临床检验技师-临床免疫学和免疫检验(2019)讲义第二章抗原抗体反应

比例性
抗原抗体反应具有比例性，即当抗原和抗体比例适当时，反应最完全，形成的免疫复合物 最多。当抗原或抗体过量时，反应则不完全，形成的免疫复合物也较少。这种比例性是由 抗原和抗体的浓度以及它们之间的比例关系决定的。
02
抗原抗体反应机制
抗原识别与结合机制
抗原表位识别
T细胞通过TCR识别抗原肽-MHC分子复合物，B细胞通过BCR识 别抗原表位。
抗原抗体反应特点
特异性
抗原抗体反应具有高度的特异性，即一种抗体只能与相应的抗原发生反应，形成免疫复合 物。这种特异性是由抗原决定簇和抗体结合部位的互补性决定的。
可逆性
抗原抗体反应是可逆的，即在一定条件下，免疫复合物可以解离成游离的抗原和抗体，再 次相遇时仍可重新结合。这种可逆性是由抗原抗体结合的亲和力决定的，亲和力越高，结 合越牢固，解离越困难。
优化抗体药物设计
通过机器学习技术对抗体进行优化设计，提高抗 体的亲和力和特异性。
抗原抗体反应模拟
利用深度学习技术模拟抗原抗体反应过程，为药 物筛选和开发提供新工具。
THANKS
感谢观看
自身免疫性疾病检测及诊断
01
02
03
检测方法
介绍常见的自身免疫性疾 病相关抗体检测方法，如 ELISA、免疫印迹技术等 。
临床意义
阐述自身抗体检测在自身 免疫性疾病诊断、病情监 测和预后评估中的应用价 值。
病例分析
通过具体病例展示自身免 疫性疾病抗体检测的临床 应用，如系统性红斑狼疮 、类风湿性关节炎等。
药物开发中抗原抗体反应的意义
01
阐述药物开发中抗原抗体反应的研究意义，包括药物安全性、
有效性等方面。
药物抗原性的研究方法
02

检验技师《抗原抗体反应》第二章试题及答案2018年检验技师《抗原抗体反应》第二章试题及答案1、传染性单核细胞增多症患者用嗜异性凝集来鉴别吸收试验结果正确的是()。

A、血清中绵羊红细胞凝集素不被(或不完全被)Forssman抗原吸收可被牛红细胞吸收B、血清中绵羊红细胞凝集素不被(或不完全被)Forssman抗原吸收，可被马红细胞吸收C、血清中绵羊红细胞凝集可被Forssman抗原吸收，也可被牛红细胞吸收D、血清中绵羊红细胞凝集素可被Forssman抗原吸收，不被牛红细胞吸收E、血清中绵羊红细胞凝集素被(或不完全被)Forssman抗原吸收，亦可被马红细胞吸收2、抗原抗体比例不适合出现的沉淀现象称为()。

A、等价带B、带现象C、前带D、后带E、中带3、甲、乙两种抗原都能与某一抗体发生特异性结合反应，这两种抗原相互称为()。

A、半抗原B、完全抗原C、TD-AgD、TI-AgE、共同抗原4、凡具有强免疫原性的物质，一般的分子量应是()。

A、≥10000B、1000C、5000D、1000000E、1000005、容易引起免疫耐受性的抗原注射途径为()。

A、静脉皮下肌内腹腔B、静脉腹腔皮下肌内C、腹腔静脉皮下肌内D、皮下肌内腹腔静脉E、腹腔皮下肌内静脉6、抗原的反应原性是指()。

A、抗原对机体的反应性的特性B、抗原与机体发生特异性反应的特性C、抗原与相应的应答产物发生特异性反应的特性D、抗原与载体发生特异性反应的特性E、抗原引起自身反应淋巴细胞活化的特性7、下列不是凝集反应试验的是()。

A、直接凝集试验B、间接凝集试验C、凝集抑制试验D、协同凝集试验E、毒素中和试验8、对人类而言属于异嗜性抗原的物质是()。

A、人抗白喉外毒素血清B、BSAC、破伤风抗毒素D、ABO血型抗原E、大肠杆菌O149、决定免疫反应特异性的物质基础是()。

A、载体B、佐剂C、抗原决定簇D、TI-AgE、TD-Ag10、下列物质中抗原性最强的是()。

第二章抗原抗体反应第一节抗原抗体反应的原理抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇（表位）和抗体超变区分子间的结构互补性以及彼此之间的密切接触，才有足够的结合力。

一、抗原抗体结合力抗原抗体是一种非共价结合，不形成共价键。

1.静电引力（库伦引力）：是因抗原、抗体带有相反电荷的氨基与羧基基团间相互吸引的能力，这种吸引力的大小和两个电荷间的距离平方成反比。

两个电荷距离越近，静电引力越大。

2.范德华力：这是原子与原子、分子与分子相互接近时分子极化作用发生的一种吸引力，是抗原、抗体两个大分子外层轨道上电子相互作用时，两者电子云中的偶极摆动而产生的引力。

这种引力的能量小于静电引力。

3.氢键结合力：是供氢体上的氢原子与受氢体上氢原子间的引力。

其结合力较强于范德华引力。

4.疏水作用：最强。

水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。

二、抗原抗体的亲和力和亲合力亲和力指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原表位之间相适应而存在的引力，它是抗原抗体间固有的结合力。

亲和力用平衡常数K来表示，K值越大，亲和性越强，与抗原结合也越牢固。

抗体的亲合力指抗体结合部位与抗原表位间结合的强度，与抗体结合价、抗体的亲和性、抗原有效表位数目等相关。

三、亲水胶体转化为疏水胶体抗原抗体多为蛋白质，为亲水胶体，在水中不发生自然沉淀。

在高pH溶液中，使得抗体蛋白质带负电，若此时与抗原结合，则抗原抗体复合物转化为疏水胶体。

若此时加入NaCl等电解质，则形成可见的抗原抗体复合物。

第二节抗原抗体反应的特点一、特异性抗原表位与抗体超变区结合的特异性，是两者在化学结构和空间构型上呈互补关系所决定的。

这一特性，是应用于临床诊断的基础。

二、可逆性抗原抗体是非共价结合，故不牢固，是一种动态平衡过程。

抗原抗体的亲合力及反应条件（如离子强度、pH等）可影响解离。

亲和层析法就是利用这个原理来纯化抗原或抗体。

三、比例性抗原抗体比例合适时，沉淀物形成快而多，称为抗原抗体反应的等价带；若抗原或抗体极度过剩则无沉淀形成，称为带现象，抗体过量时，称为前带，抗原过量时，称为后带。

4. 疏水作用力 抗原抗体分子侧链上的非极性氨基酸（亮、缬、丙）在 水溶液中与水分子间不 形成氢键。当抗原表位与抗体结合点靠近时，相互间正、负极性消失，静电引力 形成的亲水层也消失、排斥两者之间的水分子，促进抗原抗体结合。疏水作用提 供的作用力最大，约占总结合力的50%。
第二节 抗原抗体反应的特点
抗原抗体复合物浓度 亲和常数=
游离抗原浓度×游离抗体浓度
K值表示亲和力，大表示结合牢固，不易解离。
二、亲水胶体转化为疏水自然沉淀， 其蛋白质含大量氨基与羧基残基，带电荷，静电作用下，其 周围形成带相反电荷的电子云、水化层，不致自行聚合、产 生沉淀。疏水胶体 — 抗原抗体结合 — 电荷减少，电子云消 失，再加入电解质，使疏水胶体相互靠拢，形成可见抗原抗 体复合物。
抗体预滴定，找出最适反应浓度。
二、环境因素
1.电解质 Ag+Ab结合后无电解质参与，不出现可见反应 常用0.85%的Nacl促使沉淀和凝集物的形成。 2. 酸硷度 抗原抗体反应一般在pH 6~8间。 pH达到或接近抗原的等电点，即使无相应抗体，也会引起颗粒性抗原非特异 的凝集，造成假阳性反应。 3. 温度 温度升高，分子运动加速，碰撞机会增多，抗原抗体反应加速 常为37℃，高于56℃，抗原抗体解离，甚至变性或破坏。 有 些 有 独 特 的 最 适 反 应 温 度 ， 如 冷 凝 集 素 在 4℃ 左 右 与 细 胞 结 合 最 好 ， 20℃ 反而解离。
溶性复合物，大多数动物属比型，家兔为代表。
H型抗体 — 合适比例较窄，抗原抗体过量均可形成可溶性复合物，人 和大动物属此型，马免疫血清为代表。
三、可递性（reversibility）
Ag + Ab
Ag + Ab

三、抗原决定簇
1. 概念 抗原分子并非所有的基团都作用一致，决定其免疫活性 的只是其中的一小部分抗原区域。抗原分子表面具有特殊立体 构 型 和 免 疫 活 性 的 化 学 基 团 称 为 抗 原 决 定 簇 (antigenic determinant)或抗原决定基。由于抗原决定簇通常位于抗原分子 表面，因而又称为抗原表位(epitope) 。抗原决定簇决定抗原的 特异性。
免疫原性(immunogenicity) （抗原作用）指能刺激机体 产生抗体和致敏淋巴细胞的特性。
反应原性(reactinogenicity) （抗原反应）指抗原与相应 的抗体或致敏淋巴细胞发生反应的特性，此特性又称 为免疫反应性(immunoreactivity)。
2. 完全抗原与半抗原
抗原又分为完全抗原与不完全抗原。 既具有免疫原性又有反应原性的物质称为完全抗原
自身抗原 动物自身的组织通常情况下不具有免疫原性。
2. 大分子 抗原的免疫原性与其分子大小有直接关系。免疫原性良好的物质分 子量一般都在10000以上 ，在一定条件下，分子量越大，免疫原性越强。分 子量小于5000其免疫原性较弱。分子量在l 000以下的物质为半抗原，没有免 疫原性。但与蛋白质载体结合后可获得免疫原性。
3. 分子结构 相同大小的分子如果化学组成、分子结构和空间构象不同，其免 疫原性也有一定的差异。一般讲，分子结构和空间构型越复杂，免疫原性越 好。芳香环结构比直链结构强。
4. 物理性 颗粒性抗原的免疫原性通常比可溶性抗原强。可溶性抗原分子聚 合后或吸附在颗粒表面可增强其免疫原性。例如将甲状腺蛋白与聚丙烯酰 胺颗粒结合后免疫家兔可使IgM的效价提高20倍。免疫原性弱的蛋白质如 果吸附在氢氧化铝胶、脂质体等大分子颗粒上可增强其免疫原性。 5. 完整性 所以抗原物质通常要通过非消化道途径以完整分子状态进入体 内，才能保持抗原性。

临床检验免疫主管 (2)临床医学检验主管技师考试辅导《临床免疫学和免疫检验》第二章抗原抗体反应第一节抗原抗体反应的原理第二节抗原抗体反应的特点第三节影响抗原抗体反应的因素第四节免疫学检测技术的类型第一节抗原抗体反应的原理抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇（表位）和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。

抗原决定簇=表位。

这种特性是由抗原.抗体分子空间构型所决定的。

抗原表位和抗体超变区必须密切接触。

完全抗原=反应原性+免疫原性半抗原=反应原性一.抗原抗体结合力抗原抗体是一种非共价的结合，不形成共价键，需要四种分子间引力参与。

1.静电引力又称库伦引力，是因抗原.抗体带有相反电荷的氨基与羧基基团间相互吸引的能力，这种吸引力的大小和两个电荷间的距离平方成反比。

两个电荷距离越近，静电引力越大。

2.范德华引力这是原子与原子.分子与分子相互接近时分子极化作用发生的一种吸引力，是抗原.抗体两个大分子外层轨道上电子相互作用时，两者电子云中的偶极摆动而产生的引力。

这种引力的能量小于静电引力。

3.氢键结合力是供氢体上的氢原子与受氢体上氢原子间的引力。

其结合力较强于范德华引力。

4.疏水作用力（最强）水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。

当抗原表位和抗体超变区靠近时，相互间正负极性消失，周围亲水层也立即消失，从而排斥两者间的水分子，使抗原抗体进一步吸引和结合。

疏水作用力是这些结合力中最强的，因而对维系抗原抗体结合作用最大。

二.抗原抗体亲和力亲和力指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而存在的引力，它是抗原抗体间固有的结合力。

亲和力用平衡常数K来表示，K值越大，亲和性越强，与抗原结合也越牢固。

抗体的亲合力指抗体结合部位与抗原表位间结合的强度，与抗体结合价相关，即所谓多价优势。

抗体亲合力强，与抗原结合牢固，不易解离。

三.亲水胶体转化为疏水胶体抗体是球蛋白，大多数抗原亦为蛋白质，它们溶解在水中皆为胶体溶液，不会发生自然沉淀。

第二章 抗原抗体反应
抗原抗体反应
（antigen-antibody reaction）
是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结 合反应。
体内反应：可介导体液免疫效应； 体外反应：在抗原抗体复合物形成后表现为不同的现象。
体外抗原抗体反应已成为疾病诊断、病原微 生物鉴定、流行病学调查、激素或药物等化 学物质免疫检测以及科学研究工作广泛应用 的手段。
构象表位－又称为非线性表位。由序列上不 相连的几段氨基酸残基构成的空间构象所形 成的表位。
*(3)T细胞表位和B细胞表位
T细胞表位－能被T细胞抗原识别受体结合 的表位。多为顺序表位，可位于抗原分子 任意部位 。
B细胞表位－能被B细胞抗原识别受体结合 的表位，多在抗原分子的表面或转折处。
T细胞表位与B细胞表位
2、交叉反应：cross-reaction
一种抗原除能与其对应抗体相结合，还能与其共 同抗原刺激机体产生的抗体发生结合。
交叉反应示意图
共同抗原与交叉反应
A抗原
表位2 表位1
抗体2 抗体1
抗体A
B抗原
表位1 表位3
抗体1 抗体B
抗体3
交叉反应的发生并非否定抗原的 特异性，而是由于抗原的异质性 和共同表位的存在所致。
高变区（hypervariable region，HVR）
V区内变化最为剧烈的特定部位。L链、H链各3个。 因其在空间结构上可与抗原决定簇形成精密的互补，故又称互
450～550个氨基酸残基，分子量约50～75kD。
根据Ig重链抗原性的差异，Ig可分为五类：
即
IgG、IgM、IgA、IgD、IgE，
相应H链为γ 、 μ 、 α 、 δ 及 ε 链。

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7
3 半抗原（hapten）/不完全 抗原（incomplete antigen）
只具有免疫反应性而无免疫原性的物质 称为半抗原
半抗原与抗体结合
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8
4 抗原决定簇 （antigenic determinant）
又称表位（epitope），是指抗原性物质 表面决定该抗原特异性的特殊化学基团， 是免疫应答和免疫反应具有特异性的物 质基础
带现象（zonephenomenon）：等价带前 后分别为抗体或抗原过剩则无沉淀物形 成。
前带（prezone）：抗体过量
后带（postzone）精选：课件抗ppt 原过剩。
29
Marrack（1934）网络学说
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30
3 可逆性reversibility
Ag + Ab
Ag-Ab
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24
交叉反应（Cross reaction）
抗原除与其相应的抗体发生特异性反应 外，还与其他抗体发生反应称为交叉反 应
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25
引起交叉反应的原因：
抗原异质性（用于免疫动物的抗原性物质 中含有多种抗原分子，任何其他物质只要 含有一种或多种与上述物质相同的抗原分 子，必将与上述多特异性的抗血清发生交 叉反应）
抗原抗体结合过程示 意图
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18
分两个阶段： 抗原抗体特异性结合阶段 可见反应阶段
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19
1 抗原抗体结合力
静电引力：带相反电荷的氨基和羧基， 与距离有关
范德华力：原子与原子、分子与分子相 互接近时分子极化发生的引力
氢键结合力：氢原子与氢受体原子间的 引力

夹心反应
总结词
指抗原和抗体结合后，其复合物可与其 他物质结合，形成夹心结构所引发的反 应。
VS
详细描述
在夹心反应中，抗原和抗体结合后，其复 合物可以与另一种物质结合，形成一种夹 心的结构。这种反应可以显著增加反应的 灵敏度，常用于检测低浓度的抗原。例如 在酶联免疫吸附试验（ELISA）中，酶标 板上的抗体与抗原结合后，再与酶标记的 抗体结合，形成夹心结构。
抗体
指由抗原刺激机体免疫系统产生的，能与相应抗原特异性结合的 球蛋白。
抗原抗体的特性
特异性
抗原和抗体之间的结合具有高度的特异性，即一种 抗原只能与相应的抗体发生结合反应。
亲和力
抗原和抗体之间的结合力称为亲和力，亲和力的大 小决定了抗原抗体反应的强弱。
可逆性
抗原抗体结合后形成的复合物在一定条件下可以解 离，即抗原抗体反应具有可逆性。
凝集反应
观察抗原抗体结合后颗粒物的凝集情况，判断反 应结果。
荧光免疫技术
利用荧光物质标记抗体或抗原，通过荧光信号的 强弱判断反应结果。
06
抗原抗体反应的注意事项
实验前的准备
实验材料准备
确保抗原和抗体溶液的浓 度和纯度，选择适当的标 记物如荧光染料、酶等。
实验设备检查
检查实验所需仪器设备， 如离心机、显微镜、酶标 仪等，确保其正常运行。
02
抗原抗体反应的原理
抗原抗体的结合力
02
01
03
静电吸引
抗原和抗体带有相反的电荷，通过静电吸引相互结合 。
氢键
抗原和抗体中的极性基团形成氢键，增强结合力。
疏水相互作用
抗原和抗体的非极性基团相互靠近，形成疏水键。
抗原抗体的亲和力

抗体。 抗原过量区（后代现象）：沉淀少。
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42
四、阶段性
第一阶段：抗原与抗体发生特异性结合阶段 特点：反应快
第二阶段：反应可见阶段 特点：反应时间较长
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抗原抗体反应影响因素
影响抗原抗体反应的因素很多，主要有两个方面：一是抗原抗体本身的因素； 另一方面是反应环境因素。 一、反应物自身因素 抗原抗体反应中，抗原和抗体是反应的主体，所以它们的特性直接影响其结合 情况。 (一)抗原 抗原的理化性状、表面抗原决定簇的种类和数目等均可影响抗原抗体反应的结 果。
淀。 沉淀反应可用于研究抗体与大分子抗原结合的
特性。
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抗原抗体反应与沉淀形成
沉 淀 的 抗 体 量
抗原量
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沉淀反应曲线
测定方法：在一定量的抗体中，逐渐增加抗原 浓度，沉淀的形成与抗体的比例密切相关。
曲线分3个区： 抗体过量区（前带现象）：小分子复合物，不
形成沉pt课件
16
B细胞抗原表位的特性
• 天然蛋白的B细胞抗原表位通常由蛋白表面的亲水氨基
酸组成，易于接近膜结合或自由的抗体。
• 顺序抗原表位(Sequential Epitopes),连续抗原表位
(Continuous Epitopes),蛋白质一级结构
• 结构抗原表位(Continuous Epitopes),不连续抗原表
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结构决定簇与顺序决定簇
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两种抗体与一个连 续性抗原表位及一 个非连续性抗原表 位的相互作用
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蛋白质结构与抗原表位
3. 蛋白质的结构与抗原决 定簇的关系 （1）蛋白质的一级结构 只有顺序决定簇； （2）蛋白质的二级结构 与抗原的反应性密切有关； （3）蛋白质的三级结构 与抗原构象决定簇密切相 关； （4）蛋白质四级结构与 抗原构象决定簇和免疫原 价数密切相关；

二、环境因素：
1、电解质： （1）作用：中和抗原抗体复合物表面电荷，使 其靠拢聚集成出现大块聚集复合物。 （2）常用电解质：0.85%NaCl、各种缓冲液 2、酸碱度：
一般抗原抗体反应以pH6～9为宜，有补体参 与的反应以pH7.2～7.4为宜。 3、温度：一般抗原抗体反应以15～40℃为宜， 最适温度为37℃。
转化
NaCl
亲水胶体
疏水胶体
血清学反应条件下， 当抗原与抗体结合使表面 抗原抗体均带负电荷， 使极化的水分子在其 电荷减少，水化层变薄， 周围形成水化层，成 失去亲水性能，抗原抗体
为亲水胶体。
复合物成为疏水胶体
可见反应
在电解质作用下，中 和胶体粒子表面的电 荷，使各疏水胶体之 间靠拢，形成可见的 抗原抗体复合物
第二节 抗原抗体反应的特点
1.特异性 2.比例性 3.可逆性 4.阶段性
一、 特异性（specificity）
1、概念：一种抗原分子通常只能与其刺激机体后
产生的抗体结合，这种抗原与抗体结合 反应的专一性称为特异性。
特 异 性 示 意 图
2、决定因素： 由抗原决定簇和抗体分子超变区之间
空间结构的互补性决定的。
后代(postzone）抗原过量时称为。
四、阶段性
第一阶段：抗原与抗体发生特异 性结合阶段
特点：反应快 第二阶段：反应可见阶段
特点：反应时间较长
第三节 抗原抗体反应影响因素
一、反应物自身因素 *抗原：理化特性、Ag决定簇数量和种类。 *抗体： 1、来源（如：R型抗体 > H型抗体） 2、特异性与亲和力（如：单克隆抗体） 3、浓度
同上
反应类型 中和反应
标记免疫反应
实验技术 病毒中和试验 毒素中和试验

抗原与相应抗体为什么能特异性结合?
Ag决定簇和Ab分子超变区相互作用(相互吻合, 具有互补性)
亲和性:分子表面特异的可逆的弱结合力在极 短距离内才能发生。
分两个阶段进行：
抗原抗体特异性结合阶段：反应快；不可见。 可见反应阶段：受环境因素影响大。
抗原抗体反应的基本条件：
结合力 亲和力和亲合力 亲水胶体转化为疏水胶体
• 概念：抗原和抗体分子带有相反电荷的 氨基和羧基基团之间相互的引力。
• 引力的大小与两个相互作用基团间的距 离的平方成反比；平均键能约为 20.9kJ/mol。
范德华引力（Vander Waals forces）
概念：抗原和抗体相互接近时，由于分子的 极化作用而出现的引力 (诱导力、色 散力和取向力)。
异物性物质 同种异体物质 隐蔽或改变的自身物质
￭抗原的特异性
抗原决定基（antigenic determinant)
抗原决定基又称表位（epitope），指 抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基 团，是抗原分子与抗体及TCR/BCR特异结 合的基本单位。
第一节 抗 原
• 抗原的性能 • 影响抗原免疫原性的因素 • 抗原的特异性与交叉反应 • 抗原的种类 • 用于免疫测定的抗原分类
• 结合力的大小与两个相互作用基团的极化程 度的乘积成正比、与它们之间距离的7次方 成反比，键能约为4.2～12.5kJ／mol。
• 这种引力的能量小于静电引力。 • 具有特异性。
氢键结合力(hydregen bond forces)
• 概念：供氢体上的氢原子与受氢体原子 间的引力。
• 供氢体：羧基、氨基和羟基。 • 受氢体：羧基氧、羧基碳和肽键氧等。 • 能的大小取决于氢键的方向。 • 氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次

第一章 概述
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2020年10月2日
1
第一节 免疫学简介
传统的概念认为，免疫（immunity）系指机体对感染有 抵抗能力，而不患疾病或传染疾病。现代免疫学的发展认 识到，宿主体内的免疫系统，能识别并清除从外环境中侵 入的病原微生物及其产生的毒素、内环境中因基因突变产 生的肿瘤细胞、自身衰老残损的组织细胞或自身变性抗原， 实现免疫防御（immunological defence）免疫自稳 （immunological homeostasis）和免疫监视 （immunological surveillance）的功能，保持机体内环 境稳定。所以，免疫是机体识别和排斥抗原性异物的一种 生理功能。
一、抗原抗体结合力 抗原和抗体的结合为分子间结构互补的特
异结合，它是一种非共价的结合，不形成牢 固的共价键。在抗原抗体特异结合后有四种 分子间引力参与并促进其结合。
2020年10月2日
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• 静电引力（electrostatic forces）是抗原和抗体 带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互吸引的 力，又称库伦引力
2020年10月2日
4
第二章 抗原抗体反应
2020年10月2日
5
抗原抗体反应（antigen－antibody reaction）是抗原与相应抗体之间的特异性 结合反应。它既可发生在体内，也可发生在
体外。
2020年10月2日
6
第一节 抗原抗体反应的原理
抗原与抗体的特异性结合是基于抗原决定 簇（表位）与抗体超变区分子间的结构互补性 与亲和性。这种特性是由抗原、抗体分子空间 构型所决定的。
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三、亲水胶体转化为疏水胶体 大多数抗原为蛋白质，抗体是球蛋白，

2019 年临床医学检验技师考试大纲-免疫学和检验单元细目要点要求科目一、概论1.免疫学简介（1）免疫学概念与免疫应答熟练掌握 1（2）免疫组织与器官熟练掌握 1（3）免疫细胞熟练掌握 1（4）免疫分子熟练掌握 12.临床免疫学（1）免疫病理与免疫性疾病掌握 1（2）移植免疫掌握 1（3）肿瘤免疫掌握 1（4）感染免疫掌握 13.临床免疫学与免疫检验（1）免疫学技术的发展了解 1 （2）临床免疫学与免疫检验了解 1二、抗原抗体反应1.抗原抗体反应原理（1）抗原抗体结合力了解 1（2）抗原抗体亲和力和亲合力了解 1（3）亲水胶体转化为疏水胶体了解 12.抗原抗体反应的特点（1）特异性熟练掌握 1（2）可逆性熟练掌握 1（3）比例性熟练掌握 1（4）阶段性熟练掌握 13.影响抗原抗体反应的因素（1）反应物自身因素掌握 1（2）环境因素掌握 14.免疫学检测技术的类型基本类型掌握 3三、免疫原和抗血清制备1.免疫原的制备（1）颗粒性抗原的制备掌握 3 （2）可溶性抗原的制备和纯化了解 3（3）半抗原免疫原的制备掌握 3 2.免疫佐剂（1）佐剂的种类了解 1（2）佐剂的作用机制了解 13.抗血清的制备（1）免疫动物的选择了解 3（2）免疫程序了解 3（3）动物采血法了解 34.抗血清的鉴定和保存（1）抗血清的鉴定了解 3（2）抗血清的保存了解 35.抗血清的纯化（1）特异性 IgG 抗体了解 3（2）单价特异性抗血清了解 3四、单克隆抗体及基因工程抗体的制备1.杂交瘤技术的基本原理（1）杂交瘤技术掌握 3（2）阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存了解 32.单克隆抗体的制备（1）单克隆抗体的产生了解 3（2）单克隆抗体的纯化了解 3（3）单克隆抗体的性质鉴定掌握 3（4）单克隆抗体的特性了解 33.基因工程抗体制备（1）人源化抗体了解 1（2）小分子抗体了解 1（3）抗体融合蛋白了解 1（4）双特异性抗体了解 1 （5）噬菌体抗体库技术了解 24.单克隆抗体的应用（1）检验医学诊断试剂了解 2 （2）蛋白质的提纯了解 2 （3）小分子抗体的应用了解 2 （4）抗体融合蛋白的应用了解 2 （5）双特异抗体的应用了解 2 （6）抗体库技术的应用和前景了解 2五、凝集反应1.凝集反应的特点概念熟练掌握 12.直接凝集反应（1）玻片凝集试验熟练掌握 3（2）试管凝集试验熟练掌握 33.间接凝集反应（1）间接凝集反应的类型熟练掌握 4（2）间接血凝试验熟练掌握 4（3）胶乳凝集试验掌握 4（4）明胶凝集试验掌握 4 （5）间接凝集反应的应用掌握 4七、放射免疫技术1.放射免疫技术（1）基本类型及原理掌握 3（2）常用的放射性核素熟练掌握 3（3）标记物制备及鉴定了解 3（4）抗血清鉴定了解 2（5）方法学评价了解 22.放射免疫分析（1）基本原理了解 3（2）试验方法及测定方法了解 4 3.免疫放射分析（1）基本原理了解 3（2）IRMA 与 RIA 的比较了解 44.放射免疫分析技术的应用实际应用掌握 4八、荧光免疫技术1.概述（1）荧光的基本知识了解 1（2）荧光物质掌握 12.荧光抗体技术（1）荧光抗体的制备掌握 4（2）标本的制作熟练掌握 4（3）荧光抗体染色与结果熟练 4判断掌握（4）荧光显微镜的基本结构掌握 43.荧光免疫分析的类型（1）时间分辨荧光免疫测定熟练掌握 4（2）荧光偏振免疫测定了解 4（3）荧光酶免疫测定了解 44.荧光免疫技术在医学检验中的应用（1）荧光抗体技术的应用掌握 2 （2）荧光免疫测定的应用掌握 2九、酶免疫技术1.酶免疫技术的特点（1）酶和酶作用底物掌握 2 （2）酶标记抗体或抗原掌握 2 （3）固相载体熟练掌握 22.酶免疫技术分类（1）均相酶免疫测定熟练掌握 4（2）异相酶免疫测定熟练掌握 43.酶联免疫吸附试验（ELISA）（1）基本原理熟练掌握 3（2）方法类型及反应原理熟练掌握 44.酶免疫测定的应用掌握 4十、化学发光免疫分析技术1.概述（1）化学发光掌握 2（2）化学发光效率了解 22.化学发光剂和标记技术（1）化学发光剂了解 2 （2）发光剂的标记技术了解 43.化学发光免疫分析的类型（1）直接化学发光免疫分析了解 3（2）化学发光酶免疫分析掌握 3 （3）电化学发光免疫分析熟练掌握 3（4）临床应用掌握 4十一、生物素-亲和素放大技术1.生物素的理化性质与标记（1）活化生物素了解 1 （2）生物素标记蛋自质了解 12.亲和素、链霉亲和素理化性质与标记（1）亲和素及其活性了解 1 （2）链霉亲和素及其活性了解 1 （3）亲和素（或链霉亲和素）的标记了解 23.生物素_亲合素系统的特点（1）灵敏度了解 3（2）特异性了解 3（3）稳定性了解 3（4）适用性了解 3（5）其他了解 3（1）生物素-亲和素系统基本类型及原理了解 3（2）生物素-亲和素系统在酶免疫测定中应用了解 44.生物素-亲和素系统的应用（3）生物素-亲和素系统在荧光免疫技术中的应用了解 4（4）生物素-亲和素系统在放射免疫测定中的应用了解 4（5）生物素-亲和素系统在分子生物学中的应用了解 4十二、固相膜免疫测定1.概述（1）常用的固相膜了解 3（2）固相膜的技术要求了解 32.免疫金标记技术（1）胶体金的制备了解 3（2）免疫金制备了解 33.膜载体免疫测定的种类与原理（1）免疫渗滤试验熟练掌握 4（2）免疫层析试验熟练掌握 4（3）斑点酶免疫吸附试验了解 4（4）酶联免疫斑点试验了解 4（5）免疫印迹法掌握 4（6）放射免疫沉淀试验了解 4（1）标本的处理了解 2（2）抗原的保存与修复了解 21.概述（3）抗体的处理与保存了解 2（4）免疫组化的结果判断了解 3（5）质量控制了解 22.免疫荧光组织化学技术（1）组织处理了解 4（2）荧光抗体的标记及染色了解 4十三、免疫组织化学技术3.酶免疫组织化学技术（1）组织处理了解 4（2）酶标记抗体免疫组化染色了解 4（3）非标记抗体免疫酶组化染色了解 4（4）酶免疫组化染色中常用的酶及显色底物了解 34.亲和组织化学染色（1）生物素-亲和素法了解 4（2）葡萄球菌 A 蛋白法了解 4（3）凝集素法了解 4（4）链酶亲合素-生物素法了解 45.免疫标记电镜技术（1）免疫标记电镜技术的原理了解 1（2）免疫标记电镜技术标本制备的要求了解 2（3）常用的免疫标记电镜技术了解 46.免疫组织化学技术的应用（1）免疫组织化学技术的临床应用掌握 3（2）免疫组织化学技术的拓展了解 2十四、免疫细胞的分离及其表面标志检测技术1.免疫细胞的分离（1）外周血单个核细胞分离掌握 3（2）淋巴细胞的分离熟练掌握3（3）T 细胞和 B 细胞的分离了解 3（4）T 细胞亚群的分离了解 3 （5）不同细胞分离方法的综合评价了解 2（6）分离细胞的保存及活力测定掌握 32.淋巴细胞标志及亚群分类（1）T 细胞表面标志及其亚群熟练掌握 4（2）B 细胞表面标志熟练掌握 4（3）NK 细胞表面标志掌握 43.其他的免疫细胞（1）单核-吞噬细胞系统了解 2（2）树突状细胞了解 24.免疫细胞表面标志的检测及应用（1）免疫细胞表面标志的检测方法了解 4（2）淋巴细胞表面标志检测的临床意义了解 3十五、免疫细胞功能检测技术1.淋巴细胞的功能检测（1）T 细胞功能检测掌握 4（2）B 细胞功能检测掌握 4（3）NK 细胞活性测定了解 42.吞噬细胞功能检测技术（1）中性粒细胞功能检测了解 3（2）巨噬细胞功能检测了解 33.免疫细胞功能检测的临床应用掌握 4十六、细胞因子与细胞粘附因子的测定1.生物学测定方法（1）促进细胞增殖和抑制细胞增殖测定法了解 3（2）细胞毒活性测定法共同特性了解 3（3）抗病毒活性测定法了解 3 （4）趋化活性测定法了解 3（5）生物学活性测定方法学评价了解 22.免疫测定方法（1）ELISA 方法了解 4 （2）流式细胞分析法了解 4 （3）酶联免疫斑点试验了解 4 （4）免疫学测定方法学评价了解 43.细胞因子与细胞粘附因子测定的临床应用（1）临床应用了解 4（2）特定疾病诊断的辅助指标了解 4（3）评估疾病的免疫状态、判断治疗效果及预后了解 4 十七、流式细胞仪分析技术及应用1.概述（1）工作原理了解 1 （2）散射光的测定了解 2 （3）荧光测量了解 2 （4）细胞分选原理了解 12.数据的显示与分析（1）参数了解 2（2）数据显示方法了解 2（3）设门分析技术了解 23.流式细胞仪免疫分析的技术要求（1）免疫检测样品制备了解 4 （2）免疫分析中常用的荧光染料与标记染色了解 2（3）免疫胶乳颗粒技术的应用了解 4（4）流式细胞免疫学技术的质量控制了解 24.流式细胞术在免疫学检查中的应用（1）淋巴细胞及其亚群的分析掌握 4（2）淋巴细胞功能分析了解 4 （3）淋巴造血系统分化抗原及白血病免疫分型了解 4（4）肿瘤耐药相关蛋白分析了解 4（5）AIDS 病检测中的应用熟练掌握 4（6）自身免疫性疾病相关HLA 抗原分析熟练掌握 4（7）移植免疫中的应用了解 4十八、体液免疫球蛋白测定1.血清 IgG、IgA、IgM测定（1）血清 IgG、IgA、IgM测定熟练掌握 4（2）血清 IgG、IgA、IgM测定的临床意义熟练掌握 42.血清 IgD 和 IgE 测定（1）IgD 测定及临床意义掌握 4 （2）IgE 测定及临床意义掌握 43.尿液及脑脊液 Ig 测定（1）尿液 Ig 测定及临床意义掌握 4（2）脑脊液 Ig 测定及临床意义掌握 44.血清 IgG 亚类测定及临床意义了解 45.M 蛋白测定及临床意义熟练掌握 46.轻链测定及临床意义掌握 47.冷球蛋白的检测掌握 4十九、补体检测及应用1.概述（1）补体成分的含量与理化特性熟练掌握 1（2）补体的活化途径熟练掌握 12.补体总活性测定掌握 23.单个补体成分的测定（1）免疫溶血法了解 3 （2）免疫化学法掌握 34.补体结合试验（1）试验原理了解 4（2）试验方法了解 4（3）方法评价了解 3二十、免疫检验自动化仪器分析1.自动化免疫浊度分析系统（1）免疫透射比浊法掌握 3 （2）免疫胶乳比浊法了解 3 （3）免疫散射比浊法熟练掌握 3（4）免疫比浊分析的影响因素和临床应用掌握 42.自动化发光免疫分析系统（1）吖啶酯标记化学发光免疫分析仪掌握 3（2）酶联发光免疫分析仪了解 3 （3）电化学发光免疫分析仪掌握 3（4）在临床免疫检测中的熟练 4应用掌握3.自动化荧光免疫分析系统（1）时间分辨荧光免疫分析仪掌握 3（2）荧光偏振免疫分析仪了解 3 4.自动化酶联免疫分析系统掌握 31.概述（1）与质量保证相关的定义熟练掌握 1（2）实验方法诊断效率评价熟练掌握 32.免疫检验的质量控制原则（1）标本的正确收集及处理熟练掌握 3（2）标准化操作及流程了解 3 （3）标准品和质控品的应用熟练掌握 3二十一、临床免疫检验的质量保证（4）实验室的环境、设施和设备了解 33.质量保证、室内质控和室间质评之间的关系了解 3 4.常用免疫检验的质量控制（1）免疫检验质量控制中常用统计学方法的选择熟练掌握 3（2）定性免疫检验掌握 3 （3）定量免疫检验掌握 3 （4）半定量免疫检验掌握 3 5.免疫检验室内质量控制的数据处理（1）室内质控数据的评价和管理了解 3（2）室内质控的局限性了解 3 （3）免疫检验质量保证的意义了解 3二十二、感染性疾病与感染免疫检测1.细菌感染性疾病的免疫检测（1）链球菌感染熟练掌握 3（2）伤寒沙门菌感染掌握 3 （3）结核分枝杆菌感染熟练掌握 32.真菌感染性疾病的免疫检测（1）深部真菌感染掌握 3 （2）类真菌感染了解 33.病毒感染性疾病的免疫检测（1）流感病毒感染掌握 3（2）轮状病毒感染掌握 3 （3）肝炎病毒感染熟练掌握 3（4）冠状病毒感染掌握 34.先天性感染的免疫检测（1）弓形虫感染掌握 3（2）风疹病毒感染掌握 3 （3）巨细胞病毒感染掌握 3 （4）单纯疱疹病毒感染掌握 3 5.寄生虫感染的免疫检测（1）疟原虫感染掌握 3（2）血吸虫感染了解 3（3）丝虫感染了解 3（4）华支睾吸虫感染了解 3 （5）猪囊尾蚴感染了解 31.I 型超敏反应（1）I 型超敏反应发生机制掌握 1（2）常见 I 型超敏反应性疾病掌握 3（3）I 型超敏反应免疫学检测熟练掌握 42.Ⅱ型超敏反应（1）Ⅱ型超敏反应发生机制掌握 1（2）常见Ⅱ型超敏反应性疾病掌握 3（3）Ⅱ型超敏反应免疫学检测熟练掌握 4二十三、超敏反应3.Ⅲ型超敏反应（1）Ⅲ型超敏反应发生机制掌握 1性疾病及其免疫检（2）常见Ⅲ型超敏反应性疾病掌握 3测（3）Ⅲ型超敏反应免疫学检测熟练掌握 44.Ⅳ型超敏反应（1）Ⅳ型超敏反应发生机制掌握 1（2）常见Ⅳ型超敏反应性疾病掌握 3（3）Ⅳ型超敏反应免疫学检测熟练掌握 4二十四、自身免疫性疾病及其免疫检测1.概述自身免疫性疾病的共同特征掌握 32.自身免疫性疾病与免疫损伤（1）自身抗原掌握 1（2）免疫调节异常了解 1 （3）遗传因素了解 l3.常见的自身免疫性疾病（1）由Ⅱ型超敏反应引起的自身免疫性疾病了解 3（2）自身抗体-免疫复合物引起的自身免疫性疾病了解 3（3）T 细胞对自身抗原应答引起的自身免疫性疾病了解 3 4.常见自身免疫性疾病的自身抗体检测（1）自身抗体的特性掌握 3 （2）抗核抗体的检测与应用熟练掌握 4（3）抗 ENA 抗体谱的检测与应用熟练掌握 4（4）与小血管炎相关的自身抗体检测与应用了解 4（5）与 RA 相关自身抗体的检测与应用掌握 4（6）与自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应用掌握 4 （7）与桥本甲状腺炎相关自身抗体的检测与应用了解 4 （8）与神经系统自身免疫性相关自身抗体的检测与应用了解 45.自身抗体检测的临床应用（1）自身抗体检测的一般原则了解 2（2）实验室方法的选择及结果的确认了解 26.自身免疫性疾病的相关实验检测（1）免疫球蛋白和补体检测及临床意义掌握 3（2）淋巴细胞检测及临床意义了解 3（3）细胞因子检测及临床意义了解 3（4）循环免疫复合物检测及临床意义掌握 3二十五、免疫增殖性疾病及其免疫检测1.概念及分类了解 22.免疫球蛋白异常增殖性疾病的免疫损伤机制（1）浆细胞异常增殖了解 2 （2）正常体液免疫抑制了解 2 （3）异常免疫球蛋白增生造成的病理损伤了解 2（4）溶骨性病变了懈 23.常见免疫球蛋白增殖病（1）多发性骨髓瘤掌握 3 （2）巨球蛋白血症掌握 3 （3）重链病了解 3（4）轻链病了解 3（5）良性单克隆丙种球蛋白血症了解 34.免疫球蛋白异常增殖常用的免疫检测（1）血清区带电泳熟练掌握 4（2）免疫电泳熟练掌握 4（3）免疫固定电泳熟练掌握 4（4）血清免疫球蛋白定量熟练掌握45.异常免疫球蛋白的测定（1）M 蛋白的检测熟练（2）尿液轻链蛋白的检测掌握 4 （3）异常免疫球蛋白检测的应用原则掌握 4二十六、免疫缺陷病的分类和特点1.免疫缺陷病的分类和特点（1）免疫缺陷病分类掌握 3 （2）免疫缺陷病特点掌握 2 2.原发性免疫缺陷病（1）原发性 B 细胞缺陷了解3（2）原发性 T 细胞缺陷 3 （3）重症联合免疫缺陷 3 （4）原发性补体系统缺陷 33.继发性免疫缺陷病（1）继发性免疫缺陷的常见原因掌握 3（2）获得性免疫缺陷综合征4.免疫缺陷病检验（1）B 细胞缺陷的检测掌握 4 （2）T 细胞缺陷的检测掌握 4 （3）吞噬细胞缺陷的检测了解 4 （4）补体系统缺陷的检测了解 4 （5）获得性免疫缺陷的检测熟练掌握 4二十七、肿瘤免疫与免疫学检验1.肿瘤抗原（1）根据肿瘤抗原的特异性分类了解 2（2）根据肿瘤抗原产生机制分类了解 22.机体抗肿瘤的免疫学效应机制（1）抗肿瘤的细胞免疫机制了解 1（2）抗肿瘤的体液免疫机制了解 13.肿瘤免疫学检验（1）肿瘤标志物熟练掌握 3（2）肿瘤患者免疫状态的检测及临床意义掌握 4二十八、移植免疫及 1.引起排斥反应的靶抗（1）主要组织相容性抗原了解 1其免疫检测原（2）其他组织相容性抗原了解 12.排斥反应的类型及发生机制（1）超急性排斥反应了解 3（2）急性排斥反应了解 3（3）慢性排斥反应了解 3（4）移植物抗宿主反应了解 33.HLA 分型（1）血清学分型法了解 4（2）细胞学分型法了解 4（3）分子生物学分型法了解 4 4.常见的组织或器官移植（1）肾脏移植了解 3（2）肝脏移植了解 3（3）心脏移植与心肺联合移植了解 3（4）骨髓与其他来源的于细胞移植了解 35.排斥反应的预防与治疗（1）组织配型掌握 2（2）移植物与受体的预处理了解 2（3）免疫抑制措施了解 26.排斥反应的免疫监测（1）体液免疫与细胞免疫水平检测的临床意义了解 4 （2）尿微量蛋白检测的临床意义了解 4（3）急性时相反应物质检测的临床意义了解 4 （4）免疫抑制剂体内药物浓度检测的临床意义了解 4。

•当Ag与Ab结合后, 表面电荷减少, 水化层变薄； •而且由于Ag-Ab复合物形成后，与水接触的表 面积减少 •由亲水胶体转化为疏水胶体。
•在电解质作用下，中和胶体表面的电荷，疏水 胶体之间靠拢，形 成可见的Ag-Ab复合物。
亲水胶体转化为疏水胶体示意图
转化
NaCl
亲水胶体
疏水胶体
可见反应
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• 亲合力（avidity) 是指整个抗体分子与抗原物质之间的结
合强度。
是多价抗体与抗原间亲和力的总称。
106 Avidity
1010 Avidity
三、亲水胶体转化为疏水胶体 • 血清学反应条件下，抗原抗体均带负电荷， 周围出现极化水分子，形成水化层，成为亲水 胶体。 • 不会自发凝集或沉淀
[医学]2章 抗原抗体反应1免疫 学
主要内容： 1. 抗原抗体反应原理 2. 抗原抗体反应特点 3. 抗原抗体反应影响因素 4. 抗原抗体反应类型
• V区： 识别和特异性的结合抗原
• 结合？
• 摡念： • 抗原抗体反应：是指抗原与相应抗
体之间所发生的特异性结合。
• 体内反应:吞噬、溶菌、中和毒素等 • 体外反应:诊断、鉴别抗原或抗体
第二节 抗原抗体反应的特点
*1.特异性 *2.比例性 *3.可逆性
一、 特异性（specificity） *概念：抗原分子表位与抗体分子超变区结合专 一性能，由两分子间空间结构的互补性决定。
*抗原抗体结合部位：由抗体分子VH区的VL区上 各三个CDR组成，形成一个与表位互补的槽沟，
只有与其空间结构互补的抗原决定簇才能如楔状嵌入。
（Van der Waals forces） • 抗原和抗体相互接近时，由于分子的极化作 用而出现的引力。