鸡白痢的国家诊断标准
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鸡白痢禽沙门氏菌病是由沙门氏菌属中的某一种或多种沙门氏杆菌引起的禽类急性或慢性疾病的总称。
沙门氏杆菌是肠杆菌科中的一个大属,有2000多个血清型,它们广泛存在于人和各种动物的肠道内。
在自然界中,家禽是其最主要的贮存宿主。
禽沙门氏菌病依病原体的抗原结构不同可分为三类:1.由鸡白痢沙门氏菌引起的疾病,称为鸡白痢。
2.由鸡伤寒沙门氏菌引起的疾病,称为禽伤寒。
3.由其他有鞭毛能运动的沙门氏菌引起的疾病,称为禽副伤寒。
其中鸡白痢和鸡伤寒有宿主特异性,主要引起鸡和火鸡发病,而禽副伤寒则能广泛感染各种动物和人类。
目前受其污染的家禽及相关产品已成为人类沙门氏菌感染和食物中毒的主要来源之一。
因此,禽副伤寒沙门氏菌病具有重要的公共卫生意义。
另外,随着家禽业的迅猛发展以及高密度饲养模式的推广,沙门氏菌病也已成为家禽最重要的蛋传递性细菌病之一,每年由此造成的经济损失非常可观。
鸡白痢(Pullorum Disease)本病是由鸡白痢沙门氏菌引起的禽类感染,主要危害鸡和火鸡。
•临床表现以雏鸡拉白色糊状稀粪为特征,死亡率很高,成年禽多为慢性经过或呈隐性感染。
历史与分布 Rettger于1899年首次报道了此病的病原,次年将本病命名为“雏鸡致死性败血症”。
1929•年正式将本病命名为“鸡白痢”,并一直延用至今。
本病在火鸡上的发现要迟一些,最早于1928年由Hewitt•报道。
目前在所有饲养鸡和火鸡的地区均有本病的发生和存在。
病原鸡白痢沙门氏菌(Salmonella pullorum)属于肠道杆菌科沙门氏菌属D血清群中的一个成员。
无荚膜,不形成芽胞,是少数不能运动的沙门氏菌之一,为两端钝圆的细小革兰氏阴性杆菌,大小约为(1.0~2.5)µm×(0.3~0.5)µm。
本菌为需氧或兼性厌氧菌,于普通的琼脂培养基和麦康凯培养基上生长良好,形成细小、圆形、光滑、湿润、边缘整齐、露滴状、半透明、灰白色菌落,直径约为1mm~2mm。
鸡白痢的诊断鉴别方法是
鸡白痢是一种常见的家禽传染病,其病原体为鸡白痢杆菌。
鸡白痢的诊断鉴别方法包括以下几个方面:
1. 临床症状观察:鸡白痢患鸡常表现为粪便呈稀水状或黏液状,有时还伴有血丝。
鸡的精神状态可能呈现不活跃、食欲减退、羽毛松散等症状。
2. 病理检查:对死亡的鸡进行解剖检查,观察器官的异常情况,常见的病变表现包括肠道黏膜充血、水肿、出血,以及肠道溃疡等。
3. 细菌分离与鉴定:可以从病鸡的肠道或粪便样本中分离出鸡白痢杆菌,并通过相应的实验室技术(如生化试验和分子生物学方法)进行鉴定,确定病原体。
4. 血清学检测:通过血清学试验,检测鸡白痢病原体的特异抗体,可以帮助确诊。
常用的血清学检测方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)和沉淀试验等。
5. 免疫组织化学检测:利用特异性抗原对病鸡的组织进行免疫组化染色,可以观察到鸡白痢病原体在组织中的分布情况,从而有助于诊断。
鸡白痢的诊断鉴别方法的选择与实施应该结合临床症状、病理检查和实验室检测结果进行综合分析,以得出准确的诊断。
鸡白痢鸡白痢是由鸡沙门氏杆菌引起的一种及其常见的各种年龄鸡均可发生的一种传染病。
初生雏鸡的发病率和死亡率都很高,特别是2周龄以内的雏鸡死亡最多,雏鸡以白痢为特征。
成年鸡多为慢性局部感染,一般不表现明显的临床症状。
病原菌为卵圆形小杆菌,无荚膜、芽孢、革兰氏染色阴性。
为一种条件性致病菌,当机体抵抗力降低时即可发病。
对外界抵抗力不强,高温和常规消毒药均可将其杀死。
(一)诊断1、流行特点各品种鸡均有高度易感性,不同年龄的鸡发病率、死亡率差异明显。
主要是2-3周龄内的雏鸡呈现急性败血症,4-7周玲玲呈亚急性,随着日龄增加,鸡的抵抗力增强,成年鸡呈现阴性或慢性特征。
病鸡和带菌鸡是主要传染源。
本病即可垂直传播也可水平传播。
经卵垂直传播是最主要的传播方式,因种鸡为阴性带菌者,其所产的蛋约有1/3带菌。
带菌种蛋入孵后,有的在胚胎中死亡,有的孵出弱雏,有的出壳于10日龄内发生鸡白痢。
水平传播可以在孵化器内感染。
病雏鸡经过鸡和带菌鸡排泄物含有的大量病菌,污染饲料、饮水、用具等,再经消化道传染,带菌的飞沫尘埃可经呼吸道吸入感染也可通过带菌的公鸡交配而传染给母鸡。
被病鸡污染的孵化器和育雏器常是初生雏鸡感染的重要传播媒介。
鸡舍通风不良、鸡群密度大、饲料品质差、采食或饮水不足、环境卫生太差等降低抵抗力的因素均能促进本病的发生。
2、临床症状通常分败血型、白痢型、慢性型和阴性型。
(1)雏鸡多发败血型和白痢型。
在卵内感染者,常出现死胚或不能出壳的弱雏;有的一出壳即死亡。
一般在出壳后3-7天发病增多,开始死亡,7-15日龄为发病死亡高峰期,2周龄后逐渐减少。
最急性者,无症状迅速死亡,稍慢者病雏鸡表现羽毛蓬松,怕冷挤堆,精神沉郁,呈打瞌睡状,尾翅下垂,食欲减少或拒食,渴欲增加,生长发育不良。
呼吸困难而急促,其后腹部快速的一收一缩即呼吸困难的表现。
典型症状是粪便呈白色稠糊状,黏连于肛门周围,干后结成石灰样硬块堵塞肛门,俗称“糊腚眼”,因排便困难而发出吱吱尖叫声。
鸡白痢的诊断和综合防治一、鸡白痢的概述鸡白痢是由大肠杆菌、肠炎沙门氏菌或淋巴肠炎沙门氏菌等引起的一种常见的肠炎病,该病主要发生在青少年鸡和育成鸡中。
该病主要通过饮用污染水源或食用污染饲料和饮水而感染,病原菌会进入鸡体肠道,引起肠粘膜受损,导致消化道炎症反应,表现为腹泻、发热、流质便甚至出血便,病程长而顽固,极易发生二次感染。
严重影响了养殖业经济效益,所以防治这种病很重要。
二、鸡白痢的诊断1.临床症状鸡白痢的早期症状主要表现为多次水样便便,严重的病例也会出现黏液和血液便,伴有不同程度的食欲减退、体重减轻、全身倦怠等。
病程较长,但不会传染给家犬等动物。
### 2.病原学检查对鸡白痢进行病原学检查是确诊鸡白痢的一个重要方法。
对鸡粪便或肝脏等进行细菌培养和分离,如果能够隔离出鸡白痢的病原菌,则可以确定这一鸡的确实发生鸡白痢了。
### 3.病理学检查对鸡的排泄物和病死鸡做病理解剖,可以观察到肠炎及肠黏膜水肿、出血、溃疡等。
三、鸡白痢的综合防治1.加强饲养管理饲养过程中要提高饲养环境的卫生条件,做好消毒杀菌工作。
注意饲料、饮水的质量,避免过度喂养和饮水不清洁。
### 2.合理预防接种通过预防接种来提高鸡的对病原菌的抵抗力,减少感染的概率。
应该合理安排疫苗接种时间以及接种方法。
### 3.使用药物治疗在发现鸡白痢的早期症状时,可以尝试使用止泻药、止血剂等药物治疗。
在病程严重时,应该选用抗生素类药物治疗,严格按照医嘱进行使用,避免过度使用并合理使用药物,这也是控制抗生素类药物的重要方法。
### 4.及时封锁、消毒隔离在发现鸡白痢病情时,应该及时对病禽进行封锁、消毒和隔离,这是控制鸡白痢的重要措施。
同时加强场地卫生环境,如避免饲养密度过大。
四、总结鸡白痢是对养殖业造成严重影响的一种病,饲养时需要注意环境卫生、预防接种等方面进行,对发生鸡白痢的鸡的封锁、消毒隔离工作等必要措施进行,使用药物治疗时应合理使用,有针对性地进行治疗。
种鸡场鸡白痢沙门菌净化规程1范围本文件规定了种鸡场鸡白痢沙门菌检测净化、鸡白痢阴性种鸡群生物安全措施以及种鸡场鸡白痢沙门菌净化判定标准。
本文件适用于种鸡场鸡白痢沙门菌净化操作。
2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB 4789.4 食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验GB 5749 生活饮用水卫生标准GB/T 5750.2 生活饮用水标准检验方法水样的采集与保存GB/T 13091 饲料中沙门氏菌的测定GB/T 36195 畜禽粪便无害化处理技术规范3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
3.1种鸡场breeding chicken farm本文件所指的种鸡场包括曾祖代场、祖代场和父母代场。
3.2鸡白痢pullorum disease是由鸡白痢沙门菌引起的雏鸡下痢和败血症,成年鸡隐性感染为特征的一种传染病。
发病初期病鸡表现体弱,食欲减少,继而食欲废绝;随后出现腹泻,排白色糊状粪便,常见糊状粪便堵肛现象;严重感染导致败血症而死亡。
鸡白痢沙门菌既能水平传播,也能垂直传播。
3.3鸡白痢阴性种鸡群salmonella pullorum negative breeding farm是指在鸡白痢沙门菌净化过程中通过持续检疫淘汰鸡白痢沙门菌阳性鸡后剩余的种鸡群。
3.4鸡白痢沙门菌净化eradication of salmonella pullorum在一个养殖场或指定区域内,通过持续检测和监测发现鸡白痢沙门菌病原或抗体阳性鸡只,并通过淘汰阳性鸡只和维持阴性鸡群的生物安全措施,以实现净化本场鸡群鸡白痢沙门菌的过程。
4种鸡场鸡白痢沙门菌检测净化4.1总体原则4.1.1规模化种鸡场应为全封闭式鸡舍,具备鸡白痢沙门菌净化的生物安全防控条件。
4.1.2应强化本场引种和投入品的检测,避免外来病原传入风险。
鸡白痢1、概述鸡白痢是由沙门氏菌引起的鸡的传染病。
主要侵害幼雏,两周内的雏鸡发病率和死亡率最高,以白痢、衰竭、败血症为特征。
成年鸡感染后,多呈慢性经过或无明显症状。
病变局限于卵巢、卵泡、输卵管和睾丸。
隐性带菌,可随粪便排出,因卵巢带菌,可严重影响孵化率和雏鸡成活率。
2、病原鸡白痢的病原菌为鸡白痢沙门氏菌,属肠杆菌科,具有高度的专一宿主适应性,为两端钝圆的细长杆菌,对一般碱性的苯胺染料着色良好,革兰氏阴性。
鸡白痢沙门菌无鞭毛、不能运动,但有报道显示,沙门菌鞭毛的抗血清可以与鸡白痢沙门菌发生反应,这说明鸡白痢沙门菌可能含有部分鞭毛抗原表位。
也有研究表明,鸡白痢沙门菌在特殊的培养基上可呈现出运动性。
有些鸡白痢沙门菌菌株在一定温度下经多次传代培养后,也可表现出运动性,通过电镜观察,这些诱导后的菌株表面有类似鞭毛的附属物出现,但它们比鞭毛更细,且易碎。
本菌抵抗力强,室温下本菌至少可生存7d之久,在被污染的土壤内毒力可保持14个月,鸡粪悬液中可存活3月以上。
本菌的抗原结构不同,抗原型上存在变异。
其抗原型的变异主要表现在抗原型122与123上。
沙门氏菌的H抗原对热不稳定,而O抗原对热稳定,一个菌体具有多个不同的O抗原鸡白痢沙门氏菌O抗原和肠炎沙门氏菌O抗原是完全一致的。
抗原结构为1、9、12,因此,可用提纯的多糖抗原进行敏感的ELISA试验,从而可快速准确的提供一种血清学诊断方法。
3、流行病学鸡和火鸡是鸡白痢沙门菌的自然宿主,感染通常是终身的;其他禽类如雏鸭、雏鹅、鹌鹑、珍珠鸡等也可自然感染,但无长期感染的表现。
由于本病能够垂直传播,所以经种蛋传递是本病传播的主要途径。
感染鸡常为永久带菌者,产出被感染了的受精蛋,孵出患白痢的雏鸡。
患病幸存的雏鸡及同群无临床症状的雏鸡,长大后有高比率的带菌者可达85%以上。
病鸡排除粪便,污染周围水源、饲料及用具,从而造成环境的污染,即使健康的雏鸡在污染的环境中也可感染本病。
传播方式主要是通过种蛋传播,但环境及饲料饮水的污染可以通过消化道黏膜而感染,并且可以通过破损的伤口传染,特别是在断喙时,由于断喙工具的污染及环境的污染,从而可以使健康的鸡群得病。
NY/T 536—2002前言鸡伤寒和鸡白痢(fowl typhoid and pullorum disease)是由鸡白痢沙门氏菌(salmonella pullorum)和鸡伤寒沙门氏菌(salmonella gallinarum)引起的各种日龄鸡和火鸡的传染病,以急性败血性经过或以慢性隐性感染为特征。
本病呈世界性分布,所有养鸡的国家和地区都有发生。
雏鸡发生本病时,发病率和死亡率均较高,严重影响雏鸡成活率;青年鸡发病后,死亡率可达10%~20%,病程可达20天~30天,鸡只生长发育受阻;成年鸡感染本病多为慢性或隐性经过,不表现明显的症状,但可长期带菌,成为本病的主要传染源,产蛋鸡可经蛋垂直传播,因此种鸡感染后可造成更大范围的传播,集约化养鸡场一旦发生本病会造成巨大的经济损失。
世界动物卫生组织[World Organization for Animal Health(英),Office Intentional des Epizootic(法),OIE]将鸡伤寒和鸡白痢列为B类疾病,并规定了诊断标准和相应生物制品(多价抗原)的制造、标定和使用的国际标准,指定了专业实验室向全世界提供鸡白痢阳性血清标准型(S)和变异型(V)国际标准品。
我国农业部也将其列为二类疫病。
本标准中的病原分离和鉴定及全血平板凝集试验是参照OIE《诊断试验和疫苗标准手册》(2000版)(Manual of Standards for Diagnostic Tests And Vaccines,2000)等相关标准性文件制定的。
本标准中的附录A为规范性附录。
本标准由农业部畜牧兽医局提出。
本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。
本标准起草单位:中国兽医药品监察所。
本标准起草人:夏业才、张学琴、康凯、姚文生。
1范围本标准规定了鸡伤寒和鸡白痢病原分离和鉴定及全血平板凝集试验技术。
本标准所规定的病原分离鉴定适用于各种日龄鸡的鸡伤寒和鸡白痢的诊断;全血平板凝集试验适用于成年鸡的鸡伤寒和鸡白痢的诊断,可用于诊断、流行病学调查和无本病健康鸡群监测。
2病原分离和鉴定2.1材料准备2.1.1培养基鉴别培养基:SS琼脂、麦康凯琼脂。
增菌培养基:亚晒酸盐煌绿增菌培养基、四硫磺酸钠煌绿增菌培养基、三糖铁琼脂和赖氨酸铁培养基。
以上各培养基配制方法见附录A。
2.1.2沙门氏菌属诊断血清A-F多价O血清、O9因子血清、O12因子血清、H-a因子血清、H-d因子血清、H-g.m因子血清和H-g.p因子血清。
2.2采集病料可采集被检鸡的肝、脾、卵巢、输卵管等脏器,无菌取每种组织适量,研碎后进行培养。
2.3分离培养将研碎的病料分别接种亚晒酸盐煌绿增菌培养基(见第A.3章)或四硫磺酸钠煌绿增菌培养基(见第A.4章)和SS琼脂(见第A.l章)平皿或麦康凯琼脂(见第A.2章)平皿,37℃培养24h~48h,在麦康凯或SS琼脂平皿上若出现细小无色透明、圆形的光滑菌落,判为可疑菌落。
若在鉴别培养基上无可疑菌落出现时,应从增菌培养基中取菌液在鉴别培养基上划线分离,37℃培养24h~48h,若有可疑菌落出现,则进一步做鉴定。
2.4病原鉴定2.4.1生化试验和运动性检查:将可疑菌落穿刺接种三糖铁琼脂(见第A.5章)斜面和赖氨酸铁琼脂(见第A.6章)斜面,并在斜面上划线,同时接种半固体培养基,37℃培养24h 后观察,若无运动性,并且在三糖铁琼脂培养基或在赖氨酸铁琼脂培养基上出现阳性反应时,则进一步作血清学鉴定。
2.4.2血清学鉴定:对初步判为沙门氏菌的培养物作血清型鉴定,取可疑培养物接种三糖铁琼脂斜面,37℃培养18h~24h,先用A-F多价O血清与培养物作平板凝集反应,若呈阳性反应,再分别用O9、O12、H-a、H-d、H-g.m和H-g.p单价因子血清作平板凝集反应,如果培养物与O9、O12因子血清呈阳性反应,而与H-a、H-d、H-g.m和H-g.p因子血清呈阴性反应时,则鉴定为鸡白痢沙门氏菌或鸡沙门氏菌。
2.4.3用接种环取两环因子血清于洁净玻璃板上,然后用接种环取少量被检菌苔与血清混匀,轻轻摇动玻板,于l min内呈明显凝集反应者为阳性,不出现凝集反应者为阴性,试验时设生理盐水作对照应无凝集反应出现。
3全血平板凝集试验3.1材料准备3.1.1鸡伤寒和鸡白痢多价染色平板抗原、强阳性血清(500IU/mL)、弱阳性血清(10IU/mL)、阴性血清。
3.1.2玻璃板、吸管、金属丝环(内径7.5mm~8.0mm)、反应盒、酒精灯、针头、消毒盘和酒精棉等。
3.2操作在20℃~25℃环境条件下,用定量滴管或吸管吸取抗原,垂直滴于玻璃板上1滴(相当于0.05mL),然后用针头刺破鸡的翅静脉或冠尖取血0.05mL(相当于内径7.5mm~8.omm 金属丝环的两满环血液),与抗原充分混合均匀,并使其散开至直径为2cm,不断摇动玻璃板,计时判定结果,同时设强阳性血清、弱阳性血清、阴性血清对照。
3.3结果判定3.3.1凝集反应判定标准如下:a)100%凝集(#):紫色凝集块大而明显,混合液稍浑浊;b)75%凝集(+++):紫色凝集块较明显,但混合液有轻度浑浊;c)50%凝集(++):出现明显的紫色凝集颗粒,但混合液较为浑浊;d)25%凝集(+):仅出现少量的细小颗粒,而混合液浑浊;e)0%调集(-):无凝集颗粒出现,混合液浑浊。
3.3.2在2min内,抗原与强阳性血清应呈100%凝集(#),弱阳性血清应呈50%凝集(++),阴性血清不凝集(-),判试验有效。
3.3.3在2min内,被检全血与抗原出现50%(++)以上凝集者为阳性,不发生凝集则为阴性,介于两者之间为可疑反应,将可疑鸡隔离饲养1个月后,再作检疫,若仍为可疑反应,按阳性反应判定。
附录A(规范性附录)培养基的制备A.1 SS琼脂A.1.1成分牛肉浸粉5g蛋白胨5g胆盐 2.5g蛋白胨10g乳糖10g硫代硫酸钠8.5g柠檬酸钠8.5g柠檬酸铁 1.0g中性红(1%) 2.0mL煌绿(0.01%) 3.3mL琼脂粉13g蒸镏水1000mLA.1.2制法A.1.2.1将上述材料(除中性红和煌绿溶液外)混合,加热溶解。
A.1.2.2待琼脂完全溶化后,以氢氧化钠溶液调整pH至7.1~7.2。
A.1.2.3将中性红和煌绿溶液加入,混合均匀后,分装于容器中。
A.1.2.4以103.7kPa灭菌20min~30min。
A.1.3用途供鉴定沙门氏菌用。
A.2麦康凯琼脂A.2.1成分蛋白胨20g乳糖10g氯化钠5g胆盐5g中性红水溶液(1%) 0.5mL琼脂粉13g蒸镏水1000mLA.2.2制法A.2.2.1除中性红溶液外,其他成分混合,加热溶解。
A.2.2.2待琼脂完全溶化后,以氢氧化钠(NaOH)溶液调整pH至7.4。
A.2.2.3加入中性红水溶液,混合均匀后,分装于容器中。
A.2.2.4以103.7kPa灭菌20 min~30min。
A.2.3用途供分离培养沙门氏菌、大肠杆菌等肠道菌用。
A.3亚砸酸盐煌绿增菌培养基(SB培养基)A.3.1成分酵母浸出粉5g蛋白胨10g甘露醇5g牛磺胆酸钠 1.0g磷酸氢二钾(K2HPO4) 2.65g磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.02g亚硒酸氢钠4g新鲜0.1%煌绿水溶液5mL蒸馏水1000mLA.3.2制法A.3.2.1除亚硝酸氢钠和煌绿溶液外,其他成分混合于800mL蒸馏水中,加热煮沸溶解,冷至60℃以下,待用。
A.3.2.2将亚硒酸氢钠加入,再加20mL蒸馏水加热煮沸溶解,冷至60℃以下,待用。
A.3.2.3将煌绿溶液加入,调整pH至6.9~7.1。
A.3.3用途为沙门氏菌选择性增菌培养基。
A.4四硫磺酸钠煌绿增菌培养基(TTB培养基)A.4.1成分蛋白胨或多价蛋白胨5g胆盐 1.0g碳酸钙10g硫代硫酸钠30g0.1%煌绿溶液10mL碘溶液20mL蒸馏水1000mLA.4.2制法A.4.2.1除碘溶液和煌绿溶液外,其他成分混合与水中,加热溶解,分装于中号试管或玻瓶,试管每支10mL,玻瓶每瓶100mL。
在分装时不断振摇,使碳酸钙均匀地分装于试管或玻瓶。
经112 kPa 15min高压灭菌,备用。
A.4.2.2临用时,每10 mL或100mL上述混合溶液中,加入碘溶液0.2mL或2mL和0.1%煌绿溶液0.1mL或1mL(碘溶液由碘片6g、碘化钾5g,加20mL灭菌的蒸馏水配制而成)。
A.4.3用途供沙门氏菌增菌培养用。
A.5三糖铁培养基A.5.1成分牛肉浸粉5g酵母浸粉3g酵母浸出粉 2.5g氯化钠5g蛋白胨7.5g蛋白胨7.5g琼脂粉15g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖 1.0g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠 1.8g1%酚红0.2mL蒸馏水1000mLA.5.2制法A.5.21除糖类和酚红外,其他成分混合于水中,加热溶解。
A.5.2.2调整pH至7.4~7.6,再加糖类及指示剂,混匀。
A.5.2.3分装于试管中。
A.5.2.4以103.7kPa灭菌20min~30min,趁热取出,制成斜面,斜面及底层应各占二分之一为宜。
A.5.3用途供鉴别肠道菌用。
A.6赖氨酸铁琼脂A.6.1成分蛋白胨5g酵母浸粉3g柠檬酸铵铁0.5g硫代硫酸钠0.04gL-赖氨酸10g葡萄糖 1.0g溴甲酚紫0.02g琼脂13g水1000mLpH 6.5~6.9A.6.2制法除琼脂、指示剂外称取各成分,加于水中,加热溶解。
调整pH至6.5~6.9,加入指示剂及琼脂溶解后分装试管。
103.7kPa 20 min高压灭菌。
制成高层斜面。
A.6.3用途肠道细菌生化鉴定用。