血清葡萄糖测定

血清葡萄糖GLU测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理本试剂基于在精密度和准确性方面具有很高可靠性的Trinder’S方法，在防止已知化合物（如尿酸、谷胱甘肽和肌酐等）的干扰进行了进一步的改良。

GOD葡萄糖+ H2O+ O2 H2O2+葡萄糖酸 PODH2O+AAP + HBA 醌亚胺（红色）H2O 式中：AAP 为4-氨基安替比林；HBA 为4-羟基苯甲酸上述反应中，红色醌亚胺色素的生成量与样本中葡萄糖的浓度成正比，通过在波长500nm波长处测定吸光度的变化值，即可测得样本中葡萄糖的浓度。

3 标本：3.1 病人准备：12小时禁食。

3.2 类型：血清，标本最好不要溶血。

迅速分离血清或，减少红细胞糖酵解时葡萄糖的损失。

随机收集尿样。

3.3 标本存放：血清应在血液采集1小时内，尽早分离。

加入糖分解抑制剂（NaF，KF）后的稳定性：15～25℃保存可稳定1天,4～8℃保存可稳定7天。

血清中的葡萄糖，无溶血，无细菌污染，没有添加的防腐剂，在25℃下可稳定8个小时，在4℃下可稳定72小时。

尿样应保存在2～8℃下并尽快进行分析。

脑脊髓液如果避免蒸发可在2～8℃下稳定至少5天，5天内不检验的标本应在收集后立即储存在-20℃的条件下。

3.4 标本运输：常温条件下保存运输。

3.5标本拒收标集：细菌污染、超时送检的的标本。

4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司GLU试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成试剂1（R1）：过氧化物酶 375U/L 4-羟基苯甲酸15mmol/L4-氨基安替比林0.75mmol/L磷酸盐缓冲液110mmol/L试剂2（R2）：葡萄糖氧化酶6000U/L 磷酸盐缓冲液110mmol/L4.1.2 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月4.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

血清葡萄糖测定方法
血清葡萄糖测定方法是一种常用的检测血清葡萄糖的方法。

它可以检测血清中的水溶性葡萄糖的含量，从而可以反映机体的糖代谢情况。

血清葡萄糖测定方法有多种，其中最常用的是酶联免疫法（ELISA）和磷酸二氢钾滴定法（HK）。

2、酶联免疫法（ELISA）
酶联免疫法（ELISA）是一种常用的血清葡萄糖测定方法。

ELISA技术利用免疫反应原理，把糖尿病患者血清中的葡萄糖水解酶以抗原或抗体的形式结合起来，然后用抗体识别，经过可见性染料和酶的底物分解，用放大效应得到明显的反应信号，通过测量信号来确定葡萄糖的浓度。

ELISA对葡萄糖的检测灵敏度很高，但是分析时间比较长，且需要有特殊的仪器。

3、磷酸二氢钾滴定法（HK）
磷酸二氢钾滴定法（HK）是另一种检测血清葡萄糖浓度的常用方法。

它是一种血清中葡萄糖的滴定法，用40-50℃的磷酸二氢钾溶液作为比色剂，通过比色分析得到血清中的葡萄糖含量。

这种方法分析速度快，结果准确，但是需要较高的技术要求。

4、结论
血清葡萄糖测定方法是一种常用的检测血清葡萄糖的方法，它可以准确反映机体的糖代谢状况。

目前最常用的血清葡萄糖测定方法有酶联免疫法（ELISA）和磷酸二氢钾滴定法（HK），它们具有自己的优缺点，根据实际情况选择合适的方法。

第1篇一、实验目的1. 了解血糖测定的原理和方法；2. 掌握血清糖测定仪的使用方法；3. 学习血清糖的检测过程及注意事项；4. 培养实验操作技能和实验数据分析能力。

二、实验原理血糖是人体重要的能量来源，血清糖的测定对于糖尿病等疾病的诊断具有重要意义。

本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血清糖，其原理如下：在酶的催化下，葡萄糖与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的催化下进一步分解，产生水和氧气，同时还原四甲基联苯胺生成蓝色产物，在一定波长下测定吸光度，根据吸光度与血糖浓度的关系，计算血清糖浓度。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：血清糖测定仪、离心机、移液器、移液管、容量瓶、试管等；2. 试剂：葡萄糖氧化酶试剂盒、血清样品、蒸馏水、标准葡萄糖溶液等。

四、实验步骤1. 标准曲线绘制：取一系列标准葡萄糖溶液，按照试剂盒说明书进行操作，测定吸光度，以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 血清样品处理：取一定量的血清样品，按照试剂盒说明书进行操作，加入葡萄糖氧化酶试剂，混合均匀后，放入血清糖测定仪中测定吸光度。

3. 结果计算：根据标准曲线，计算血清样品的血糖浓度。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：绘制标准曲线，得到线性回归方程：y = 0.0126x + 0.0035，相关系数R² = 0.998。

2. 血清样品测定：按照实验步骤，测定血清样品的血糖浓度，得到结果如下：样品编号血糖浓度（mmol/L）1 5.22 6.83 7.53. 结果分析：根据实验结果，该血清样品的血糖浓度为6.8mmol/L，属于正常范围。

六、实验总结1. 本实验成功绘制了标准曲线，并利用血清糖测定仪测定了血清样品的血糖浓度，实验结果符合预期。

2. 在实验过程中，应注意以下几点：（1）严格按照试剂说明书进行操作，确保实验准确性；（2）注意样品处理过程中的无菌操作，避免污染；（3）熟练掌握血清糖测定仪的使用方法，确保实验顺利进行。

血液中葡萄糖的测定（邻甲苯胺法）一目的掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法。

二原理血清样品中的葡萄糖在酸性环境中与邻甲苯胺共热时，葡萄糖脱水转化为5-羟甲基α-呋喃甲醛，后者与邻甲苯胺结合为蓝绿色的醛亚胺（Schiff碱）。

血清中的蛋白质则溶解在冰醋酸和硼酸中不发生混浊。

将标准葡萄糖溶液与样品按相同方法处理，在630nm波长处比色，即可测得样品中葡萄糖含量。

邻甲苯胺法测得正常空腹血糖值为3.9～6.11mmol / L (即100ml血清中葡萄糖的正常值为70～100mg)。

邻甲苯胺法对葡萄糖特异性高，测定结果为真糖值，为临床上常用的血糖测定方法。

此方法不受血液中其他还原物质的干扰，测定时也无需去除血浆或血清中的蛋白质。

由于血液葡萄糖在进食后明显升高，所以必须采取空腹血做血液葡萄糖测定，血细胞糖酵解作用会降低血液葡萄糖浓度，所以血液抽出后应及时测定，或用含氟化钠的抗凝剂抑制糖酵解，可稳定24小时。

三操作1.采得待测血样（抗凝）后立即离心以分离血浆（3,000转离心15分钟）。

2.取干燥试管4支，分别标出号码，按下表添加试剂。

4.以空白管调零，读取各管630nm处吸光度值。

5.计算血糖mmol/L = 测定管吸光值× 5标准管吸光值四实验器材与试剂分光光度计、沸水浴、试管、移液管、电炉、烧杯、洗耳球、试管夹。

邻甲苯胺试剂：称取硫脲(AR)级1.5g，溶于940ml冰醋酸(AR级)中，加邻甲苯胺60ml。

置棕色瓶中至少可用两个月。

此试剂腐蚀性极强，应避免接触皮肤。

12 mmol/L苯甲酸溶液：900ml蒸馏水中加入1.4g苯甲酸，加热助溶，冷却后定容到1L。

葡萄糖标准储存液（100 mmol / L）：称取无水葡萄糖（烘箱80烘干至恒重，干燥器中保存）1.802g，溶于80ml苯甲酸溶液中，再定容到100ml。

葡萄糖标准应用液（5 mmol / L）：取标准储存液5ml，加苯甲酸溶液至100ml。

血液葡萄糖的测定方法血液葡萄糖测定方法是用于检测人体血液中葡萄糖含量的一种方法。

葡萄糖是人体重要的能量供应来源，它在体内的浓度与机体的代谢状态密切相关。

因此，对于糖尿病患者来说，监测血液葡萄糖水平非常重要，有助于他们控制血糖水平，维持身体健康。

血液葡萄糖的测定方法有很多种，根据实际需求和方法的可行性，可以选择不同的方法进行测定。

以下将介绍几种常见的血液葡萄糖测定方法。

首先是基于试纸的葡萄糖测定方法。

这种方法常用于家庭血糖监测，便携式血糖仪就是基于试纸原理的。

使用这种方法，只需将试纸置于一滴血液上，试纸上的葡萄糖酶会与葡萄糖发生反应，产生氧化还原反应，导致试纸变色，通过比色板或仪器来判断血糖水平。

这种方法操作简便，但准确度相对较低，适用于一般家庭血糖监测。

其次是荧光法葡萄糖测定方法。

这种方法是基于葡萄糖氧化酶的反应原理，葡萄糖氧化酶与葡萄糖反应生成辅酶还原型，再与辅酶反应产生荧光染料，测量荧光强度来计算血糖浓度。

这种方法灵敏度高，准确度较高，但需要专业的仪器和技术支持，适用于实验室中血糖测定。

此外，还有电化学法葡萄糖测定方法。

这种方法是将血液样品置于电极上，通过电化学反应来测量葡萄糖浓度。

常用的电极有电化学氧化酶电极和谐振速度电极。

电化学法测定血糖准确度高，但仪器复杂，需要专业的操作技术和维护。

最后是光学法葡萄糖测定方法。

这种方法是利用光学仪器，通过检测葡萄糖溶液对特定波长光的吸收或散射来测定葡萄糖浓度。

光学法测定速度快，操作简便，适用于实时监测。

总之，血液葡萄糖测定方法多种多样，每种方法都有其适用的场景和特点。

在选择合适的测定方法时，需要根据实际需求，考虑准确性、操作便捷性以及成本等因素。

对于糖尿病患者来说，定期监测血液葡萄糖水平非常重要，可以根据医生的建议选择合适的测定方法，并保持良好的血糖控制，以维持健康的生活。

血清葡萄糖测定方法
血清葡萄糖测定方法的步骤如下：
1. 采集血液样本，一般常用的是静脉血。

2. 将血样离心，使血浆和血细胞分离开。

3. 取血浆样本进行血清葡萄糖测定。

常用的血清葡萄糖测定方法有：酶促反应法、葡萄糖氧化酶法、光度法等。

4. 酶促反应法：将血清样本与一定浓度的葡萄糖酰胺酶和葡萄糖脱氢酶一起反应，生成NADH。

通过测量NADH的吸光度来计算血清中的葡萄糖含量。

5. 葡萄糖氧化酶法：将血清样本与一定浓度的葡萄糖氧化酶反应，生成过氧化氢和D-酮糖。

再用过氧化物酶反应掉过氧化氢，最后通过吸光度计算血清中的葡萄糖含量。

6. 光度法：将血清样本与一定浓度的酚啉试剂和磷酸缓冲液混合后，通过加热反应，测量其吸光度，然后计算血清中的葡萄糖含量。

7. 根据所用方法的不同，测定结果会有一些差异，请根据实验室所用的方法进行测定。

一、实训目的通过本次实训，使学生掌握血清葡萄糖检测的基本原理、操作方法和注意事项，提高学生的实验技能和综合素质，为今后从事临床检验工作打下坚实基础。

二、实训内容1. 实验原理血清葡萄糖检测是利用葡萄糖氧化酶法检测血清中的葡萄糖含量。

该方法基于葡萄糖氧化酶催化-D-葡萄糖氧化生成D-葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的催化下，与色原在酸性条件下生成绿色化合物，通过比色法测定绿色化合物的吸光度，从而计算出血清中葡萄糖的含量。

2. 实验材料（1）试剂：葡萄糖氧化酶试剂盒、显色剂、底物、缓冲液、氧化酶溶液、过氧化物酶溶液、盐酸、磷酸盐缓冲液、标准葡萄糖溶液。

（2）仪器：酶标仪、移液器、加样器、微量离心机、恒温水浴锅、试管、试管架、吸头、吸管、酒精灯、蒸馏水等。

3. 实验步骤（1）标准曲线绘制1）将标准葡萄糖溶液用蒸馏水稀释成0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0mg/L系列浓度。

2）分别取上述溶液100μl于试管中，加入葡萄糖氧化酶试剂100μl，混匀。

3）在37℃恒温水浴锅中反应10分钟。

4）取出试管，加入显色剂100μl，混匀。

5）室温放置10分钟。

6）用酶标仪在波长520nm处测定吸光度。

7）以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

（2）样品测定1）取血清样品100μl于试管中，按照上述步骤进行操作。

2）测定吸光度。

3）根据标准曲线计算血清中葡萄糖的含量。

4. 结果与分析（1）标准曲线绘制以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，计算相关系数R²。

（2）样品测定根据标准曲线，计算血清中葡萄糖的含量。

三、实训总结1. 通过本次实训，掌握了血清葡萄糖检测的基本原理、操作方法和注意事项。

2. 培养了严谨的实验态度和团队协作精神。

3. 提高了实验技能和综合素质。

4. 为今后从事临床检验工作打下了坚实基础。

四、存在问题及改进措施1. 问题：部分学生操作过程中出现吸光度误差较大，导致计算结果不准确。

血清葡萄糖（GLU ）
一、检测原理
在己糖激酶的作用下，葡萄糖被三磷酸腺苷酸（ATP ）磷酸化。

葡萄糖-6-磷酸在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的作用下被氧化，进而降低了二核糖酸尼古丁胺腺嘌呤（NADH ）的水平，在340nm 或410nm 条件下测量NADH 的吸收值，作为反应终点数值。

葡萄糖+ATP −−−→−己糖激酶
G6P+ADP
G6P+NAD+−−→−PD
G 66-磷酸糖苷+NADH+H+
二、参考区间
血清：3.9—6.1mmol/L
三、临床意义
1、升高见于：糖尿病、慢性胰腺炎、甲状腺功能亢进、心肌梗死、皮质醇增多症、肢端肥大症、嗜铬细胞瘤、胰高血糖素瘤；脑外伤、脑溢血。

2、降低：见于各种原因引起的胰岛素分泌过多或对抗胰岛素的激素分泌不足、甲状腺功能不全、肾上腺功能不全、脑垂体恶病质、急性进行性肝脏疾病(急性黄色肝萎缩、急性肝炎、肝癌、磷及砷中毒等)、新生儿低血糖症等。