土壤酸性转化酶(Solid-Acid invertase, S-AI)试剂盒说明书

土壤漆酶（Soil Laccase，SL）试剂盒使用说明微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC1965规格：100管/48样产品内容：试剂一：液体40mL×1瓶，4℃保存。

工作液：粉剂×2瓶，4℃避光保存，临用前每瓶加10mL试剂一溶解。

产品说明：漆酶（Laccase）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高等植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。

漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基，在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS，测定ABTS自由基的增加速率，可计算得漆酶活性。

自备实验用品及仪器：天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、震荡仪。

测定操作1.分光光度计计/酶标仪预热30min，调节波长到420nm，蒸馏水调零。

对照管测定管样本（g）0.020.02试剂一（μL）250工作液（μL）25037℃震荡反应10min，冰浴5min，分别取出上清200μL于420nm处测定吸光值，记为A对照管和A测定管。

△A=A测定管-A对照管2.酶活性计算公式a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下酶活性定义：每克土壤每分钟氧化1nmol底物ABTS所需的酶量为一个酶活力单位（U）。

SL活性（nmol/min/g）=△A/(ε×d)×V反总÷W÷T=0.694×△A÷Wε：ABTS毫摩尔消光系数：36L/mmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，0.25mL；W，样本质量，g；T：反应时间，10min。

b.用96孔板测定的计算公式如下酶活性定义：每克土壤每分钟氧化1nmol底物ABTS所需的酶量为一个酶活力单位（U）。

SL活性（nmol/min/g）=△A/(ε×d)×V反总÷W÷T=1.388×△A÷Wε：ABTS毫摩尔消光系数：36L/mmol/cm；d：比色皿光径，0.5cm；V反总：反应总体积，0.25mL；W，样本质量，g；T：反应时间，10min。

土壤纤维素酶（S-CL）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号：BC0150规格：50T/24S产品说明：S-CL主要来源于土壤微生物，S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。

本产品采用3.5－二硝基水杨酸法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。

产品内容：试剂一：甲苯10mL×1瓶，4℃保存；（自备）试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存；试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂四：液体15mL×1瓶，4℃保存；标准品：粉剂×1支，4℃保存，含10mg无水葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入1mL蒸馏水溶解，配制成10mg/mL葡萄糖溶液备用，4℃可保存1周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。

标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1mg/mL。

自备的仪器和用品:可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

操作步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。

2、加样表和测定步骤：对照管测定管标准管空白管风干土样（g）0.250.25-试剂一(μL)125125-煮沸15min（盖紧）振荡混匀，室温放置15min-第1页，共2页试剂二（μL）250250-试剂三（μL）10001000-蒸馏水（μL）250250-振荡混匀，40℃水浴糖化1h后，煮沸15min（盖紧，防止水分散失）,得糖化液糖化液(μL)5050-标准液(μL)--50蒸馏水(μL)50试剂四(μL)150150150150混匀，沸水浴中煮沸显色15min（盖紧，防止水分散失），冷却蒸馏水（μL）1050105010501050混匀，540nm处蒸馏水调零，测定吸光值A，样品管计算ΔA=A测定管-A对照管标准曲线的建立：540nm处蒸馏水调零，读标准管吸光值ΔA=A标准管-A空白管。

土壤酸性磷酸酶活性测定试剂盒使用说明微量法货号：BC0145规格：100T/96S产品内容：试剂一：液体×1瓶，4℃避光保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。

用前加100mL蒸馏水充分溶解。

试剂三：液体×1瓶，4℃保存。

试剂四：粉剂×1瓶，4℃避光保存。

临用前加576μL无水乙醇（自备），24μL蒸馏水充分溶解。

（变褐色后不能再使用）标准品：液体×1瓶，0.5μmol/mL苯酚标准液，4℃保存。

产品说明：土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。

土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响，根据最适pH范围，通常分为酸性、中性和碱性三种类型。

酸性环境中，S-ACP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出S-ACP活性。

试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水、乙醇和甲苯。

操作步骤：一、粗酶液提取：称取风干混匀土壤约0.1g，加入0.05mL甲苯（自备），轻摇15min；加0.4mL试剂一并且摇匀后，置于37℃恒温培养箱，开始计时，催化反应24h；到时后迅速加入1mL试剂二充分混匀，以终止酶催化的反应。

10000rpm室温离心10min，取上清液置于冰上待测。

二、测定步骤：1.分光光度计预热30min以上，调节波长到660nm，蒸馏水调零。

2.空白管：取微量玻璃比色皿/酶标板，加入10μL蒸馏水，20μL试剂三，4μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水166μL，混匀后室温静置30min，于660nm测定吸光度，记为A空白管。

3.标准管：取微量玻璃比色皿/酶标板，加入10μL标准液，20μL试剂三，4μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水166μL，混匀后室温静置30min，于660nm测定吸光度，记为A标准管。

土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase,S-SC）试剂盒使用说明分光光度法50管/24样货号：BC0240产品简介：S-SC能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收，其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量，微生物数量及土壤呼吸强度密切关，是评价土壤肥力的重要指标。

S-SC催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与3，5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在540nm有特征光吸收，在一定范围内540nm光吸收增加速率与S-SC活性成正比。

试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

产品内容：试剂一：甲苯5mL×1瓶，4℃保存；（自备）试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前每瓶加入40mL蒸馏水充分溶解备用；试剂四：液体45mL×1瓶，4℃保存；标准品：粉剂×1支，4℃保存，含10mg无水葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入1ml 蒸馏水溶解备用，4℃可保存1周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。

标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至0.5、0.4、0.3、0.2、0.1mg/ml。

操作步骤：试剂名称测定管对照管标准管风干土样（g）0.10.1-试剂一（μL）1515-振荡混匀，使土样全部湿润，37℃放置15min-试剂二（μL）250250-试剂三（μL）750--蒸馏水（μL）-750-混匀，放入37℃水浴培养24小时，10000g，4℃，离心5min，取上清液，同时准备标准品上清液或标准品（μL）200200200试剂四（μL）500500500充分混匀，放入沸水浴中煮沸5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混匀。

标准曲线的建立：540nm处蒸馏水调零，读标准管吸光值A。

以浓度（y）为纵坐标，吸光度A（x）为横坐标建立标准曲线。

土壤尿酸酶活性检测试剂盒说明书货号：UPLC-MS-4018规格：50T/24S紫外分光光度法产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体2mL×1瓶（自备）2-8℃保存试剂二A液液体0.5mL×1支2-8℃保存试剂二B液液体17.5mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体40mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体60mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：自备甲苯；2、试剂二：临用前按照试剂二A液︰试剂二B液=1︰35的比例混合，根据样本量所需使用当天现配现用；3、标准品：5µmol/mL的尿酸溶液。

产品说明：土壤尿酸酶（Soil Uricase，S-UR）是一种与核酸代谢有关的氧化还原酶，主要是将土壤中的核酸腺嘌呤与尿酸等物质转化成尿囊素和尿囊酸，进而生成尿素供植物利用。

土壤尿酸酶能够催化尿酸生成尿囊素、CO2和H2O2，尿酸在284nm有特征吸收峰，通过测定反应前后尿酸的减少量，来表示土壤尿酸酶活性。

（284nm）Uric Acid UreaseAllantoin+H2O2+CO2注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、研钵、可调式移液器、1mL石英比色皿、冰、30~50目筛、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。

二、测定步骤1、紫外分光光度计预热30min以上，调节波长至284nm，蒸馏水调零。

2、将5µmol/mL标准溶液用蒸馏水倍比稀释为0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625µmol/mL标准溶液待用。

货号：QS2506 规格：50管/24样可溶性酸性转化酶（Soluble acid invertase, S-AI）试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：蔗糖转化酶（Invertase，Ivr）催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。

根据最适 pH，Ivr分为酸性转化酶（AI）和中性转化酶（NI）两种类型。

AI的最适pH为3～5。

AI分为可溶性AI(S-AI)和细胞壁不溶性AI（B-AI）两种类型。

S-AI 主要存在于细胞液泡或自由空间中，最适 pH 为 4.5~5.0（酸性），通过降解液泡中蔗糖，调节液泡中蔗糖的利用和果实内糖类的积累。

测定原理：S-AI催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与3,5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范围内510nm光吸收增加速率与S-AI活性成正比。

自备实验用品及仪器：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存;试剂一：液体50mL×1瓶，4℃保存;试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入25mL试剂一充分溶解备用；用不完的试剂4℃保存;试剂三：液体30mL×1瓶，4℃避光保存；粗酶液提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。

12000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

处，蒸馏水调零，记录各管吸光值A，如果吸光值大于2，可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式中乘以相应稀释倍数)，ΔA=A测定-A对照。

S-AI活性计算：标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.001；x为标准品浓度（μg/mL），y为吸光值。

（1）按蛋白浓度计算：第1页，共2页单位的定义：37℃每mg蛋白每分钟产生1μg还原糖定义为一个酶活性单位。

土壤漆酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC1960规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体60 mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×2瓶2-8℃保存试剂三液体3 mL×1瓶常温保存溶液的配制：1、试剂二：临用前取1瓶加15 mL 试剂一溶解，现用现配，并且尽快使用，用不完的试剂2-8℃可保存一周；若试剂变色则不能使用。

2、试剂三：若有白色物质析出，放于37℃中溶解即可。

产品说明：土壤漆酶（SL ）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高等植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。

漆酶分解底物ABTS 产生ABTS 自由基，在420nm 处的吸光系数远大于底物ABTS ，测定ABTS 自由基的增加速率，可计算得漆酶活性。

ABTS Radical(420nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、天平、低温离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、震荡仪、研钵、30-50目筛。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。

二、测定步骤1.分光光度计预热30min 以上，调节波长到420nm ，蒸馏水调零。

2.加样表：试剂名称测定管对照管土样（g ）0.10.1试剂一（μL ）450450试剂二（μL）500-置于37℃水浴锅或37℃恒温培养箱准确反应10min。

试剂三（μL）5050试剂二（μL）-5004℃，12000g 离心15min，取上清于420nm测定其吸光值，分别记为A测定管、A对照管，计算ΔA测定=A测定管-A对照管。

土壤亚硝酸还原酶（S-NiR）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号：BC2995规格：100T/48S 产品内容：试剂一：粉剂×1支，4℃保存。

加入1mL蒸馏水溶解，4℃保存2周。

临用前用蒸馏水稀释400倍，现用现配。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。

临用前加15mL蒸馏水溶解，4℃保存2周。

试剂三：液体15mL×1瓶。

此溶液为饱和溶液，取上清使用即可。

试剂四：液体15mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂五：液体15mL×1瓶，4℃避光保存。

标准品：粉剂×1支，4℃保存。

10mg亚硝酸钠，临用前加入1.45mL蒸馏水配成100μmol/mL的标准溶液。

4℃保存2周。

产品说明：土壤亚硝酸还原酶（Solid-Nitrite reductase，S-NiR）是反硝化作用中的关键酶之一，它是由土壤反硝化细菌产生的一种还原酶类，可将NO 2-还原为NO，它的活性反映了生物降解过程中氮素的转化效率，为氮素转化规律的研究提供一定的依据。

亚硝酸还原酶可将NO 2-还原为NO，使样品中参与重氮化反应生成紫红色化合物的NO 2-减少，即540nm处吸光值的变化可反应土壤中亚硝酸还原酶的活性。

自备实验用品及仪器：可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、30目（或更大）筛、冰和蒸馏水。

测定操作：1、样本处理：新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。

2、操作步骤：（1）可见分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至540nm。

蒸馏水调零。

（2）将标准溶液用蒸馏水稀释为0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125μmol/mL的标准溶液。

（3）加样表：无机质管空白管1对照管测定管标准管空白管2风干土样（g）--0.050.05--蒸馏水（μL）-100100--试剂一（μL）100-100--试剂二（μL）100100100100--混匀后，25℃反应3h试剂三（μL）100100100100--充分震荡30s，10000rpm，4℃，离心10min--上清液（μL）100100100100--标准品（μL）----100-试剂四（μL）100100100100100100试剂五（μL）100100100100100100蒸馏水（μL）-----100充分混匀，室温放置15min后吸取200μL于微量玻璃比色皿或96孔板中测定540nm各管吸光值，分别记为A无机质管、A空白管1、A对照管、A测定管、A标准管和A空白管2，计算ΔA测定=（A无机质管-A空白管1）-（A测定管-A对照管），ΔA标准=A标准管-A空白管2。

土壤中性磷酸酶（soil neutral phosphatase）活性测定试剂盒（分光光度法）货号:BC0460规格:50T/48S产品简介：土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。

土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响，根据最适pH范围，通常分为酸性、中性和碱性三种类型。

中性环境中，S-NP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出S-NP活性。

产品内容：试剂一：液体×1瓶，4℃避光保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。

用前加50mL蒸馏水充分溶解。

试剂三：液体×1瓶，4℃保存。

试剂四：粉剂×1支，4℃避光保存。

临用前加1152μL无水乙醇（自备），48μL蒸馏水充分溶解。

（变褐色后不能再使用）标准品：液体×1支，0.5μmol/mL苯酚标准液，4℃保存。

操作步骤：一、粗酶液提取：称取风干混匀土壤约0.1g，加入0.05mL甲苯（自备），轻摇15min；加0.4mL试剂一并且摇匀后，置于37℃恒温培养箱，开始计时，催化反应24h；到时后迅速加入1mL试剂二充分混匀，以终止酶催化的反应。

8000rpm，25℃离心10min，取上清液置于冰上待测。

二、测定步骤：1.分光光度计预热30min以上，调节波长到660nm，蒸馏水调零。

2.空白管：取1mL玻璃比色皿，加入50μL蒸馏水，100μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830μL，混匀后室温静置30min，于660nm 测定吸光度，记为A空白管。

3.标准管：取1mL玻璃比色皿，加入50μL标准液，100μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830μL，混匀后室温静置30min，于660nm 测定吸光度，记为A标准管。

4.测定管：取1mL玻璃比色皿，加入50μL上清液，100μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830μL，混匀后室温静置30min，于660nm 测定吸光度，记为A测定管。

土壤酸性磷酸酶（soil acid phosphatase）活性测定试剂盒（分光光度法）使用说明货号:BC0140规格:50T/48S产品简介：土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。

土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响，根据最适pH范围，通常分为酸性、中性和碱性三种类型。

酸性环境中，S-ACP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出S-ACP活性。

产品内容：试剂一：液体×1瓶，4℃避光保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。

用前加50mL蒸馏水充分溶解。

试剂三：液体×1瓶，4℃保存。

试剂四：粉剂×1支，4℃避光保存。

临用前加1152μL无水乙醇（自备），48μL蒸馏水充分溶解。

（变褐色后不能再使用）标准品：液体×1支，0.5μmol/mL苯酚标准液，4℃保存。

操作步骤：一、粗酶液提取：称取风干混匀土壤约0.1g，加入0.05mL甲苯（自备），轻摇15min；加0.4mL试剂一并且摇匀后，置于37℃恒温培养箱，开始计时，催化反应24h；到时后迅速加入1mL试剂二充分混匀，以终止酶催化的反应。

8000rpm，25℃离心10min，取上清液置于冰上待测。

二、测定步骤：1.分光光度计预热30min以上，调节波长到660nm，蒸馏水调零。

2.空白管：取1mL玻璃比色皿，加入50μL蒸馏水，100μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830μL，混匀后室温静置30min，于660nm 测定吸光度，记为A空白管。

3.标准管：取1mL玻璃比色皿，加入50μL标准液，100μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830μL，混匀后室温静置30min，于660nm 测定吸光度，记为A标准管。

4.测定管：取1mL玻璃比色皿，加入50μL上清液，100μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830μL，混匀后室温静置30min，于660nm 测定吸光度，记为A测定管。