形成催化三联体来实现催化。
?如何研究酶的活性中心，哪些氨基酸残基组成
活性中心？
答：1.化学修饰
非特异性修饰
特异性共价修饰
亲和标记
2.动力学参数测定
3.X射线晶体结构衍射
4.定点诱变
组成活性中心的氨基酸残基：
?什么是别构酶，催化有何特征。
答：变构酶也称别构酶，是一类重要的调节酶。由于其本身结构及性质上的特点，能够调节酶促反应
①已知的变构酶都是寡聚酶，即含有两个或两个以上亚基。在酶分子上除了有和底物结合的活性
部位外，还有和调节物(或效应物)结合的调节部位(变构部位)。这两种部位同处在不同亚基或在同一亚基的不同部位上。
②具有变构效应。当底物或效应物和酶分子上的相应部位结合后，会引起酶分子构象改变从而影
响酶的催化活性，这种效应叫做变构效应。凡是使酶活性增强的效应物称为变构激活剂。反之，称为变构抑制剂，前者常常是变构酶的底物，后者常是代谢反应序列的终产物.
③变构酶的反应初速度对底物浓度作图不遵循米氏方程，而呈S形曲线，
⑤变构酶一般分子量较大，结构更复杂，往往表现出一些与一般酶不同的性质。脱敏。
?蛋白酶根据活性中心和催化机制分为哪几类？那种酶的活性中心需要金属离子。
答：1.溶菌酶
2.核糖核酸酶A
3.丝氨酸蛋白酶
3.天冬氨酸蛋白酶
5.羧肽酶A (酶活性中心需要金属离子)
第9章辅酶与维生素
名词、符号、结构
TPP ：焦磷酸硫胺素
NADPH：是一种辅酶，叫还原型辅酶Ⅱ ，学名烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸
FMN ：黄素单核苷酸
FAD ：黄素腺嘌呤二核苷酸
CoA ：辅酶A
Vc ;维生素C又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素。
FH4 :四氢叶酸
简答
?水溶性维生素和脂溶性维生素包括哪些，它们衍生的辅酶是什么，具有什么功能？
水溶性
维生素B1(硫胺素) TPP α -酮酸氧化脱羧
维生素B2(核黄素 ) FMN、FAD 氢载体
维生素PP [尼克酸（酰胺）] NAD+、NADP+ 氢载体
泛酸（遍多酸） CoASH 酰基载体
维生素B6 [吡哆醇（醛、酸）] 磷酸吡哆醇（醛）转氨、脱羧、消旋
叶酸 FH4(THFA) 一碳基团载体
生物素羧化辅酶
维生素C（抗坏血酸）氧化还原作用
硫辛酸酰基载体、氢载体
维生素B12（氰钴氨素）变位酶辅酶、一碳基团载体
脂溶性
?Vitamin A 视黄醇，包括A1和A2，前者主要存在于哺乳动物和海水鱼肝脏内，后者存在于淡水鱼肝脏内，A1活性较A2为大一倍。
功能：维持上皮细胞正常结构和功能；组成视色素；促进粘多糖合成及骨的形成和生长等。
Vit A缺乏的症状包括，皮肤和各器官表皮角质化（蟾皮病）、眼角膜和结膜表皮细胞退变（干眼症，角膜软化症）、夜盲症。
?Vitamin D 属于类甾醇衍生物，具环戊烷多氢菲结构，包括D2和D3两种，D2又称麦角钙化（甾）醇（ergocalciferol, calciferol），D3又称胆钙化（甾）醇（cholecalciferol）。紫外线照射可使它们变为相应的活化形式。
主要作用：调节钙和磷的吸收及代谢，并促进成骨作用，具抗佝偻病和抗软骨病的作用。
?Vitamin E Vit E均为苯骈二氢吡喃的衍生物被用于保护脂肪和Vit A不被氧化；保护生物膜，增加细胞对废气的抵抗力，使细胞免受损伤和癌变；对生育功能重要，临床用于防治流产及早产?Vitamin K 天然Vit K有K1和K2两种，都是2-甲基-1，4萘醌的衍生物
作用：与凝血作用有关，具抗出血不凝作用，主要功能是加速血液凝固、促进肝脏合成凝血酶原所必需的因子、参与体内氧化-还原反应（是呼吸链的一部分，参与电子传递和氧化磷酸化）
?哪些辅酶为氢的传递体？
答：FMN FAD NAD+ NADP+ 硫辛酸
第10章核酸性质及结构
1、名词、符合、结构
mRNA：信使RNA，5‘端有一帽子结构，3‘末端有一段长约200个腺苷酸的polyA尾巴。
cDNA：为具有与某RNA链呈互补的碱基序列的单链DNA或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。
超螺旋：DNA三级结构的一种形式，如果DNA分子的两端是固定的，因为DNA分子额外多转几圈使双螺旋中存在的张力不能释放掉，DNA分子本身就会发生扭曲用以抵消张力。这种扭曲称为超螺旋。
CDS ：是编码一段蛋白产物的序列。
2、简答
1、核酸包括哪些种类，功能有何不同。
答：根据所含戊糖的不同，分为含核糖的核糖核酸（RNA）和含脱氧核糖的称脱氧核糖核酸（DNA）。RNA 根据分子结构和功能的不同分为mRNA、tRNA、rRNA三类。
DNA是主要的遗传物质，是染色体的主要成分。贮存决定物种的所有蛋白质和RNA结构的全部遗传信息；RNA参与蛋白质的生物合成。rRNA是核糖体的组成成分，mRNA主要功能是实现遗传信息在蛋白质上的表达，是遗传信息传递过程中的桥梁。tRNA的功能是携带符合要求的氨基酸，
2、碱基和戊糖之间是如何连接的？核苷酸和核苷酸之间如何连接的。
答：嘧啶碱的第1位氮原子或嘌呤碱的第9位氮原子与戊糖的第1’位碳原子通过糖苷键连接。两个核苷酸以前一个核苷酸的3’羟基和下一个核苷酸的5’磷酸形成3’,5’磷酸二酯键连接
3、DNA双螺旋结构的基本特征是是什么？除B-DNA外还有哪些形式。维持DNA双螺旋的作用力有哪些。
答：两条链反向平行，围绕着中心轴盘绕成螺旋状结构，碱基处于螺旋内侧，而磷酸和戊糖位于外侧，碱基平面与螺旋轴垂直。两条链接碱基之间的氢键和碱基堆积力牢固地连为一体。碱基按配对规律配对。
3、DNA是遗传物质是如何被证明的。
答：O。Avery等人从有荚膜、菌落光滑lll型肺炎球菌的细胞中提取出纯化的DNA加到无荚膜、菌落粗糙的ll型细菌培养物中，结果发现DNA能使一部分llR型细胞获得合成荚膜多糖的能力。而后来的用35S和32P标记的噬菌体T2感染大肠杆菌，结果发现只有32p标记的DNA进入大肠杆菌细胞内。而35S标记的蛋白质仍留在细胞外。DNA是遗传物质逐步被证明并被接受。
第11章核酸性质及研究方法
名词、符合、结构
DNase：脱氧核糖核酸酶，是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。
RNase：核糖核酸酶，RNA水解酶，RNase H是一种核糖核酸内切酶，能分解RNA/DNA杂交体系中的RNA链。
RNase A 对RNA有水解作用，但对DNA则不起作用。
限制修饰系统：在细胞中，限制酶可降解外源侵入的DNA，但不降解经修饰酶甲基化保护的自身DNA,此为限制修饰系统。主要由限制内切酶和甲基化酶组成的二元系统。
Tm：DNA的热变性过程中光吸收达到最大吸收一半时的温度称为DNA的解链温度( melting temperature，简写Tm)或熔点
Southern-blot： Southern blot印迹法利用已知的DNA探针检测靶标DNA的存在及大小位置，Southern 印迹法就是将电泳凝胶上的DNA片段转移到硝酸纤维素膜上后，再进行杂交。
Northern-blot 利用DNA或RNA探针将RNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交。检测靶RNA的存在。
EB：溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂，用于观察琼脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。
PCR：聚合酶链反应体外扩增DNA技术，
ddGTP：双脱氧腺嘌呤核苷三磷酸。
简答题
?影响Tm的因素有哪些？
答：DNA的均一性、G-C之含量、介质中的离子浓度。
?影响质粒电泳行为的因素有哪些。
答：DNA分子的大小、胶浓度、电压、电极缓冲液、温度、碱基组成、溴化乙锭。
?DNA双脱氧测序的原理
双脱氧测序原理，末端终止法—
答：聚合酶用模板作指导，不断地将dNTP加到引物的3'-OH末端，使引物延伸，合成出新的互补DNA 链。如果加入一种特殊核苷酸，双脱氧核苷三磷酸（ddNTP），因它在脱氧核糖的3’位置缺少一个羟基，故不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键。经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离制得的放射性自显影区带图谱将为新合成的不同长度的DNA链中C的分布提供准确信息，从而将全部C的位置确定下来。类似的方法，在ddATP、ddGTP和ddTTP存在的条件下，可同时制得分别以ddA、ddG和ddT残基为3‘端结尾的三组长短不一的片段。将制得的四组混合物平行地点加在变性聚丙烯酰胺凝胶电泳板上进行电泳，每组制品中的各个组分将按其链长的不同得到分离，制得相应的放射性自显影图谱。从所得图谱即可直接读得DNA的碱基序列.
?分子杂交技术的原理及应用。
答：应用核酸分子的变性和复性的性质，使两条来源不同的具有一定同源性（即具有碱基互补关系）的单链DNA分子或单链DNA分子与RNA分子经退火形成双链DNA分子或DNA-RNA异质双链分子(heteroduplex)的过程。三大分子杂交技术
Southern blotting
Northern blotting
Western blotting-- Western Blotting利用抗原抗体之间互补性结合的原理，利用酶连或其它方式标记的抗体检测靶抗原的存在及存在部位。
Southern blotting 和Northern blotting利用同源单链核酸分子可依据碱基配对原则形成异质双链的原理，通过放射性或非放射性方法标记一段单链核酸序列获得探针，检测与探针同源的核酸分子的研究方法。
?DNA复杂度与复性速度之间的关系。
答：DNA的片段越大，复性速度越小，具有的重复序列越多福星速度越快。
?核酸纯度鉴定方法？核酸分子均一性的鉴定方法？
答：测定OD260：OD280的比值来表示DNA的纯度
?PCR技术的基本原理，关键步骤及应用。
答：原理：高温可以使DNA的双链解离形成单链，再通过引物与DNA模板结合，之后在TaqDNA聚合酶催化下DNA链延伸，合成与模板互补的子链，最终形成新的DNA。
基本步骤：设计一对引物以便有效扩增所需的DNA序列，并尽可能减少产生的非特异性产物；选择三个温度进行热循环：变性（使DNA双链解离形成单链）、退火（低温下引物与模板DNA互补区结合）、延伸（中温下，在DNA酶的催化下以引物为起点的DNA链的延伸。）；扩增完成后取出一定产物，检测扩增结果。
应用：病原体的检测、法医和刑侦鉴定、癌基因的检查、基因探针的制备、基因组测序和染色体巡视、cDNA库的构建、基因突变的分析和定位诱变、DNA重组、基因的分离和克隆、遗传病和某些疑难病的诊断以及孕妇的产前检查。
1、模板DNA
2、寡核苷酸引物
3、dNTP
4、Taq
5、缓冲环境、合适的温度
1．在生理pH 条件下，下列哪种氨基酸带正电荷C A．丙氨酸B．酪氨酸C．赖氨酸 D．蛋氨酸E．异亮氨酸 2．下列氨基酸中哪一种是非必需氨基酸B A．亮氨酸B．酪氨酸C．赖氨酸 D．蛋氨酸E．苏氨酸 3．蛋白质的组成成分中，在280nm 处有最大吸收值的最主要成分是：A A．酪氨酸的酚环B．半胱氨酸的硫原子 } C．肽键D．苯丙氨酸 4．下列4 种氨基酸中哪个有碱性侧链D A．脯氨酸B．苯丙氨酸C．异亮氨酸D．赖氨酸 5．下列哪种氨基酸属于亚氨基酸B A．丝氨酸B．脯氨酸C．亮氨酸D．组氨酸 6．下列哪一项不是蛋白质α-螺旋结构的特点B A．天然蛋白质多为右手螺旋 B．肽链平面充分伸展 ） C．每隔个氨基酸螺旋上升一圈。 D．每个氨基酸残基上升高度为. 7．下列哪一项不是蛋白质的性质之一C A．处于等电状态时溶解度最小B．加入少量中性盐溶解度增加 C．变性蛋白质的溶解度增加D．有紫外吸收特性 8．下列氨基酸中哪一种不具有旋光性C A．Leu B．Ala C．Gly D．Ser E．Val 9．在下列检测蛋白质的方法中，哪一种取决于完整的肽链B / A．凯氏定氮法B．双缩尿反应C．紫外吸收法D．茚三酮法 10．下列哪种酶作用于由碱性氨基酸的羧基形成的肽键D A．糜蛋白酶B．羧肽酶C．氨肽酶D．胰蛋白酶 11．下列有关蛋白质的叙述哪项是正确的A A．蛋白质分子的净电荷为零时的pH 值是它的等电点 B．大多数蛋白质在含有中性盐的溶液中会沉淀析出 C．由于蛋白质在等电点时溶解度最大，所以沉淀蛋白质时应远离等电点D．以上各项均不正确 ? 12．下列关于蛋白质结构的叙述，哪一项是错误的A A．氨基酸的疏水侧链很少埋在分子的中心部位 B．电荷的氨基酸侧链常在分子的外侧，面向水相 C．白质的一级结构在决定高级结构方面是重要因素之一 D．白质的空间结构主要靠次级键维持 13．列哪些因素妨碍蛋白质形成α-螺旋结构E A．脯氨酸的存在B．氨基酸残基的大的支链 C．性氨基酸的相邻存在D．性氨基酸的相邻存在
https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/entry/uqjedAc4/ 北大医学部视频资源http://202.112.190.68/shipin.htm 北京中医药大学精品课程https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/ 北大医学部视频资源http://202.112.190.68/shipin.htm 上海中医药大学网络教学资料 方剂学视频:https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/jpkj/fjx/shikuang.htm 方剂学网络课件:https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/jpkj/fjx/index.htm 实验中医学视频:https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/jpkj/syzyx/shikuang.htm 中医内科学课件:https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/jpkj/zynk/cai/ctm.rar 安装须知:https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/jpkj/zynk/cai/setup.rtf 内科学视频:https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/jpkj/zynk/shikuang.htm 针灸学网络课程http://61.129.75.54/zhenjiu/zj_demo/index.htm 辽宁中医学精品课程https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/jpkc/article_index.asp 天津中医学院-实验针灸学网络教学 http://202.113.168.14/zhenjiu/101/ 帐号:test/密码:test http://202.113.168.14/zhenjiu/101/50.htm里面的视频都可以下载! 广州中医药大学精品课程 http://210.38.96.15/index.htm http://210.38.96.15/zjtn/index.htm http://210.38.96.15/zynkx/CONTENT/SHIPIN.HTM http://210.38.96.15/shl/index.htm 福建中医学院精品课程https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/JPKC/JPKC.HTM 暨南大学精品课程https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/ 陕西医学高等专科学校组胚教研室精品课程 https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/jxlx/jxlx.htm 海南医学院精品课程http://210.37.79.3/jingpin/index.htm 四川大学精品课程---医学部分 诊断学http://219.221.200.61/2003/58/classonline.htm 药物化学http://219.221.200.61/2003/show.asp?id=63 病理学http://219.221.200.61/g2003/show.asp?id=57 护理学基础http://219.221.200.61/2004/show.asp?id=47 生理学http://219.221.200.61/2004/show.asp?id=33 生物化学http://219.221.200.61/2004/show.asp?id=45 口腔修复学http://219.221.200.61/2004/show.asp?id=52 河北省精品课程网站http://218.11.76.26/ 河北医科大学https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/jpkc/jpkt.htm 中国医科大学精品课程网https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/curriculum/ 武汉大学精品课程－－医学部分 武汉大学精品课程网站https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/ 人体解剖学https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/jpkc/rtjp/ 病理生理学https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/jpkc/blslx/asp/ 药理学https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/jpkc/ylx/index.htm 临床生物化学和生物化学检验https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/shenbao/lcyx/lcyx01.htm 牙体牙髓学https://www.doczj.com/doc/6918028120.html,/jpkc/ytysbx/index.html
生物化学重点及难点归纳总结 武汉大学生命科学学院生化的内容很多,而且小的知识点也很多很杂,要求记忆的内容也很多.在某些知识点上即使反复阅读课本,听过课后还是难于理解.二则由于内容多,便难于突出重点,因此在反复阅读课本后找出并总结重点难点便非常重要,区分出需要熟练掌握和只需了解的内容. 第一章: 氨基酸和蛋白质 重点:1.氨基酸的种类和侧链,缩写符号(单字母和三字母的),能够熟练默写,并能记忆在生化反应中比较重要的氨基酸的性质和原理 2.区分极性与非极性氨基酸,侧链解离带电荷氨基酸,R基的亲水性和疏水性,会通过利用pK值求pI值,及其缓冲范围. 3.氨基酸和蛋白质的分离方法(实质上还是利用蛋白质的特性将其分离开来,溶解性,带电荷,荷质比,疏水性和亲水性,分子大小(也即分子质量),抗原-抗体特异性结合. 4.蛋白质的一级结构,连接方式,生物学意义,肽链的水解. 第二章: 蛋白质的空间结构和功能 重点: 1.研究蛋白质的空间结构的方法(X射线晶体衍射,核磁共振光谱) 2.构筑蛋白质结构的基本要素(肽基,主链构象,拉氏图预测可能的构造,螺旋,转角,片层结构,环形构象,无序结构) 3.纤维状蛋白:角蛋白,丝心蛋白,胶原蛋白,与之相关的生化反应,特殊性质,,及其功能的原理. 4.球状蛋白和三级结构(特征及其原理,基元及结构域,三级结构揭示进化上的相互关系.蛋白质的折叠及其原理,推动蛋白质特定构象的的形成与稳定的作用力,疏水作用,氢键,静电相互作用,二硫键. 5.寡聚体蛋白及四级结构(测定蛋白质的亚基组成.,寡聚体蛋白存在的意义及其作用 原理) 6.蛋白质的构象与功能的关系(以血红蛋白和肌红蛋白作为例子进行说明,氧合曲线,协同效应,玻尔效应) 第三章: 酶 重点:1.酶的定义及性质,辅助因子.活性部位 2.酶的比活力,米氏方程,Vmax,Km,转换数,Kcat/Km确定催化效率,双底物酶促反应动力学.对酶催化效率有影响的因素,及其作用机理. 3.酶的抑制作用,竞争性抑制剂,非竞争性抑制剂,反竞争性抑制剂,不可逆抑制剂,及其应用. 4.酶的作用机制:转换态,结合能,邻近效应,酸碱催化,共价催化及其原理,会举例.溶菌酶的作用机制,丝氨酸蛋白酶类及天冬氨酸蛋白酶类的结构特点及作用机制. 5.酶活性调节,酶原激活,同工酶,别构酶,多功能酶和多酶复合物. 及其与代谢调节的关系及原理.
食品生物化学教学大纲集团标准化办公室：[VV986T-J682P28-JP266L8-68PNN]
课程编号09054206： 《食品生物化学》课程教学大纲 Biochemistry 适用于本科食品科学与工程等专业 总学时：48学分3 开课单位：生命科学系课程负责人：呼凤兰 执笔人：呼凤兰审核人：高平 一、课程性质.目的和任务： 《食品生物化学》课程是食品科学与工程、生物科学等专业的一门专业基础课。本课程的任务是研究食品的化学组成、性质、生理功能和它们在贮藏和加工过程中的变化的一门科学。通过本课程的教学，使学生掌握食品生物化学的基本原理、基础知识和基本技能，掌握食品在加工和贮藏过程中其营养质量的变化，理解食品各营养成分在生物体内的代谢过程和规律，培养学生分析和解决一些简单的生化实际问题的能力，为今后学习其它职业基础课和职业核心课奠定基础。 二、教学基本要求 要求学生掌握糖类、脂类、蛋白质和核酸等几大类生命物质的基本结构、性质和功能；掌握酶的组成、分类、酶作用机理、酶活力测定和酶促反应动力学；掌握糖类分解代谢，脂肪酸费解和合成代谢，DNA和RNA合成蛋白质合成等生物体内的重要生化反应过程；掌握生物氧化中氧化磷酸化过程和ATP产生机理；掌握层析、电泳、酶动力学实验、核酸等生物物质分离、蛋白质性质实验等生物化学基本实验技巧。 三、教学内容、目标要求与学时分配 第一章绪论 教学内容： 食品生物化学的研究对象；学习食品生物化学的意义；如何学习食品生物化学；新陈代谢概论 目标及要求： 1、了解本课程的特点和学习方法及我国食品营养工作的发展历程及未来任务； 2、掌握食品的概念，了解食品生物化学的研究内容和与其它学科的关系。 教学重点及难点：生物化学的概念及食品生物化学研究对象和内容 课时分配：2课时 第二章食品物料重要成分化学
《食品营养与健康》课程标准 课程代码：适用专业：食品营养与检测 学时/学分：96/6 编制人： 1、课程概述 1.1课程性质与 本课程是为食品营养与检测专业开设的一门重要专业必修课。本课程的教学目的是培养学生深入理解营养与人体需要和健康的关系，熟悉基础营养学的基本理论知识和基本方法；了解不同人群的营养需求特点与膳食原则；理解各类食品的营养价值，膳食营养与健康的关系，了解社区营养的内容与方法；了解食物的体内过程及其代谢，热能来源和不同劳动强度的热能供给量、膳食参考摄入量（DRI）相关指标及其制定依据。掌握食品营养评价、人体营养状况测评、膳食指导与评估、膳食调查与评价、营养咨询与教育的方法与技能。培养学生具有从事食品工业生产管理、营养师、营养配餐员等技术能力，以便在今后的食品营养与生产及相关工作中，能够熟练地应用营养学知识解决实际问题，为改善我国居民的营养状况和提高居民的健康水平服务。 本课程上承有机化学、分析化学、食品化学、食品生物化学，食品加工技术等，下续毕业设计和顶岗实习等课程。 1.2课程设计思路 本课程教学采用工作任务为载体，根据企业所需学生还需要什么来设定进行课程设置和内容的选定，遵循实用、够用原则。突出对学生的职业技能的训练，加强实训课内容的针对性，同时围绕“营养配餐员”、“公共营养师”的职业资格鉴定来安排能力目标和技能训练。理论知识的选取也是紧紧围绕项目的工作任务的完成来设置的，但同时又考虑到高等教育对理论知识的学习的需要。在设置这些内容时又考虑到相关职业证书的对知识、技能和职业素质方面的要求。 课程组通过与营养健康专家、企事业单位技术人员和专业教师一起进行深入、细致、系统的分析，明确了课程的主要内容是人体必需的七大营养素的生理功能及对人体健康的关系和如何针对不同人群进行营养食谱设计、人体营养状况测量、营养咨询与教育以及膳食调查
生物化学模拟题B卷 一、A型选择题 1. 蛋白质变性后将会产生的结果是（ C ） A.大量氨基酸游离出来 B.生成大量肽段 C.空间构象改变 D.肽键断裂 E.等电点变为零 2. 维系蛋白质α－螺旋和β－折叠结构稳定的化学键是（ E ） A. 肽键 B. 离子键 C. 二硫键 D. 疏水作用 E. 氢键 3. 酶活性中心的叙述，正确的是（ A ） A．有些酶可以没有活性中心 B．都有辅酶作为结合基团 C．都有金属离子 D．都有特定的空间构象 E．抑制剂都作用于活性中心 4. 关于同工酶的叙述，错误的是（） A．生物学性质相同 B．酶分子一级结构不同 C．同工酶各成员K m 值不同 D．是一组催化相同化学反应的酶 E．酶分子活性中心结构相同 5. 1分子乙酰CoA经三羧酸循环氧化后的产物是（ C ） A.柠檬酸 B.草酰乙酸 和H 2O D.草酰乙酸和CO 2 E. CO 2 和4分子还原当量 6. 磷酸戊糖途径生成的重要产物是（ C ） A. 5-磷酸核糖,NADH B. 6-磷酸葡萄糖,NADPH C. 5-磷酸核糖,NADPH D. 6-磷酸果糖,NADPH E. 5-磷酸核糖,FADH
7. 长期饥饿时，血糖主要来自（D ） A．肌肉蛋白降解的氨基酸 B．肝蛋白降解的氨基酸 C．肌糖原分解 D．肝糖原分解 E．甘油的糖异生 8. 成熟红细胞获得能量的主要途径是（ E ） A. 脂肪酸氧化 B. 2，3-二磷酸甘油酸旁路 C. 磷酸戊糖途径 D. 糖的有氧氧化 E. 糖酵解 9. 体内贮存的脂肪主要来自（ C ） A．类脂 B．生糖氨基酸 C．葡萄糖 D．脂肪酸 E．酮体 10. 脂酰CoA进行β氧化的酶促反应顺序为（ C ） A．脱氢、再脱氢、加水、硫解 B．硫解、脱氢、加水、再脱氢 C．脱氢、加水、再脱氢、硫解 D．脱氢、脱水、再脱氢、硫解 E．加水、脱氢、硫解、再脱氢 11. 有关酮体的描述错误的是（ A ） A．肝脏可生成酮体，但不能氧化酮体 B．仅在病理情况下产生 C．主要成分为乙酰乙酸、β－羟丁酸和丙酮 D．合成酮体的酶系存在于线粒体 E．原料为乙酰CoA 12. 关于电子传递链的叙述错误的是（ D ） A．电子传递链各组分组成4个复合体 B．主要有NADH氧化呼吸链和琥珀酸氧化呼吸链 C．每对氢原子氧化时都生成3个ATP D．抑制细胞色素氧化酶后,传递链组分都处于还原状态E．如果氧化不与磷酸化偶联,仍可传递电子
一、选择题（单项选择题） 1．下列哪一个化合物的名称与所给出的维生素名称不符? ( ) A．α－生育酚一维生素E B．硫胺素一维生素B， C．抗坏血酸一维生素C D．氰钴胺素一维生素B12 E．吡哆醛一维生素B2 2．下列哪一个辅酶不是来自维生素 ( ) A．CoQ B．FAD C．NAD＋ D.pLp E．Tpp 3．分子中具有醌式结构的是 ( ) A．维生素A B．维生素B1 C．维生素C D．维生素E E．维生素K 4．具有抗氧化作用的脂溶性维生素是 ( ) A．维生素C B．维生素E C．维生素A D．维生素B1 E．维生素D 5．下列维生素中含有噻唑环的是 ( ) 丸维生素E2 B．维生素B1 C．维生素PP D．叶酸 E．维生素B7 6．成人及儿童因缺乏哪种维生素而导致干眼病? ( ) A．维生素]35 B．叶酸 C．维生素A D.维生素B3 E．维生素B6 7．下列哪种维生素可转化为甲基和甲酰基载体的辅酶? ( ) A. 硫胺素 B．叶酸 C.维生素A D．泛酸 E．核黄素 8．下列关于维生素C结构和性质的叙述，哪一项是错误的? ( ) A. 维生素C是含六个碳原子骨架的化合物 B．维生素C具有酸性是因为一COOH释放质子 C．还原型维生素C为烯醇式，而氧化型维生素C为酮式 D．还原型维生素C的元素组成为C：H：O=6：8：6 E．维生素C是一种内酯化合物 9．下列哪一种维生素或辅酶不含环状结构 ( ) A.烟酸 B．四氢叶酸 C．维生素D3 D．泛酸 E．生物素 10．下列哪一种辅酶能与焦磷酸硫胺素一起在丙酮酸转变为乙酰辅酶A的过程中起重要作用 ( ) A．维生素B3 B‘硫辛酸 C．维生素A D．维生素C E．NADP 11．泛酸是CoA的组成成分，后者在糖、脂和蛋白质代谢中起 ( ) A．脱羧作用 B．酰基转移作用 C.脱氢作用 D．还原作用 E．氧化作用12．下列哪个不是丙酮酸脱氢酶系的辅助因子? ( ) A．pLp B．Tpp C．硫辛酸 D．FAD E．CoA 13．下列哪一个反应需要生物素 ( ) A．羟化作用 B．羧化作用 C．脱羧作用 D．脱水作用 E．脱氨基作用 14．转氨酶的辅酶是下列化合物中的哪一个? ( ) A. 尼克酸 B．泛酸 C．硫胺素 D．磷酸吡哆醛 E．核黄素 15．下列哪一种化合物由谷氨酸、对氨基苯甲酸和蝶呤啶组成 ( ) A. 维生素B12 B．氰钴胺素 C．叶酸 D．生物素 E．CoA 16．除CoA可以作为酰基载体之外，下列哪种物质也可以传递乙酰基 ( ) A. 生物素 B．叶酸 C. Tpp D．硫辛酸 E．维生素B12 17．来自于食物的抗生物素蛋白不影响哪一种酶的催化反应? ( ) A．琥珀酸脱氢酶 B．丙酰辅酶A羧化酶
（生物科技行业）食品生物化学食品生物化学课程标 准
《食品生物化学》课程标准 一.课程概述 生物化学是研究生命的化学,它属于生命科学中的基础学科。食品生物化学是生物化学的一个分支学科。它是研究生物有机体包括动物、植物、微生物及人体等的化学组成和生命过程中的化学变化规律，侧重于研究食品原料化学组成及其性质、食品成分在有生命的原料中的变化规律、食品成分在加工过程中的变化规律、食品成分在人体内的变化规律、食品原料生产的品种改造及其变化规律。 食品生物化学是食品科学与工程专业的基础学科。它是以生物化学为基础，与食品化学或食品原料学有一定关系。它的前置课程有无机化学、有机化学、物理化学、生物学，是这些基础科学在教学中的综合与发展的运用。它的后置课程有食品微生物学、食品营养学、食品生物技术、食品加工原理（工艺学）等。 这门学科的重点是掌握生命科学的基础知识，理解生命的变化和发展过程，指导食品原料进行生物技术和化学技术改造，指导人们合理和科学地膳食。在食品科学与工程学科中具有极其重要的地位，对培养该学科人才的基本理论、科学综合素养和研究开发能力具有重要意义。 二．课程目标 1.知道《食品生物化学》这门学科的性质、地位和独立价值。知道这门学科的研究范围、研究方法、学科进展、应用和未来方向。 2.理解这门学科的主要概念、基本理论，尤其是与食品成分及其在加工、贮运及为人体所利用的静态和动态生物化学过程。 3.学会运用其中的基本原理去指导生产和新产品开发，并更好地理解现代生物技术是怎样对食品原料进行生物改造的。 4.养成对与食品有关的生命过程的兴趣和健康的饮食生活方式，并能把所学的基本理论应用
《食品分析》课程标准 一、课程概述 《食品分析》是食品科学与工程专业专业基础课。该课程的理论基础是无机化学、分析化学、有机化学、物理化学、生物化学、仪器分析等基础理论课。课程主研究、讨论食品生产、科研，营养学研究，卫生管理，质量控制等方面所需解决食品组分、含量分析，结构、作用的确定等问题；主要的内容有：营养成分，食品添加剂，污染物等。采用的分析方法有化学法，物理法，仪器分析法等。 该课程的先修课程有无机及分析化学、有机化学等，后续课程有食品工艺学、食品品质控制管理等。 二、课程目标 本课程是研究和评定食品品质及其变化的一门学科。其主要任务是依据物理、化学、生物化学的一些基本理论和运用各种科学技术，按照制订的技术标准对原料、辅助材料、半成品及成品的质量进行检验。食品分析的作用是为食品行业把好生产质量关，为改进生产工艺、加工技术和包装技术、开发新的食品资源提供依据。通过本课程的学习，应能掌握食品分析和检验的基本理论知识，能独立完成实验操作，正确处理分析结果，具有较强的综合实验能力。 三、课程内容和教学要求 第一章绪论 要求深刻理解和熟练掌握的重点内容有： 1.食品分析的性质、任务和作用。 2.食品分析的内容。 要求一般理解和掌握的内容有： 1.食品分析方法及发展方向。 2.食品分析的学习方法和主要的参考资料。 第二章食品分析的基本知识 要求深刻理解和熟练掌握的重点内容有： 1.正确采集样品的方法。 2.样品的预处理方法及分析方法的选择。 3.掌握食品分析的误差与数据处理的方法。 要求一般理解和掌握的内容有： 1. 样品的制备及保存方法。了解国内外食品分析标准。 第三章 要求深刻理解和熟练掌握的重点内容有： 熟练掌握比重法、折光法、旋光法在食品分析中的应用。 要求一般理解和掌握的内容有： 理解和掌握比重法、折光法、旋光法在食品分析中的应用原理。 第四章水分和水分活度值的测定 要求深刻理解和熟练掌握的重点内容有： 水分的测定方法：干燥法、蒸馏法、卡尔·费休法。 要求一般理解和掌握的内容有：
生化习题 选择题 1.含有2个羧基的氨基酸是：（ A ） A.谷氨酸 B. 苏氨酸 C.丙氨酸 D. 甘氨酸 2.酶促反应速度V达到最大反应速度Vmax的80%时，底物浓度[S]: （ D ） A. 1 Km B. 2 Km C. 3 Km D. 4 Km 3.三碳糖、六碳糖与七碳糖之间相互转变的糖代谢途径是：（ D ） A．糖异生 B．糖酵解 C．三羧酸循环 D．磷酸戊糖途径 4.哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度：（ B ） A．不可逆抑制作用 B．竞争性可逆抑制作用 C．非竞争性可逆抑制作用 D 反竞争性抑制作用 5.鸟氨酸循环中，尿素生成的氨基来源有：（ C ） A．鸟氨酸 B．精氨酸 C．天冬氨酸 D．瓜氨酸 6.糖酵解途径中，第二步产能的是: （ B ） A. 1，3-二磷酸甘油酸到 3-磷酸甘油酸 B. 磷酸烯醇式丙酮酸到丙酮酸 C. 3-磷酸甘油醛到 1，3-二磷酸甘油酸 D. F-6-P到 F-1,6-P 7.氨基酸的联合脱氨过程中，并不包括哪类酶的作用: （ D ） A 转氨酶 B L –谷氨酸脱氢酶 C 腺苷酸代琥珀酸合成酶 D 谷氨酸脱羧酶 8.下列哪一种物质不是糖异生的原料: （ C ） A. 乳酸 B. 丙酮酸 C. 乙酰CoA D. 生糖氨基酸 9.目前被认为能解释氧化磷酸化机制的假说是: （ C ） A、化学偶联假说 B、构象变化偶联假说 C、化学渗透假说 D、诱导契合假说 10、1958年Meselson和Stahl利用15N标记大肠杆菌DNA的实验证明了下列哪一种机制？（D） A．DNA能被复制 B．DNA基因可转录为mRNA C．DNA基因可表达为蛋白质
绪论 掌握：生物化学、生物大分子和分子生物学的概念。 【复习思考题】 1. 何谓生物化学？ 2. 当代生物化学研究的主要内容有哪些 蛋白质的结构与功能 掌握：蛋白质元素组成及其特点；蛋白质基本组成单位--氨基酸的种类、基本结构及主要特点；蛋白质的分子结构；蛋白质结构与功能的关系；蛋白质的主要理化性质及其应用；蛋白质分离纯化的方法及其基本原理。 【复习思考题】 1. 名词解释：蛋白质一级结构、蛋白质二级结构、蛋白质三级结构、蛋白质四级结构、肽单元、模体、结构域、分子伴侣、协同效应、变构效应、蛋白质等电点、电泳、层析 2. 蛋白质变性的概念及本质是什么有何实际应用？ 3. 蛋白质分离纯化常用的方法有哪些其原理是什么？ 4. 举例说明蛋白质结构与功能的关系 核酸的结构与功能 掌握：核酸的分类、细胞分布，各类核酸的功能及生物学意义；核酸的化学组成；两类核酸（DNA与RNA）分子组成异同；核酸的一级结构及其主要化学键；DNA 右手双螺旋结构要点及碱基配对规律；mRNA一级结构特点；tRNA二级结构特点；核酸的主要理化性质（紫外吸收、变性、复性），核酸分子杂交概念。 第三章酶 掌握：酶的概念、化学本质及生物学功能；酶的活性中心和必需基团、同工酶；酶促反应特点；各种因素对酶促反应速度的影响、特点及其应用；酶调节的方式；酶的变构调节和共价修饰调节的概念。 第四章糖代谢 掌握：糖的主要生理功能；糖的无氧分解（酵解）、有氧氧化、糖原合成及分解、糖异生的基本反应过程、部位、关键酶（限速酶）、生理意义；磷酸戊糖途径的生理意义；血糖概念、正常值、血糖来源与去路、调节血糖浓度的主要激素。 【复习思考题】 1. 名词解释：.糖酵解、糖酵解途径、高血糖和糖尿病、乳酸循环、糖原、糖异生、三羧酸循环、活性葡萄糖、底物水平磷酸化。 2．说出磷酸戊糖途径的主要生理意义。 3．试述饥饿状态时，蛋白质分解代谢产生的丙氨酸转变为葡萄糖的途径。
《食品生物化学》课程标准 一.课程概述 生物化学是研究生命的化学,它属于生命科学中的基础学科。食品生物化学是生物化学的一个分支学科。它是研究生物有机体包括动物、植物、微生物及人体等的化学组成和生命过程中的化学变化规律，侧重于研究食品原料化学组成及其性质、食品成分在有生命的原料中的变化规律、食品成分在加工过程中的变化规律、食品成分在人体内的变化规律、食品原料生产的品种改造及其变化规律。 食品生物化学是食品科学与工程专业的基础学科。它是以生物化学为基础，与食品化学或食品原料学有一定关系。它的前置课程有无机化学、有机化学、物理化学、生物学，是这些基础科学在教学中的综合与发展的运用。它的后置课程有食品微生物学、食品营养学、食品生物技术、食品加工原理（工艺学）等。 这门学科的重点是掌握生命科学的基础知识，理解生命的变化和发展过程，指导食品原料进行生物技术和化学技术改造，指导人们合理和科学地膳食。在食品科学与工程学科中具有极其重要的地位，对培养该学科人才的基本理论、科学综合素养和研究开发能力具有重要意义。 二．课程目标 1.知道《食品生物化学》这门学科的性质、地位和独立价值。知道这门学科的研究范围、研究方法、学科进展、应用和未来方向。 2.理解这门学科的主要概念、基本理论，尤其是与食品成分及其在加工、贮运及为人体所利用的静态和动态生物化学过程。 3.学会运用其中的基本原理去指导生产和新产品开发，并更好地理解现代生物技术是怎样对食品原料进行生物改造的。 4.养成对与食品有关的生命过程的兴趣和健康的饮食生活方式，并能把所学的基本理论应用到指导生活、生产和科学研究实践。培养学生在生产和生活中发现、分析和解决问题的能力等。 三、课程内容和教学要求 这门学科的知识与技能要求分为知道、理解、掌握、学会四个层次。这四个层次的一般涵义表述如下： 知道———是指对这门学科和有机体内部发生、发展和消亡机制的认知。 理解———是指对这门学科涉及到的概念、原理的说明和解释，能理解生命体内部各种生化现象之间的相互关系。 掌握———是指运用已理解的概念和原理说明、解释、类推同类生化反应和生命现象。 学会———是指能模仿或在教师指导下独立地完成某些生化实验。 教学内容和要求表中的“√”号表示教学知识和技能的教学要求层次。 本标准中打“*”号的内容可作为自学，教师可根据实际情况确定要求或不布置要求。
生物化学选择题和填空题 ? ? ?一、最佳选择题：下列各题有A、B、C、D、E五个备选答案，请选择一个最佳答案。 1、蛋白质一级结构的主要化学键是() A、氢键 B、疏水键 C、盐键 D、二硫键 E、肽键 2、蛋白质变性后可出现下列哪种变化() A、一级结构发生改变 B、构型发生改变 C、分子量变小 D、构象发生改变 E、溶解度变大 3、下列没有高能键的化合物是() A、磷酸肌酸 B、谷氨酰胺 C、ADP D、1，3一二磷酸甘油酸 E、磷酸烯醇 式丙酮酸 4、嘌呤核苷酸从头合成中，首先合成的是() A、IMP B、AMP C、GMP D、XMP E、ATP 5、脂肪酸氧化过程中，将脂酰～SCOA载入线粒体的是() A、ACP B、肉碱 C、柠檬酸 D、乙酰肉碱 E、乙酰辅酶A 6、体内氨基酸脱氨基最主要的方式是() A、氧化脱氨基作用 B、联合脱氨基作用 C、转氨基作用 D、非氧化脱氨基作用 E、脱水脱氨基作用 7、关于三羧酸循环，下列的叙述哪条不正确() A、产生NADH和FADH2 B、有GTP生成 C、氧化乙酰COA D、提供草酰乙酸净合成 E、在无氧条件下不能运转
8、胆固醇生物合成的限速酶是() A、HMG COA合成酶 B、HMG COA裂解酶 C、HMG COA还原酶 D、 乙酰乙酰COA脱氢酶E、硫激酶 9、下列何种酶是酵解过程中的限速酶() A、醛缩酶 B、烯醇化酶 C、乳酸脱氢酶 D、磷酸果糖激酶 E、3一磷 酸甘油脱氢酶 10、DNA二级结构模型是() A、α一螺旋 B、走向相反的右手双螺旋 C、三股螺旋 D、走向相反的左手双螺旋 E、走向相同的右手双螺旋 11、下列维生素中参与转氨基作用的是() A、硫胺素 B、尼克酸 C、核黄素 D、磷酸吡哆醛 E、泛酸 12、人体嘌呤分解代谢的终产物是() A、尿素 B、尿酸 C、氨 D、β—丙氨酸 E、β—氨基异丁酸 13、蛋白质生物合成的起始信号是() A、UAG B、UAA C、UGA D、AUG E、AGU 14、非蛋白氮中含量最多的物质是() A、氨基酸 B、尿酸 C、肌酸 D、尿素 E、胆红素 15、脱氧核糖核苷酸生成的方式是() A、在一磷酸核苷水平上还原 B、在二磷酸核苷水平上还原 C、在三磷酸核苷水平上还原 D、在核苷水平上还原 E、直接由核糖还原 16、妨碍胆道钙吸收的物质是()
等电点：在某PH的溶液中，氨基解离呈阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，此时溶液的P H称为该氨基酸的等电点 DNA变性：某些理化因素会导致氢键发生断裂，使双链DNA解离为单链，称为DNA变性 解链温度（Tm）：在解链过程中，紫外吸收值得变化达到最大变化值的一半时所对应的温度 酶的活性中心：酶分子中一些必需基团在空间结构上彼此靠近，组成具有特定空间结构的区域，能和底物特异结合，并将底物转化为产物，这一区域称为酶的活性中心 同工酶：指催化相同化学反应，但酶蛋白的分子结构、理化性质、免疫学性质不同的一组酶 诱导契合：在酶和底物相互接近时，其结构相互诱导、相互变性、相互适应，这一过程为酶底物结合的诱导契合 米氏常数（Km值）：等于酶促反应速率为最大反应速率一半时的底物浓度 酶原的激活：酶的活性中心形成或暴露，酶原向酶的转化过程即为。。 有氧氧化：葡萄糖在有氧条件下彻底氧化成水和二氧化碳的反应过程称为有氧氧化 三羧酸循环：是指乙酰CoA和草酰乙酸缩合生成含3个羧基的柠檬酸，再4次脱氢，2次脱羧，又生成草酰乙酸的循环反应过程 糖异生：从非糖化合物转化为葡萄糖或糖原的过程称为。。 脂肪动员：指储存在脂肪细胞中的甘油三酯，被酯酸逐步水解为游离脂酸和甘油并释放入血，通过血液运输至其他组织，氧化利用的过程 酮体：是脂酸在肝细胞线粒体中β-氧化途径中正常生成的中间产物：乙酰乙酸、β-羟丁酸、丙酮脂蛋白：血浆中脂类物质和载脂蛋白结合形成脂蛋白 呼吸链：线粒体内膜中按一定顺序排列的一系列具有电子传递功能的酶复合体，可通过连锁的氧化还原将代谢物脱下的电子最终传递给氧生成水。这一系列酶和辅酶称为呼吸链或电子传递链 营养必需氨基酸：体内需要而又不能自身合成，必须由食物提供的氨基酸 一碳单位：指某些氨基酸在分解代谢过程中产生的含有一个碳原子的基因 半保留复制：DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模极，按碱基配对规律，合成与模极互补的子链、子代细胞的DNA。一股单链从亲代完整的接受过来，另一股单链则完全重新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致，这中复制方式称为半保留复制 生物转化：机体对内外源性的非营养物质进行代谢转变，使其水溶性提高，极性增强，易于通过胆汁或尿液排出体外，这一过程为生物转化 氧化磷酸化：代谢物脱氢进入呼吸链，彻底氧化成水的同时，ADP磷酸化生成ATP，称为氧化磷酸化 底物水平磷酸化：底物由于脱氢脱水作用，底物分子内部能量重新分布生成高能键，使ATP磷酸化生成ATP的过程 密码子：在mRNA的开放阅读框架区，以每3个相邻的核苷酸为一组，代表一种氨基酸。这种三联体形成的核苷酸行列称为密码子 盐析：在蛋白质溶液中加入大量中性盐，以破坏蛋白质的胶体性质，使蛋白质从溶液中沉淀析出称为盐析 糖酵解：葡萄糖或糖原在组织中进行类似的发酵的降解反应过程，最终形成乳酸或丙酮酸，同时释放出部分能量，形成ATP供组织利用 蛋白质的一级结构：指在蛋白质分子从N-端至C-端的氨基酸排列顺序 蛋白质的二级结构：多肽链主链骨架原子的相对空间位置。 蛋白质的三级结构：整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置。即肽链中所有原子在三维空间的排布位置。 蛋白质的四级结构：蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用 DNA的空间结构与功能
试题一 四、名词解释 1．两性离子（dipolarion） 2．米氏常数（Km值） 3．生物氧化（biological oxidation） 4．糖异生(glycogenolysis) 5．必需脂肪酸（essential fatty acid） 五、问答 1．简述蛋白质变性作用的机制。 2．DNA分子二级结构有哪些特点？ 5．简述tRNA在蛋白质的生物合成中是如何起作用的？ 四、名词解释 1.两性离子：指在同一氨基酸分子上含有等量的正负两种电荷，又称兼性离子或偶极离子。 2．米氏常数（Km值）：用Ｋm值表示，是酶的一个重要参数。Ｋm值是酶反应速度（V）达到最大反应速度（Vmax）一半时底物的浓度（单位M或mM）。米氏常数是酶的特征常数，只与酶的性质有关，不受底物浓度和酶浓度的影响。 3．生物氧化：生物体内有机物质氧化而产生大量能量的过程称为生物氧化。生物氧化在细胞内进行，氧化过程消耗氧放出二氧化碳和水，所以有时也称之为“细胞呼吸”或“细胞氧化”。生物氧化包括：有机碳氧化变成CO2；底物氧化脱氢、氢及电子通过呼吸链传递、分子氧与传递的氢结成水；在有机物被氧化成CO2和H2O的同时，释放的能量使ADP转变成ATP。 4．糖异生：非糖物质（如丙酮酸乳酸甘油生糖氨基酸等）转变为葡萄糖的过程。 5．必需脂肪酸：为人体生长所必需但有不能自身合成，必须从事物中摄取的脂肪酸。在脂肪中有三种脂肪酸是人体所必需的，即亚油酸，亚麻酸，花生四烯酸。 五、问答 1. 答： 维持蛋白质空间构象稳定的作用力是次级键，此外，二硫键也起一定的作用。当某些因素破坏了这些作用力时，蛋白质的空间构象即遭到破坏，引起变性。 2．答： 按Watson-Crick模型，DNA的结构特点有：两条反相平行的多核苷酸链围绕同一中心轴互绕；碱基位于结构的内侧，而亲水的糖磷酸主链位于螺旋的外侧，通过磷酸二酯键相连，形成核酸的骨架；碱基平面与轴垂直，糖环平面则与轴平行。两条链皆为右手螺旋；双螺旋的直径为2nm，碱基堆积距离为0.34nm，两核酸之间的夹角是36°，每对螺旋由10对碱基组成；碱基按A=T，G≡C配对互补，彼此以氢键相连系。维持DNA结构稳定的力量主要是碱基堆积力；双螺旋结构表面有两条螺形凹沟，一大一小。．
《食品化学》课程标准 一、课程概述 食品化学是一门主要包括微生物、化学、生物学和工程学的多学科的科学，是食品科学主要课程，是食品专业的的专业基础课，它的主要任务包括：研究食品材料（原料和产品）中主要成分的组成、结构和性质；食品在贮藏、加工和包装过程中可能发生的化学和物理变化；食品成分的结构、性质和变化对食品质量和加工性能的影响等。 该课程的先修课程有无机及分析化学、有机化学、生物化学等，后续课程有食品工艺学、食品保藏原理、毕业论文等课程。 二、课程目标： 1、知道该学科的性质、地位、独立价值、研究范围、基本框架、研究方法、学科进展和未来方向等。 2、通过对本课程的学习，让学生能够基本掌握食品中主要成分的组成、结构和性质；食品在贮藏、加工过程中可能发生的化学和物理变化；食品成分的结构、性质和变化对食品质量和加工性能的影响，并通过实验来加强对本课程的理解。 3、了解和掌握食品化学的基本知识和研究方法，从而在食品加工和保藏领域较好地从事教学、研究、生产和管理方面的工作。 三、课程的内容和要求 这门学科的知识与技能要求分为知道、理解、掌握、学会四个层次。这四个层次的一般涵义表述如下：知道———是指对这门学科认知。 理解———是指能懂得对这门学科涉及到的概念、原理与技术的说明和解释。 掌握———是指运用已理解的食品化学原理说明、解释并运用到实践中。 学会———是指能模仿或在教师指导下独立地完成食品化学的具体操作。教学内容和要求表中的“√”号表示教学知识和技能的教学要求层次。
四、课程实施 （一）课时安排与教学建议 本课程属于食品工程（本科）专业必修课：理论课学时数35，实验课学时数9，学分2个。具体课时安排如下：
1．在生理pH 条件下，下列哪种氨基酸带正电荷？ C A．丙氨酸B．酪氨酸C．赖氨酸 D．蛋氨酸E．异亮氨酸 2．下列氨基酸中哪一种是非必需氨基酸？ B A．亮氨酸B．酪氨酸C．赖氨酸 D．蛋氨酸E．苏氨酸 3．蛋白质的组成成分中，在280nm 处有最大吸收值的最主要成分是： A A．酪氨酸的酚环B．半胱氨酸的硫原子 C．肽键D．苯丙氨酸 4．下列4 种氨基酸中哪个有碱性侧链？ D A．脯氨酸B．苯丙氨酸C．异亮氨酸D．赖氨酸 5．下列哪种氨基酸属于亚氨基酸？ B A．丝氨酸B．脯氨酸C．亮氨酸D．组氨酸 6．下列哪一项不是蛋白质α-螺旋结构的特点？ B A．天然蛋白质多为右手螺旋 B．肽链平面充分伸展 C．每隔3.6 个氨基酸螺旋上升一圈。 D．每个氨基酸残基上升高度为0.15nm. 7．下列哪一项不是蛋白质的性质之一？ C A．处于等电状态时溶解度最小B．加入少量中性盐溶解度增加 C．变性蛋白质的溶解度增加D．有紫外吸收特性 8．下列氨基酸中哪一种不具有旋光性？ C A．Leu B．Ala C．Gly D．Ser E．Val 9．在下列检测蛋白质的方法中，哪一种取决于完整的肽链？ B A．凯氏定氮法B．双缩尿反应C．紫外吸收法D．茚三酮法 10．下列哪种酶作用于由碱性氨基酸的羧基形成的肽键？ D A．糜蛋白酶B．羧肽酶C．氨肽酶D．胰蛋白酶 11．下列有关蛋白质的叙述哪项是正确的？ A A．蛋白质分子的净电荷为零时的pH 值是它的等电点 B．大多数蛋白质在含有中性盐的溶液中会沉淀析出 C．由于蛋白质在等电点时溶解度最大，所以沉淀蛋白质时应远离等电点D．以上各项均不正确 12．下列关于蛋白质结构的叙述，哪一项是错误的？ A A．氨基酸的疏水侧链很少埋在分子的中心部位 B．电荷的氨基酸侧链常在分子的外侧，面向水相 C．白质的一级结构在决定高级结构方面是重要因素之一 D．白质的空间结构主要靠次级键维持 13．列哪些因素妨碍蛋白质形成α-螺旋结构？ E A．脯氨酸的存在B．氨基酸残基的大的支链 C．性氨基酸的相邻存在D．性氨基酸的相邻存在 E．以上各项都是 14．于β-折叠片的叙述，下列哪项是错误的？ C A．β-折叠片的肽链处于曲折的伸展状态 B．的结构是借助于链内氢键稳定的
一、单项选择题 1．辅脂酶在脂肪消化吸收中的作用 ( ) A．直接水解脂肪成脂肪酸和甘油 B．是合成脂肪的主要关键酶 C．是胰脂酶对脂肪消化不可缺少的蛋白质辅助因子 D．是脂肪酸β氧化的第一个酶 E．以上都是 2．辅脂酶对胰脂酶起辅助作用的机制是 ( ) A. 传递H原子 B．提供O2 C. 解除肠腔内胆汁酸盐对胰脂酶的抑制 D．通过氧化还原反应为胰脂酶提供NADPH+H+ E．降低胰脂酶和脂肪的结合 3．合成甘油三酯最强的器官是 ( ) A．肝 B．肾 C．脂肪组织 D．脑 E．小肠 4．肝细胞内的脂肪合成后的去向 ( ) A. 在肝细胞内水解 B．在肝细胞内储存， C. 在肝细胞内氧化供能 D. 在肝细胞内与载脂蛋白结合为VLDL分泌入血 E．以上都不对 5．小肠黏膜细胞再合成脂肪的原料主要来源于 ( ) A．小肠黏膜细胞吸收来的脂肪的水解产物 B．肝细胞合成的脂肪到达小肠后被消化的产物 C．小肠黏膜细胞吸收来的胆固醇的水解产物 D．脂肪组织的分解产物 E．以上都对 6．脂肪动员指 ( ) A．脂肪组织中脂肪的合成 B．脂肪组织中脂肪的分解 C．脂肪组织中脂肪被脂肪酶水解为游离脂肪酸和甘油并释放人血供其他组织氧化利用 D．脂肪组织中脂肪酸的合成及甘油的生成 E．以上都对 7．能促进脂肪动员的激素有 ( ) A．肾上腺素 B．胰高血糖素 C．促甲状腺素 D．ACTH E．以上都是 8．线粒体外脂肪酸合成的限速酶是 ( ) A. 酰基转移酶 B．乙酰CoA羧化酶 C．肉毒碱脂酰CoA转移酶I D．肉毒碱脂酰CoA转移酶Ⅱ E．β—酮脂酰还原酶 9．酮体肝外氧化，原因是肝内缺乏 ( ) A. 乙酰乙酰CoA硫解酶 B. 琥珀酰CoA转硫酶 C．β羟丁酸脱氢酶 D．β—羟—β—甲戊二酸单酰CoA合成酶
生物化学知识点整理 注： 1.此材料根据老师的PPT及课堂上强调需掌握的内容整理 而成，个人主观性较强，仅供参考。（如有错误，请以课本为主） 2.颜色注明：红色：多为名解、简答（或较重要的内容） 蓝色：多为选择、填空 第八章脂类代谢 第一节脂类化学 脂类：包括脂肪和类脂，是一类不溶于水而易溶于有机溶剂，并能为机体利用的有机化合物。 脂肪：三脂肪酸甘油酯或甘油三酯。 类脂：胆固醇、胆固醇酯、磷脂、糖脂。
第二节脂类的消化与吸收 脂类消化的主要场所：小肠上段 脂类吸收的部位：主要在十二指肠下段及空肠上段 第三节三酰甘油（甘油三酯）代谢 一、三酰甘油的分解代谢 1.1）脂肪动员：储存在脂肪细胞中的脂肪，被肪脂酶逐步水解为 脂肪酸及甘油，并释放入血以供其他组织氧化利用的过程。 2）关键酶：三酰甘油脂肪酶 （又称“激素敏感性三酰甘油脂肪酶”，HSL） 3）脂解激素：能促进脂肪动员的激素，如胰高血糖素、去甲肾
上腺素、肾上腺素等。 4）抗脂解激素：抑制脂肪动员，如胰岛素、前列腺素、烟酸、 雌二醇等。 2.甘油的氧化 甘油在甘油激酶的催化下生成3-磷酸甘油，随后脱氢生成磷酸二羟丙酮，再经糖代谢途径氧化分解释放能量或经糖异生途径生成糖。 3.脂肪酸的分解代谢 饱和脂肪酸氧化的方式主要是β氧化。 1）部位：组织：脑组织及红细胞除外。心、肝、肌肉最活跃； 亚细胞：细胞质、线粒体。 2）过程： ①脂酸的活化——脂酰CoA的生成（细胞质） 脂肪酸 脂酰 消耗了2 ②脂酰CoA进入线粒体 酶：a.肉碱酰基转移酶 I（脂肪酸氧化分解的关键酶、限速酶） b.肉碱酰基转移酶Ⅱ c.脂酰肉碱——肉碱转位酶（转运体） ③脂酸的β氧化 a.脱氢：脂酰