抗核抗体及常用检测方法

抗核抗体的检测方法
1. 酶联免疫吸附试验（ELISA），就像侦探在寻找线索一样，能精准地检测出抗核抗体是否存在呢。

比如说，在检查血液的时候，它能火眼金睛般地把抗核抗体给揪出来！
2. 免疫荧光法呀，如同一个神奇的魔法镜，可以让抗核抗体现形哟！就好比如你在黑暗中寻找东西，它一下子就把光打在了目标上，厉害吧！比如医生用这个方法能清楚地看到抗核抗体的情况呢。

3. 免疫印迹法可牛了，它仿佛是个智能识别器，对抗核抗体的辨别那叫一个准！你想想看，这不就像是在一堆东西里一下子挑出你想要的那个，是不是很神奇呀！像诊断一些疾病的时候就经常用到它呢。

4. 胶体金法呀，就像是个小巧玲珑的指南针，能快速指引出抗核抗体的方向哦！比如说在一些快速检测中，它就发挥大作用啦！
5. 化学发光法，那简直就是夜空中最亮的星呀，一下子就能把抗核抗体照亮呢！举个例子，在检测的关键时刻，它能给出最闪亮的答案！
6. 间接免疫荧光法，相当于一个精准的瞄准器，能准确无误地锁定抗核抗体呢！就像射击比赛中瞄准靶心一样厉害哟！比如在复杂的情况中它也能发挥威力。

7. 斑点酶免疫技术，如同一个细心的卫士，能牢牢地守住检测抗核抗体的关卡呀！想想看，是不是很有安全感呢！比如在特定的检测情境下它可重要啦。

8. 流式细胞术，哇塞，这可是个高科技的玩意儿呀，能高效地检测抗核抗体呢！这就好比有一双特别的眼睛，能瞬间捕捉到关键信息，厉害吧！像一些精确的分析中就少不了它。

9. 放射免疫法，那可是个厉害的角色呢，对检测抗核抗体有着独特的本领哦！就好像拥有超级力量一样，能准确找到目标呢！比如在一些专业的检测领域就有它的用武之地啦。

我觉得这些抗核抗体的检测方法都各有特点和优势，在医学诊断中都起着至关重要的作用呢！。

抗核抗体谱15项解读抗核抗体谱15项解读抗核抗体谱是检测自身免疫反应中的血清免疫球蛋白抗体种类及滴度的一种常规检测方法，常用于风湿免疫科、肾内科、消化内科等临床科室。

抗核抗体谱检查的结果能够反映身体免疫系统的情况及是否存在自身免疫性疾病，因此深受临床医生的重视和病患的关注。

那么，在接收抗核抗体谱检查结果时，该如何解读呢？以下是抗核抗体谱15项解读的详细内容。

一、ANA（抗核抗体）ANA又叫抗核抗体，是一种血清免疫球蛋白，在自身免疫性疾病中常表现出高水平。

阳性结果可能说明存在某些自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮等。

二、抗ds-DNA抗体抗ds-DNA抗体是一种血清免疫球蛋白，主要用于系统性红斑狼疮的辅助诊断。

阳性结果可能提示患者存在系统性红斑狼疮等疾病。

三、抗Sm抗体抗Sm抗体是一种血清免疫球蛋白，主要用于系统性红斑狼疮的辅助诊断，阳性结果可能提示患者存在系统性红斑狼疮等疾病。

四、抗SS-A抗体抗SS-A抗体是一种血清免疫球蛋白，主要用于Sjogren综合征的辅助诊断。

阳性结果可能提示患者存在Sjogren综合征等疾病。

五、抗SS-B抗体抗SS-B抗体是一种血清免疫球蛋白，主要用于Sjogren综合征的辅助诊断。

阳性结果可能提示患者存在Sjogren综合征等疾病。

六、抗RNP抗体抗RNP抗体是一种血清免疫球蛋白，主要用于恶性结节病的辅助诊断。

阳性结果可能提示患者存在结节性多肌病等疾病。

七、抗SSC70抗体抗SSC70抗体是一种血清免疫球蛋白，主要用于系统性硬化症的辅助诊断。

阳性结果可能提示患者存在系统性硬化症等疾病。

八、抗Ro-52抗体抗Ro-52抗体是一种血清免疫球蛋白，主要用于干燥综合征的辅助诊断。

阳性结果可能提示患者存在干燥综合征等疾病。

九、抗PM-Scl抗体抗PM-Scl抗体是一种血清免疫球蛋白，主要用于多发性硬化的辅助诊断。

阳性结果可能提示患者存在多发性硬化等疾病。

十、抗Jo-1抗体抗Jo-1抗体是一种血清免疫球蛋白，主要用于肌无力症的辅助诊断。

抗核抗体检测及临床意义LLL抗核抗体（ANA）检测是一种用于检测人体血清中是否存在针对细胞核自身抗原的抗体的试验。

该检测主要用于系统性红斑狼疮（SLE）的诊断，但也常用于其他自身免疫性疾病的筛查和辅助诊断。

ANA检测是通过间接免疫荧光法进行的。

在该试验中，人体血清与细胞核自身抗原结合，形成免疫复合物，然后用荧光标记的二抗检测这些抗体的存在。

正常情况下，储存在细胞核内的抗原是隐蔽的，抗体不会结合。

而在自身免疫性疾病患者中，细胞核结构和组成发生了改变，使得抗原暴露在胞质中，即可触发产生ANA抗体。

ANA检测的结果以荧光染色的形式呈阳性或阴性。

阳性结果可以进一步进行亚型检测，包括抗dsDNA（双链脱氧核糖核酸）、抗Sm（Smith）抗体、抗Ro/La抗体等。

这些亚型的检测有助于进一步明确患者是否患有其中一种具体的自身免疫性疾病。

对于SLE患者，ANA检测的阳性率可以高达95%以上。

但需要指出的是，ANA检测并不能单独用于SLE的诊断，因为这种抗体在其他自身免疫性疾病和一部分非自身免疫性疾病中也可以出现阳性反应。

因此，ANA检测通常作为其他临床病征和实验室检查的辅助诊断指标。

除SLE外，其他一些自身免疫性疾病也可检测到ANA抗体。

例如，系统性硬化症、类风湿性关节炎和干燥综合征等疾病在临床上也存在ANA阳性的情况。

通过进一步检测抗体亚型，可有助于明确患者患病的特定类型和病情严重程度。

对于临床医生而言，ANA检测的结果常常与患者的病史、体征和其他实验室检查结果综合分析来进行诊断。

这些综合信息有助于明确患者是否存在自身免疫性疾病，并辅助制定治疗方案。

总的来说，抗核抗体（ANA）检测在自身免疫性疾病的诊断和辅助诊断中起着重要的作用。

通过检测患者血清中的ANA抗体，可以帮助医生进行早期诊断和治疗，提高患者的生活质量和预后。

然而，需要注意的是，ANA检测的结果仅仅是一个辅助指标，最终诊断应综合考虑病史、体征和其他实验室检查结果。

抗核抗体的研究进展综述报告目录1.抗核抗体的检测方法 (1)2.抗核抗体发病机制 (2)3.抗核抗体临床应用 (2)4.抗核抗体发病风险 (3)5.展望 (4)参考文献 (4)抗核抗体(antinuclear antibody ANA)是出现于自身免疫性疾病患者血清中的一组自身抗体的总称，最初定义是指针对真核细胞核成分为靶抗原的自身抗体总称，但随着对ANA认识的不断深入，许多针对细胞浆成分的抗体陆续被发现，ANA的定义己经不局限于针对细胞核抗原了，而是指一组将细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞周期蛋白等全部细胞成分作为靶抗原的自身抗体的总称，也就是所谓的ANA谱。

1.抗核抗体的检测方法抗核抗体(antinuclear antibody，ANA)又称抗恢酸抗原抗体，是一组将自身真恢细胞的各种成分作为靶抗原的自身抗体的总称，主要存在于血清中抗恢抗体在自身免疫性疾病的诊疗过程中有着不可替代的作用[1]。

近年来，自身免疫性疾病（AID）的危象率和死亡率不断上升。

随着AIDS的不断完善和实验室旁检测技术的进步，自身抗体的旁检测具有重要的临床意义，对AIDaid的诊断、鉴别诊断、治疗监测和预后判断具有重要意义[2]。

目前用于临床实验室检测自身抗体的方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫分析（RIA）、间接免疫荧光（IIF）、免疫印迹（LIA）和抗原芯片。

在ANA侧检测的某些方面，当使用不同传感原理的几种方法时，一些测试结果之间存在一些矛盾。

因此，比较实验室中常用的抗核抗体检测方法在临床上非常重要[3]。

IIF方法广泛应用于各种临床实验室，但在临床应用中存在缺陷。

IIF需要有经验的工程师来确定荧光模型。

抗体之间的干扰会导致荧光掩蔽或多个荧光模型的重叠。

肉类解读的结果在很大程度上取决于观众的体验能力。

ANAS特异性抗体的测试侧基于可回收抗原的特定测试侧，该可回收抗原可针对特定类型提取。

理论上它是最可靠的实验室诊断方法。

抗核抗体检测程序
一、操作步骤：
1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。

2、将标本对应微孔按顺序编号。

3、滴入2滴试剂一（洗涤液）于反应板中央孔中，待完全渗入。

4、滴入100ul血清于反应板孔中待完全渗入。

5、滴加3滴试剂二（金标液）于反应板孔中，待完全渗入。

6、滴入三滴试剂一于反应板孔中，待完全渗入。

二、结果判断
阳性：反应板孔中央出现2个红色圆斑，为阳性。

阴性：反应板孔中央出现1个红色圆斑，为阴性。

三、注意事项：
1、若遇冬天室内温度较低时（16度左右），可在37度水浴箱内操作。

2、陈旧血清盒高脂血症血清一般不宜使用。

3、如果质控斑点太浅请多加2滴试剂2。

若膜的
背景较深，可多滴几滴试剂2。

若膜的背景较深，可多滴加几滴试剂1充分洗涤。

阳性斑点较弱时，可延长至20分钟观察结果。

4、检测一旦开始操作，应按操作步骤连续进行，直至结束。

抗核抗体组合(新3)检查内容全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：抗核抗体组合(新3)检查是一种用于检测人体免疫系统中的抗核抗体水平的检测项目。

抗核抗体是一类针对细胞核内成分的抗体，其存在可以反映出人体免疫系统的异常情况。

这项检查主要用于辅助诊断自身免疫性疾病、风湿免疫性疾病、系统性红斑狼疮等疾病，并且可以帮助医生评估疾病的严重程度和预后。

本文将介绍抗核抗体组合(新3)检查的内容、意义、操作方法以及注意事项。

一、检查内容抗核抗体组合(新3)检查主要包括以下几个方面的内容：1. 抗核抗体(ANA)检测：ANA是一种特异性抗体，主要反应人体免疫系统对细胞核内成分的异常免疫反应。

阳性结果可能提示自身免疫性疾病的存在。

2. 抗双链DNA抗体（anti-dsDNA）检测：抗双链DNA抗体是一种特异性抗体，其阳性结果常见于系统性红斑狼疮等风湿免疫性疾病患者。

3. 抗核RNP抗体（anti-RNP）检测：抗核RNP抗体是一种特异性抗体，其阳性结果可能提示结缔组织病等自身免疫性疾病的存在。

二、检查意义抗核抗体组合(新3)检查的结果可以帮助医生进行以下方面的判断：1. 辅助诊断自身免疫性疾病：抗核抗体组合检查是自身免疫性疾病的辅助诊断手段之一，对于系统性红斑狼疮、风湿关节炎等疾病的诊断具有重要意义。

2. 评估疾病的严重程度：抗核抗体组合检查结果可以帮助医生评估疾病的活跃程度和严重程度，指导治疗方案的制定。

3. 预测疾病的预后：阳性的抗核抗体组合检查结果可能提示疾病的预后不佳，需要进行及时干预和治疗。

三、检查操作方法进行抗核抗体组合(新3)检查时，需要注意以下操作方法：1. 采血：医生将利用针头采集患者的静脉血进行检测。

2. 送检：采集的血样将被送往实验室进行检测，检测结果将在数天内出具。

3. 诊断：医生将根据实验室检测结果对患者进行诊断，制定相应的治疗计划。

四、注意事项进行抗核抗体组合(新3)检查时，需要注意以下事项：1. 遵医嘱：在进行检查前应咨询医生，根据医生的指导进行相关检查。

抗核抗体谱（IgG）检测对自身免疫性疾病的诊断价值自身免疫性疾病是一类疾病，其发病机制是机体免疫系统失调，导致自身抗原（又称自身抗体）诱导T细胞和B细胞对自身组织器官产生异常的免疫反应，进而引起炎症和破坏。

自身免疫性疾病包括多种疾病，如系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿关节炎（RA）、硬皮病（SSc）、系统性硬化症（SD）、淋巴细胞神经病（LNB）等。

对于这些疾病的诊断和鉴别诊断十分重要。

抗核抗体谱（IgG）检测是一种常用的检测方法，通过检测患者血清中的抗核抗体谱水平，可以帮助医生进行自身免疫性疾病的诊断和鉴别诊断。

本文将详细探讨抗核抗体谱（IgG）检测对自身免疫性疾病的诊断价值。

一、抗核抗体谱（IgG）检测的基本原理抗核抗体谱（IgG）是指一组抗体，这些抗体对核内抗原或核质蛋白等具有特异性，通过检测这些抗体的水平可以了解患者的自身免疫疾病情况。

抗核抗体谱（IgG）检测通常采用ELISA法，通过对患者血清中的抗核抗体进行定量和定性的检测，可以获得患者的抗核抗体谱水平和抗体的种类。

目前，抗核抗体谱（IgG）检测已经成为自身免疫性疾病的诊断和鉴别诊断的一个重要辅助手段。

1. 系统性红斑狼疮（SLE）系统性红斑狼疮是一种慢性自身免疫性疾病，其临床表现多种多样，包括关节痛、皮疹、贫血、肾脏受累等。

抗核抗体谱（IgG）检测在SLE的诊断中非常具有重要的价值。

研究表明，SLE患者血清中的抗核抗体谱水平通常较高，而且形式多样，包括ds-DNA抗体、Sm抗体、RNP抗体、SSA抗体和SSB抗体等。

通过检测患者血清中这些抗体的水平，可以帮助医生进行SLE的早期诊断和鉴别诊断。

2. 类风湿关节炎（RA）3. 硬皮病（SSc）硬皮病是一种少见的自身免疫性疾病，其主要表现是皮肤硬化、器官纤维化等。

抗核抗体谱（IgG）检测在硬皮病的诊断和鉴别诊断中也起着重要作用。

研究发现，硬皮病患者血清中的抗核抗体谱水平与疾病的严重程度呈正相关。

间接免疫荧光法检测抗核抗体（ANA）标准操作程序1.检测信息2.检测原理如果标本阳性，在第一次温育时，已稀释血清中的特异性IgG、IgA和IgM抗体与固定在载片上生物薄片中的HEP-2细胞和灵长类肝脏反应；在第二步，这些抗体与荧光素标记的抗人抗体反应，然后在荧光显微镜下观察特异性的荧光模型。

3.样本要求3.1病人准备事项3.2样本类型及处理方法4.试剂注意事项：开启所有试剂（包括校准品、标准品）需注明日期及签名。

每个试剂容器都需贴上写有以下内容的标签：启用日期、截至日期。

开启时应检查试剂是否变色，是否有肉眼可见的细菌生长迹象、浊度、沉淀反应等，这些表示已经变质或超过保质期。

5.仪器设备备注：“溯源方式”栏填写送较、自校、送检、自检、比对等。

6.质量控制6.1 质控方法：阳性和阴性对照为实验可靠性的内部对照，每次实验都必须做。

6.2 质控周期：阳性、阴性对照为实验可靠性的内部对照，每次实验都必须做。

阳性对照荧光滴度允许上下波动一个级别，荧光滴度波动超过一个级别，则为失控。

6.3 变异系数：本专业组不涉及此内容。

6.4 分析方法：与标本同样检测。

6.5失控处理:6.5.1失控原因分析：失控有多种因素的影响，这些因素包括样本稀释比率错误，荧光素加错，受强光照射引起荧光粹灭等。

6.5.2 任何因素引起的失控都必须重新检测标本。

6.5.3 失控情况处理：操作者在测定质控时，如发现失控，上报专业组主管（组长），并协助专业组主管（组长）一同分析处理，记录失控及处理情况。

7.校准品/标准品本专业组不涉及此内容8.操作步骤8.1准备工作：为防止载片表面发生冷凝而破坏基质，只有当平衡至室温后，方可打开包装袋。

用记号笔作上标记，不要触及生物薄片。

打开保护袋后，载片须在15分钟内进行温育。

不要用外包装袋破损的载片。

8.2标本稀释：用PBS-吐温缓冲液1：100稀释，取10.1μL血清用1.0mLPBS-吐温缓冲液稀释混匀。

抗核抗体检测原理抗核抗体是指针对细胞核内物质（包括核糖体、线粒体等）的自身免疫抗体。

抗核抗体检测在临床上广泛应用于风湿免疫系统疾病的诊断和鉴别诊断。

抗核抗体检测原理主要是通过ELISA或间接免疫荧光法等技术，检测患者血清中的自身免疫抗体与核抗原结合的情况，来判断是否存在自身免疫反应。

抗核抗体检测的方法有多种，本文将重点介绍ELISA和间接免疫荧光法。

一、ELISA法检测原理ELISA法是酶联免疫吸附试验，又称酶标法。

其检测原理基于抗原与特异性抗体的反应，在一个特定的底物上标记酶使其可定量测定。

ELISA法的具体操作步骤如下：1. 将核抗原制备成微孔板的包被抗原，加入标准物、阳性及阴性对照和待检血清。

2. 洗涤掉未结合物，加入人抗IgG酶标记物，形成抗体-抗原-酶复合物。

3. 清洗掉未结合的抗体，加入底物与显色剂，使酶与底物反应所生成的色素可量化。

4. 通过光密度计测定每个孔的发光程度，根据标准曲线计算出各样本抗体的浓度。

二、间接免疫荧光法检测原理间接免疫荧光法又称间接荧光抗体法，其检测原理是使用荧光标记的细胞核物质（如正常人淋巴细胞的核）作为抗原，检测待测血清中的自身抗体结合情况。

具体操作步骤如下：1. 将正常人淋巴细胞制成薄片，用甲醛固定，形成抗原。

2. 加入待检血清，其中若存在抗核抗体，会与抗原结合形成复合物。

3. 再加入荧光标记的抗人IgG抗体，以荧光染色，并进行显微镜观察。

4. 观察样本的荧光染色程度、荧光颗粒的类型和形态、分布情况等，以判断是否存在抗核抗体的阳性反应或抗核抗体水平的高低。

三、应用抗核抗体检测可以用于如系统性红斑狼疮、硬皮病、混合型结缔组织病等自身免疫性疾病的诊断和鉴别诊断。

对于一些具有高度特异性的抗核抗体或特定细胞核抗原，如抗ds-DNA（双链DNA）抗体，根据抗体阳性水平还可以预测某一个病人的病情的严重程度和治疗效果。

高滴度抗核抗体可预示病情活动度高，反之即预示病情不活跃，治疗效果好等。

抗核抗体谱检测（免疫印迹法）1 目的熟悉自身免疫性疾病抗核抗体谱检测标准操作规程，以便于更加规范化的操作，提高免疫检验质量，保证结果的准确性。

2 适用范围适用于免疫室内自身免疫性疾病抗核抗体谱检测3 职责检验科主任负责组织人员制定自身免疫性疾病抗核抗体谱检测标准操作程序，免疫室组长负责组织人员具体实施。

4 该SOP变动程序本标准程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，，并报经下述人员批准签字：专业组长、科主任。

5原理该欧蒙印迹法试剂盒用于体外定性检测血清或血浆中的人抗nRNP、Sm、SS-A（天然SS-A 和Ro-52）、SS-B、Scl-70、PM-Scl、Jo-1、CENP B、PCNA、dsDNA、核小体、组蛋白、核糖体P蛋白和AMA M2等14种不同抗原IgG类抗体。

实验膜条上平行包被了这些高度纯化的抗原。

在第一次温育时，已稀释的血清与实验膜条反应。

如果标本阳性，特异性的IgG（也包括IgA和IgM）与相应抗原结合。

为检测已结合的抗体，加入酶标抗人IgG（酶结合物）进行第二次温育，然后加入酶底物，以产生可观察的颜色反应。

6标本采集及实验标本要求采取静脉血2-3ml，待分离血清后，离心（1500-3000转/分）15分钟，待测。

随机静脉血2ml，分离血清备用。

也可使用EDTA、肝素或柠檬酸盐抗凝血浆。

稳定性：标本宜新鲜，无污染，避免溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。

7标本存放：待检患者标本于2-8 C可稳定14天，稀释后的标本应在同一个工作日内检测。

8标本运输：2-8℃密闭运输。

9标本拒收条件：蛋白变性标本，标本中含有颗粒物质，细菌污染，严重溶血或脂血标本不能做测定。

10试剂附:nRNP/Sm：小牛和兔胸腺提取物，经亲和层析纯化的天然U1-nRNP。

Sm：牛脾脏和胸腺提取物，经亲和层析纯化的天然Sm。

SS-A：牛脾脏和胸腺提取物，经亲和层析纯化的天然SS-A。

Ro-52：重组的Ro-52（52kDa），相应的人cDNA用杆状病毒系统在昆虫细胞中表达。

抗核抗体常用检测方法我折腾了好久抗核抗体检测方法这事儿，总算找到点门道。

说实话，一开始我完全是瞎摸索的。

我先接触到的是间接免疫荧光法，那时候我就想，这方法听起来就很复杂。

就好像在一个黑暗的大房子里找特定颜色的小珠子，房子里还有很多干扰的东西。

具体操作的时候，要先把细胞固定在载玻片上，这就相当于先给珠子确定一个活动范围呗。

然后加上患者血清，如果患者体内有抗核抗体，就像对应的钥匙来开锁一样，会和细胞里的抗原结合。

再加上荧光标记的二抗，你可以想象这是一个带信号灯的小助手，能让我们在显微镜下看到有没有结合反应。

但是这里面的坑可不少呢。

比如说血清的稀释比例，我一开始完全没概念，就随便弄，结果得到的数据乱七八糟的。

后来我发现这个稀释比例得好好研究，参考以前的文献或者根据实验室的标准来，不然要么阳性看不到，要么全是假阳性。

之后我又试了酶联免疫吸附测定法（ELISA）。

这方法有点像在一排小格子里，一个一个排查宝藏。

把已知抗原包被在酶标板上，然后加入患者血清。

这时候，如果有抗体存在，就跟间接免疫荧光法里一样，它就会结合。

不过是通过酶的底物显色来判断。

这里有一点要小心，就是洗板环节，洗不干净就容易出问题，就跟洗碗似的，要是洗不干净就会有残留油渍（也就是杂质）干扰结果。

我还听说有免疫印迹法，但我还没怎么深入去研究过，只是大概了解这是像把不同的东西都摆在一条线上来检查的一种手段。

不过相比我前面做过的两种方法，感觉操作起来可能会更复杂一些。

总之呀，抗核抗体检测这事儿呢，不能心急，要多做几次找到最适合的条件。

在实验室里摸爬滚打好久，我才渐渐明白了这些方法里的弯弯绕绕。

不管是哪种方法，都得仔细谨慎，避免那些容易出错的小细节。

抗核抗体谱(IgG)检测标准操作规程1.目的规范抗核抗体谱(IgG)检测，保证结果的准确性。

2.适用范围检验科免疫组工作人员。

3.试剂规格名称与组成型号名称：ANA 谱 1靶抗原：nRNP/Sm，Sm，SS-A，Ro-52，SS-B，Scl-70，Jo-1，CENP B，dsDNA，核小体，组蛋白，核糖体 P 蛋白类型：IgG基质：抗原包被的检测膜条规格：16×01(16)4.预期用途：用于体外定性检测人血清或血浆中的抗 nRNP、Sm、SS-A（天然 SS-A 和 Ro-52）、SS-B、Scl-70、PM-Scl、Jo-1、CENP B、PCNA、dsDNA、核小体、组蛋白、核糖体P 蛋白和 AMA M2 共 14 种不同抗原 IgG 类抗体。

5.适应症：夏普综合征（MCTD），系统性红斑狼疮（SLE），干燥综合征，进行性系统性硬化症，多肌炎皮肌炎、重叠综合征、局限型进行性系统性硬化症（CREST 综合征），原发性胆汁性肝硬化。

6.临床意义：抗核抗体识别是各种细胞核组分（细胞核的生化成份）[1,2]，包含核酸、细胞核蛋白及核糖蛋白。

可特征性地出现于许多疾病中，尤其是风湿性疾病[3,4,5]。

在炎症性风湿性疾病中，这些抗核抗体的阳性率在 20%到 100%之间，以风湿性关节炎的阳性率最低，在 20%至40%之间。

因此，ANA 鉴别诊断在对个别风湿疾病的确认十分必要，而且对自身免疫性疾病的进一步诊断也很有价值。

[3,6,7,8,9,10,11]风湿疾病—夏普综合征（混合结缔组织病＝MCTD)[8]—系统性红斑狼疮（SLE)[8, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22]—干燥综合征（原发性干燥综合征）[5],—系统性硬化症（系统性硬皮病,SSc)[1, 23],—局限型系统性硬化症（CREST 综合征） [28]—多肌炎/皮肌炎[12,15]—类风湿性关节炎[5]7.主要组成成分：8.储存条件及有效期： 2-8°C 保存，不要冷冻。

酶标法普通光学显微镜可有效检测抗核抗体酶标法普通光学显微镜可有效检测抗核抗体抗核抗体ANA(AntinuclearAntibody)筛查是结缔组织病,系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫性疾病的常规检测手段.ANA是一个统称,通常是指抗各种细胞核成分的抗体.ANA的性质主要为IgG,也有IgM,IgA和IgD,它们无器官和种属特异性,即该类抗体可以和所有动物’的细胞核发生反应;因此理论上说来,玻片基质上包被有任何真核的细胞均可与检体中的抗体反应,经典的ANA检测手段——间接荧光免疫标记法(IIF)均可检测到相应的抗体;但因不同细胞的核抗原表达量不同,因此临床检测中的检测灵敏度有很大差异,如与传统的基于鼠肾基质检测PSS(progressivesystemsclero.sis)相比,有丝分裂状态的人上皮样细胞(humanepithelioidcells,HEp一2)检测具有更高的灵敏度,可获得更清晰的识别模式.新的抗原基质的不断出现为特征模式的判读提供了更加方便清晰的图象,Hep一2000细胞即是一种经HEp一2转染的有丝分裂状态的细胞:HEp一2cells+特异的DNA序列=HEp一2000cells(转染细胞)这些特异的DNA序列中承载着SSA(Ro)抗原序列,约有10%～20%的转染细胞表达这种抗原;因此以过度表达SSA(Ro)抗原的转染细胞为基质检测检体中的相应抗体与以HEp一2细胞为基质相比更有效.基质细胞的不同有丝分裂状态有助于特异着色模式(distinctivestainingpatterm)的识别.抗SSA(Ro)抗体是干燥综合征(SS)患者最常见的自身抗体,部分SLE患者中亦可检出该抗体,即Hep一2000ANA免疫荧光检测系统/免疫酶标检测系统在进行ANA筛查的同时能够进行抗SSA(Ro)抗体的检测,且不影响或模糊其他ANA抗体的荧光/着色模式.随着基质的日趋改进,检测方法的改进使ANA检测的成本亦趋于降低.酶标法检测ANA的基本原理与荧光法基本相同,只是所标记的信号改为酶标记;在酶的作用下,相应颜色试剂显色,从而直接通过普通光学显微镜观察图象.以IIF为标准,对荧光标记和酶标记两种方法的图象加以分析比较;如果结果为阳性,表明抗原一抗体一荧光素/酶三者结合在一起,这种复合物可在荧光显微镜/普通光学显微镜下观察到位于细胞核内的苹果绿的特殊染色模式/蓝紫色染色模式;如果结果为阴性,则不呈现这种特殊模式.ANA的阳性模式主要为四种:Nucleolarpattern(核仁型),HomogeneousPat-tern(均质型),SpeckledPattern(斑点型),Centro. merePatternPenipheralPattern(外围型)o实验所得的阳性特征模式证实酶标法与荧光法具有高度的一致性,即酶标法同样可观察到清晰的特征模式.在临床应用中,荧光染色需配置价格较昂贵的荧光显微镜,成为其临床广泛应用的一大障碍;酶标法染色的玻片可在普通光学显微镜下观察图象,且所制玻片可长期保存,无荧光淬灭问题,便于结果的回顾性分析.应用IIF作为ANA检测的”金标准(goldstandard)已有数十年的历史,在临床检测中积累了丰富的数据资料,可为临床相关疾病的国外医学情报oo∞\国诊断治疗及预后判断提供客观和有力的实验支持,因此作为临床检测ANA的经典试验有着不可替代的位置.但V.Anuradha等人开展的一项研究应用荧光标记和酶标记两种方法对系统性红斑狼疮(SLE),类风湿性关节炎(RA),健康对照者(Hc)和其他结缔组织病(OCTD)分组的样本进行检测,结果发现RA组的酶标法ANA阳性检出率明显低于荧光法,其他组的结果大致吻合.另一项研究表明酶研究进展FOREIGNMEDICALINFORMA TION-V olume27-July2OO6 标法在阳性模式的判读上具有优势,所得的阳性模式图象与相应的荧光染色的阳性模式相比更清晰;因此临床更倾向于应用酶标染色法.鉴于酶标法检测的应用还处在初始阶段,相关的实验数据的判读与结果解释还需进一步的临床试验支持,目前临床可综合两种方法在方法学和实际应用中的具体情况而选择不同的方法.(刘巧俏编译,寒冰校)■蛋白酶抑制剂突变的数量和类型可决定病毒学反应来自于美国的研究人员报道说,通过检测HIV感染者的蛋白酶抑制剂(PI)突变的数量和类型可预测其对抗逆转录病毒药物的病毒学应答.美国食品药品管理局(FDA)的LisaK.Naeger博士认为,弄清HIV感染者中的抗逆转录病毒抗性是确定接受过抗逆转录病毒治疗的患者下一个最佳治疗方案的关键所在.Naeger博士及其同事KimberlyA.Struble在接受抗逆转录病毒治疗的患者中就基线蛋白酶基因型和显型对HIV应答阿托那韦(atazanavir)/利托那韦(ritonavir)的效果进行了评估;研究结果发表在近期的《艾滋病》杂志上.研究人员发现,在接受阿托那韦/利托那韦治疗且在PI抗性相关的位点出现M46,G73,I84或L90替代的患者中,病毒应答率低于30%;但D30N,M36I/V,V77I和N88S/D的存在不会影响患者对阿托那韦/利托那韦的病毒学应答.研究结果表明,当存在3种或4种蛋白酶抑制剂突变时,患者的反应率可由60%以上降至40%以下;在那些有5种或更多的基线蛋白酶抑制剂突变的患者中,不存在任何病毒学反应.研究人员对此强调指出,如果出现包括M36I,M46I/V/L或V82A/F/T/S的3种或3种以上的基线蛋白酶抑制剂突变,病毒学反应率可降至30%以下;如果出现包括G73S/A/c,I84V或LgOM在内的3种或更多的基线蛋白酶抑制剂突变,病毒学反应率则有可能低于20%.同样地,基线蛋白酶抑制剂显型可对病毒学反应率产生明显的影响.Naeger博士报道,在应用阿托那韦/利托那韦的本项研究中,基线蛋白酶抑制剂突变数量的增加可降低患者对阿托那韦/利托那韦的病毒学反应;而基线蛋白酶抑制剂显型高于5倍的对阿托那韦的易感性改变将导致病毒学反应降低.因此,临床医生可基于上述信息与患者HIV的基因型和/或显型来更好地决定对患者是否采用阿托那韦/利托那韦治疗方案.(古月编译)■国外医学情报000\圆。

抗核抗体检测程序
一、操作步骤：
1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。

2、将标本对应微孔按顺序编号。

3、滴入2滴试剂一（洗涤液）于反应板中央孔中，待完全渗入。

4、滴入100ul血清于反应板孔中待完全渗入。

5、滴加3滴试剂二（金标液）于反应板孔中，待完全渗入。

6、滴入三滴试剂一于反应板孔中，待完全渗入。

二、结果判断
阳性：反应板孔中央出现2个红色圆斑，为阳性。

阴性：反应板孔中央出现1个红色圆斑，为阴性。

三、注意事项：
1、若遇冬天室内温度较低时（16度左右），可在37度水浴箱内操作。

2、陈旧血清盒高脂血症血清一般不宜使用。

3、如果质控斑点太浅请多加2滴试剂2。

若膜的
背景较深，可多滴几滴试剂2。

若膜的背景较深，可多滴加几滴试剂1充分洗涤。

阳性斑点较弱时，可延长至20分钟观察结果。

4、检测一旦开始操作，应按操作步骤连续进行，直至结束。

检测抗核抗体常用的方法有：
放射免疫法。

常用于检测抗DNA抗体，有Farr法及过滤法。

间接ELISA法。

临床上主要是应用间接ELISA检测抗dsDNA抗体，其重复性及敏感性均较对流免疫电泳及双扩散为高。

抗核抗体检查是通过抽取患者的血清来进行检测，通过患者的抗体和血清综合，以最后的检查筛选结果为准，其中DNA抗体检测能够有效的检查体内抗细胞核酸和抗蛋白抗体，ENA 抗体包括sm抗体、抗ssa、抗ssb抗体等，每个患者的体质不同，最后的指标特异性也不太一样，最后还要结合患者的具体症状进行分析和诊断病情。