西格玛DMSO细胞级

基金项目：福建省自然科学基金项目（编号：２０２０Ｊ０１７９１，２０２２Ｊ０１１１０９）；福建省海洋藻类活性物质制备与功能开发重点实验室开放课题（编号：２０２０ＦＺＳＫ０４）；国家级大学生创新创业训练计划项目（编号：２０２２１０３９９００３）作者简介：方佳琪，女，泉州师范学院在读本科生。

通信作者：王芳（１９６９—），女，泉州师范学院教授，硕士生导师，博士。

Ｅ ｍａｉｌ：ｄｗｆ３２０＠１６３．ｃｏｍ收稿日期：２０２２ ０３ ０５ 改回日期：２０２２ １１ ２３犇犗犐：１０．１３６５２／犼．狊狆犼狓．１００３．５７８８．２０２２．９０２４８［文章编号］１００３ ５７８８（２０２３）０３ ０１１４ ０８一种多金属氧酸盐对多酚氧化酶的抑制活性评价及在南美白对虾保鲜上的应用Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙｏｆａｐｏｌｙｏｘｏｍｅｔａｌｌａｔｅｏｎｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｏｘｉｄａｓｅａｎｄｉｔｓａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆ犔犻狋狅狆犲狀犪犲狌狊狏犪狀狀犪犿犲犻方佳琪１，２犉犃犖犌犑犻犪 狇犻１，２韩　情１，２犎犃犖犙犻狀犵１，２马阳瑜１，２犕犃犢犪狀犵 狔狌１，２　王　芳１，２犠犃犖犌犉犪狀犵１，２李莉莉３犔犐犔犻 犾犻３　李文杰１，４犔犐犠犲狀 犼犻犲１，４　王　力１，３犠犃犖犌犔犻１，３（１．福建省海洋藻类活性物质制备与功能开发重点实验室，福建泉州　３６２０００；２．泉州师范学院海洋与食品学院，福建泉州　３６２０００；３．集美大学海洋食品与生物工程学院，福建厦门　３６１０２１；４．泉州师范学院化工与材料学院，福建泉州　３６２０００）（１．犉狌犼犻犪狀犘狉狅狏犻狀犮犲犓犲狔犔犪犫狅狉犪狋狅狉狔犳狅狉狋犺犲犇犲狏犲犾狅狆犿犲狀狋狅犳犅犻狅犪犮狋犻狏犲犕犪狋犲狉犻犪犾犳狉狅犿犕犪狉犻狀犲犃犾犵犪犲，犙狌犪狀狕犺狅狌，犉狌犼犻犪狀３６２０００，犆犺犻狀犪；２．犆狅犾犾犲犵犲狅犳犗犮犲犪狀狅犾狅犵狔犪狀犱犉狅狅犱犛犮犻犲狀犮犲，犙狌犪狀狕犺狅狌犖狅狉犿犪犾犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔，犙狌犪狀狕犺狅狌，犉狌犼犻犪狀３６２０００，犆犺犻狀犪；３．犆狅犾犾犲犵犲狅犳犗犮犲犪狀犉狅狅犱犪狀犱犅犻狅犾狅犵犻犮狅犾犈狀犵犻狀犲犲狉犻狀犵，犑犻犿犲犻犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔，犡犻犪犿犲狀，犉狌犼犻犪狀３６１０２１，犆犺犻狀犪；４．犆狅犾犾犲犵犲狅犳犆犺犲犿犻犮犪犾犈狀犵犻狀犲犲狉犻狀犵犪狀犱犕犪狋犲狉犻犪犾狊，犙狌犪狀狕犺狅狌犖狅狉犿犪犾犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔，犙狌犪狀狕犺狅狌，犉狌犼犻犪狀３６２０００，犆犺犻狀犪）摘要：目的：研究新型多酚氧化酶抑制剂对南美白对虾的保鲜效果。

4类重庆柑橘乙醇提取物类黄酮分析及其体内外抗氧化评价[目的]研究4類重庆柑橘乙醇提取物的类黄酮成分及其体内外抗氧化活性。

[方法]以4种重庆产区柑橘果实（梁平柚、奉节脐橙、万州大红袍红橘和潼南尤力克柠檬）为研究材料，利用Xevo G2-S Qtof高分辨四级杆飞行时间质谱仪中的超高效液相色谱仪（Ultra-performance liquid chromatography with a photodiode array detector，UPLC-PDA）对柑橘果皮和果肉的乙醇提取物中主要的10种类黄酮（橙皮苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、地奥司明、橘皮素、川陈皮素、圣草次苷、甜橙黄酮、异橙黄酮和山柰酚）进行了定性和定量分析，并用3种体外抗氧化测定方法（DPPH、ABTS、FRAP）评价柑橘果实乙醇提取物的抗氧化活性。

同时，以酿酒酵母BY4742菌株为试验模型，检测用低、中、高浓度的4类柑橘果实乙醇提取物处理后酵母菌胞内活性氧（Reactive oxygen species，ROS）含量。

[结果]不同柑橘、同种柑橘不同部位的类黄酮种类和含量都存在差异。

总体而言，柑橘果皮类黄酮物质的种类与总含量高于果肉，果皮提取物的内外抗氧化能力高于果肉提取物。

其中，梁平柚果实中含量最高的是柚皮苷，奉节脐橙、万州大红袍红橘和潼南尤力克柠檬果实提取物中含量较高的是橙皮苷。

此外，圣草次苷大量存在于潼南尤力克柠檬果实中，川陈皮素大量存在于万州大红袍红橘中，芸香柚皮苷大量存在于奉节脐橙中，山柰酚主要分布于梁平柚果皮中，地奥司明主要分布于柠檬和柚子的果肉中。

[结论]奉节脐橙具有较好的营养价值。

与其他3种柑橘果肉相比，奉节脐橙果肉含有最高的类黄酮含量、综合抗氧化活性和较高的活性氧清除能力。

我国是柑橘属植物最重要的起源地，拥有丰富的柑橘资源[1-2]。

柑橘作为类黄酮含量丰富的水果之一，具有重要的的营养、保健、医学和经济价值[3-5]。

目前已从柑橘中鉴定出超过60种类黄酮物质，主要是黄烷酮类、黄酮、黄酮醇和花色苷[6]，其具有重要的抗氧化活性[7]。

网络出版时间：２０２３－０７－２５１１：５３：２１　网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｌｉｎｋ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｕｒｌｉｄ／３４．１０８６．Ｒ．２０２３０７２４．１３４５．０５２◇实验方法学◇荧光探针法检测脏器硫化氢方法的建立及验证李　娜１，２，樊修和１，王　征１，胡　伟１，杨浩东１，熊洋洋１，于金高１，２（陕西中医药大学１．陕西中药资源产业化省部共建协同创新中心，秦药特色资源研究开发国家重点实验室（培育），陕西省创新药物研究中心，２．陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室，陕西咸阳　７１２０４６）收稿日期：２０２３－０１－１１，修回日期：２０２３－０４－１０基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８２００３９６４）；陕西中医药大学校级科研课题（ＮｏＣＸＳＪ２０２３３４）作者简介：李　娜（１９９６－），女，硕士生，研究方向：药物作用及机制，Ｅ ｍａｉｌ：ｌｎｓｈ０２１６＠１６３．ｃｏｍ；于金高（１９８９－），男，博士，副教授，硕士生导师，研究方向：药物相互作用及其毒效转化，通信作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｊｉｎｇａｏ＿ｙｕ＠ｓｉｎａ．ｃｎｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２２１０００７文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２３）０８－１５９２－０７中国图书分类号：Ｒ ３３２；Ｒ１９４．３；Ｒ３９４；Ｒ７３；Ｒ９８１．９摘要：目的　快速制备并分离纯化硫化氢特异性荧光探针（ＷａｓｈｉｎｇｔｏｎＳｔａｔｅＰｒｏｂｅ ５），建立动物组织中硫化氢的荧光探针测定法，并在癌性胸水模型中进行方法适用性验证。

方法　优化条件分离纯化ＷＳＰ ５；对荧光探针反应液配制溶剂、ＤＭＳＯ加入体积、ｐＨ、反应液溶剂和反应液体积、样品前处理温度、研磨次数、研磨后静置时间等条件进行考察；以Ｓ １８０腹水瘤细胞建立癌性胸水小鼠模型，测定小鼠各脏器中的硫化氢含量。

结果　以硅胶和葡聚糖凝胶为固定相，二氯甲烷－甲醇－甲酸（６０∶１∶０ １，Ｖ／Ｖ／Ｖ）和二氯甲烷－甲醇（１∶１，Ｖ／Ｖ）为洗脱剂制备ＷＳＰ ５纯品；动物组织样本和硫氢化钠标准溶液加入优化后的５倍量冰冷反应液，低温研磨、高速离心，上清液避光孵育１２ｈ，测定荧光强度并计算硫化氢浓度；该方法检测限约０ ６μｍｏｌ·Ｌ－１，定量限１μｍｏｌ·Ｌ－１，在硫氢化钠一定浓度范围内，浓度与荧光强度线性系数均大于０９９；在癌性胸水小鼠模型中，各脏器硫化氢含量随着注射癌细胞数量的增多均有不同程度的增加趋势。

二甲基亚砜科技名词定义中文名称：二甲基亚砜英文名称：dimethyl sulfoxide;DMSO定义：一种氢键破坏剂。

因其抗冻作用，可用于细胞的冻存；因其对大分子的变性作用，用于变性凝胶电泳等。

所属学科：生物化学与分子生物学（一级学科）；方法与技术（二级学科）本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布百科名片二甲基亚砜（Dimethyl sulfoxide或DMSO），无色液体，重要的极性非质子溶剂。

它可与许多有机溶剂及水互溶。

二甲基亚砜具有极易渗透皮肤的特殊性质，造成使用人员感觉类似牡蛎般的味道。

[编辑本段]基本资料结构式产品名称：二甲基亚砜结构简式：(CH3)2-S-O英文名：Dimethyl sulfoxide别名：Dimethylsulfoxide; Methyl sulfoxide; Sulfinylbis (methane); DMSO 分子式：C2H6OS分子量：78.12CAS：登录号67-68-5EINECS：登录号200-664-3FEMA：登录号3875物理化学性质密度：1.1熔点：18.4-19.0°C沸点：189°C折射率：1.477-1.48闪点：95°C[编辑本段]简介二甲基亚砜（DMSO）是一种含硫有机化合物，分子式为（CH3）2SO，常温下为无色无臭的透明液体，具有吸湿性的可燃液体，既有高极性，高沸点，非质子，于水混溶的特性，毒性极低，热稳定性好，能溶于乙醇，丙醇，苯和氯仿等大多数有机物，被誉为“万能溶剂”。

二甲基亚砜广泛用作溶剂和反应试剂，特别是丙烯腈聚合反应中作加工溶剂和抽丝溶剂，作聚氨酯合成及抽丝溶剂，作聚酰胺，聚酰亚胺和聚砜树脂的合成溶剂，以及芳烃，丁二烯抽提溶剂和合成氯氟苯胺的溶剂等。

除此之外，在医药工业中二甲基亚砜还有直接用作某些药物的原料及载体。

二甲基亚砜本身有消炎止痛，利尿，镇静等作用，亦誉为“万灵药”，常作为止痛药物的活性组分添加于药物之中。

。临床用于治疗上呼吸道感
染、 肺炎、 流感等多种发热症, 是一疗效较好的解表退 热药。随着柴胡注射液在临床上的广泛应用, 也发现 了一些不良反应, 常见的有过敏性休克、 过敏性反应 等 。而药品不良反应与细胞毒性具有一定相关性。 本文比较了 6 个厂家 32批柴胡注射液的细胞毒性, 并 就其细胞毒性与聚山梨酯 80的相关性进行了研究。 1 材料与仪器 6 个不同厂家 32 批柴胡注射液 ; L - 929 细胞 ,
比稀释后与 L929 细胞接触培养 , 通过倒置显微镜观察其形态 , 采用 MTT ( 四唑 盐 ) 法 量化细胞 毒性 , 计算相对增 殖率 ( RGR ), 并对其细胞毒性与聚山 梨酯 80 含量相关性进行研究。 结果 : 6 个不同厂家 32 批柴胡注射液中 , 聚山梨酯 80 含量大 于 2 m g mL- 1的 25 批样品 , 无明显细胞毒性的稀释倍数为 4~ 16 倍以上 ; 聚山梨酯 80 含量 小于 1 mg mL - 1 的 7 批 样品 , 无 明显细胞 毒性的稀释倍数为 2~ 8 倍。 结论 : 柴胡注射液体外细胞毒性与聚山梨 酯 80 含量呈正相关。 关键词 : 柴胡注射液 ; 细胞毒性 ; 聚山梨酯 80; MTT 法 中图分类号 : R 917 文献标识码 : A 文章编号 : 0254- 1793( 2010) 09- 1809- 04
Abstract Objective : T o in vest ig ate the cy totox ic ity in vitro of Radix Bupleuri injectio n and exp lo re the prin ciple in order to prov id e references for the security eva lu ation of trad itional Ch in ese m edic in e in jection . M ethod s : L929 cells w ere in cubated w ith Rad ix Bup leuri in jection of vario us concentrations , and cell for m w as observed by inverted phase contrast m icroscope. C ytotox icity w as exam ined by MTT test and RGR w as ca lcutated to stu dy the corre lation betw een the cy totox ic ity and the concentration of Po lysorbate 80 . Resu lts : No obv ious cytotoxcity exsited in R adix Bupleuri in ject io n dilu ted 4 to 16 ti m es w hen the concentration of Po lysorbate 80 w as above 2 m g

KLF4的SUMO化修饰促进IL4诱导巨噬细胞向M2型极化目录一、摘要：．．1(一)中文摘要．1(二)英文摘要．4二、正文7(一)前言．7(二)材料和方法．8(三)结果．．23(四)讨论．．35(五)结论．．37(六)参考文献．．38三、综述．．43(一)综述43(二)参考文献．．48四、读学位期间发表文章情况54五、致谢．．55万方数据大连医科大学硕士学位论文KLF4的SUMO化修饰促进I L-4诱导巨噬细胞向M2型极化硕士研究生姓名：王克洲指导教师：邢嵘教授程金科研究员蔡蓉副教授专业名称：病理学与病理生理学摘要目的与背景到目前为止，在哺乳动物中，KLFs(KrUppel—like factors)家族已经有十七个成员被鉴定出来，它们均属于DNA结合蛋白中的锌指结构家族，故具有转录活性。

KLFs通过其锌指结构结合到DNA上的CACCC元件和GC丰富区域，发挥转录激活或转录抑制的生物学功能，并由此广泛参与细胞增殖、分化、发育、迁移、炎症、凋亡等生命活动过程。

KLF4作为该家族中重要的一员，在细胞的生长、分化以及凋亡等生物学功能中具有十分重要的作用。

SUMO(Small Ubiquitin—related Modifier Protein)化修饰是将SUMO小分子(SUM01／2／3，人中有SUM04，一种类泛素蛋白)共价结合到一系列底物蛋白上的一种翻译后修饰方式。

SUMO化修饰是一个动态且可逆的过程，通过特异性的E1 激活酶、E2结合酶、E3连接酶的特异性催化作用，将SUMO小分子共价结合在底物蛋白质特定的赖氨酸残基上，最终影响底物蛋白的生物学活性以及在细胞中的定位。

而其可逆反响(去SUMO化修饰)那么是由一类被称为SENPs(SUMO—specificproteases)的特异性蛋白酶来催化完成。

巨噬细胞是机体天然免疫中的重要组成局部，并且在炎症反响以及机体免疫抵抗中发挥着十分重要的作用。

由于单核一巨噬细胞系具有多样性以及可塑性等重要的特点，因此在组织中，单核一巨噬细胞可对不同的微环境会表现出不同的表型。

二甲双胍通过下调c-Myc增强人乳腺癌MDA-MB-231细胞对他莫昔芬的敏感性方雪娇;徐建昕;王思萱;龙露叶;管晨;钱诗菡;吕建新【摘要】目的:研究二甲双胍是否通过下调c-Myc增强人乳腺癌MDA-MB-231细胞对他莫昔芬的敏感性.方法:CCK-8法、平板集落形成实验、流式细胞术和Transwell实验检测二甲双胍和他莫替芬单独/联合作用对MDA-MB-231细胞活力、集落形成能力、肿瘤细胞凋亡率及迁移和侵袭能力的影响;Western blot和免疫组化实验检测细胞和肿瘤组织中c-Myc的表达水平;建立SCID小鼠MDA-MB-231细胞皮下移植瘤模型,以研究二甲双胍和他莫昔芬在体内对三阴性乳腺癌的影响.结果:与对照组和单独用药组相比,二甲双胍联合他莫昔芬协同抑制MDA-MB-231细胞的活力和迁移能力,对集落形成、凋亡诱导和侵袭能力表现为相加效应(P<0.01);二甲双胍和他莫昔芬单独或者联合下调c-Myc蛋白的水平(P<0.01).进一步研究表明,二甲双胍和他莫昔芬可能通过下调c-Myc抑制SCID小鼠皮下移植瘤的生长(P<0.01).结论:二甲双胍联合他莫昔芬通过下调c-Myc抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭以及SCID小鼠的肿瘤生长.二甲双胍联合他莫昔芬有望成为三阴性乳腺癌的一种有效的治疗手段.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2019(035)005【总页数】8页(P769-776)【关键词】二甲双胍;他莫昔芬;三阴性乳腺癌;c-Myc;敏感性【作者】方雪娇;徐建昕;王思萱;龙露叶;管晨;钱诗菡;吕建新【作者单位】温州医科大学检验医学院、生命科学学院, 浙江省医学遗传学重点实验室, 浙江温州 325035;温州医科大学检验医学院、生命科学学院, 浙江省医学遗传学重点实验室, 浙江温州 325035;温州医科大学检验医学院、生命科学学院, 浙江省医学遗传学重点实验室, 浙江温州 325035;温州医科大学检验医学院、生命科学学院, 浙江省医学遗传学重点实验室, 浙江温州 325035;温州医科大学检验医学院、生命科学学院, 浙江省医学遗传学重点实验室, 浙江温州 325035;温州医科大学检验医学院、生命科学学院, 浙江省医学遗传学重点实验室, 浙江温州 325035;温州医科大学检验医学院、生命科学学院, 浙江省医学遗传学重点实验室, 浙江温州 325035【正文语种】中文【中图分类】R737.9;R730.23大多数国家女性肿瘤患者中乳腺癌的诊断率和肿瘤相关死亡率均位居第1位。

细胞冻存过程中dmso的作用一、细胞冻存中DMSO的基础知识DMSO全名叫二甲基亚砜。

在细胞冻存的时候，它可是个相当重要的角色呢。

细胞在冻存的过程中，会面临很多危险，就像小细胞们在经历一场超级大冒险。

二、DMSO在细胞冻存中的具体作用1. 保护细胞免受冰晶伤害当我们把细胞放进低温环境冻存的时候，如果没有DMSO，细胞里的水就会形成冰晶。

这些冰晶就像一把把小刀子，会把细胞结构给割得乱七八糟的。

而DMSO能够降低细胞内的冰点，阻止冰晶的形成，就像给细胞穿上了一层柔软的防护铠甲，让细胞免受冰晶的伤害。

2. 维持细胞内外渗透压平衡细胞内外的渗透压得保持平衡才行，就像一个跷跷板，两边得一样重才稳定。

在冻存过程中，细胞周围的环境发生了很大的变化。

DMSO能够调节细胞内外的渗透压，让细胞不会因为渗透压的变化而过度失水或者吸水，这样细胞就能在冻存的过程中保持比较稳定的状态啦。

3. 促进细胞的渗透DMSO具有很强的渗透性，它能够帮助其他冻存液中的成分更好地进入细胞内部。

这就好比是打开了细胞的大门，让那些对细胞有益的东西能够顺利地进去，从而更好地保护细胞。

三、DMSO使用时的一些注意事项1. 浓度问题DMSO的浓度可不能随便乱加哦。

一般来说，在细胞冻存液中，DMSO的浓度在5% - 15%左右比较合适。

如果浓度太高，可能会对细胞产生毒性，就像给细胞吃了太多的毒药一样，细胞会受不了的；如果浓度太低呢，又起不到很好的保护作用，就像给细胞穿了一件破破烂烂的防护衣。

2. 操作过程中的防护DMSO具有一定的腐蚀性，我们在使用的时候得小心一点。

最好戴上手套，要是不小心沾到手上，会感觉皮肤有点不舒服的，就像被小虫子咬了一口似的。

而且在添加DMSO到冻存液中的时候，要在通风良好的地方进行，因为它的气味有点难闻，要是在封闭的空间里，那味道可不好受呢。

细胞生物学评价实验手册一、细胞培养技术（一）试剂制备1.l-dmem,h-dmem基础培养液将一袋l-dmem培养基（含10g粉末）或h-dmem培养基（含13.4g粉末）溶解于700ml超纯水中，称取2.2g碳酸氢钠，混匀，混匀至1000ml。

（调整pH值7.2-7.4）2.l-dmem,h-dmem完全培养液L-dmem基本培养基加入10%胎牛血清，0.22μM过滤灭菌，4℃保存。

3.25×pbs（储液）称取：50g氯化钠、1.25g氯化钾、18.1g磷酸氢二钠和1.56g磷酸二氢钠，加入约200ml水，充分溶解，定容至250ml（调节pH值7.2-7.4），室温保存。

4.1×pbs（工作液）取40ml25×PBS稀释25倍，即加入超纯水定容至1000ml，高温灭菌。

（调整pH值7.2-7.4）5.0.25％/0.02%胰酶/edta称取2.5G胰蛋白酶，将0.4gedta溶解在约900ml1×PBS中，搅拌并完全溶解后，4℃过夜。

第二天，调节pH值至7.2，定容至1000ml，0.22μM过滤器灭菌，4℃保存。

6.细胞冻存液L-dmem/h-dmem基本培养基、胎牛血清和DMSO按1:3:6的比例混合，过滤灭菌0.22μM。

7.成脂诱导液（1）脂肪诱导液(ai)h-dmem的最终浓度为1μMol/L地塞米松0.5mmol/libmx、100mmol/l吲哚美辛和10μg/ml牛胰岛素，0.22μm过滤器除菌，4℃保存。

（2）脂肪保持液(am)h-dmem的最终浓度为10μG/ml牛胰岛素，0.22μM过滤灭菌，4℃保存。

8.成骨细胞诱导液（os）l-dmem的最终浓度为0.1μMol/l地塞米松、10mmol/l甘油磷酸钠和50mg/ml维生素C，0.22μg在4℃下对过滤器进行消毒。

9.成软骨诱导培养液高糖DMEM+10NG/ml TGF-β3+50ng/mligf-1+20%fbs10。

细胞死亡与疾病三萜皂甙元(2α-oh-原人参二醇)通过肠道微生物改造，经由肠道FXRGLP-1轴改善代谢综合征摘要绞股蓝总皂甙是宜兴绞股蓝的提取物，传统上已被处方用于改善亚洲民间和当地传统医学医院的代谢综合症。

但是，其作用机理仍不清楚。

在这项工作中，我们的研究结果表明，长期施用体内绞股蓝皂苷的代谢物2α-OH-异丙醇（GP2）可保护小鼠免受高脂饮食诱导的肥胖的影响，并通过改善肠道L细胞功能改善糖耐量。

从机理上讲，GP2处理可抑制胆汁盐水解酶的酶促活性，并调节肠道菌群的比例，从而导致牛体内β-多酚酸（TβMCA）的积累增加。

TβMCA通过降低核受体法尼酯X受体（FXR）的转录活性来诱导GLP-1的产生和分泌。

将GP2重塑的粪便菌群移植到抗生素治疗的小鼠中也增加了肠道TβMCA含量并改善了肠道L 细胞功能。

这些发现表明，GP2通过肠道微生物群重塑至少部分地通过肠FXR / GLP-1轴改善了代谢综合征，并且还暗示GP2可以作为代谢综合征的有希望的口服治疗剂。

引言代谢综合症是由一系列营养性危险因素引起的慢性疾病，已成为全球范围内主要的公共卫生挑战1,2。

胰高血糖素样肽1（GLP-1）是一种有效的抗高血糖降血糖素激素，由肠L细胞产生并从其分泌，随后在食物摄入后增强胰岛β细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌。

最近，有证据表明，肥胖患者的肠道脂毒性和氧化应激会加速L细胞功能障碍的发生率4,5。

因此，改善肠道L细胞功能的策略可能对代谢综合征具有新的治疗潜力。

胆汁酸（BAs）与类固醇具有碳骨架，是由肝脏中的胆固醇合成的，并分泌到肠中，以促进膳食脂质和脂溶性维生素的吸收6-8。

肠道中超过95％的胆汁酸被吸收，剩余的5％进入结肠，在那里它们被修饰为仲胆汁酸9。

甘氨酸或牛磺酸缀合的一级BAs在肠道中被胆汁盐水解酶（BSH）快速解偶联，肠道微生物群尤其是拟杆菌，乳杆菌和梭状芽胞杆菌广泛表达这种细菌，这是肠道细菌广泛表达的10,11。

SIGMA-ALDRICH 化学品安全技术说明书版本号5.2修订日期02.07.2013打印日期23.12.2013 1. 化学品及企业标识1.1 产品标识符产品名称: 二甲基亚砜产品编号: D2650品牌: Sigma1.2 鉴别的其他方法DMSOMethyl sulfoxide1.3 有关的确定了的物质或混合物的用途和建议不适合的用途仅用于研发。

不作为药品、家庭或其它用途。

1.4 安全技术说明书提供者的详情制造商或供应商名称: Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co.,Ltd41F K. Wah Centrre1010 Huai Hai Zhong Road200031 SHANGHAICHINA西格玛奥德里奇（上海）贸易有限公司中国上海市淮海中路1010号嘉华中心41层邮政编码：200031电话号码: +86 21-61415566传真: +86 21-61415567电子邮件地址: china@1.5 应急电话紧急联系电话: +8621-614155602. 危险性概述2.1 GHS-分类易燃液体 (类别 4)2.2 GHS 标记要素，包括预防性的陈述象形图无警示词警告危险申明H227可燃液体警告申明预防措施P210远离热源、火花、明火和热表面。

- 禁止吸烟。

P280戴防护手套/穿防护服/戴护目镜/戴面罩.事故响应P370 + P378火灾时：用干的砂子，干的化学品或耐醇性的泡沫来灭火。

安全储存P403 + P235保持低温，存放于通风良好处。

废弃处置P501将内容物/ 容器处理到得到批准的废物处理厂。

2.3 其它危害物 -无3. 成分/组成信息3.1 物质别名: DMSOMethyl sulfoxide分子式: C2H6OS分子量: 78.13 g/mol无4. 急救措施4.1 必要的急救措施描述一般的建议请教医生。

向到现场的医生出示此安全技术说明书。

吸入如果吸入,请将患者移到新鲜空气处。

二甲基亚砜DMSO（细胞培养级别）产品描述：DMSO 属于非质子极性溶剂，常用于化学反应、PCR反应以及在细胞、组织和器官的保存中用作玻璃化低温冷冻防护剂。

DMSO用于细胞冷冻培养基内，可以保护细胞免受冰晶引起的机械性损伤。

它也可以用于主培养、亚培养、重组异倍体、杂交瘤等系列细胞株，胚胎干细胞（ESC）和造血干细胞的冷冻保藏。

另外常常与BSA或FBS混合使用用途：（1）DMSO广泛应用在人、动物细胞株及细菌噬菌体λ的低温防护中，制备DMSO溶液用来冷冻细胞的步骤如下：A. 配制冷冻培养基：含有细胞培养用培养基、10-20% 血清和5-10% DMSO；B. 用胰酶或其他合适的方法消化贴壁细胞；（细胞最好处于对数增长期）C. 低速离心（4 °C，250 × g, 10min）收集细胞，吸去培养基；D. 用冷冻培养基悬浮细胞，使细胞密度为106 -107 cells/ml；E. 平均分配细胞，装入冻存管内；F. 依照标准冻存程序冷冻细胞，冻存在-70 °C 或更低的温度内；（2）细胞融合时，40-50% PEG 溶液内加入10% DMSO；（3）有文献报道DMSO作为缓冲液的成分，用于以下的实验：Poly （A+）RNA 的纯化，E. coli感受态细胞转化、PCR反应、cDNA文库的扩增、DNA测序、DEAE-葡聚糖介导的细胞转染、聚凝胺介导的DNA转染；（4）有相应的程序描述到用DMSO回收膜过滤后的DNA，用于接下来的PCR扩增反应；（5）用于DNA测序的毛细管电泳技术将5% DMSO (v/w)混入 2 M尿素中，如果需要可以调整DMSO浓度到100%。

（6）有研究报道不同浓度的DMSO与寡核苷酸的熔点温度关系；（7）有研究描述利用DMSO提高杂交瘤细胞中单克隆抗体的产量；调查发现低温冷冻前用含有DMSO的培养基高温培养杂交瘤细胞。

（8）文献报道利用DMSO修饰蛋白中的磷酸丝氨酸和磷酸苏氨酸残基用作磷酸化状态的质谱分析（MS）；（9）文献报道水和DMSO中的亮脯利特（Leuprolide ）降解作用；互溶性：• 完全互溶：LDPE, HDPE，聚丙烯, PPCO, 聚甲基戊烯，尼龙，teflon FEP• 中度互溶：聚苯乙烯，ECTFE/ETFE• 不互溶：聚砜,，flexible and rigid PVC tubing，聚碳酸脂注意事项：仅用于实验室，不可用于药品、家居和其他用处。

二甲基亚砜（DMSO）对人肝癌 HepG2细胞的诱导分化作用的实验研究赵岩;赵斐然;满永宏【期刊名称】《现代肿瘤医学》【年(卷),期】2016(024)016【摘要】Objective:To investigate the inducing differentiation effect of DMSO on human hepatocellular carcino-ma HepG2 cells. Methods:HepG2 cells were cultured in vitro and treated with DMSO. Effect of cell proliferation ac-tivity was measured with MTT assay. To observe the changes of cell morphology with inverted microscope and Giemsa staining,the alpha fetoprotein(AFP)and albumin(ALB)secretion were tested with radioimmunoassay. Gamma glu-tamyl transpeptidase(γ - GT)and alkaline phosphatase( ALP)activity were tested with enzymatic reaction. Re-sults:DMSO can significantly inhibit HepG2 cell proliferation after 72h(P ﹤0. 05),the morphology of the cells were differented to mature cell,AFP secretion and γ - GT enzyme activity were significantly decreased(P ﹤ 0.05),ALP activity and ALB content were significantly increased(P ﹤ 0. 05). Conclusion:DMSO can induce human hepatocellu-lar carcinoma HepG2 to normal cell differentiation and inhibit cell proliferation.%目的：探讨二甲基亚砜（DMSO）对人肝癌 HepG2细胞的诱导分化作用。

北京雷根生物技术有限公司
DMSO(PCR 级)
简介：
二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)，属于极性非质子溶剂，CAS 号为67-68-5，分子量为78.13，可用作溶剂、反应试剂、增效剂等，具有很高的选择抽提能力，同时是高GC 含量模板扩增促进剂。

Leagene DMSO(PCR 级)用于PCR 反应，其作用在于：1、富含GC 模板的PCR 扩增，研究表明DMSO 可有效的促进GC 含量高达52～73模板的扩增；
2、降低变性温度对碱基的依赖性；
3、提高T aq DNA 聚合酶的稳定性。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、将DMSO (PCR 级)加入PCR 反应体系，其工作浓度一般为5～10%。

1、 如遇环境温度较低，溶液易产生沉淀，可以温浴加热促溶。

2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

编号 名称 NP0001 Storage DMSO (PCR 级) 10ml 4℃ 使用说明书 1份。

药用DMSO质量技术指标产品英文名称：WAK-Chemie CryoSure-DMSO USP Grade DMSO产品中文名称：WAK-Chemie 二甲基亚砜高纯度溶液WAK-Chemie WAK-DMSO-70 6x70mL yoSure-DMSO USP Grade DMSO二甲基亚砜高纯度溶液USP级4200ml产品介绍：德国WAK CHEMIE公司研发的二甲亚砜（DMSO）在高级别DMSO的精制领域处于领先地位，其细胞冻存级产品在市场上拥有较高的占有率，经过六年多的客户检验和使用，质量过硬。

为了进一步提升品质，在攻克了几个难题后，生产线进行了GMP改造。

该产品为德国药监局正式批准可进行临床注射、骨髓移植、造血干细胞分离、脐带血冻存、角膜及其他器官保存等领域。

特别应用在贵重细胞和娇嫩细胞的冻存和复苏，适合广大科研工作者，尤其是从事免疫学、细胞学、生物制药和干细胞临床应用的科研人员。

目前，脐带血库、血站等全国有超过一百家临床、科研单位已经使用了等国WAK公司的产品，客户还在不断增加中。

WAK公司的二甲亚砜纯度高于99.5%，且每瓶DMSO都用KOH通过光谱仪做了可染色物质的检验，本DMSO 杂质含量远远低于美国药典中允许的含量，另外为了防止玻璃瓶掰开时细小碎片进入药液，其选择了造价较高的胶盖多计量药瓶。

WAK公司的二甲亚砜（DMSO）商品名叫CryoSure，是在GMP条件下生产的，无热原、无内毒素、无支原体，同时根据客户要求，做了活力实验、支原体检验。

DMSO 二甲基亚砜特性说明：DMSO 二甲基亚砜:分子式：（CH3）2SO（简写DMSO）分子量：78.13 沸点：189(760mmHg) 结晶点：18.45 比重：1.1014(20) 闪点：95 燃点：304规格：优级品、医药级、光谱级、食品级、电子级。

性质：一种透明、无色、无臭、呈微苦味的液体，毒性极低。

它是一种水溶性的化合物，能溶解绝大多数有机化合物，甚至对无机盐也能溶解。

PFOS暴露对秀丽线虫寿长的影响及其与IIS相关基因的关联全氟辛烷磺酸（perfluorooctanesulphonate，PFOS）是重要的全氟有机化合物和主要代谢产物.因高表面活性和疏水疏油等特性，PFOS作为原料被大量用于表面防污剂、材料涂层、清洗剂、食品包装等各类工业及生活用品中.大量研究表明PFOS具有环境持久性和生物累积性，被认为是一种新型的持久性有机污染物.目前PFOS的污染足迹已遍布全球生态系统，并对生态环境和人类健康构成严重的威胁.虽然欧盟、美国、日本等发达国家已经限制了PFOS的使用，但目前世界上仍有许多国家生产和使用PFOS.检测结果显示在大气、水、土壤、沉积物等多种环境介质中均已检测到PFOS存在.在我国沈阳市降雪中的PFOS浓度平均值范围在0.4～46.2 ng/L之间.长江三峡水域个别水域PFOS含量高于10 ng/L.美国6个城市中心废水中PFOS浓度为0.04～5.29 μg/L.美国职业人群血液中PFOS的平均浓度为1046 μg/L，而非职业人群为11.6 μg/L.PFOS可以通过食物摄入、空气吸入、皮肤吸收等多种途径进入机体，在人体血液中的半衰期长达5.4年.大量毒理学研究显示PFOS 对肝、心脑血管、胚胎、生殖系统、神经系统等多部位产生毒性效应.如PFOS干扰正常的脂质代谢，对肝脏有氧化损伤作用；降低动物精细胞活力，减少精子数量，增加精子畸形率；PFOS延迟幼龄动物的生长发育，影响记忆功能.然而PFOS长期暴露是否能加速衰老，对动物的寿长产生影响尚未见报道.秀丽线虫（C. elegans）是一种新型模式生物，具有适合衰老和寿长研究的多种优势.如个体小，生命周期短，繁殖能力强.超过40%基因与人类基因同源，因而相关结果可以外推到高等动物和人体，以评价环境污染物的健康风险.本文运用N2型秀丽线虫和4种基因缺陷型的转基因秀丽线虫进行PFOS的慢性暴露，观察和比较寿命长度的变化.研究目的是观察PFOS暴露对秀丽线虫寿长的影响，并分析其与胰岛素信号通路（Insulin/IGFl.1 signaling pathway，IIS）相关基因的关系.1材料与方法1.1模式生物与主要试剂秀丽隐杆线虫（C.elegans）由国际线虫遗传中心（Caenorhabditis Genetics Center，CGC）提供.野生型为N2型秀丽线虫.基因缺陷型包括CF1139 [daf16（mu86）Ⅰ；muIs61]，CF1580 [daf2（e1370）Ⅲ，muIs84]，CF1295 [daf16bKO]，和TJ1052 [age1（hx546）Ⅱ].利用涂有大肠杆菌OP50的线虫培养基（nematode growth medium，NGM）培养线虫，所有线虫均在20 ℃下恒温培养.十七氟1辛烷磺酸钾购于美国西格玛公司，蛋白胨、酵母粉、琼脂粉、叠氮化钠（NaN3）、DMSO均购于国药集团化学试剂有限公司，其他化学药品及试剂均为国产分析纯.1.2暴露方法将PFOS溶解于DMSO中，配制成10 mmol/L的储备液，用大肠杆菌OP50分别稀释至200 μmol/L，20 μmol/L，2 μmol/L，0.2 μmol/L，助溶剂DMSO浓度小于1%.吸取50 μL溶液，加于测定寿命用的NGM培养基六孔板上，每一个浓度设置3个平行样，记录其浓度与顺序.空白组吸取50 μL大肠杆菌OP50溶液涂布.在室温中放置至干透，然后转到20 ℃恒温培养箱中培养，过夜后即可使用.暴露时选择同步化的L1期线虫，并持续暴露50 h，完成一个生命周期.吸取50～100条线虫于一个PFOS暴露用板孔中，以少量水冲散抱团线虫，并保持培养基表面干燥，放入恒温培养箱中20 ℃培养.1.3寿长统计PFOS暴露期结束后，将暴露的线虫转移到六孔板NGM培养皿，平均一个孔板转移30～40条为宜.此日记录为0 d，放入恒温培养箱中20 ℃培养，并隔日记录线虫存活数.6 d左右转移一次六孔板，防止杂菌对寿命产生影响.在转移过程中要注意丢失的线虫，或者爬到孔板壁上死亡的线虫，以及因为霉菌死亡的线虫，从最初的计数中排除.实验中，判断线虫死亡的标准为在低倍显微镜下，对机械刺激没有反应，于高倍显微镜观察下不进食.1.4统计学分析实验数据均以平均值±标准误差（Mean±SE）表示.运用SPSS软件的单因素方差分析对各组数据进行显著性分析，以p0.05 或p0.01，表示差异显著.2结果2.1PFOS慢性暴露导致野生型秀丽线虫寿长缩短0.2、2、20、200 μmol/L PFOS对N2型秀丽线虫暴露50 h后，观察PFOS对线虫存活率和寿长的影响.结果显示PFOS暴露组存活率曲线均在对照组之下，呈浓度依赖性的渐次下降趋势（见图1A）.进一步分析显示PFOS暴露导致线虫的平均寿长明显缩短，各暴露组较对照组均有显著性差异（见图1B）.特别是200 μmol/L高浓度暴露组，平均寿长较对照组降低了47.1%，最长寿命也较对照组降低了约30%（18.67 d vs 24 d），反映PFOS较强的减寿效应.2.2IIS通路相关基因缺陷影响秀丽线虫寿长本文进一步在秀丽线虫上观察IIS通路相关基因缺陷是否影响寿长.结果显示基因缺陷型CF1580、CF1295与CF1139线虫的存活率曲线均位于野生型N2线虫的下方；TJ1052基因缺陷型存活率曲线位于N2线虫上方（见图2A）.统计分析得出CF1580、CF1295和CF1139线虫平均寿长较N2型显著性缩短，TJ1052型则显著延长（见图2B）.群体最长寿命观察显示，TJ1052最长寿命为27.33 d，比N2型长25%.而CF1580、CF1295和CF1139型线虫最长寿命均明显缩短.结果表明CF1580、CF1295和CF1139型线虫相关基因缺陷导致减寿效应，而TJ1052型线虫基因敲除导致增寿效应.注：（A）PFOS暴露对秀丽线虫存活率的影响；（B）PFOS暴露对秀丽线虫平均寿长影响图1PFOS暴露对野生型秀丽线虫寿长的影响Fig.1Effects of PFOS exposure on lifespan in wild type C. elegans 注：（A）N2型和CF1580、CF1295、CF1139、CF1139基因缺陷型线虫存活率曲线；（B）N2型和IIS通路相关基因缺陷型线虫平均寿长图2IIS通路相关基因缺陷型秀丽线虫与N2型的寿长比较Fig.2Comparison of lifespans between N2 type and IIS genedeficient types of C. elegans2.3PFOS慢性暴露对IIS通路相关基因缺陷型秀丽线虫寿长的影响在IIS通路相关基因缺陷型CF1580、CF1295、CF1139、CF1139线虫上，进一步观察PFOS慢性暴露对寿长的影响效应.结果如图3所示，PFOS导致CF1580和CF1139线虫的存活率曲线均较对照组下移（见图3A，B），并呈一定的剂量依赖效应，其变化与在N2型秀丽线虫观察到的效应类似.统计结果显示PFOS导致CF1580和CF1139线虫的平均寿长均显著缩短（见图3E），这表明CF1580和CF1139线虫的相关基因缺陷未影响PFOS的缩短寿长的效应.而在CF1295和TJ1052基因缺陷型线虫上，则观察到不同的效应.同样梯度的PFOS暴露后，CF1295和TJ1052线虫的生存率曲线均与对照组部分重叠（见图3C和D），未见明显位移.统计显示2 μmol/L和20 μmol/L的PFOS 暴露导致CF1295线虫平均寿长稍有降低，但与对照组未有显著性差异（见图3E）.在TJ1052线虫上，3个PFOS暴露组平均寿长较对照均未见明显变化（见图3E）.这表明CF1295和TJ1052线虫的相关基因缺陷明显影响PFOS的缩短寿长的效应.在N2型和IIS通路相关基因缺陷型线虫上进一步分析0.2，2和20 μmol/L的PFOS暴露后线虫寿长变化率.结果如图3F，图中红色越深的部分表示变化率越高，即该品种对此浓度的PFOS暴露敏感，而色度越偏蓝则变化率越低，即该品种对此浓度的PFOS暴露不敏感.N2品种对于PFOS的暴露敏感程度最高，CF1580和CF1139线虫的敏感与N2基本一致，只是高浓度暴露组稍有下降.图中蓝色区域对应的CF1295与TJ1052两个品种则对PFOS暴露敏感程度低，寿长几乎不受PFOS暴露影响.注：（a）（d）PFOS暴露分别对CF1139型（a）、CF1580型（b）、CF1295型（c）和TJ1052型（d）线虫存活率的影响；（e）PFOS暴露对CF1139、CF1580、CF1580和TJ1052型线虫平均寿命影响及比较；（f）不同浓度PFOS暴露导致N2、CF1139、CF1580、CF1580和TJ1052型线虫寿长变化率等高图图3PFOS暴露对IIS通路相关基因缺陷型秀丽线虫寿长的影响及其比较分析Fig.3Effects of PFOS exposure on lifespans of IIS genedeficient C. elegans and their comparisons3讨论作为新型持久性污染物，PFOS在生物体内的蓄积能力强于多氯联苯和有机氯农药等经典有机污染物，其可能的生态风险与健康危害引起了广泛关注.本文结果显示PFOS低浓度慢性暴露导致野生型秀丽线虫平均寿长和最长寿命均显著缩短，这表明PFOS较强的减寿效应.虽然PFOS的多种毒理学效应已有研究，其对动物寿长的影响尚属首次报道.本文暴露的最低效应浓度为0.2 μmol/L（107.4 μg/L），虽然比环境相关浓度高1—2个数量级.但考虑到PFOS在生物体内较强的聚积效应，如鱼类对PFOS的浓缩倍数为500～12 000倍.另外PFOS 在人类血清中的半衰期长达5.4年.这表明本文使用的低浓度PFOS暴露导致动物衰老加快和寿长缩短，对机体健康具有明显的风险.进一步研究显示daf2突变的CF1580型、daf16b敲除的CF1295型，和daf16突变的CF1139型线虫寿长显著缩短，age1突变的TJ1052型线虫寿长则显著延长.以往研究显示Insulin/IGFl.1信号通路的参与机体发育、代谢、生殖等多种功能[18，19].IIS通路上主要包括胰岛素受体daf2基因、胰岛素受体底物IRS1基因、哺乳动物PIK3同源基因age1、转录因子daf16、肿瘤抑制因子PTEN同源物daf18基因等.本文研究与相关研究相互印证，表明IIS信号通路相关的age1、daf2、daf16基因与新陈代谢、免疫及应激反应等多种功能调控有关，从而与线虫的寿长关系密切.我们进一步观察PFOS暴露导致IIS信号通路相关基因突变型线虫寿长变化率，及其与野生型线虫上观察的差异.结果在CF1139和CF1580突变种上发现daf16的突变或daf2的突变均未改变PFOS的缩短寿长效应.而在CF1295和TJ1052转基因型上发现daf16b的基因敲除或age1基因突变能阻断PFOS对线虫的减寿效应.这表明DAF16B和AGE1蛋白在PFOS诱发线虫衰老加快和寿长缩短中起到重要作用.PFOS暴露影响动物衰老和寿长可能涉及到胰岛素信号、饮食限制和氧化损伤的多种因素，深入机制尚需进一步研究.。