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![吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s1/m/b0ed930b102de2bd970588c5.png)
专利名称：吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法专利类型：发明专利
发明人：詹志斌,秦巨波,谢秀萍,陈小波,龚明峰,张志刚
申请号：CN201911130294.9
申请日：20191118
公开号：CN111595954A
公开日：
20200828
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法，其是利用高效液相色谱法对吲达帕胺原料药中的DCC和DCU进行检测，包括以下步骤：(1)配制吲达帕胺原料药供试品溶液；(2)分别配制DCC对照品溶液、DCU的对照品溶液和DCC&DCU对照品溶液；(3)进样，按以下条件对步骤(1)供试品溶液和步骤(2)中的对照品溶液分别进行检测：色谱条件：流动相：乙腈‑水；梯度洗脱：
0‑30min乙腈比例由10‑40％逐渐升至90‑98％；柱温为33‑37℃；流速为1.4‑1.6ml/min；检测波长为190‑210nm；(4)将供试品DCC、DCU对应的峰面积与对照品溶液计算得到DCC、DCU的含量。
本发明所提供的吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法，使用的试剂毒性小，杂质干扰少，检测方法可靠稳定。
申请人：远大医药(中国)有限公司
地址：430000 湖北省武汉市硚口区硚口路160号1幢23层1-6号
国籍：CN
代理机构：武汉蓝宝石专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：王振宇
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医药界 2020年06月第12期—115—临床经验基于HPLC 法的吲达帕胺片有关物质测定曹 祺 潘翠萍（广东安诺药业股份有限公司，广东 普宁 515300）【摘要】:目的：基于HPLC 法测定吲达帕胺片有关物质。
方法：采用高效液相色谱设备，流动相为甲醇（CH 3OH ）-水（H 2O ）-冰醋酸（CH 3COOH ）比例为30:40:0.2，流速为2ml/min ，检测波长为260nm 。
结果：通过测定得出，实验组的测定误差在0.70μg/ml~0.90μg/ml 范围内，而对照组的测定误差最小值也超过了1.00μg/ml 。
结论：基于HPLC 法的吲达帕胺片有关物质测定方法具有可有效降低测定结果误差，进一步提高测定方法的准确性，保障药品制备的质量。
【关键词】：HPLC 法；吲达帕胺片；有关物质；测定；【中图分类号】R 927 【文献标识码】A 【文章编号】2095-4808（2020）12-115-010.引言吲达帕胺片是一种常见治疗高血压的药物，吲达帕胺的化学名称为：N-（3-甲基-2,3-二氢-1H-吲哚基）-3-氨磺酰基-4-氯-苯甲酰胺，尤其化学名称可以看出，该药物是一种携带吲哚环的磺胺衍生物[1]。
除了治疗高血压疾病外，吲达帕胺片还可通过抑制远端肾小管皮质稀释段对钠元素的重吸收，从而促进尿液中钠元素的排泄量增加，同时在一定程度上增加钾元素的排泄量，具备一定的利尿效果。
其次，该药物还具备一定的降压作用，但目前由于研究较浅，吲达帕胺片在降压作用中的相关机制尚未作出明确的判断。
当前在医药市场当中，吲达帕胺片主要作为利尿和降压的药物，且需求量较大，是各大零售药店和医院终端的畅销药物[2]。
随着药物生产技术的不断更新，该药物的生产规模也将逐步扩大，并且含有吲达帕胺的口服缓控释制剂也具备良好的应用前景，当前国内外药物市场中吲达帕胺主要以普通片、缓释片和缓释胶囊等类型药剂为主。
针对吲达帕胺片的有关物质组成成分，本文提出一种基于HPLC 法的吲达帕胺片有关物质测定方法。
HPLC检测中药中非法添加化学降压药物随着高血压疾病的普遍发生，化学降压药物被广泛应用于临床治疗中。
然而，一些不良商家为增加中药的功效，非法向中药中添加化学降压药物，这既影响患者的健康，也破坏了中药的药性。
因此，如何检测中药中是否存在非法添加化学降压药物成为了一个重要的研究问题。
目前，高效液相色谱（HPLC）已经成为检测中药中非法添加化学降压药物的常用方法之一。
HPLC技术基于物质在固体与液体之间的相互作用而实现物质的分离和检测。
常见的液相色谱柱包括反相柱、离子交换柱和大小排列柱等。
而检测中药中非法添加化学降压药物则需要选用特定的柱型和检测条件。
具体来说，针对不同的化学降压药物，需要选择适当的检测波长和检测方法。
以利福平为例，通常采用反相柱（C18）作为固相，流动相则是甲醇-水混合液。
在此条件下，利福平的检测波长通常为254 nm。
如果中药中非法添加了利福平，那么就会出现具有特征波长和保留时间的峰。
而利福平的峰面积和峰高则可用来计算其含量。
其他化学降压药物的检测方法也类似，唯一不同的是某些药物需要特殊的检测条件。
当然，在HPLC检测过程中，需要注意一些技巧和细节。
首先，样品的前处理至关重要，自然干燥和无菌破碎等操作是必须的。
其次，需要根据样品的特点选用不同的提取方法，比如超声波法、微波法和微量萃取法等。
如此，才能有效提取化学降压药物并减少杂质的干扰。
最后，在完成HPLC检测后，还需要对检测结果进行质量评估，如判断峰的对称程度、峰面积和峰高等。
总的来说，HPLC检测是一种可靠的手段，用于检测中药中非法添加化学降压药物。
当然，在实际检测中，也需要结合其它检测手段，如质谱分析或核磁共振成像，从而更好地保护人民的健康和安全。
吲达帕胺缓释片的制备及体外释放度测定谢清春;陈燕忠;吕竹芬;何敏【摘要】目的制备吲达帕胺缓释片并测定其释放度.方法以进口市售片为对照片,以高效液相色谱法为测定释放度的方法,以释放度为指标筛选缓释片处方,考察填充剂类型(乳糖、可溶性淀粉及微晶纤维素)及羟丙基甲基纤维素(HPMC K4M)用量对释放度的影响;并对自制片和对照片的释放曲线进行相似性评价.结果以乳糖作填充剂,HPMC K4M的质量分数为25%时,自制缓释片的释放度与对照片比较差异无统计学意义.释放度测定方法:吲达帕胺的质量浓度在0.2～1.5 μg·mL-1范围内与峰面积线性关系良好,低、中、高3个浓度的回收率分别是100.08%、99.67%、99.58%.结论自制缓释片处方工艺简单、经济,释放曲线与对照片相似.【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2010(026)006【总页数】3页(P561-563)【关键词】吲达帕胺;缓释片;高效液相色谱法;体外释放【作者】谢清春;陈燕忠;吕竹芬;何敏【作者单位】广东药学院,药物研究所/广东省药物新剂型重点实验室,广东,广州,510006;广东药学院,药物研究所/广东省药物新剂型重点实验室,广东,广州,510006;广东药学院,药物研究所/广东省药物新剂型重点实验室,广东,广州,510006;广东药学院,药物研究所/广东省药物新剂型重点实验室,广东,广州,510006【正文语种】中文【中图分类】R94吲达帕胺(indapamide)属于噻嗪类利尿药,降压作用强而利尿作用弱,其抗高血压和排钠利尿作用是分离的:低剂量时降低血压,较高剂量时其附加的利尿作用才显著[1]。
该药由法国Servier公司首先研制[2],《中国药典》2010年版收载了其普通片剂。
目前国内临床应用较多的缓释片是进口的纳催离(natrilix SR),它能在24 h内很好地控制血压,且在服药后的25～30 h之间仍能稳定降压。
高校液相色谱法测定吲达帕胺片的含量石家庄杏林锐步医药科技股份有限公司河北石家庄050000
摘要：目前,吲达帕胺片质量标准已收载入中国药典2020年版二部中，其含
量测定采用紫外分光光度法。
本文主要论述采用高效液相色谱法测定吲达帕胺片
的含量。
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Agilent ZORBAX SB-C18，
4.6mm×150mm，5µm）；以0.1%磷酸水溶液-乙腈-甲醇（60:30:10）为流动相；
柱温25℃；流速为每分钟1.5ml；检测波长240nm。
关键词：高效液相色谱法；吲达帕胺；含量测定；
吲达帕胺为磺胺类利尿药，临床上主要用于治疗原发性高血压。
目前，吲达帕胺片质量标准已收载入中国药典2020年版二部、国外药典（USP、BP、JP）中。
ChP2020吲达帕胺片的含量测定分析方法为紫外分光光度法，USP、BP、JP中采用的为高校液相色谱法。
优先考虑专属性好、灵敏度高的HPLC 法。
考虑USP、BP的含量测定中均采用离子对试剂作为流动相，而JP中选择0.1%磷酸溶液-乙腈-甲醇（6:3:1）作为流动相，成分简单，且易于冲洗，我们选择
在JP基础上建立吲达帕胺片的含量测定分析方法。
一、主要仪器与试剂
高效液相色谱仪、分析天平、超声波清洗仪。
水、乙腈（色谱纯）、甲醇
（色谱纯）、磷酸、无水乙醇、吲达帕胺对照品。
二、分析方法建立
1.流动相及色谱柱的确认
参考JP中吲达帕胺片质量标准，我们选择十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，经筛选，以Agilent ZORBAX SB-C18（4.6mm×150mm，5µm）作为色谱柱；并采用JP中的流动相0.1%磷酸溶液-乙腈-甲醇（6:3:1）。
1.检测波长的选择
根据吲达帕胺对照品的全波长扫描图谱，吲达帕胺在208nm、240nm附近均有吸收，但208nm波长较低，考虑到空白辅料可能带来的干扰以及紫外灯寿命问题，选定本方法的检测波长为240nm。
1.流速的选择
参照JP吲达帕胺片质量标准，在柱温30℃条件下，分别设置流速为每分钟1.5 ml、1.8ml，采集色谱图，其主峰保留时间依次为5.9min、4.9min，均可，我们选择1.5ml/min作为本方法的流速。
1.柱温的选择
筛选不同柱温：25℃、30℃、35℃、40℃。
结果发现各温度条件下理论板数与对称因子未有显著变化，但柱温高于30℃时，主峰前未知杂质与主峰无法达到分离，因此选定本方法的柱温为分离效果更好的25℃。
1.进样浓度的选择
分别配制浓度为10μg/ml、25μg/ml供试品溶液进行含量测定，两个浓度的样品含量依次101.2%、99.7%，基本一致；对称因子与理论板数无显著差别，但浓度为10μg/ml时信噪比仅为737.6，远低于2000，因此本方法样品浓度选用25μg/ml。
1.进样体积的选择
考察进样体积为10μl、20μl及50μl。
进样体积50μl时，理论板数显著降低；进样体积10μl和20μl时的信噪比均大于2000，符合要求，但进样体积10μl时理论板数较高，因此本方法选择进样体积为10μl。
1.最终确定的分析方法
色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Agilent ZORBAX SB-C18，4.6×150mm，5µm，或效能相当的色谱柱）；以0.1%磷酸水溶液-乙腈-甲醇（60:30:10）为流动相；柱温25℃；流速为每分钟1.5ml；检测波长240nm。
供试品配制取本品20片，精密称定，研细，精密称取细粉适量（相当于
吲达帕胺2.5mg），置100ml量瓶中，加溶剂适量，振摇超声至少30min使溶解，用溶剂稀释至刻度，摇匀，经0.45μm有机针式过滤器滤过，取续滤液，即得。
对照品溶液：取吲达帕胺对照品适量，精密称定，加50%乙醇溶解并稀释制
成每l ml中约含25µg的溶液。
三、分析方法验证
1.系统适用性
取对照品溶液，连续进样6针，吲达帕胺峰面积的相对标准差为0.1%，小于2%。
系统适用性良好。
2.专属性
经酸、碱、氧化、高温、高湿、光照破坏后，空白溶液、空白辅料在吲达帕
胺主峰位置均无干扰；降解产物峰与主峰之间的分离度介于1.07～25.15，符合
要求；以二极管阵列检测器检测主峰纯度，角度均小于阈值，符合要求。
专属性
良好。
3.线性与范围
配制不同浓度（40%、50%、60%、75%、125%、100%、150%）的对照品溶液，
测定，得出回归方程为y=0.3804x-0.0144，R2为0.9998，线性良好。
图1 吲达帕胺线性关系图
4.准确度
配制80%、100%、120%浓度的加标溶液，每个浓度平行配制3份，进行测定。
平均回收率为100.1%，RSD（n=9）为0.6%，准确度较高。
5.精密度
由不同操作者分别在不同日期使用不同仪器，配制6份供试品溶液，并测定。
RSD=0.9%、0.6%（n=6），RSD=0.8%（n=12）。
精密度良好。
6.耐用性
该方法在流动相中磷酸水溶液比例（±5%）、乙腈比例（±5%）、甲醇比例（±3%）、配制磷酸水溶液磷酸加入量（±0.2ml）、柱温（±5℃）、波长
（±5nm）、流速（±20%）及同一厂家同一型号不同批号色谱柱各条件变化之后，吲达帕胺片的含量测定RSD 为 0.8%，测定结果均在 94%～96%之间，符合规定，
耐用性良好。
四、总结
综上所述，根据《化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则》及相关指
导原则，对建立的吲达帕胺片含量测定方法，从专属性、线性与范围、精密度、
准确度、耐用性等方面进行方法学验证，结果表明：本方法专属性好、精密度好、准确度高、线性良好、耐用性好，适用于吲达帕胺片含量测定。
参考文献：
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2020年版二部.中国医药科技出
版社，2020.05:589.
[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典2020年版四部.中国医药科技出
版社，2020.05:480-483.
[3]课题研究组.化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则. 2005.03:1-13.
[4]JP18:1049-1050.
[5]USP40:115-116.
[6]BP2018.。
