美天旎细胞因子分泌型细胞检测试剂盒

CD133是近年在干细胞领域研究较为活跃的细胞膜糖蛋白之一,常表达于未成熟的造血干细胞或祖细胞,新近有报道认为它在脑肿瘤、前列腺癌、小鼠的Lewis肺癌、B16黑色素瘤的干细胞中均有表达,已被认为是这些肿瘤干细胞的标志之一。

miltenyi biotec（德国美天旎）拥有CD133全系列的全球专利。

美天旎部分CD133：一.CD133的分子结构人CD133抗原为5次跨膜糖蛋白，目前发现的同源性抗原有CD133_1和CD133_2，其基因分别定位在人类的4号和2号染色体上，分析CD133的基因结构发现，CD133_1基因至少含有27个外显子，CD133_2基因比CD133_1基因少1个27 bp的4号外显子。

CD133_1抗原cDNA全长为3 794 bp，其中5′端有37 bp的非翻译区，3′端有1 159 bp的UTR，中间为2 598 bp的开放阅读框，编码865个氨基酸的蛋白。

转录起始密码子ATG位于38bp 处，ATG之后还有一编码19个氨基酸的信号肽序列,终止密码子位于第2 763位,第3 906核苷酸处有一长20 bp的polyA序列。

CD133_1与CD133_2的相对分子质量分别为120 KD 和112 KD，CD133_2由含856个氨基酸的肽链组成，比CD133_1少9个位于E1区的氨基酸[2]。

在发现人CD133的同年，在小鼠中也发现了CD133_1的同源性抗原并命名为Prominin_1，二者具有60％的相似结构，之后，成功克隆出Prominin_2，与Prominin_1和人CD133分别有29％和26％的相似结构，认为是Prominin_1的同源性抗原。

CD133的功能目前尚不清楚，存在于C端的酪氨酸暗示它可能是通过酪氨酸残基磷酸化作用而发挥级联效应的生长因子受体。

二. CD133阳性的肿瘤干细胞利用某些干细胞标志物与肿瘤细胞标志物相结合的方法确定肿瘤干细胞特异性的标志物，是当前肿瘤干细胞筛选的主要手段。

美天旎公司MACS(磁珠分选)相关产品一、MACS微珠（MicroBeads）MACS微珠是一种与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒，用于目的细胞或者去除细胞的磁性标记。

微珠直径约有50nm，比细胞小200多倍，体积为细胞的百万分之一，光学显微镜下不可见。

微珠由多聚糖和氧化铁组成，无毒性，对细胞无损伤，可以生物降解。

MACS微珠与流式细胞仪兼容，不会影响细胞的光散射特性；磁性标记只占用20－30％的结合位点，不影响细胞的荧光抗体标记。

此外，MACS微珠可以最大限度地避免细胞活化；无需解离磁珠，可以直接进行后续实验：如流式细胞仪分析或分选、细胞培养、分子生物学研究、回输给人或者动物。

MACS微珠主要有三种：直标微珠、间标微珠、多选微珠。

其中间标微珠有抗免疫球蛋白微珠、抗生物素微珠或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠。

多选微珠是专门为分选细胞亚群而研制的一种微珠。

这种微珠通过特殊的方式与抗体偶联，在第一次阳性分选完成后，与细胞结合的多选微珠可以被解离试剂剪切下来，阳性分选的细胞可以进行再次阳性分选或者去除分选。

MACS技术分选的CD8阳性T细胞（箭头所示为磁性结合在细胞表面的微珠）二、MACS分选柱（Separation Column）MACS分选柱是一类填充有不同规格铁珠的塑料容器，铁珠表面有亲水包被，因此不会损伤细胞。

在磁场外MACS分选柱不带有磁性，但是当置于一个永久性磁场—MACS分选器中时，分选柱内的铁珠可以使分选器的磁场增强1000倍，足以滞留仅标记有极少量微珠的目的细胞；磁性标记细胞从分选柱中通过时可以受到均匀的磁力作用，从而提高分选纯度和回收率。

手动操作在30分钟内可完成，自动分选仅需2.5-10分钟，得到的细胞可立即用于后续实验。

此外，大多数MACS分选柱都是无菌包装，一次性使用，可以满足细胞培养所需的无菌条件。

三、MACS分选器（MACS Separators）MACS分选器由永久性磁铁和支架构成。

美天旎7月新品细胞分选产品：1、Pan-DC 富集试剂盒，人：适用于阴性分选Pan-DC细胞，可获得高活性，高纯度，高得率的DC细胞，分选细胞与下游实验相兼容。

应用：•分选的细胞适用于免疫表型分析和功能检测，分子分析；•与其他细胞共培养检测其与其他细胞之间的相互作用；•适用于细胞迁移实验。

2、高纯度CD34 磁珠试剂盒，人：该试剂盒可以分选获得超高纯度的CD34+造血干祖细胞，并且能够确保细胞功能和活性不受影响，分选获得的细胞与下游实验相兼容。

应用：分选的细胞适用于细胞培养，分子分析，流式检测。

3、MACSxpress 分选器该分选器适用于MACSxpress大磁珠的分选，无需配合分选柱，分选更方便，更快捷。

4、抗TRA-1-60 磁珠，人：TRA- 1-60单克隆抗体可以特异性的和表达在未分化的ES细胞，包括iPS细胞，EC 细胞和EG 细胞表面的抗原相结合。

伴随着细胞的分化TRA-1-60在人ES细胞表面的表达量会降低。

TRA-1-60磁珠可特异性的分选人未分化的ES和重编程后的iPS。

应用：•适用于阳性分选人未分化的ES细胞，iPS细胞，EC 细胞和EG 细胞；•分选的细胞适用于下游细胞培养；•分选的细胞适用于下游分子分析等；细胞培养产品：1、CytoBox Mo-DC：该试剂盒包括用于刺激单核细胞向DC转换的细胞因子，该试剂盒所含的细胞因子为重组人的粒细胞巨噬细胞克隆刺激因子（GM-CSF）和重组人的IL-4（rIL-4）。

应用：在GM-CSF和IL-4 的共同作用下，可以将单核细胞诱导成未成熟的DC。

2、TLR9 检测试剂该试剂盒中包括4种不同刺激TLR9受体的CpG ODNs 以及相应的ODNs 对照. 该试剂盒包括A-级, B-级, C-级和P-级.。

世界著名抗体公司Santa公司是世界上最大的抗体生产厂家，目前可提供的抗体种类多达两万多种，几乎覆盖了目前生命科学研究的各个最新领域，其每种抗体又有多个克隆可以选择，还提供一些对应蛋白标准品及相关产品，如ABC试剂盒，各种标记二抗，Western试剂盒，蛋白分子量Marker，核抽提物等，为免疫学研究工作提供了极大的方便。

Abcam公司是世界有名的抗体王国，以优质、齐全的产品、完善的网络支持功能和强大的技术支持队伍得到全球客户的认可和赞誉。

并在2004年获得了对于生物界公司不可多得的英女王奖，拥有很好的知名度和口碑。

AbMART全球抗体生产行业的新贵，在全球首推低价格“保证使用成功”的抗体定制服务，保证定制的抗体能在ELISA, Western, IP, IF/ICC等各种实验中成功使用。

建立抗体研发和生产流水线，实现低价格和高速度提供各种抗体，做抗体行业的沃尔玛。

AbMART（艾比玛特）致力于抗体的工业化，目标是设立抗体定制服务的行业标准，是目前全球最大的抗体制备公司之一。

R&D公司于1976年成立于美国，一直致力于各种细胞因子及其相关分子的生产研发，其生产的各种ELISA试剂盒、重组因子及抗体以其卓越的品质赢得了世界各国科研及临床诊断机构的青睐。

是全世界最大的细胞因子公司。

该公司产品丰富涵盖了百余种细胞因子类ELISA试剂盒, 重组细胞因子类蛋白（209种之多）及相关的多达250余种单克隆、多克隆抗体；细胞凋亡、Caspase及胶原酶系列以及细胞因子类等热点领域。

Proteintech GroupProteintech Group, Inc(武汉三鹰生物技术有限公司)是一家由留学人员和专业管理人员组成的新型生物技术外资企业，成立于2000年11月，2002年5月被认定为高新技术企业，目前是中国大陆最大的抗体公司。

公司总部和实验室设在武汉东湖新技术开发区关东科技园内，在美国和英国拥有自己的销售网络和网站（w ）。

美天旎手动分选设备
内包括：
这款分选套装只能配合MS柱子使用，最大的细胞上样量是2X10，捕获细胞量是107。

用于阳性分选。

2．美天旎4通道分选套装：可以同时进展4个样本的实验，比较快捷，而且各种分选策略都适用
试剂盒内包括：
这款分选套装可以配合LS柱子和LD柱子使用，最大的细胞上样量是2X10，捕获细胞量是108。

可用于阳性分选和去除分选。

这款分选套装可配合使用MS柱子和LS柱子或LD柱子，mini套装最大的细胞上样量是2X108 ，捕获细胞量是107；midi套装最大的细胞上样量是2X109 ，捕获细胞量是108。

可用于阳性分选和去除分选，不足的地方就是每次只能进展一次实验。

4 MidiMacs套装
一根LS分选柱上样量为10E9, 适合阳性分选和去除分选
5 MiniMacs套装
一根LS分选柱上样量为10E8, 适合阳性分选和去除分选.
五款分选套装的比较：。

美天旎细胞治疗平台CliniMACS系统简介第一部分、德国美天旎生物技术有限公司及MACS细胞分离技术介绍第二部分、CliniMACS系统在临床细胞治疗中的应用一、CliniMACS细胞分选仪及其配件介绍二、CliniMACS CD34系统的安全性德国美天旎生物技术有限公司上海市仙霞路319号远东国际广场A栋2301室200051电话：（86 21）62351005传真：（86 21）62350953服务热线：800 820 2606北京市东城区朝阳门内大街银河SOHO D座50723室100010电话：（86 10）64107101传真：（86 10）64100990第一部分德国美天旎生物技术有限公司及MACS细胞分离技术介绍德国美天旎生物技术有限公司（Miltenyi Biotec GmbH）是一个以细胞分选技术为主、拥有多样化产品的生物技术公司。

开发研制并销售世界上最先进的细胞分选、细胞生物学、相关分子生物学产品和技术，尤其在干细胞分选、DC细胞分选与分析、细胞因子分泌细胞分选与分析、免疫治疗、再生医学方面占有极大的优势，CD133、BDCA-2（CD303）、BDCA-4（CD304）单抗为我公司专利产品。

我公司总部位于德国科隆，在科隆和德国北部罗斯托克均有cGMP生产机构。

我们的产品有免疫磁珠、特异性细胞及蛋白质或者DNA/RNA分选用的MACS分选设备、单克隆抗体、无菌溶液、基础和特殊培养基、血液/血浆治疗用的生物学吸附剂、LIFE18血浆分离机、流式细胞仪及相关耗材。

MACS技术已成为细胞分选的标准方法，从实验室到临床，从小规模到大规模，从常见细胞到稀有细胞和复杂的细胞亚群，从人类和小鼠细胞到其它种系的细胞，MACS技术提供了可在每个实验室进行高品质细胞分选的方法。

MACS技术原理MACS技术为德国美天旎生物技术有限公司的专利产品，是一种集合了免疫学、细胞生物学、磁力学等知识于一体的高度特异性细胞分选技术，其高度特异性来自抗体对抗原的特异性识别。

美天旎细胞因子分泌型细胞检测系列试剂盒采用独特的技术
设计，能检测分泌细胞因子的白细胞的比例，而且无需固定、破膜
的步骤，所以标记的细胞是活细胞，检测后的细胞仍可用于下游的
细胞分选和培养等实验。

原理及操作步骤示意图：
技术原理：
1、多克隆刺激剂刺激T细胞3-16h，T细胞活化后大量分泌细胞因子；
2、捕获试剂与细胞共孵育，捕获试剂的一端耦联CD45抗体，因此，所有白细胞均能被捕获试剂标记，而捕获试剂另一端耦联细胞因子特异性抗体；
3、抗原特异性T细胞分泌的细胞因子被捕获试剂结合并捕获；
4、加入细胞因子特异性检测试剂，耦联荧光素的细胞因子抗体即可与细胞因子、捕获试剂形成带荧光的三明治复合物，即可用于流式检测。

技术优势：
1、无需固定破膜步骤，检测后的细胞为活细胞，可以用于细胞因子分泌型细胞的分选和培养。

2、美天旎专利技术，操作简单，可重复性好。

目前，美天旎已有多种细胞因子分泌型细胞检测试剂盒，如：
另有更多细胞因子分泌型细胞分选、检测试剂盒，您可以通过以下方式了解：上海优宁维生物科技有限公司
Email：info@
我们会尽所能的帮助您。

提供最专业、最全面的抗体服务。

细胞因子检测中常用的试剂盒及其原理细胞因子检测是研究生物体内细胞间相互作用以及免疫和炎症反应的重要工具。

试剂盒是细胞因子检测中常用的实验工具，通过检测细胞因子的表达水平，可以了解细胞因子在机体免疫调节、疾病发展以及治疗效果等方面的作用。

本文将介绍几种常用的细胞因子检测试剂盒及其原理。

1. ELISA试剂盒ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的细胞因子检测方法，其原理是利用酶标记的抗体与待测细胞因子结合，通过底物反应等方法来测定细胞因子的浓度。

ELISA试剂盒一般包括固相酶标板、抗体、酶标记抗体、底物等多个组分。

首先，在固相酶标板上固定特异性的抗体，然后加入待测样品和酶标记抗体，待测样品中的细胞因子与抗体结合形成免疫复合体。

随后，通过底物反应产生荧光或色素等信号，测定底物反应的光强度或吸光度，从而确定细胞因子的浓度。

2. PCR试剂盒PCR（Polymerase Chain Reaction）是一种用于扩增DNA片段的技术，也常用于细胞因子的检测。

PCR试剂盒包括DNA聚合酶、引物、模板DNA等多个组分。

PCR试剂盒的原理是在适当的温度条件下，利用DNA聚合酶酶活性，引物定向结合至待扩增的DNA片段，然后进行反复的变温扩增，分别进行DNA的变性、引物的结合和DNA片段的合成等步骤，最终扩增得到相应数量的特定DNA片段。

通过测定PCR产物的数量，可以推断细胞因子的表达水平。

3. 流式细胞术试剂盒流式细胞术是一种广泛应用于细胞因子检测的方法，也称为流式细胞仪。

流式细胞术试剂盒包括荧光染色剂、抗体等。

流式细胞术试剂盒的原理是将待测样品进行细胞标记，通常使用荧光染色剂标记细胞表面的某些蛋白，或者使用特异性的抗体标记细胞表面的特定细胞因子。

然后，通过流式细胞仪检测细胞标记的荧光强度或颜色，以及细胞数量，通过对流式细胞仪所得数据的分析，可得出细胞因子的表达水平。

细胞因子检测试剂盒的原理与检测方法探析细胞因子检测是一种常见的生物学研究方法，用于评估生物体内细胞因子的水平和活性。

细胞因子是一类由多种细胞合成的蛋白质或肽类分子，它们在机体的免疫反应、炎症反应、细胞增殖以及组织修复等过程中发挥重要的调节作用。

细胞因子检测试剂盒是一种常用于测量细胞因子浓度的试剂盒，其原理和检测方法对于细胞因子的研究和应用具有重要意义。

一、细胞因子检测方法的原理1.ELISA法ELISA法是一种常用的细胞因子检测方法，其原理是利用特定的抗体与待测细胞因子发生特异性结合，然后通过酶标记二抗与抗体复合物反应发生颜色反应，最后通过读取吸光度来间接测定细胞因子浓度。

ELISA法具有高灵敏度、高特异性和高重现性的优点，广泛应用于细胞因子的检测。

2.免疫荧光法免疫荧光法是一种直接观察和定量细胞因子的检测方法。

该方法利用细胞因子与特异性荧光染料或标记有荧光物质的抗体特异性结合，形成对应的荧光复合物。

通过荧光显微镜等设备观察并测定细胞因子的分布和定量情况。

免疫荧光法具有高灵敏度和高分辨率的优势，适用于细胞因子的多点和多通道检测。

3.流式细胞术流式细胞术是一种通过携带特异荧光标记的抗体与细胞因子结合，然后通过流式细胞仪对细胞群体进行快速检测的方法。

在流式细胞术中，细胞因子与特定抗体结合后，可以通过流式细胞仪进行单细胞的分析和定量，同时还可以与其他细胞参数进行联合检测。

流式细胞术具有高通量、高灵敏度和高精准度的优点，被广泛应用于细胞因子的研究。

二、细胞因子检测方法的操作步骤1.样品处理细胞因子检测试剂盒需要对待测样品进行前处理，通常包括样品收集、加入稳定液或溶液进行稀释、离心等步骤。

样品的前处理能够提高细胞因子的测定灵敏度和可信度。

2.试剂准备细胞因子检测试剂盒需要根据说明书准备试剂，包括稀释缓冲液、标准品、酶联免疫试剂等。

3.标准曲线制备标准曲线是细胞因子浓度与检测结果之间的关系。

根据试剂盒提供的标准品，将其按一定浓度系列进行稀释，并配制出一系列细胞因子浓度不同的标准品。

细胞因子检测试剂盒的性能评估及标准化方法细胞因子检测试剂盒是一种常用的生物学实验试剂，用于测定细胞因子在生物样本中的浓度。

准确评估细胞因子检测试剂盒的性能和标准化方法对于提高实验结果的可靠性至关重要。

本文将介绍细胞因子检测试剂盒的性能评估和标准化方法，以及常见的技术要点。

一、细胞因子检测试剂盒性能评估方法1. 准确性评估准确性是评估细胞因子检测试剂盒性能的重要指标，可以通过对已知浓度的标准样本进行测定来评估。

选择多个浓度的标准样本，分别进行实验测定，并与已知浓度进行比较。

计算测定值和已知值之间的差异，以评估检测试剂盒的准确性。

2. 精密度评估精密度是评估细胞因子检测试剂盒性能的另一个重要指标，用于评估同一样本的重复测定结果的一致性。

选择同一生物样本，重复进行多次实验测定，并计算测定值之间的变异系数。

较小的变异系数表示测定结果的一致性较好，检测试剂盒的精密度较高。

3. 灵敏度评估灵敏度是评估细胞因子检测试剂盒性能的关键指标，表示检测器对低浓度细胞因子的响应能力。

选择不同浓度的标准样本，测定其信号强度，并记录变化幅度。

计算最低检测浓度（LOD）和最低定量浓度（LOQ），以评估检测试剂盒的灵敏度。

4. 特异性评估特异性是指检测试剂盒能否准确测定目标细胞因子而不受其他成分的干扰。

进行对照实验，将目标细胞因子与其他相关分子进行交叉反应检测，并评估结果的差异。

较小的交叉反应说明检测试剂盒具有较好的特异性。

二、细胞因子检测试剂盒标准化方法1. 样本处理标准化样本处理是细胞因子检测的关键环节，影响到最终测定结果的准确性。

建立样本处理标准化方法，包括样本采集、储存和处理流程的规范化。

确保样本的一致性处理可以提高实验结果的可靠性。

2. 实验参数标准化实验参数标准化是指在细胞因子检测试剂盒的使用过程中，标准化实验条件和步骤，以减少操作的变异性。

重点关注涉及温度、pH值、反应时间等关键参数的标准化。

确保实验参数的一致性有助于提高测试结果的准确性和重复性。

细胞因子检测试剂盒在疾病研究中的作用和前景概述：细胞因子检测试剂盒是一种用于检测和测量细胞因子水平的工具。

细胞因子是一类分泌的蛋白质，广泛参与了细胞间的相互作用和通讯过程。

它们在调节和控制免疫系统、炎症反应、细胞增殖和死亡等生物学过程中发挥着重要的作用。

因此，细胞因子检测试剂盒在疾病研究中具有重要的作用和广阔的前景。

作用：1. 探索疾病机制：细胞因子检测试剂盒可帮助研究人员了解疾病发生发展的机制。

通过测量和分析细胞因子的水平和变化，可以探索疾病的发病机制、病理生理过程以及相关的细胞信号通路等。

例如，通过检测免疫系统相关的细胞因子水平，可以深入研究自身免疫性疾病的发病机制。

2. 评估疾病严重程度：细胞因子水平的变化与疾病的严重程度之间存在关联。

细胞因子检测试剂盒的使用可以帮助医生评估患者的病情严重程度，并辅助制定有效的治疗方案。

比如，在肿瘤研究中，检测恶性肿瘤细胞因子的水平可以帮助评估肿瘤的侵袭性和预测患者的预后。

3. 监测治疗效果：治疗后细胞因子水平的变化可以反映治疗效果。

细胞因子检测试剂盒的使用可以帮助医生监测治疗的效果，并及时调整治疗方案。

例如，在炎症性疾病的治疗中，通过检测炎症相关的细胞因子水平的变化，可以评估治疗的有效性和选择适当的药物。

前景：1. 个体化治疗：细胞因子检测试剂盒的发展将有助于实现个体化治疗的目标。

不同患者对药物治疗的反应存在差异，这与其细胞因子水平的差异有关。

通过检测和分析细胞因子水平，可以更准确地判断患者对治疗的反应，从而为个体化治疗提供重要依据。

2. 新药研发：细胞因子检测试剂盒的应用有助于加速新药的研发。

通过对疾病相关细胞因子的检测，可以筛选出潜在的治疗靶点，指导和优化新药的设计和研发过程。

同时，细胞因子检测试剂盒还可用于评估新药的疗效，并提供相关的药理学数据支持。

3. 预测预后和复发风险：细胞因子检测试剂盒的应用有助于预测患者的预后和复发风险。

通过检测和分析患者血液中的细胞因子水平，在治疗前就可以预测患者的预后情况，并制定个性化的治疗方案。

细胞因子检测试剂盒的原理及实验操作流程细胞因子检测试剂盒是一种用于检测细胞因子水平的实验试剂盒。

细胞因子是一类具有调节和介导免疫、炎症和细胞增殖等生物学功能的蛋白质分子，它们在机体免疫应答、疾病发展以及药物研究等领域具有重要的意义。

细胞因子检测试剂盒通过特定的试剂和技术，可以快速、准确地检测细胞因子的水平，为科学研究和临床诊断提供有力的支持。

细胞因子检测试剂盒的原理主要包括两个方面：免疫学方法和酶联免疫吸附测定法（ELISA）。

免疫学方法是通过免疫学反应原理来检测细胞因子的水平。

具体步骤包括：1. 样品收集和预处理：收集需要检测的样品，如血液、血清、血浆或细胞上清等。

对样品进行预处理，例如离心、稀释或加标等，以提高检测的灵敏度和准确性。

2. 抗体结合：将与目标细胞因子相关的抗体加入样品中，通过抗原-抗体结合的方式，形成特异性复合物。

这些抗体通常是特异性识别目标细胞因子的单克隆或多克隆抗体。

3. 洗涤：对于非特异性结合的物质，通过洗涤步骤将其除去，以减少干扰并提高检测的特异性。

4. 信号产生：添加特定的辅助试剂，如酶标记的二抗或荧光标记的二抗等，在免疫结合复合物中形成信号物质。

5. 信号检测：利用光谱设备或荧光显微镜等仪器对信号物质进行检测和定量分析。

检测的方法根据试剂盒的不同而有所差异，常见的包括酶标记法、荧光法、放射免疫法等。

ELISA法是目前最常用的细胞因子检测方法之一，其原理基于酶标记物介导的免疫反应。

ELISA法可以快速、准确地检测细胞因子的水平，并且具有灵敏度高、重复性好的特点。

具体步骤如下：1. 吸附：将经预处理的样品加入包被了特异性抗体的微孔板孔中，目标细胞因子会与抗体结合。

2. 洗涤：将非特异性结合的物质通过洗涤步骤除去，以减少背景干扰。

3. 检测：添加特异性酶标记的二抗，它会与目标细胞因子结合。

通过酶底物的作用，产生可定量测定的颜色反应。

4. 反应终止：通过反应终止剂停止酶反应，阻止进一步的颜色反应产生。