LDH Assay 测定药物细胞毒性

产品简介：产品编号产品名称产品包装产品价格C0016 100次176.00元碧云天的乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit)，也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit)，是一种基于diaphorase催化的INT显色反应，通过比色法检测细胞毒性时释放的乳酸脱氢酶活性或检测其它样品中的乳酸脱氢酶活性的试剂盒。

本试剂盒可以用于常规的乳酸脱氢酶活性的检测，更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。

同时，基于细胞总乳酸脱氢酶活性的检测，本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。

细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里，其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)。

通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH的活性，就可以实现对细胞毒性的定量分析。

LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标，并被广泛用于细胞毒性检测。

LDH释放被认为是以前使用放射性的51Cr标记细胞，随后通过51Cr释放进行细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。

本试剂盒的基本原理是，在乳酸脱氢酶的作用下，NAD+被还原生成NADH，NADH和INT(2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱氢酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan)，在490nm波长下产生吸收峰，从而可以通过比色来定量乳酸脱氢酶的活性。

吸光度与乳酸脱氢酶活性成线性正相关。

该酶联反应原理的示意图如下：可检测细胞培养液、细胞裂解液等样品中乳酸脱氢酶的活性。

一个试剂盒可进行100次检测。

包装清单：产品编号产品名称包装C0016-1 LDH释放试剂 1.5mlC0016-2 乳酸溶液2mlC0016-3 酶溶液1ml×2C0016-4 INT溶液(10X) 0.2mlC0016-5 INT稀释液2ml—说明书1份保存条件：-20℃保存，一年有效。

细胞介导细胞毒作用检测法：LDH释放法
佚名
LDH释放法
1）测定方法
1．用含5％小牛血清的RPMI-1640培养液将靶细胞调整到5×104～2×105/ml，此浓度需根据情况预先标定。

2．在96孔圆底细胞培养板中加入靶细胞，每孔加100μl。

3个效应细胞自然释放对照孔不加靶细胞，只加100μl培养液。

3．向各孔加100μl效应细胞，效应细胞与靶细胞的比例根据要求而定，通常为5：1～20：1。

自然释放孔不加效应细胞只加100μl培养液，最大释放孔中加100μl 1％ NP40。

每个实验置三个复孔。

4．置37℃ 5％ CO2的二氧化碳培养箱中培养4～6小时。

5．离心培养板200×g 10分钟。

每孔吸出150μl上清液，对应加入另一块96孔酶联检测板中。

向第二块板每孔依次加20μl 0.4mol/L乳酸溶液、20μl 4mmol/L 2-p-碘苯酯-3-p-氯化硝基苯四唑，20μl反应液（含0.03％ BSA，2.7U/ml硫辛酰胺脱氢酶，
4.5mmol/L氢化型辅酶I（NAD＋），1.2％蔗糖的PBS），室温中放置20分钟。

在酶联检测仪上测定各孔的光密度（OD值），检测波长492nm，参考波长650nm。

2）特异性杀伤活性的计算
杀伤活性（％）＝[（OD实验组－OD总自然释放）/（OD最大释放组－OD总自然释放）]×100％。

LDH释放法检测肿瘤患者PBM C和CIK细胞的细胞毒活性X张　蕾a,李芳秋a,张士新a,黄海嵘b,李德闵b(南京军区南京总医院a.解放军临床检验医学研究所;b.心胸外科,南京　210002)摘　要:目的　建立检测细胞毒活性的乳酸脱氢酶(L DH)测定法,了解肿瘤患者外周血单个核细胞(PBM C)和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)的抗肿瘤活性,为肿瘤的免疫细胞治疗提供参考。

方法　采集肿瘤患者和健康成人外周血,常规分离PBM C,体外进行CIK的培养,用L DH释放法分别检测PBM C和CIK对肿瘤细胞K562的细胞毒活性。

结果　肿瘤患者PBM C对K562的杀伤活力比正常人显著降低(P<0.05)。

经多种细胞因子诱导培养7～10d后,健康人和肿瘤患者的CIK 对K562的杀伤活力都有显著提高(P<0.01),肿瘤患者CIK杀伤活力接近于健康人。

结论　肿瘤患者P BM C细胞毒活性显著降低,但经诱导培养成CIK后则显著提高。

用L DH释放法检测肿瘤病人CIK细胞毒活力,有助于CI K疗法适应病人的选择及个体疗效观察。

关键词:乳酸脱氢酶释放法;细胞因子诱导的杀伤细胞;细胞毒活性;肿瘤治疗中图分类号:R730.43　文献标志码:A　文章编号:1671-7414(2008)06-027-03Measurement of Cytotoxic Activity of PBMC andCIK from Cancer-bearing Patients Using LDH Release AssayZHANG Lei a,LI Fang-qiu a,ZHANG Shi-xin a,HU ANG Hai-rong b,LI De-min b(a.Institute of Clinical L aboratory M edicine,PL A;b.Dep ar tment ofCardiothor acic Surgery,N anj ing General H osp ital Command,N anj ing210002,China)Abstract:Objective　T o investigate the anti-t umor activit y of peripher al blood monouclear cells(P BM C)and CIK cells from cancer-bearing patients.Methods　PBM C fr om healthy donor s and patients w ere iso lated and w ere incubated w ith var ious types of cy tokines to generate CIK.Cyto tox ic activit y of PBM C and CIK fr om cancer-bear ing patients at diagnosis w as evaluated using an L DH release assay.Results　T he anti-tum or activity of P BM C fro m patients w as much lower t han that of healthy donor s.A fter stimulation,the cyto tox ic activity of CIK w as sig nificant incr eased,and the cytoto xic activity in CIK w as increased to the prox imat e level of these tw o g ro ups,r espectiv ely.C oncl usion　Result s show the enhancement of cy totox ic activity o f CIK cells fr om bot h healthy donors and cancer patients.L DH release assay is useful for choosing candidated patients and for estimating the indiv idual t her apeut ic efficiency of CIK.Keywords:L DH release assay;cyto kine-induced killer cell;cyto tox ic activity;tumor ther apy 细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK)是新一代抗肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方案,已经作为一种肿瘤的辅助疗法应用于临床。

G9711, G9712 and G9713中文说明书适用产品目录号：J2380和J23812019版 CTM548原英文技术手册TM548LDH-Glo™Cytotoxicity Assay普洛麦格(北京)生物技术有限公司Promega (Beijing) Biotech Co., Ltd 地址：北京市东城区北三环东路36号环球贸易中心B座907-909电话：************网址：技术支持电话：800 810 8133(座机拨打)，400 810 8133(手机拨打)技术支持邮箱：*************************CTM5482019制作1LDH-Glo™ Cytotoxicity Assay所有技术文献的英文原版均可在/ protocols获得。

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电子邮箱：*************************1. 产品描述 (2)2. 产品组分和储存条件 (4)3. 实验前的准备 (5)3. A. 用户需提供的材料 (5)3. B. 试剂准备 (5)3. C. 检测线性范围和LDH稀释倍数的建议 (6)3. D. 温度和试剂兼容性 (7)3. E. 检测实验的孵育时间 (7)3. F. 微孔板和设备 (7)4. 操作步骤 (8)4. A. 推荐的对照 (8)4. B. 细胞毒性检测操作步骤示例 (8)4. C. LDH阳性对照 (10)5. 注意事项 (11)5. A. 细胞培养基和血清 (11)5. B. LDH在培养基中和在冷冻状态下的稳定性 (12)5. C. 使用终止液以获得稳定的发光信号 (13)5. D. 与活力检测或其它检测试剂盒联合使用 (13)6. 附录 (14)6. A. 检测球状体（SPHEROID）培养物中时间依赖性的细胞毒性 (14)6. B. 在ADCC实验中检测细胞特异性的细胞毒性 (15)6. C. 评估细胞数量和细胞增殖 (16)6. D. 参考文献 (17)6. E. 相关产品 (17)普洛麦格(北京)生物技术有限公司Promega (Beijing) Biotech Co., Ltd 地址：北京市东城区北三环东路36号环球贸易中心B座907-909电话：************网址：技术支持电话：800 810 8133(座机拨打)，400 810 8133(手机拨打)技术支持邮箱：*************************CTM5482019制作21. 产品描述乳酸脱氢酶(LDH)是一种稳定的可溶性胞质酶，存在于多种细胞中。

乳酸脱氢酶释放法lactate dehydrogenase release assay碧云天的乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit)，也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit)，是一种基于diaphorase催化的INT显色反应，通过比色法检测细胞毒性时释放的乳酸脱氢酶活性或检测其它样品中的乳酸脱氢酶活性的试剂盒。

本试剂盒可以用于常规的乳酸脱氢酶活性的检测，更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。

同时，基于细胞总乳酸脱氢酶活性的检测，本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。

细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里，其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)。

通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH 的活性，就可以实现对细胞毒性的定量分析。

LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标，并被广泛用于细胞毒性检测。

LDH释放被认为是以前使用放射性的51Cr标记细胞，随后通过51Cr释放进行细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。

本试剂盒的基本原理是，在乳酸脱氢酶的作用下，NAD+被还原生成NADH，NADH和INT(2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱氢酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan)，在490nm波长下产生吸收峰，从而可以通过比色来定量乳酸脱氢酶的活性。

吸光度与乳酸脱氢酶活性成线性正相关。

该酶联反应原理的示意图如下：可检测细胞培养液、细胞裂解液等样品中乳酸脱氢酶的活性。

一个试剂盒可进行100次检测。

包装清单：产品编号产品名称包装C0016-1 LDH释放试剂 1.5mlC0016-2 乳酸溶液2mlC0016-3 酶溶液1ml×2C0016-4 INT溶液(10X) 0.2mlC0016-5 INT稀释液2ml—说明书1份保存条件：-20℃保存，一年有效。

LDH乳酸脱氢酶细胞毒性检测LDH释放检测办法：a. 依据细胞的大小和发展速度将适量细胞接种到96孔细胞造就板中,使待检测时细胞密度不超出80-90%满.b. 吸去造就液,用PBS液洗涤一次.换新颖造就液(推举应用含1%血清的低血清造就液或恰当的无血清造就液),将各造就孔分成如下几组：包含无细胞的造就液孔(布景空白对比孔),未经药物处理的对比细胞孔(样品对比孔),未经药物处理的用于后续裂解的细胞孔(样品最大酶活性对比孔),以及药物处理的细胞孔(药物处理样品孔),并做好标识表记标帜.按照试验须要赐与恰当药物处理(如参加0-10μl阁下特定的药物刺激,可设置不合浓度,不合处理时光,对比孔中需参加恰当的药物溶剂对比),持续按通例造就.到预定的检测时光点前1小时,从细胞造就箱里掏出细胞造就板,在“样品最大酶活性对比孔”中参加试剂盒供给的LDH释放试剂,参加量为原有造就液体积的10%.参加LDH释放试剂后,重复吹打数次混匀,然后持续在细胞造就箱中孵育.c. 到达预准时光后,将细胞造就板用多孔板离心计心情400g离心5min.分离取各孔的上清液120μl,参加到一新的96孔板响应孔中,随即进行样品测定.预备工作：a. INT溶液(1X)的设置装备摆设：依据所需的INT溶液(1X)的量,取适量INT溶液(10X)用INT稀释液稀释至1X.例如,取20μl INT溶液(10X),参加180μl INT稀释液,混匀后即设置装备摆设为200μl INT溶液(1X).INT溶液(1X)宜现配现用,设置装备摆设后4℃保管可于当天应用,不宜设置装备摆设后冻存.b. LDH检测工作液的配制: 依据待测定的样品数(含对比),参考下表在临检测前新颖配制适量的检测工作液.留意：LDH检测工作液必须现配现用,配制和应用进程中均要留意恰当避光.样品测定:a. 各孔分离参加60μl LDH检测工作液.b. 混匀,室温(约25℃) 避光孵育30min(可用铝箔包裹后置于程度摇床或侧摆摇床上迟缓动摇).然后在490nm处测定吸光度.应用600nm或大于600nm的任一波长作为参考波长进行双波长测定.c. 盘算(测得的各组吸光度均应减去布景空白对比孔吸光度)细胞毒性或逝世亡率(%)=(处理样品吸光度－样品对比孔吸光度) / (细胞最大酶活性的吸光度－样品对比孔吸光度)×100d. 可绘制细胞毒性曲线：纵座标为现实吸光度,横坐标为药物浓度;据此可盘算该药物感化特准时光的半致逝世剂量LD50.。

乳酸脱氢酶（LDH）释放法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途乳酸脱氢酶（LDH）释放法细胞繁殖与毒性定量检测试剂是一种旨在通过酶联连续反应系统检测由于细胞损伤导致的细胞内稳定的乳酸脱氢酶释放到细胞外，使四唑盐染料碘硝基氯化四氮唑（INT）还原为红色甲臜（farmazan），即比色法定量测定酶活性，以评价活体细胞繁殖的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

适用于各种药物、化学、环境因子和营养因子处理的贴壁或悬浮生长中的动物或人体细胞。

替代传统的同位素[51 Cr]释放检测的最佳选择。

产品严格无菌，即到即用，简捷敏感，性能稳定，显色清晰，检测准确，重复性好。

技术背景细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的损害或完全裂解导致细胞浆内的酶释放外泄到培养液里，其中包括活性稳定的乳酸脱氢酶。

乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase；LDH）释放法的测定是基于在乳酸脱氢酶的作用下，还原NAD+反应生成的NADH，再与氧化型2-（4-碘苯）-3-（4-硝基苯）-5-苯四唑（Iodonitrotetrazolium；INT）在硫辛酰胺脱氢酶（diaphorase）的催化下反应生成红色生色产物甲臜（formazan），在490nm波长下产生吸收峰，从而确定释放的乳酸脱氢酶的活性，作为细胞膜完整性的标志：吸光值与细胞死亡或毒性程度成线性正相关。

酶联连续反应系统为：lactate dehydrogenaseNAD+ + Lactate → Pyruvate + NADHdiaphoraseNADH + INT → NAD++ Formazan（red）产品内容裂解液（Reagent A）1毫升补充液（Reagent B）1毫升反应液（Reagent C）5毫升显色液（Reagent D）1毫升终止液（Reagent E）1毫升标准液（Reagent F）20微升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里，反应液（Reagent C）和显色液（Reagent D）避免光照；有效保证6月用户自备96孔细胞培养板：用于细胞操作的容器细胞培养箱：用于孵育反应孔板离心机：用于沉淀细胞酶标仪：用于定量检测染色后的细胞实验步骤一、贴壁细胞检测1．准备96孔细胞培养板的待测细胞（每孔100微升）：包括未处理的对照细胞（样品对照孔），未处理的后续裂解的细胞（样品最大酶活性对照孔），以及药物处理的细胞（处理样品孔），并做好标记（细胞密度为每孔2 X 103至2 X 104细胞）2．到规定的检测时间点前1小时，从湿润的细胞培养箱里取出待测的96孔细胞培养板（注意：确保细胞培养液维持在100微升容量）3．加入10微升裂解液（Reagent A）到未处理的后续裂解的细胞孔里（样品最大酶活性对照孔）4．同时加入10微升补充液（Reagent B）到其余所有检测孔里5．放回湿润的细胞培养箱里，继续培养1小时，即规定检测时间6．从湿润的细胞培养箱里取出待测的96孔细胞培养板7．放进孔板离心机离心10分钟，速度为250g8．分别小心移取50微升上清液到新的96孔板的相应孔里，避免触摸细胞颗粒，同时注意做好标记9．分别加入50微升反应液（Reagent C）（注意：使用前，须混匀）10．分别加入10微升显色液（Reagent D）11．摇动96孔板混匀12．在室温下孵育30分钟，避免光照13．（选择步骤）分别加入10微升终止液（Reagent E）14．即刻放进酶标仪里测读：波长490nm15．计算处理样品实际吸光读数：处理样品孔吸光读数－样品对照孔吸光读数16．计算样品细胞最大酶活性的实际吸光读数：样品最大酶活性对照孔吸光读数－样品对照孔吸光读数17．计算细胞毒性或死亡率（％）：（处理样品实际吸光读数÷样品细胞最大酶活性的实际吸光读数）X 10018．或绘制细胞生长曲线：纵座标（Y轴）为实际吸光读数（A）；横坐标（X轴）为细胞数或时间点或药物浓度；据此计算其LD50二、悬浮细胞检测1．准备96孔细胞培养板的待测悬浮细胞（每孔100微升）：包括未处理的对照细胞（样品对照孔），未处理的后续裂解的细胞（样品最大酶活性对照孔），以及药物处理的细胞（处理样品孔），并做好标记（细胞密度为每孔5 X 103至5 X 104细胞）2．到规定的检测时间点前1小时，从湿润的细胞培养箱里取出待测的96孔细胞培养板（注意：确保细胞培养液维持在100微升容量）3．加入10微升裂解液（Reagent A）到未处理的后续裂解的细胞孔里（样品最大酶活性对照孔）4．同时加入10微升补充液（Reagent B）到其余所有检测孔里5．放回湿润的细胞培养箱里，继续培养1小时，即规定检测时间6．从湿润的细胞培养箱里取出待测的96孔细胞培养板7．放进孔板离心机离心10分钟，速度为250g8．分别小心移取50微升上清液到新的96孔板的相应孔里，避免触摸细胞颗粒，同时注意做好标记9．分别加入50微升反应液（Reagent C）（注意：使用前，须混匀）10．分别加入10微升显色液（Reagent D）11．摇动96孔板混匀12．在30℃温度下孵育30分钟，避免光照13．（选择步骤）分别加入10微升终止液（Reagent E）14．即刻放进酶标仪里测读：波长490nm15．计算处理样品实际吸光读数：处理样品孔吸光读数－样品对照孔吸光读数16．计算样品细胞最大酶活性的实际吸光读数：样品最大酶活性对照孔吸光读数－样品对照孔吸光读数）17．计算细胞毒性或死亡率（％）：（处理样品实际吸光读数÷样品细胞最大酶活性的实际吸光读数）X 10018．或绘制细胞生长曲线：纵座标（Y轴）为实际吸光读数（A）；横坐标（X轴）为细胞数或时间点或药物浓度；据此计算其LD50注意事项1．本产品为100次（1个96孔板）操作2．操作时须戴手套3．整个操作须无菌操作4．建议每个样品安排3个孔，即重复3次，计算时取其平均值5．检测体系相应增加，试剂用量按比例相应增加：例如200微升检测体系，试剂用量增加1倍6．每孔中的培养液需100微升，避免使用周边培养孔（常常液体蒸发而减少）7．系统测试，可以加入2至5微升标准液（Reagent G）到50微升无细胞的细胞培养液里，然后按照说明书加入反应液（Reagent C）和显色液（Reagent D）即可8．细胞裂解效果不佳，可以使用20微升裂解液（Reagent A）处理9．孵育时，须避光10．染色完成后，建议即刻检测，最迟不得超过1小时11．细胞培养和处理时，避免使用草酸（OXALATE），草氨酸（OXAMATE）和EDTA，否则影响检测的准确性12．血清含有乳酸脱氢酶，建议使用浓度不要超过1％13．细胞过度生长、密度过高、离心速度过大、培养箱内外温差过大等因素会造成细胞自然释放乳酸脱氢酶14．酚红会干扰检测15．样品最大酶活性对照孔或最大OD吸光读数与细胞裂解程度密切相关16．如果用户没有孔板离心机，则移取上清液时格外小心17．如果用户没有匹配的波长，可以使用波长470nm至570nm之间的任一波长替代18．本公司提供系列细胞繁殖检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定检测敏感使用承诺杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。

Product datasheetLDH Assay Kit (Cytotoxicity) ab65393126 References 3 ImagesOverviewProduct name LDH Assay Kit (Cytotoxicity)Detection method ColorimetricSample type Cell culture mediaAssay type Enzyme activity (quantitative)Assay time1h 00mProduct overview LDH Assay Kit (Cytotoxicity) ab65393 uses WST for the fast and sensitive detection of LDHreleased from damaged cells.The LDH assay, also known as LDH release assay, is a cell death / cytotoxicity assay used toassess the level of plasma membrane damage in a cell population. Lactate dehydrogenase(LDH) is a stable enzyme, present in all cell types, which is rapidly released into the cell culturemedium upon damage of the plasma membrane. LDH is the most widely used marker used to runa cytotoxicity assay.The LDH assay protocol is based on an enzymatic coupling reaction: LDH released from the celloxidizes lactate to generate NADH, which then reacts with WST to generate a yellow color. Theintensity of the generated color correlates directly with the number of lyzed cells.Only 10µl of culture medium is required for the assay, and thus the background from serum andculture medium is significantly reduced. Cells can be cultured in regular 10% serum containingmedium; no reducing serum or special medium is required for the assay.In addition, since WST is very stable, the reaction can be read multiple times and can be stoppedat any time point during the reaction.LDH activity can be easily quantified by spectrophotometer or plate reader at OD450nm.LDH assay protocol summary:- transfer 10µl culture medium into new plate- add LDH reaction mix and incubate for 30 min at room temp- analyze with microplate readerNotes This product is manufactured by BioVision, an Abcam company and was previously called K313LDH-Cytotoxicity Colorimetric Assay Kit II. K313-500 is the same size as the 500 test size of ab65393.Alternative LDH assaysIf you would like to use a fluorometric assay, please refer to LDH-Cytotoxicity Assay Kit (Fluorometric) (ab197004).This kit is more sensitive than the colorimetric LDH Cytoxicity Assay Kit ab65391.To measure LDH activity in sample types such as serum, plasma, and cell lysates, we recommend LDH assay kit ab102526.Related products and guides to cytotoxicity / cell viability / proliferation assaysReview our cell health assay guide to learn about our other kits to perform a cell viability assay , cytotoxicity assay or cell proliferation assay .Platform Microplate readerStorage instructions Store at -20°C. Please refer to protocols.PathwayFermentation; pyruvate fermentation to lactate; (S)-lactate from pyruvate: step 1/1.Involvement in disease Defects in LDHA are the cause of glycogen storage disease type 11 (GSD11) [MIM:612933]. A metabolic disorder that results in exertional myoglobinuria, pain, cramps and easy fatigue.Sequence similarities Belongs to the LDH/MDH superfamily. LDH family.Post-translational modifications ISGylated.Cellular localizationCytoplasm.PropertiesComponentsIdentifier500 tests10000 testsCell Lysis Solution Clear/NM 1 x 5ml 20 x 5ml LDH (Positive control)Red 1 vial 20 vials LDH Assay Buffer NM 1 x 50ml 20 x 50ml Stop Solution Blue 1 x 5ml 20 x 5ml WST Substrate MixAmber1 vial20 vialsImagesLDH Cytotoxicity Assay using ab65393Image from Bukong TN et al., PLoS Pathog 10(10), Fig S6. Doi: 10.1371/journal.ppat.1004424. Reproduced under the Creative Commons license/licenses/by/4.0/Bafilomycin A1 (BafA1) toxicity was assessed in Human hepatic (Huh7.5) cells after 24 hours at different concentrations (12.5nm, 25nm, 50nm and 100nm) were administered to cells using LDH cytotoxicity assay kit (ab65393). Cytotoxicity was measured by subtracting LDH content in remaining viable cells from total LDH in untreated controls.LDH Cytotoxicity Assay useing ab65393Jurkat T cells were cultured in 96-well plate in 100 μl of culture medium. LDH Assay was performed using 10μl of culture medium using the WST probe. Low control (white bar); High control (black bar).LDH Cytotoxicity Assay using ab65393Comparison of WST-1 and INT based LDH assays. 3T3 cells were cultured in a 96-well plate in 100 µl of culture medium. The LDH assay was performed using 10 µl of culture medium using WST-1 (Brown bar) and INT (Green bar) methods. The WST-1 based LDH assay is more stable and sensitive than the INT based method.Please note: A ll products are "FOR RESEA RCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIA GNOSTIC PROCEDURES"Our Abpromise to you: Quality guaranteed and expert technical supportReplacement or refund for products not performing as stated on the datasheetValid for 12 months from date of deliveryResponse to your inquiry within 24 hoursWe provide support in Chinese, English, French, German, Japanese and SpanishExtensive multi-media technical resources to help youWe investigate all quality concerns to ensure our products perform to the highest standardsIf the product does not perform as described on this datasheet, we will offer a refund or replacement. For full details of the Abpromise, please visit https:///abpromise or contact our technical team.Terms and conditionsGuarantee only valid for products bought direct from Abcam or one of our authorized distributors。