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2024食安快线考试题库及答案一、单项选择题1. 食品中污染物限量标准中，污染物是指（）。
A. 食品原料中固有的B. 在食品生产、加工、包装、贮存、运输过程中产生的C. 食品中所含有的对人体健康可能造成危害的物质D. 食品中所含有的对人体健康有益的物质答案：C2. 食品安全标准应当以（）为依据。
A. 科学原则B. 法律原则C. 经济原则D. 政治原则答案：A3. 食品生产经营者对其生产经营食品的安全负责，应当依照法律、法规和食品安全标准从事生产经营活动，保证食品安全，诚信自律，对社会和公众负责，接受（）。
A. 社会监督B. 政府监督C. 消费者监督D. 媒体监督答案：A4. 国家建立食品安全风险监测制度，对食源性疾病、食品污染以及食品中的有害因素进行监测。
下列哪项不是食品安全风险监测的目的（）。
A. 收集食品污染数据B. 收集食源性疾病数据C. 收集食品中有害因素数据D. 收集食品营养成分数据答案：D5. 食品生产经营者应当建立并执行从业人员健康管理制度，患有国务院卫生行政部门规定的有碍食品安全疾病的人员，不得从事接触直接入口食品的工作。
下列哪项不是有碍食品安全的疾病（）。
A. 霍乱B. 病毒性肝炎C. 活动性肺结核D. 贫血答案：D二、多项选择题6. 食品生产经营者应当依照法律、法规和食品安全标准从事生产经营活动，下列哪些行为是符合要求的（）。
A. 使用符合食品安全标准的食品原料B. 使用符合食品安全标准的食品添加剂C. 使用不符合食品安全标准的食品包装材料D. 遵守食品安全操作规范答案：ABD7. 国家对食品生产经营实行许可制度，下列哪些单位需要取得食品生产经营许可（）。
A. 食品生产者B. 食品经营者C. 食品添加剂生产者D. 食品检验机构答案：ABC8. 食品安全风险评估不得向生产经营者收取费用，食品安全风险评估结果应当及时向（）通报。
A. 国务院卫生行政部门B. 国务院农业行政部门C. 国务院食品药品监督管理部门D. 国务院质量监督部门答案：ABC9. 食品生产经营者应当建立食品安全追溯体系，下列哪些信息需要记录（）。
食品安全与检测技术期末复习考点总结(加强版)work Information Technology Company.2020YEAR一：前言1、食品安全（WHO定义目前）：在规定的使用方式和用量的条件下长期食用，对食用者不产生不良反应的实际把握。
2、食品安全问题造成的后果:经济损失、政治后果和贸易纠纷3、食品危害因子类型：生物危害（细菌、寄生虫、病毒）、化学危害（天然毒素、添加剂、农兽药、化肥、清洗消毒剂）、物理危害（头发、昆虫、玻璃、金属、辐照射线）二：检测技术原理1、紫外一可见分光光度法原理：分子价电子吸收波长范围在200-760nm区间的电磁辐射能而产生能级间跃迁形成的的吸收光谱称为该物质的紫外—可见吸收光谱，利用紫外～可见光谱进行物质的定性、定量分析的方法称为紫外—可见分光光度法。
紫外一可见分光光度法分为原子吸收光谱和分子吸收光谱两种。
2、气相色谱法(GC)原理：利用试样中各组分在气相-固定、气-液相间的分配系数不同,当汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时,组分就在其中的两相间进行反复多次分配,经过一定的柱长后,便彼此分离,按顺序离开色谱柱进入检测器,产生的离子流讯号经放大后,在记录器上描绘出各组分的色谱峰。
（使用气相色谱应从两个方面考虑,即色谱柱和检测器。
气相色谱法使用的色谱柱主要是填充柱和毛细管柱）。
气相色谱检测器：浓度型检测器：测量的是载气中某组分浓度瞬间的变化，即检测器的响应值和组分浓度成正比。
质量型检测器：测量的是载气中某组分进入检测器的速度变化，即检测器的响应值和单位时间内进入检测器某组分的质量成正比3、气相色谱-质谱法( GC-MS)原理：质谱分析法基本原理: 采用高速粒子来撞击气态分子或原子，将电离后的正离子加速导入质量分析器中，然后按质荷比(m/z )的大小顺序进行收集和记录，即得到质谱图。
根据质谱峰的位置进行物质的定性和结构分析，根据峰的强度进行定量分析。
气相色谱-质谱法( GC-MS) 是将气相色谱仪和质谱仪串联起来,成为一个整机使用的检测技术,它既具有气相色谱高的分离效能,又具有质谱准确鉴定化合物结构的特点,可达到同时定性、定量的检测目的。
单位食品安全快检知识试题一、选择题1、国家标准肉肠的亚硝酸盐含量为≤（A）mg/kg。
A、30 B 70 C、10 D、502. 快速检测所用试剂应在（A）条件下保存。
A、4～30℃阴凉干燥处B、 0～14度冷藏C、-18以下冷冻D、20～30照晒3. 手持ATP适用于（A）的检测。
A 餐用具洁净度B 油脂老化程度C 微生物菌群 D水果蔬菜中的农药残留4、下列（B）类农药不是农药速测卡的常检农药种类?A、有机磷B、有机氯C、氨基甲酸酯 D酶5、以下（C）样品浸泡液不需冉处理就可直接用于检测?A、有明显可见色泽B、混浊或有悬浮物;C、澄清透明D、以上都不是。
6.做亚硝酸盐快速检测时，称取2g待测样品，加入20ml蒸馏水，震荡过滤，取1mL滤液加入9mL蒸馏水，混匀待测，此待测液的稀释倍数为（A）A 100倍B 10倍C 20倍D 50倍7、试剂保管时应注意以下（D）因素？A、高温热源B、潮湿C、密封D、以上都是8 .采用国家规定的快速检测方法对食用农产品进行抽查检测,被抽查人对检测结果有异议的,可以自收到检测结果时起( )小时申请复检。
复检( C )采用快速检测方法。
A.四、可以B.二十四、可以C.四、不得D.二十四、不得9.（B）适用于肉制品、肉类罐头、蔬菜、酱腌菜、鲜肉类、鲜鱼类、食用盐、瓶装饮料中的快速定量测定。
A孔雀石绿 B 亚硝酸盐 C吊白块 D明矾10. 50%乙醇提取溶液怎样配置（B）A、乙醇与水1:2体积混匀B、乙醇与水1:1等体积混匀C、乙醇与水2:1体积混匀11. 对快检的采样数量描述正确的是（D）A散装食品样品:每份不少于5kgB 采样分为两份：一份用于检测，一份用于留样C定型包装食品样品：<250g包装的, 取样件数不少于6件D定型包装食品样品:>250g包装的,取样件数不少6件12、下列物质中属于食品添加剂的是（B）。
A、甲醛B、二氧化硫C、亚硝酸钠D、吊白块13.食品安全快速检测的初步筛查结果（A）作为执法依据。
可编辑修改精选全文完整版食品安全快检知识题库.doc单位姓名食品安全快检知识试题一、选择题1、国家标准肉肠的亚硝酸盐含量为≤（A）mg/kg。
A、30 B 70 C、10 D、502. 快速检测所用试剂应在（A）条件下保存。
A、4～30℃阴凉干燥处B、 0～14度冷藏C、-18以下冷冻D、20～30阳光照晒3. 手持ATP适用于（A）的检测。
A 餐用具洁净度B 油脂老化程度C 微生物菌群 D水果蔬菜中的农药残留4、下列（B）类农药不是农药速测卡的常检农药种类A、有机磷B、有机氯C、氨基甲酸酯 D酶5、以下（C）样品浸泡液不需冉处理就可直接用于检测A、有明显可见色泽B、混浊或有悬浮物;C、澄清透明D、以上都不是。
6.做亚硝酸盐快速检测时，称取2g待测样品，加入20ml蒸馏水，震荡过滤，取1mL滤液加入9mL蒸馏水，混匀待测，此待测液的稀释倍数为（A）B 10倍C 20倍D 50倍7、试剂保管时应注意以下（D）因素A、高温热源B、潮湿C、密封D、以上都是8 .采用国家规定的快速检测方法对食用农产品进行抽查检测,被抽查人对检测结果有异议的,可以自收到检测结果时起( )小时内申请复检。
复检( C )采用快速检测方法。
A.四、可以B.二十四、可以C.四、不得D.二十四、不得9.（B）适用于肉制品、肉类罐头、蔬菜、酱腌菜、鲜肉类、鲜鱼类、食用盐、瓶装饮料中的快速定量测定。
A孔雀石绿 B 亚硝酸盐 C吊白块 D明矾10. 50%乙醇提取溶液怎样配置（B）A、乙醇与水1:2体积混匀B、乙醇与水1:1等体积混匀C、乙醇与水2:1体积混匀11. 对快检的采样数量描述正确的是（D）A散装食品样品:每份不少于5kgB 采样分为两份：一份用于检测，一份用于留样C定型包装食品样品：<250g包装的, 取样件数不少于6件D定型包装食品样品:>250g包装的,取样件数不少6件12、下列物质中属于食品添加剂的是（B）。
食品平安快速检测学问测试题一、单项选择题1、下列类农药不是农药速测卡的常检农药种类?A、有机磷B、有机氯C、氨基甲酸酯2、试剂保管时应留意以下因素？A、高温热源B、潮湿C、阳光照耀D、密封E、以上都是3、具有很好的漂白、抗氧化和防腐等作用，还能掩盖发霉的蜜栈半成品、银耳和虾仁等霉斑。
A、二氧化硫B、二氧化碳C、硫化氢4、酱腌菜由于腌制、储存或加工不当，会含有高浓度的。
A、亚硝酸盐B、硝酸盐C、亚硫酸盐5、甲醛检测时，以下食品应作为最重点的检测与监管对象？A、水发品、血制品B、鲜香菇C、干香菇D、豆制品；6、硫磺燃烧时可产生气体，可使食品表面颜色显得白亮，艳丽，有漂白和保鲜食品作用。
A、二氧化碳B、二氧化硫C、硫化氢7、以下样品浸泡液不需再处理就可干脆用于检测？A、有明显可见色泽B、混浊或有悬浮物；C、澄清透亮D、以上都不是。
8、下列物质中属于食品添加剂的是。
A、甲醛B、二氧化硫C、硼砂D、吊白块9、食品加工添加吊白块是利用其分解产生的具有增加食品弹性，亚硫酸盐有漂白食品的作用。
A、甲醛B、二氧化硫C、亚硫酸盐10、以下食品用工业双氧水处理后，对人体危害最大的是。
A、干果类；B、干制水产；C、病死禽畜肉；D、牛奶11、鱼丸、肉丸比较可能还有的含有的有毒物质是。
A、甲醛B、二氧化硫C、硼砂D、亚硝酸盐12、国家标准肉肠的亚硝酸盐含量为≤。
A、30B、70C、10D、5013、食品检测采样时，依据样品作用可以分为试验样品、复验样品、。
A、原始样品B、平均样品C、保留样品14、仪器快速检测西式火腿样品的亚硝酸盐含量为98时，相宜的处理方法为。
A、提出警告B、查封食品C、取样送检D、暂停销售，取样复检15、依据《浙江省流通领域商品质量快速定性检测规则》规定，检测点每周检测不少于，每天检测样品不少于批次，全年检测样品不少于批次。
A、5天、12个、3500个B、5天、8个、2500个C、5天、10个、4000个D、5天、15个、5000个二、推断题（对的打√，错的打×）1、37%左右的甲醛溶液俗称“福尔马林”，医学上用于尸体和样品的防腐，水产品和水发品浸泡甲醛有保鲜和提高感官质量的效果。
单位姓名食品安全快检知识试题一、选择题1、国家标准肉肠的亚硝酸盐含量为≤（A）mg/kg。
A、30 B 70 C、10 D、502. 快速检测所用试剂应在（A）条件下保存。
A、4～30℃阴凉干燥处B、 0～14度冷藏C、-18以下冷冻D、20～30阳光照晒3. 手持ATP适用于（A）的检测。
A 餐用具洁净度B 油脂老化程度C 微生物菌群 D水果蔬菜中的农药残留4、下列（B）类农药不是农药速测卡的常检农药种类?A、有机磷B、有机氯C、氨基甲酸酯 D酶5、以下（C）样品浸泡液不需冉处理就可直接用于检测?A、有明显可见色泽B、混浊或有悬浮物;C、澄清透明D、以上都不是。
6.做亚硝酸盐快速检测时，称取2g待测样品，加入20ml蒸馏水，震荡过滤，取1mL滤液加入9mL蒸馏水，混匀待测，此待测液的稀释倍数为（A）A 100倍B 10倍C 20倍D 50倍7、试剂保管时应注意以下（D）因素？A、高温热源B、潮湿C、密封D、以上都是8 .采用国家规定的快速检测方法对食用农产品进行抽查检测,被抽查人对检测结果有异议的,可以自收到检测结果时起( )小时内申请复检。
复检( C )采用快速检测方法。
A.四、可以B.二十四、可以C.四、不得D.二十四、不得9.（B）适用于肉制品、肉类罐头、蔬菜、酱腌菜、鲜肉类、鲜鱼类、食用盐、瓶装饮料中的快速定量测定。
A孔雀石绿 B 亚硝酸盐 C吊白块 D明矾10. 50%乙醇提取溶液怎样配置（B）A、乙醇与水1:2体积混匀B、乙醇与水1:1等体积混匀C、乙醇与水2:1体积混匀11. 对快检的采样数量描述正确的是（D）A散装食品样品:每份不少于5kgB 采样分为两份：一份用于检测，一份用于留样C定型包装食品样品：<250g包装的, 取样件数不少于6件D定型包装食品样品:>250g包装的,取样件数不少6件12、下列物质中属于食品添加剂的是（B）。
A、甲醛B、二氧化硫C、亚硝酸钠D、吊白块13.食品安全快速检测的初步筛查结果（A）作为执法依据。
一、样本采集的基本知识1.1样本采集的基本概念采样(又称取样、抽样)就是从原料或产品的总体(通常是一批食品)中抽取一部分样本，通过分析一个或数个样本，对整批食品的质量进行估计。
根据样本的性质可分为原始样本和平均样本。
原始样本：根据待检食品的性质，按相应规则从待测食品的各个部位采集少量的小样，混合在一起即是该批食品的原始样本。
平均样本：将原始样本混合均匀按四分法平均地分出～部分作为全面检验用的样本。
根据样本的作用可分为试验样本、复检样本和保留样本。
试验样本：由平均样本中分出用于全部项目检验用的样本。
复检样本：对检验结果有怀疑有争议或分歧时可根据具体情况进行复检，故必须有复检样本。
保留样本：对某些样本需封存保留一段时间，以备再次验证。
原始样本通常数量较大，需要采用一定的方式进行取舍，即四分法。
具体做法是将采得的原始样本置于一大而洁净的平面上，用洁净器具充分搅拌均匀后堆成一圆锥形，将锥顶压平，使厚度为3cm左右，然后等分四份，弃去对角两份，将剩下的两份按上法再进行混合，分四份，重复上述操作直至剩余量为所需的样本量为止。
1.2采样的原则1.2.1．代表性原则食品因加工批号，原料情况(来源、种类、地区、季节等)，加工方法，运输、贮藏条件，销售中的各个环节(如有无防蝇、防蜂螂、防鼠等设备)及销售人员的责任心和卫生知识水平等都对食品卫生质量有着重要影响。
在采样时必须考虑这些因素，使所采的样本能真正反映被采样的总体水平，也就是通过对具代表性样本的监测能客观推测食品的质量。
1.2.2典型性原则采集能充分说明达到监测目的的典型样本，包括以下几种样本。
（1）污染或怀疑污染的样本应采集接近污染源的食品或易受污染的那一部分，以证明是否被污染。
同时还应采集确实被污染的同种食品作一空白对照试验。
（2）中毒或怀疑中毒的食品这类样本种类较多，有呕吐物、排泄物、血液、脏器、胃肠及内容物、中毒者吃剩下的食物、药物和其他有关物质。
应根据中毒症状、可疑中毒物性质采集可能含毒量最多的样本，中毒者吃剩下的食物、餐具(未洗刷)、药品是最好的检材。
一、食品安全问题国内2008年奶粉三聚氰胺，2010年7月又重现江湖；2010年的海南“豇豆事件”及“农夫山泉事件”；2010年8月出现的“圣元奶粉早熟事件”国外2010年8月美国的鸡蛋沙门氏菌事件；2010年8月出现的超级细菌事件。
2010年10月26日，中国疾病预防控制中心发布信息称，近期检测出三株NDM-1耐药基因阳性细菌。
这三个病例分别来自于今年3月和6月提取的细菌样本，特别是两例新生儿病例，基本可以由此排除境外传入的可能。
此次所测细菌的实际取样时间，早于英国科学家发现NDM-1之前。
这也就表明，早在英国科学家发现超级细菌之前，超级病菌此前就在中国存在。
“分别在宁夏和福建查出的含NDM-1耐药基因细菌病例，可以理解成该耐药基因可能已经存在于人群中，只是尚未被检测到。
”10月27日，中国疾控中心办公室主任王健在接受本报记者采访时说。
二、《食品安全快检技术》与《食品分析》的区别内容上；分析手段上；分析的目的。
免疫标记技术（放射免疫、荧光免疫、胶体金免疫技术及酶联免疫技术）。
PCR（polymerase chain reaction）技术。
基因芯片技术。
生物酶抑制技术等。
三、主要内容（理论）第一章免疫技术重点为ELISA技术第二章基因食品的检测重点为PCR技术第三章食品中有害化学物质的检测重点为胆碱酯酶抑制法测定农药,微生物生长抑制法测定抗生素第四章食品中有害微生物的快速检测重点为微生物的显色培养快速检测法第五章食品中毒素的快速检测重点为生物法测定食品中的毒素第一章免疫学技术第一节有关免疫的基本理论一抗原与抗体的基本理论（一）抗原1 抗原的定义完全抗原：进入动物体内能刺激动物的免疫系统发生免疫应答，从而引起动物产生抗体或形成致敏淋巴细胞（免疫原性），并能和抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质（免疫反应性）。
半抗原：只具有免疫反应性。
2 免疫原性抗原能否成功诱导宿主产生免疫应答取决于三个方面：抗原异质性：抗原物质和宿主本身物质之间的差异，抗原物质的来源和宿主的亲缘关系越远，抗原性越强；分子量：越大，免疫原性越强；化学结构：蛋白质＞多糖和核酸；支链、环状结构＞直链，球形＞线形分子。
宿主个体发育、生理状态和遗传性等都对免疫原性有很大影响，所以不同动物，同种动物的不同个体的免疫都有差异。
免疫方式主要包括抗原的进入途径、剂量、次数、间隔时间等。
3 特异性体现在免疫原性及免疫反应性上。
一种抗原只能诱发一种特异的免疫应答，结果形成特异性抗体或致敏淋巴细胞；抗原只能与其诱导的特异性抗体或致敏淋巴细胞进行反应，这是其在食品安全快检中得以广泛应用的基础。
抗原的特异性是由抗原决定簇决定的，抗原决定簇是抗原分子上具有一定组成和结构的特殊化学基团，多数天然抗原分子通常存在多种抗原决定簇，一般来讲，不同的抗原其抗原决定簇不同，但有时，某一种抗原决定簇也会出现在其他抗原分子上，使其成为共同抗原决定簇，这种抗原决定簇是抗原抗体交叉反应的基础。
4 抗原分类根据来源分：天然、人工和合成抗原三类，天然抗原指天然的生物、细胞及天然产物；人工抗原指人工化学改造后的抗原，如半抗原经化学改造后就是人工抗原；合成抗原是指化学合成的抗原，比如氨基酸的聚合物。
根据水溶性分：不溶的颗粒抗原和可溶性胶体抗原，如细菌的鞭毛、纤毛和菌体都是颗粒抗原；蛋白质、多糖、DNA和真菌毒素都是可溶性胶体抗原。
按亲缘关系不同：自身抗原、同种型抗原、异种抗原。
按免疫应答机理：普通抗原和超级抗原（极低浓度的抗原产生非常强的免疫效应）。
（二）抗体1 抗体的定义、分布和分类抗原刺激宿主免疫系统后，由免疫系统产生分泌的能和抗原发生特异性结合的免疫球蛋白（immunoglobin，Ig）。
主要存在于动物的血清中，也存在于体液和体外分泌液，如乳汁和细胞分泌液中。
Ig包括很多种类，比如人类的Ig可分为IgG 、IgM、IgA、IgD、IgE五大类，其中IgG、IgA分别可进一步分成IgG1、IgG2、IgG3、IgG4和IgA1、IgA2亚类。
2 抗体的结构以人的Ig为例，IgG 、IgD、IgE以抗体单体形式存在，而IgM由五个抗体单体通过J链连接在一起的五聚体，因此IgG 、IgD、IgE属二价抗体，而IgM为十价抗体。
二抗原和抗体的制备（一）抗原的制备1 细菌细胞抗原的制备通常将细菌于固体培养基上培养，挑取菌落入无菌生理盐水中，灭菌，离心，用无菌生理盐水配制成菌悬液，备用。
2 可溶性抗原制备与纯化蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶类、脂多糖、细菌外毒素等可溶性抗原中相当部分来源于组织细胞，成分比较复杂。
通常需要将组织和细胞破碎，经一定的方法纯化后才能获得所需的抗原。
（1）通过酶（溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶等）消化细胞溶菌酶：主要通过水解肽聚糖的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，由此可见，更适合于G+；纤维素酶：也能水解β-1,4糖苷键；蜗牛酶：消化腺中发现有纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、甘露糖酶、蔗糖酶、半乳聚糖酶、蛋白水解酶、氨基酸转移酶等多种具有生物活性的混合酶。
（2）反复冻融、或者超声波破碎。
（3）表面活性剂处理使细胞壁破坏。
通过上述三种方法使细胞内容物溢出，通过离心除去细胞碎片即可。
如果要制备单一成分的抗原，如蛋白质，还需经过离心、盐析、凝胶色谱、离子交换色谱等方法纯化。
3 半抗原免疫原的制备及检验属于半抗原的物质是低分子量的物质，如多糖、激素、抗生素、农药及其他化学物品等。
这些小分子物质并不是免疫原，只有与合适载体连接后，才有免疫原性。
常见的载体有多聚赖氨酸、羧甲基纤维素(CMC)、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、牛血清蛋白(BAS)、卵清蛋白(OV)等。
与载体连接方式：物理方法、化学方法物理法：通过载体（CMC、PVP）的电荷和微孔吸附半抗原。
化学法：利用某些功能基团将其连接到蛋白质载体上。
如果带有游离氨基或羧基以及2种基团都有的半抗原，可直接与载体连接，如果没有，需改造使其带有游离氨基或羧基才能与载体连接。
半抗原与载体结合的数目与免疫原性密切相关，一般认为至少要有20个以上的半抗原分子联结到一个载体分子上，才能有效地刺激免疫动物产生抗体。
常用吸收光谱法测定。
4 佐剂与抗原混合，能非特异性地增强抗体应答的物质。
目前人和动物用的免疫佐剂主要是金属盐类（氢氧化铝、磷酸铝、磷酸钙等）、乳化的水-油佐剂（也称弗氏佐剂，由液体石蜡与无水羊毛脂加热混溶而成，称不完全弗氏佐剂，再加入死分枝杆菌如卡介苗以增强炎性反应，称完全弗氏佐剂，这类佐剂副反应严重，主要用于动物制备抗体）（二）抗体的制备1 多克隆抗体的制备多克隆抗体是抗原或抗原与佐剂的混合物按一定程序直接免疫试验动物后获得的抗血清。
不同的抗原决定簇刺激不同的B淋巴细胞（抗体产生细胞）克隆产生的抗体混合物，所以称多克隆抗体。
（1）动物选择食品安全中检测有害物质和微生物常用的动物为鼠（大鼠、小鼠、豚鼠）和兔子。
（2）免疫步骤注射：通常的方案是少量多次。
动物产生有效抗体的过程有一定时间规律，一般在首次接触抗原的7-10天后，动物血清中才有抗体出现，并在14-21天内达到高峰值，这段时期称初次反应，此后一定时间内，如再次接触同一抗原，则特异抗体的生成量将会超过初次反应的许多倍，称二次反应。
抗体效价测定：效价在1：16以上，能达到1：64，即可达到要求，应及时采血，否则抗体将会下降。
（常用免疫双向扩散法测定）免疫双向扩散法测定效价：溶化琼脂糖放在干净平皿或玻片上，约3mm厚，冷却凝固，打孔器打孔。
中央孔内加适量抗原（容量为50μl），周围各孔内分别加入50μl 1：2、1：4、1：8、1：16、1：32及不稀释的抗血清，37℃下孵育24h，观察有无沉淀线产生。
（3）采血及抗体效价测定采血方式：颈动脉放血、心脏采血、静脉采血方式。
抗体收集：抗体存在血清部分，血液室温凝固1h，4℃过夜，血块收缩，将血块离心得残存于其内的血清，收集两部分血清，离心，存贮于-20℃或-70℃。
（4）抗体的纯化及鉴定抗体与所有蛋白质一样，具有一定的溶解度、荷电性、分子大小、疏水程度和配体专一性，因而能够利用盐析沉淀、层析和电泳等技术将抗体分离纯化。
抗体纯化要先清楚抗体的用途，用于酶标检测时，只需除去干扰实验的杂质即可。
常用的方法有盐析、盐析+凝胶过滤、离子交换+凝胶过滤、阳离子交换+阴离子交换+凝胶过滤、盐析+亲和层析、亲和层析+阴离子交换+凝胶过滤等。
鉴定：可以用凯氏定氮法测定其含量、或者分光光度法测定蛋白质含量，也可用凝胶电泳检测其纯度。
（5）抗体的保存纯化后的抗体保存十分重要，保存不当，可导致抗体效价下降或消失。
常用的方法有：液体保存：抗体经过滤除菌后，加入0.1%的NaN3或硫柳汞以防腐，存于4℃可保存半年到一年；低温保存：抗体分成小包装，于-20℃--40℃保存，一般1年效价不会有明显下降，但应防止反复冻融；冷冻干燥保存：冻干后置于普通冰箱4-5年效价无明显下降。
2 单克隆抗体的制备单克隆抗体是由单一的B淋巴细胞克隆、针对单一的抗原决定簇产生的均一的免疫球蛋白。
因为单克隆抗体的制备是以细胞（包括B淋巴细胞、骨髓瘤细胞和融合子等）为实验对象，在制备过程中采用了细胞融合、细胞培养和细胞克隆等细胞工程技术，因此单克隆抗体又称为细胞工程抗体。
三抗原或抗体的固定化ELISA方法中，常将抗原、抗体通过物理或化学方法，与不溶水的固相载体相结合，使以后的免疫反应都与固相载体发生联系，便于分离结合和游离的免疫反应物，将蛋白质物质与固相载体连接的过程，称蛋白质的固相化或包被技术。
可用作固相载体的材料主要两类：一类是天然有机物，如纤维素、葡聚糖凝胶、琼脂糖、淀粉及他们的衍生物；一类为人工合成的高分子聚合物，如聚苯乙烯、聚氯乙烯等。
固定化的既可通过物理吸附方式，也可通过化学偶联方式。
第二节免疫学检测技术一免疫沉淀及免疫凝集反应（一）免疫沉淀（单向免疫扩散、双向免疫扩散、火箭免疫电泳、对流免疫电泳等）量电解质存在条件下发生特异性结合，形成抗原-抗体复合物并出现肉眼可见的沉淀或浑浊，在固体载体中表现为沉淀线，液体中出现絮状物或液体浑浊。
由于其灵敏度较低，通常作定性分析，食品安全检测中主要作为病原菌的定性测定和鉴定。
（二）免疫凝集颗粒抗原（细菌、血红细胞等）或可溶性抗原结合于不溶性的载体微粒上后与相应的抗体在适当条件下，经一定时间后凝集成肉眼可见的凝聚物。
1 直接凝集反应：颗粒抗原+抗体；2 反相被动凝集反应：可溶性抗体-不溶性颗粒+抗原；3 间接凝集反应：可溶性抗原-不溶性颗粒+抗体。
间接凝集反应中的不溶性颗粒如血红细胞、金黄色葡萄球菌的菌体、乳胶、胶体金、磁珠和明胶颗粒等。
血红细胞来自于人或别的动物的血液，采血后加入抗凝血剂，然后离心即可获得血红细胞，对于多糖抗原，可以直接吸附，对于蛋白质抗原或抗体须以戊二醛作为交联剂连接。
